1例藍狐飼料中毒并繼發(fā)產(chǎn)氣莢膜梭菌病的診治

楊志元 , 白勝偉 ， 聞曉波 ， 冉旭華

(黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動物科技學(xué)院 ， 黑龍江 大慶 163319)

1例藍狐飼料中毒并繼發(fā)產(chǎn)氣莢膜梭菌病的診治

楊志元 , 白勝偉 ， 聞曉波 ， 冉旭華

(黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動物科技學(xué)院 ， 黑龍江 大慶 163319)

藍狐屬于食肉目犬科動物，又稱為北極狐，是白狐的一種變異品種，主要生長在高緯度地區(qū)，如北冰洋、北美洲、西伯利亞和歐亞大陸[1]。藍狐是珍貴的毛皮動物之一，其毛皮是高檔飾品和高檔裘皮服飾的生產(chǎn)原料，在國際皮毛市場廣泛暢銷[2]，其毛色美觀，輕便柔軟，保暖性強，被稱為“軟黃金”，是世界上重要的裘皮支柱。藍狐是我國由國外引入飼養(yǎng)的毛皮動物中的一種，我國毛皮動物養(yǎng)殖業(yè)起始于上個世紀中葉。近年來，狐的養(yǎng)殖在我國快速發(fā)展,但都以藍狐為主,銀狐和彩狐的養(yǎng)殖相對較少[3]。

該養(yǎng)殖場的病死藍狐出現(xiàn)精神沉郁、肛門脫出、鼻孔流出無色液體、胃腸脹氣，黏膜潰瘍脫落，氣體惡臭，肺出血性壞死，心內(nèi)膜、腎和肝都有出血斑，脾出血，脾質(zhì)脆易碎，肌肉有淡黃色液體滲出，胃內(nèi)容物稀薄為液態(tài)，腸內(nèi)容物黏稠，腸壁內(nèi)有膿包等癥狀，本研究通過臨床診斷和實驗室診斷技術(shù)，確診該藍狐場發(fā)病的原因是藍狐食入霉變的飼料造成黃曲霉毒素中毒并繼發(fā)感染產(chǎn)氣莢膜梭菌。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 2016年9月19日大慶某藍狐場送來的病死藍狐。

1.2 試驗方法

1.2.1 臨床診斷與剖檢 采用臨床常規(guī)診斷方法對病死藍狐進行診斷，包括問診、視診和剖檢，即詢問病死藍狐的生活史、既往史和現(xiàn)病史等；觀察病死藍狐的整體狀況、表皮情況等；最后對病死藍狐進行剖檢，并無菌采取病料。

1.2.2 實驗室診斷

1.2.2.1 涂片、革蘭染色和鏡檢 采集病死藍狐的大腸內(nèi)容物、心、脾臟、肺臟、肝臟和腎進行無菌操作涂片，染色和鏡檢[5]。

1.2.2.2 分離純化培養(yǎng) 取大腸內(nèi)容物、心、脾臟、肺臟、肝臟和腎分別接種于普通營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基和厭氧肉肝湯培養(yǎng)基上進行增菌培養(yǎng)，待細菌增長適宜時，挑取厭氧肉肝湯培養(yǎng)基中菌落接種到血瓊脂平板上劃線純分，37 ℃厭氧培養(yǎng)24 h，觀察培養(yǎng)特性，將純化后的細菌進行革蘭染色鏡檢。

1.2.2.3 藥敏試驗 挑取血瓊脂平板上純化后的菌體，接種在滅菌的厭氧肉肝湯培養(yǎng)基，厭氧、37 ℃培養(yǎng)24 h后取出，用生理鹽水稀釋到適宜濃度，采用紙片擴散法[6]對該細菌進行藥敏試驗。根據(jù)標準進行判斷[7](抑菌環(huán)直徑大于15 mm為高敏(S)；直徑在10～15 mm為中度敏感(I)；直徑小于10 mm為耐藥(R)。)。

1.2.2.4 生化試驗 分離純化后得到的細菌分別接種于吲哚、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、水楊苷、H2S、明膠、硝酸鹽還原、甲基紅試驗和脲酶微量生化反應(yīng)管中進行生化試驗，并用標準菌株做參考，對其進行鑒定。

1.2.2.5 動物試驗 選取8周齡、體重在20～30 g健康小鼠4只，將其隨機分成兩組，將提純的菌液注射到其中2只小鼠體內(nèi)，進行標記作為試驗組，另外2只小鼠不注射菌液只注射無菌生理鹽水作為空白對照組。在適宜相同的條件下飼養(yǎng)這兩組小鼠并觀察兩組小鼠的生理變化。

1.3 飼料檢驗試驗 將養(yǎng)殖場喂養(yǎng)病死藍狐的飼料送實驗室檢測。

2 結(jié)果

2.1 臨床診斷結(jié)果 (1)病死藍狐是突發(fā)性脹氣死亡，在病例出現(xiàn)的1個月期間，養(yǎng)殖場中1 000只藍狐中有20只藍狐持續(xù)性死亡，都出現(xiàn)脹氣現(xiàn)象，并且死亡的藍狐體積都相對較大。通過視診觀察到病死的藍狐全身脹氣，肛門脫出，輕按鼻孔流出無色液體等；(2)病死藍狐發(fā)病期間養(yǎng)殖場采用酵母粉拌料(山楂酵母粉)對其進行治療；(3)病死藍狐養(yǎng)殖場中采用的飼料為吉林農(nóng)科膨化全價飼料(狐貍專用)、膨化玉米(儲存1個月)，海魚(儲存1個月)和羊肝(儲存半年)。

2.2 剖檢結(jié)果 將病死藍狐進行剖檢，可觀察到病死藍狐胃腸脹氣，黏膜潰瘍、脫落，有惡臭氣體排出，肺出血性壞死，心內(nèi)膜、腎和肝有出血斑，脾出血、脾質(zhì)脆易碎，肌肉有淡黃色液體滲出，胃內(nèi)容物稀薄為液態(tài)，腸內(nèi)容物黏稠，腸壁內(nèi)有膿包等病變。

通過對病死藍狐進行臨床診斷與剖檢可初步診斷病死藍狐是由飼料中毒和繼發(fā)感染產(chǎn)氣莢膜梭菌引起患病和死亡。

2.3 實驗室檢驗結(jié)果

2.3.1 細菌的純培養(yǎng)和鏡檢結(jié)果 該細菌在普通營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基上基本不生長，但厭氧肉肝湯培養(yǎng)中生長良好，經(jīng)37 ℃恒溫厭氧培養(yǎng)6 h后，厭氧肉肝湯培養(yǎng)基變渾濁，并有大量氣體產(chǎn)生；在血瓊脂平板上生長呈灰白色、半透明、表面光滑、邊緣整齊的圓形菌落，直徑約1～4 mm，菌落有雙層溶血環(huán)，外環(huán)呈α溶血環(huán)，內(nèi)環(huán)呈β溶血環(huán)。革蘭染色鏡檢可見該菌為革蘭陽性粗大桿菌，呈藍紫色，有莢膜，菌體兩端鈍圓，多單個存在或成對排列，偶見芽孢等。

2.3.2 藥敏試驗結(jié)果 該菌的藥敏試驗結(jié)果表明，該菌對卡那霉素、阿莫西林和氧氟沙星高度敏感；對泰樂菌素、青霉素、慶大霉素和強力霉素中度敏感；對新霉素、鏈霉素、氨芐西林和環(huán)丙沙星耐藥。

表1 藥敏試驗結(jié)果

2.3.3 生化試驗結(jié)果 該菌的生化試驗的結(jié)果與產(chǎn)氣莢膜梭菌的生化試驗結(jié)果一樣，可判斷該菌為產(chǎn)氣莢膜梭菌。

表2 生化試驗結(jié)果

+：陽性，-：陰性

2.3.4 動物回歸試驗結(jié)果 通過試驗可觀察到未注射菌液的小鼠健康，無死亡。注射菌液的小鼠，發(fā)生突然死亡。根據(jù)實驗室診斷的結(jié)果，可判斷造成藍狐患病和死亡的細菌是產(chǎn)氣莢膜梭菌。

2.3.5 飼料檢查結(jié)果 飼料檢查顯示,長時間儲存的飼料中為含有大量的黃曲霉毒素。綜合臨床診斷和實驗室診斷的結(jié)果，可知病死藍狐是由飼料中黃曲霉毒素中毒并繼發(fā)感染產(chǎn)氣莢膜梭菌導(dǎo)致患病和死亡。

3 治療

患病藍狐可肌肉注射卡那霉素、阿莫西林和氧氟沙星，進行抗菌治療，同時更換長期存放的飼料，包括魚類、玉米和羊肝等；對飼喂的飼料配比進行調(diào)整，動物性的飼料配比適量增加，植物性的飼料減少；飼喂混合飼料時添加保肝護肝的保健藥品，同時要多加水，將食物調(diào)的稀軟易消化等方法對藍狐進行治療。通過回訪得知，根據(jù)治療方案對藍狐進行治療，藍狐不再出現(xiàn)死亡，飲食等各方面的情況趨于正常。

4 討論

產(chǎn)氣莢膜梭菌主要存在于動物的腸道中，只有在動物抵抗力降低的情況下，才能引起產(chǎn)氣莢膜梭菌大量繁殖，導(dǎo)致藍狐患病和死亡。養(yǎng)殖場藍狐因為長期飼喂變質(zhì)的飼料造成黃曲霉毒素中毒，使藍狐抵抗力變低，產(chǎn)氣莢膜梭菌大量繁殖，從而引起機體患病和死亡。死亡的藍狐主要是體型相對較大的個體。主要是因為體型較大的個體攝入較多的變質(zhì)飼料，對肝臟的損害較大，從而較先發(fā)病死亡，這是中毒的一個重要發(fā)病特征。藥敏試驗結(jié)果表明，產(chǎn)氣莢膜梭菌對卡那霉素、阿莫西林和氧氟沙星高度敏感；而對其他的一些抗生素不太敏感甚至是產(chǎn)生耐藥性。在飼喂藍狐時，不能飼喂長時間儲存的飼料，長時間儲存的飼料容易變質(zhì)產(chǎn)生毒素，對動物產(chǎn)生毒害作用，給養(yǎng)殖場帶來重大經(jīng)濟損失，并且易影響動物食品安全和造成抗生素的亂用。在飼養(yǎng)藍狐時一定要做好疾病的防治工作，減少不必要的損失。

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S865.2+3

B

0529-6005(2017)0068-02

2017-03-15

楊志元(1992-)，女，碩士生，研究方向為預(yù)防獸醫(yī)學(xué)，E-mail:wenxiaobo1977@163.com

冉旭華，E-mail；ranxahua@163.com