鹽酸貝那普利片仿制藥與原研藥的溶出度一致性評(píng)價(jià)

卜媛媛，金 鵬

（淮安市食品藥品檢驗(yàn)所，江蘇 淮安 223001）

鹽酸貝那普利片仿制藥與原研藥的溶出度一致性評(píng)價(jià)

卜媛媛，金 鵬

（淮安市食品藥品檢驗(yàn)所，江蘇 淮安 223001）

目的比較3種國(guó)產(chǎn)鹽酸貝那普利片仿制藥與原研藥的體外溶出度，對(duì)溶出曲線進(jìn)行比較評(píng)價(jià)一致性。方法采用槳法，溶出介質(zhì)體積500 mL，轉(zhuǎn)速50 rpm，分別以水、pH1.2鹽酸溶液、pH4.5磷酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液為溶出介質(zhì)測(cè)定溶出度，HPLC法測(cè)定含量。通過(guò)計(jì)算相似因子評(píng)價(jià)溶出曲線相似性。結(jié)果僅仿制藥B 與參比制劑D的溶出度一致性相似，A和C與參比制劑溶出一致性不一致。結(jié)論部分仿制藥與原研制劑溶出一致性較差，制劑工藝有待改善。

鹽酸貝那普利；仿制藥；溶出曲線；一致性評(píng)價(jià)

鹽酸貝那普利是世衛(wèi)組織推薦的一線抗高血壓藥，是血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑類的抗高血壓藥中安全性高、療效佳、不良反應(yīng)少的手性藥物，廣泛應(yīng)用于臨床[1]。國(guó)內(nèi)批準(zhǔn)的化學(xué)藥物絕大部分都是仿制藥，這些藥品質(zhì)量參差不齊，部分與國(guó)際先進(jìn)水平差距較大。2016年3月國(guó)家食藥總局發(fā)布一致性評(píng)價(jià)指導(dǎo)原則，目的是提高仿制藥整體水平，達(dá)到與原研產(chǎn)品相同的質(zhì)量水準(zhǔn)，提高人民群眾用藥水平[2]。本文對(duì)鹽酸貝那普利片的3種仿制藥進(jìn)行溶出度的測(cè)定，參照總局發(fā)布的《普通口服固體制劑溶出曲線測(cè)定與比較指導(dǎo)原則》[3]與原研藥進(jìn)行溶出曲線相似性比較，對(duì)鹽酸貝那普利進(jìn)行仿制藥與原研藥的一致性評(píng)價(jià)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

電子天平（梅特勒XSDU205型）；智能溶出試驗(yàn)儀（天大天發(fā)ZRS-8G）；高效液相色譜儀（戴安U3000）。

1.2 試藥

鹽酸貝那普利對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定研究院；批號(hào)：100768-201102； HPLC法測(cè)定含量：99.5%）；磷酸二氫鉀、氯化鉀、氫氧化鈉、鹽酸、高氯酸鈉為國(guó)產(chǎn)分析純；甲醇為國(guó)產(chǎn)色譜純；水為純化水。參比制劑為鹽酸貝那普利片（生產(chǎn)企業(yè)：D，批號(hào)：x2276、x2425）。受試制劑為鹽酸貝那普利片（生產(chǎn)企業(yè)：A，批號(hào)：160507；生產(chǎn)企業(yè)：B，批號(hào)：161001；生產(chǎn)企業(yè)：C，批號(hào)：FB20160901）。

2 方 法

2.1 溶出度試驗(yàn)條件

參照參比制劑標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定溶出度檢查方法[4]：溶出介質(zhì)500 mL，漿法，50轉(zhuǎn)/分鐘，取樣時(shí)間點(diǎn)分別為5、10、15、20、30和40分鐘，同時(shí)考察試樣在水、pH1.2鹽酸溶液（鹽酸7.65 mL→1000 mL）、pH4.5磷酸鹽緩沖液（0.2 mol/L磷酸二氫鉀溶液250 mL→1000 mL）、pH6.8磷酸鹽緩沖液（0.2 mol/L磷酸二氫鉀溶液250 mL+0.2 mol/L氫氧化鈉溶液112 mL→1000 mL）等4種溶出介質(zhì)中的溶出曲線。

2.2 溶出度測(cè)定方法及驗(yàn)證

參照參比制劑含量測(cè)定高效液相法[4]。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以氯化鉀緩沖液（每1000 mL中含0.010 mol鹽酸和0.090 mol氯化鉀，pH值2.06）-甲醇-水（17∶58：25）為混合溶液，每1000 mL混合溶液中加612 mg高氯酸鈉為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)：240 nm。按3.1項(xiàng)下試驗(yàn)條件，溶液過(guò)0.45 μm濾膜，取續(xù)濾液作為供試液；另稱取鹽酸貝那普利對(duì)照品，用溶出介質(zhì)溶解制成0.01 mg/mL的溶液作為對(duì)照液。精密量取上述供試液與對(duì)照液各20 μL注入液相色譜儀，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算出每片累積溶出量。

2.2.1 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

取參比制劑供試液各20 μL注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖見(jiàn)圖1，理論板數(shù)均大于8000，鹽酸貝那普利峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度也符合要求。

a 供試品溶液色譜圖（溶劑為水）

b 供試品溶液色譜圖（溶劑為pH1.2鹽酸溶液）

c 供試品溶液色譜圖（溶劑為pH4.5磷酸鹽緩沖液）

圖1 供試品溶液色譜圖

2.2.2 線性范圍

精密稱取鹽酸貝那普利對(duì)照品52.00 mg，加水溶解并稀釋至500 mL，作為對(duì)照品貯備液。精密量取對(duì)照品貯備液0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、5.0 mL分別置于20 mL的量瓶中，用溶出介質(zhì)定容并搖勻。分別取20μl注入高效液相色譜儀，測(cè)定峰面積，并以峰面積為縱坐標(biāo)，以濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見(jiàn)表1，結(jié)果表明4種不同溶出介質(zhì)中，鹽酸貝那普利在1.035μg/mL～25.870 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系均良好。

表1 線性關(guān)系考察

2.2.3 穩(wěn)定性

分別取4種溶出介質(zhì)中30分鐘時(shí)的供試品溶液（廠家：B，批號(hào)：161001），在放置于HPLC進(jìn)樣盤的情況下，在制備后的0、2、6、14、20、24小時(shí)測(cè)定含量。結(jié)果表明：供試液24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.4 準(zhǔn)確度[5]

取參比制劑樣品細(xì)粉0.4438 g（批號(hào)：x2276，含量：99.12%，平均片重：0.1868 g）置50 mL量瓶中，用水稀釋成濃度為0.4710 mg/mL的溶液，搖勻，濾過(guò)，作為樣品溶液，精密稱取對(duì)照品52.00 mg，置500 mL的量瓶中，以水作為溶劑稀釋至刻度，作為對(duì)照液。精密量取1 mL樣品溶液9份置100 mL量瓶中，分別加入對(duì)照液3 mL、5 mL、7 mL各3份，用水定容至刻度，作為溶出介質(zhì)為水的準(zhǔn)確度試驗(yàn)供試液。同法配置其他三種溶出介質(zhì)的準(zhǔn)確度試驗(yàn)供試液。精密量取供試液和2.2項(xiàng)下的對(duì)照液各20 μL注入高效液相色譜儀，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算。水作為介質(zhì)時(shí)平均回收率99.07%，RSD為1.5%；pH1.2鹽酸溶液為介質(zhì)時(shí)平均回收率99.37%，RSD為1.1%；pH4.5磷酸鹽緩沖液為介質(zhì)時(shí)平均回收率99.20%，RSD為0.92%；pH6.8磷酸鹽緩沖液為介質(zhì)時(shí)平均回收率100.14%，RSD為1.2%；結(jié)果表明：方法準(zhǔn)確度良好。

3 結(jié)果與討論

3.1 參比制劑與受試制劑溶出曲線比較

按照2.1～2.2項(xiàng)下試驗(yàn)方法，測(cè)定參比制劑與受試制劑的溶出曲線。見(jiàn)圖2。

圖2 不同介質(zhì)中的溶出曲線比較

從圖2結(jié)果可以看出：

（1）15分鐘內(nèi)，參比制劑在各溶出介質(zhì)中平均溶出量均達(dá)到85%以上，B廠家樣品在各溶出介質(zhì)中平均溶出量均達(dá)到85%以上，可以認(rèn)為溶出曲線相似。

（2）A廠家樣品在pH1.2鹽酸溶液、pH4.5磷酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液3種溶出介質(zhì)中15分鐘內(nèi)平均溶出量未達(dá)到85%，C廠家樣品在各溶出介質(zhì)中15分鐘內(nèi)平均溶出量未達(dá)到85%，則使用相似因子f2法[6-7]評(píng)價(jià)與參比制劑的相似性。計(jì)算公式如下：

公式中：Tt為t時(shí)間受試制劑的累積溶出百分率；Rt為t時(shí)間參比制劑的累積溶出百分率；n為取樣時(shí)間點(diǎn)個(gè)數(shù)。當(dāng)f2在50～100之間時(shí)，表明兩制劑溶出度相似或等同。

參照一致性評(píng)價(jià)指導(dǎo)原則，計(jì)算f2因子時(shí)，兩制劑所取時(shí)間點(diǎn)須一致且不少于3個(gè)，溶出率在85%以上的時(shí)間點(diǎn)不應(yīng)多于1個(gè)。本實(shí)驗(yàn)選用5、10、15、20、30和40分鐘一共6個(gè)點(diǎn)，經(jīng)對(duì)試驗(yàn)的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，選用了5、10、15和20分鐘一共4個(gè)點(diǎn)來(lái)計(jì)算f2因子。見(jiàn)表2。

表2 f2因子計(jì)算結(jié)果

3.2 討論

由以上結(jié)果可得，B廠家的樣品與參比制劑在4種溶出介質(zhì)中曲線均相似，可以判定為溶出度一致性相似；C廠家樣品與參比制劑在4種溶出介質(zhì)中曲線均不相似，可以判定為溶出度一致性不相似；A廠家樣品僅在水中與參比制劑溶出曲線相似，可判定為與參比制劑溶出度一致性基本不相似。整體來(lái)說(shuō)，國(guó)內(nèi)的仿制藥質(zhì)量差異比較大，與參比制劑相比較，釋藥速度較慢，可能是由于輔料選擇和制劑工藝等有所差別。國(guó)家開(kāi)展仿制藥一致性評(píng)價(jià)工作，可以促使企業(yè)對(duì)藥品質(zhì)量更為重視，提高合理用藥水平，保障公眾用藥質(zhì)量。

[1] 金 鵬,劉 艷,卜媛媛.不同廠家鹽酸貝那普利片溶出度考察[J].中國(guó)藥事,2015,29(2):183-188

[2] 余珊珊,張正付,李正奇.仿制藥一致性評(píng)價(jià)現(xiàn)狀調(diào)查及對(duì)策[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué),2015,20(1):118-120.

[3] 國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局.普通口服固體制劑溶出度試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則[ED/OL].2015.

[4] 國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局.《國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)》新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)第四十五冊(cè)[S].WS1-(X-347),2003Z:86-87

[5] 國(guó)家藥典委員會(huì).《中華人民共和國(guó)藥典》(2015年版四部)[S].通則:374-377

[6] 張啟明,謝沐風(fēng),寧保明,等.采用多條溶出曲線評(píng)價(jià)口服固體制劑的內(nèi)在質(zhì)量[J].中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志,2009,40(12):946-950,955.

[7] 謝沐風(fēng).溶出曲線相似性的評(píng)價(jià)方法[J].中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志,2009,40(4):308-310

R927.1

B

ISSN.2095-8242.2017.055.10828.03

卜媛媛（1983-），女，江蘇漣水人，主管藥師，碩士研究生，研究方法：藥學(xué)方向

本文編輯：吳玲麗