羊腹瀉病原菌的分離鑒定與藥敏試驗

那音臺

（呼倫貝爾市新巴爾虎右旗呼倫鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，內(nèi)蒙古呼倫貝爾 021300）

羊腹瀉病原菌的分離鑒定與藥敏試驗

那音臺

（呼倫貝爾市新巴爾虎右旗呼倫鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，內(nèi)蒙古呼倫貝爾 021300）

某一羊養(yǎng)殖場，150日齡的羊出現(xiàn)食欲廢覺，嚴重腹瀉，有的羊只出現(xiàn)了神經(jīng)癥狀，有的羊突然死亡。為了鑒定引起150日齡的羊腹瀉與突然死亡的病原菌，對突然死亡的患病的150日齡的羊進行剖檢，無菌采集150日齡的突然死亡的肝臟、肺臟、腎臟、心血等病料組織進行病原菌的分離，在采集的150日齡的突然死亡病料組織中分離一株病原菌，對分離到的病原菌通過細菌的培養(yǎng)特性鑒定、細菌革蘭氏染色觀察細菌形態(tài)學、生化試驗鑒定等方法，分離菌株被鑒定為大腸桿菌。將分離到的大腸桿菌通過口服方式攻毒給小白鼠，結(jié)果顯示，分離到的大腸桿菌對小白鼠具有很強的致病性，感染率100%，死亡率100%。用K-B藥敏紙片法對分離的致病性鏈球菌進行藥敏試驗分析，結(jié)果顯示，分離菌株對頭孢曲松、氨芐西林、阿莫西林、頭孢他定、磺胺間甲氧嘧啶、頭孢拉啶6種藥物高度敏感，對林可霉素、青霉素、大觀霉素、強力霉素、卡娜霉素6種抗生素耐藥。

羊；致病性大腸桿菌；藥敏試驗

隨著我國的養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，羊的養(yǎng)殖數(shù)量越來越多，我國養(yǎng)羊數(shù)量主要集中于新疆、青海、四川、內(nèi)蒙古、山東、河北及北京等多個省市養(yǎng)地區(qū)，多個地區(qū)的羊養(yǎng)殖已經(jīng)形成規(guī)模化的養(yǎng)殖場，集約化養(yǎng)殖羊越來越多。羊相關的傳染性疾病越來越多，越來越復雜。養(yǎng)殖戶對羊相關的傳染性疾病也愈來愈重視。羊的相關的傳染性疾病主要包括病毒性、細菌性疾病。其中，羊的細菌性的傳染病最為嚴重，尤其是羊的致病性大腸桿菌引起的腹瀉嚴重危害著我國養(yǎng)羊的發(fā)展。因此，羊的致病性大腸桿菌病成為養(yǎng)羊業(yè)中常見的傳染性疾病之一，羊的致病性大腸桿菌病是由致病性大腸桿菌引起不同階段羊的一種急性、熱性、敗血性傳染病，對不同階段的羊均易感，羊的致病性大腸桿菌病發(fā)病無明顯的季節(jié)性，常年均有發(fā)生羊的致病性大腸桿菌病，筆者通過對突然發(fā)病的臨床癥狀和剖檢變化實驗室診斷技術及致病性試驗，確定引起150日齡羊嚴重腹瀉和突然死亡的病原菌為致病性大腸桿菌，對其進行藥敏試驗，分析其耐藥性，進行合理的使用藥物。

1 發(fā)病情況

某一羊養(yǎng)殖場，養(yǎng)羊數(shù)量為1000只左右，其中，150日齡的羊出現(xiàn)食欲廢覺，嚴重腹瀉，有的羊只出現(xiàn)了神經(jīng)癥狀，有的羊突然死亡，發(fā)病率為10%，死亡率為6%。

2 臨床癥狀

150日齡的羊出現(xiàn)了精神沉郁，食欲開始減少，到后期出現(xiàn)了食欲廢絕，有的羊，口腔黏膜以及糜爛，流出白色帶泡沫的涎液，舌頭腫大，病羊的鼻腔和眼睛有膿性分泌物排出，有的病羊出現(xiàn)水樣的黃色腹瀉，有的病羊帶有神經(jīng)癥狀，嚴重腹瀉、脫水而死。

3 病理剖檢變化

對病死羊進行病理剖檢，觀察組織學癥狀。剖檢的病羊病羊的胸腔、腹腔均有淡黃色滲出液，頜下、腸系膜淋巴結(jié)腫大、出血；心臟發(fā)硬，淤血；肝臟腫大、質(zhì)脆呈線淡黃色；腎臟腫大，胃及腸道有片狀或者條狀的出血，腸壁變薄，嚴重的黏膜脫落。

4 細菌分離培養(yǎng)與形態(tài)學觀察

無菌采集150齡的突然死亡的肝臟、肺臟、腎臟、心血等病料組織接種于7%綿羊脫纖血液營養(yǎng)培養(yǎng)基上，放置37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12～16h后，接種與伊紅美藍培養(yǎng)基養(yǎng)基上，37℃恒溫培養(yǎng)12h，挑取單個優(yōu)勢菌落接種革蘭氏染色鏡檢。結(jié)果顯示，從病死仔豬體內(nèi)分離菌株在伊紅美蘭培養(yǎng)基可見邊緣光滑整齊、濕潤的、帶鐵銹黑色菌落，革蘭氏染色呈兩端鈍圓陰性桿狀菌，與報道大腸桿菌培養(yǎng)特性和形態(tài)特征一致。

5 細菌生化特性鑒定

分離菌株能分解麥芽糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇；木糖和阿拉伯糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣，吲哚和甲基紅陽性，V-P試驗呈陰性，經(jīng)ATB自動生化儀鑒定為大腸桿菌，評定結(jié)果合格率為 99.9%。與大腸桿菌的生化特性一致。

6 分離菌株的致病性試驗

將6只小白鼠分為2組，第一組每只小白鼠口服分離菌株0.5 ml（109cfu /ml），另外一組，口服等量的生理鹽水，觀察7天，第一組小鼠出現(xiàn)全部死亡，另外一組健康存活，說明了分離的菌株對小白鼠具有很強的致病性。

7 藥敏試驗

用K-B藥敏紙片法對分離的致病性鏈球菌進行藥敏試驗，結(jié)果顯示，分離菌株對頭孢曲松、氨芐西林、阿莫西林、頭孢他定、磺胺間甲氧嘧啶、頭孢拉啶6種藥物高度敏感，對林可霉素、青霉素、大觀霉素、強力霉素、卡娜霉素6種抗生素耐藥。

表1 藥敏試驗結(jié)果

8 結(jié)論

通過對突然發(fā)病的臨床癥狀和剖檢變化實驗室診斷技術及致病性試驗，確定引起150日齡羊嚴重腹瀉和突然死亡的病原菌為致病性大腸桿菌，將分離到的大腸桿菌通過口服方式攻毒給小白鼠，結(jié)果顯示，分離到的大腸桿菌對小白鼠具有很強的致病性，感染率100%，死亡率100%。因而，證實分離菌株為致病性大腸桿菌。結(jié)果顯示，分離菌株對頭孢曲松、氨芐西林、阿莫西林、頭孢他定、磺胺間甲氧嘧啶、頭孢拉啶6種藥物高度敏感，對林可霉素、青霉素、大觀霉素、強力霉素、卡娜霉素6種抗生素耐藥。

[1]蔣培紅，韓冬，肖真真，等.濟寧青山羊大腸桿菌病病原分離鑒定[J].畜牧與獸醫(yī)，2016，48（1）：142-143.

[2]蘇洋洋，宋萍，孫鎏國，等.一例山羊大腸桿菌的分離鑒定及藥敏試驗[J].畜禽業(yè)，2014，（6）：8-9.