超高液相色譜法測(cè)定黃瓜中的4種苯并咪唑類農(nóng)藥殘留量

孟繁磊+宋志峰+張振都+何智勇+蔡紅梅+魏春雁

摘要：建立檢測(cè)黃瓜中的多菌靈、噻菌靈、甲基硫菌靈、2-氨基苯并咪唑殘留量的超高液相色譜方法。黃瓜樣品用乙腈勻漿提取，鹽析凈化后，經(jīng)C18柱分離，甲醇—水體系為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，可調(diào)波長(zhǎng)檢測(cè)器分別在275nm、265nm、300nm和275nm處檢測(cè)，保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。結(jié)果4種農(nóng)藥在1～100mg/L的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r2=0.9987～0.9992）。該方法前處理步驟簡(jiǎn)單，分析速度快，能夠滿足農(nóng)殘分析的要求。

關(guān)鍵詞：超高液相色譜法；黃瓜；農(nóng)殘

中圖分類號(hào)： TS255.7 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A DOI編號(hào)： 10.14025/j.cnki.jlny.2017.22.026

多菌靈等苯并咪唑類農(nóng)藥是常用的低毒殺菌，能防治多種作物病害，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中廣泛使用。已報(bào)道的苯并咪唑類農(nóng)藥分析方法有分光光度法[1-2]、氣相色譜法[3]、液相色譜法[4-5]、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法[6-7]等。本研究在總結(jié)各種方法的基礎(chǔ)上，結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室條件，篩選出適合黃瓜中4種苯并咪唑類農(nóng)藥前處理及檢測(cè)方法，同時(shí)為檢測(cè)其他基質(zhì)上4種農(nóng)藥殘留提供技術(shù)支持。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

超高液相色譜儀：Waters公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：德國(guó) IKA公司；渦旋混勻器：德國(guó)IKA公司；

乙腈、甲醇、丙酮：色譜級(jí)，賽默飛世爾科技公司；無(wú)水硫酸鎂：分析純，廣州分析試劑廠；N-丙基乙二胺（PSA）、C18：美國(guó)安捷倫公司。

多菌靈、噻菌靈、甲基硫菌靈、2-氨基苯并咪唑：純度≥98%，北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司。

1.2色譜條件

色譜柱：ACQUITY UPLC BEH C18（100×2.1mm，1.7μm）；流動(dòng)相：甲醇溶液+水（40+60）；流速：0.5mL/min；柱溫：40℃；進(jìn)樣量：5μL。檢測(cè)波長(zhǎng)，見(jiàn)表1。

1.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別稱取0.01g多菌靈、噻菌靈、甲基硫菌靈、2-氨基苯并咪唑，用丙酮溶解定容至100mL，搖勻，零下18℃保存。然后用流動(dòng)相配制成濃度分別為1mg/L、2mg/L、5mg/L、10mg/L、100mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液?；旌蠘?biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖，見(jiàn)圖1。

1.4樣品處理

1.4.1提取 稱取20g試樣于具塞離心管中，加入25mL乙腈，10000r/min 高速勻漿2min，加入無(wú)水硫酸鎂和氯化鈉的混合物（質(zhì)量比1∶1）15g，蓋上蓋子劇烈振搖1min，5000r/min離心5min，使乙腈和水分層。

1.4.2凈化 移取上層乙腈1mL置于預(yù)先加有50mg PSA、50mgC18、150mg無(wú)水MgSO4的2mL離心管內(nèi)，2000r/min渦旋2min，5000r/min離心5min，取上層清液0.5mL，加入0.5mL超純水中，過(guò)0.22μm的濾膜，供UPLC分析。

2 結(jié)果與分析

2.1檢測(cè)波長(zhǎng)的確定

通過(guò)紫外分光光度計(jì)對(duì)多菌靈、噻菌靈、甲基硫菌靈、2-氨基苯并咪唑標(biāo)準(zhǔn)品的掃描，確定了最大吸收波長(zhǎng)分別在275nm、265nm、300nm、275nm處。

2.2線性關(guān)系和檢出限

將1.3中的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液按照1.2的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，峰面積為縱坐標(biāo)（y），濃度C（mg/L）為橫坐標(biāo)（x）繪制工作曲線，以信噪比（S/N）=3時(shí)的測(cè)定濃度為測(cè)定低限，結(jié)果見(jiàn)表2。結(jié)果表明，4種農(nóng)藥的濃度與對(duì)應(yīng)的峰面積呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)在0.9987～0.9996之間，測(cè)定低限不大于0.1mg/kg。

2.3方法的回收率與精密度

本試驗(yàn)采用加標(biāo)的方式來(lái)進(jìn)行回收率的測(cè)定。稱取18份空白黃瓜基質(zhì)，加入不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，進(jìn)行回收率和重復(fù)性實(shí)驗(yàn)，每個(gè)添加濃度平行測(cè)定6次，按照1.4進(jìn)行樣品處理、1.2色譜條件測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表3。4種苯并咪唑類農(nóng)藥的回收率為86.89%～100.21%，RSD為1.98%～5.26%，表明該方法提取測(cè)定黃瓜中的4種苯并咪唑類農(nóng)藥準(zhǔn)確可行及重復(fù)性良好。

3 結(jié)論

本方法建立了超高效液相色譜同時(shí)測(cè)定黃瓜中多菌靈、噻菌靈、甲基硫菌靈、2-氨基苯并咪唑殘留量的方法，該方法簡(jiǎn)便快速、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果可靠，為其他蔬菜中苯并咪唑類農(nóng)藥的檢測(cè)提供參考。

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作者簡(jiǎn)介：孟繁磊，碩士，助理研究員，研究方向：食品質(zhì)量安全。

通訊作者：魏春雁，教授，研究方向：食品及農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)。endprint