慢性阻塞性肺疾病急性加重期及治療后誘導(dǎo)痰細(xì)胞分類、嗜酸粒細(xì)胞陽離子蛋白的變化比較

文一波　刑斌　朱佑銘

【摘要】 目的：比較分析慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）及治療后誘導(dǎo)痰細(xì)胞分類、血嗜酸粒細(xì)胞陽離子蛋白（ECP）的變化。方法：抽取筆者所在醫(yī)院于2016年4-12月收治的128例AECOPD患者。分別于入院當(dāng)天及治療1周后應(yīng)用熒光酶免疫法測定血液中的ECP，以及應(yīng)用改良后的誘導(dǎo)痰技術(shù)實(shí)施誘導(dǎo)痰細(xì)胞分類的計數(shù)。結(jié)果：AECOPD患者治療后，中性粒細(xì)胞比例降低，巨噬細(xì)胞比例升高，ECP值比治療前降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。淋巴細(xì)胞的比例較治療前升高，嗜酸性粒細(xì)胞降低，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：AECOPD患者誘導(dǎo)的痰細(xì)胞主要是中性粒細(xì)胞，而健康人誘導(dǎo)的痰細(xì)胞主要是巨噬細(xì)胞，治療后，患者的痰細(xì)胞分類及ECP均有明顯變化。

【關(guān)鍵詞】 AECOPD； ECP； 痰細(xì)胞分類

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.23.020 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1674-6805（2017）23-0042-02

The Comparative Analysis of the Changes of Induced Sputum Cytology and Eosinophil Cationic Protein in Patients with Acute Exacerbation of Chronic Obstructive Pulmonary Disease/WEN Yi-bo，XING Bin，ZHU You-ming.//Chinese and Foreign Medical Research，2017，15（23）：42-43

【Abstract】 Objective：To compare and analyze the changes of induced sputum cytology and eosinophil cationic protein（ECP） in patients with acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease（AECOPD）.Method：128 patients diagnosed as AECOPD were selected from April 2016 to December 2016 in our hospital.On the day of admission and a week after treatment，the fluorescence enzyme immunoassay was used to test the ECP in blood，and the induced sputum technique was applied in sputum cell classification counting.Result：After treatment，the proportion of neutrophils decreased，while the proportion of macrophages increased，the value of ECP decreased，the differences were statistically significant（P<0.05）.The proportion of lymphocytes increased，and the proportion of eosinophils decreased，but the differences were not statistically significant（P>0.05）.Conclusion：In the induced sputum of AECOPD patients，neutrophil is the major cell type，while macrophages predominated in the healthy people.After treatment，the sputum cytology and ECP value change obviously.

【Key words】 AECOPD； ECP； Sputum cell classification

First-authors address：Guangan City Hospital of Traditional Chinese Medicine，Guangan 638500，China

慢性阻塞性肺疾?。╟hronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一種以不完全可逆的氣流受限為特征的疾病，與肺部對有害氣體或有害顆粒的異常炎癥反應(yīng)有關(guān)，由不同炎性細(xì)胞、炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子介導(dǎo)的慢性氣道炎癥，會進(jìn)一步引發(fā)氣道阻塞和氣道重構(gòu)，對COPD發(fā)生發(fā)展起著重要作用[1]。痰誘導(dǎo)是指以高滲鹽水或其他誘導(dǎo)液霧化吸入，誘導(dǎo)無痰或少痰的受檢者產(chǎn)生足夠的痰液，對呼吸道分泌物中的細(xì)胞及其他液相成分進(jìn)行分析研究的一種無創(chuàng)性檢測方法。目前痰誘導(dǎo)方法眾多，沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，人們在不斷探索一種可以用于各類呼吸道疾病且副作用少的方法[2]。為了比較分析慢性阻塞性肺疾病急性加重期（acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD）及治療后誘導(dǎo)痰細(xì)胞分類、血嗜酸細(xì)胞陽離子蛋白（ECP）的變化，筆者所在醫(yī)院對其開展了深入探究，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

經(jīng)患者同意和醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)實(shí)施，抽取筆者所在醫(yī)院于2016年4-12月收治的AECOPD患者作為研究對象，其中男56例，女72例，患者年齡43～72歲，平均（72.6±9.4）歲，平均患病時間（5.13±2.34）年。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者無心源性哮喘或腦血管疾病等，存在意識模糊和嗜睡等癥狀，X線胸片提示有支氣管和肺部感染跡象，且不吸煙，近1個月內(nèi)未發(fā)生過支氣管及肺部感染，近2個月未用激素，均簽署知情同意書[3]。排除標(biāo)準(zhǔn)：本次研究前2周內(nèi)曾有急性發(fā)作，患者呼吸衰竭需要使用機(jī)械通氣，患者患有哮喘、支氣管擴(kuò)張、腫瘤、結(jié)締組織病、糖尿病、甲狀腺功能亢進(jìn)等疾病，合并高血壓病、嚴(yán)重左、右心功能衰竭者[4]。endprint

1.2 方法

1.2.1 采集及處理痰標(biāo)本 患者均采用超聲霧化機(jī)以1 ml/min的速度吸入30 ml 3%的高滲鹽水實(shí)施痰誘導(dǎo)。在霧化前，患者擤鼻，深咳，在此時如果有痰，就將痰液咳出并棄去，然后用生理鹽水漱口。每次間隔5 min收集痰液并且測定FEV，如果霧化不夠5 min棄去咳出痰液，等患者霧化的時間大于5 min之后再次用生理鹽水漱口之后讓患者深咳，此時如果有痰，就將痰液咳入到無菌的容器內(nèi)備查。如果無痰或痰量少，則給予生理鹽水漱口之后再次霧化。在取得足夠的痰量或霧化時間達(dá)到30 min時暫停誘導(dǎo)。收集的痰液應(yīng)在2 h內(nèi)處理，其中痰液標(biāo)本內(nèi)每個低倍視野的白細(xì)胞≥25個，鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)≥10個，無唾液、痰液重量≥1 g、細(xì)胞活力不小于50%為合格標(biāo)本。調(diào)節(jié)細(xì)胞的懸浮密度達(dá)到1×106個/ml，把75 μl的懸浮液放置在離心機(jī)內(nèi)，450 r/min，離心6 min，將沉淀涂片、風(fēng)干并用蘇木素伊紅進(jìn)行染色。計算分類以每張涂片上非鱗狀上皮細(xì)胞的個數(shù)為40個，鱗狀上皮細(xì)胞<20%看作合格標(biāo)本。對細(xì)胞實(shí)施分類和計數(shù)。

1.2.2 留取及處理血標(biāo)本 采集2～3 ml靜脈血放置在玻璃管內(nèi)，在20 ℃～25 ℃下凝血1 h，1.0～1.3 kg，離心10 min，把血清移到另外潔凈的玻璃管內(nèi)，1.0～1.3 kg，離心的時間為10 min。把血清移到潔凈的塑料試管內(nèi)，放在20 ℃下保存，采用熒光酶免疫法測定血液之中ECP的含量。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察并比較治療前后的痰細(xì)胞的分類，以及ECP值變化。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

本研究數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析和處理，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，各組均數(shù)比較采用單因素方差分析、組間兩兩比較用SNK-q檢驗(yàn)，方差不齊者采用秩和檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 痰細(xì)胞的分類

AECOPD患者經(jīng)治療后，痰液內(nèi)中性粒細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞的比例都有下降的趨勢，而巨噬細(xì)胞及淋巴細(xì)胞比例則升高；其中中性粒細(xì)胞降低及巨噬細(xì)胞上升較顯著，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；淋巴細(xì)胞的升高及嗜酸性粒細(xì)胞降低則不顯著，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見表1。

2.2 ECP值變化

患者在治療后，其血液ECP的值明顯下降，與治療前比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3 討論

慢性阻塞性肺疾病是一種具有氣流受限特征的可以預(yù)防和治療的疾病，氣流受限不完全可逆、呈進(jìn)行性發(fā)展，是一種重要的慢性呼吸系統(tǒng)疾病，嚴(yán)重影響患者的勞動能力和生活質(zhì)量[5-6]。目前臨床及實(shí)驗(yàn)室多通過支氣管肺泡灌洗、聚合酶鏈反應(yīng)等技術(shù)研究氣道炎癥，但這些方法存在侵入性、危險性、費(fèi)用高等問題，絕大多數(shù)患者無法接受[7-8]。

誘導(dǎo)痰的來源與自發(fā)排痰、支氣管肺泡灌洗液、支氣管活檢的部位不同，主要來源于外周氣道至中央氣道的分泌物，反映了氣道分泌物自然狀態(tài)下的濃度，具有更集中的細(xì)胞和生化物質(zhì)成分，尤適合氣道炎癥疾病的研究[9-10]。該技術(shù)有易行、無創(chuàng)、經(jīng)濟(jì)、安全、可靠性高、重復(fù)性好及患者很容易接受的優(yōu)點(diǎn)。而ECP是嗜酸性粒細(xì)胞的特異標(biāo)志，是嗜酸細(xì)胞活化后釋放出的強(qiáng)堿性顆粒蛋白，反映了嗜酸細(xì)胞的活化程度，具有極強(qiáng)的細(xì)胞毒性作用，引起氣道高反應(yīng)性或喘息發(fā)作，加重變態(tài)反應(yīng)炎癥過程[11-12]。

本次研究證明，患者在AECOPD內(nèi)，中性粒細(xì)胞的比例明顯高于其他細(xì)胞，嗜酸性粒細(xì)胞的比例高。治療后，中性粒細(xì)胞比例降低及巨噬細(xì)胞比例升高明顯，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。淋巴細(xì)胞升高及嗜酸性粒細(xì)胞降低的比例較小，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。治療后，患者的ECP值比治療前降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

綜上所述，通過分析誘導(dǎo)血ECP及痰細(xì)胞分類比例之間的關(guān)聯(lián)，有助于了解AECOPD患者的病情。

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（收稿日期：2017-04-19）endprint