渝西地區(qū)牛羊藍(lán)舌病的血清學(xué)調(diào)查

袁 媛 , 李前勇 , 張德志 , 吳潤(rùn)標(biāo) , 邵 彬 , 劉茂秋 , 鄧華英

(西南大學(xué)榮昌校區(qū)動(dòng)物醫(yī)學(xué)系 ， 重慶 榮昌 402460)

渝西地區(qū)牛羊藍(lán)舌病的血清學(xué)調(diào)查

袁 媛 , 李前勇 , 張德志 , 吳潤(rùn)標(biāo) , 邵 彬 , 劉茂秋 , 鄧華英

(西南大學(xué)榮昌校區(qū)動(dòng)物醫(yī)學(xué)系 ， 重慶 榮昌 402460)

藍(lán)舌病是一種由呼腸孤病毒科環(huán)狀病毒屬的藍(lán)舌病病毒引起的嚴(yán)重侵害反芻動(dòng)物的非接觸性烈性傳染病，是OIE劃定為A類(lèi)，我國(guó)列為一類(lèi)的動(dòng)物重要疫病。本病最早于1876年發(fā)現(xiàn)于南非的綿羊，1906年正式命名為藍(lán)舌病，1934年發(fā)現(xiàn)于牛[1]，我國(guó)于1979年在云南省確定了綿羊藍(lán)舌病的存在[2]。目前該病已廣泛發(fā)生于20多個(gè)國(guó)家。藍(lán)舌病主要感染綿羊，臨床以發(fā)熱、消瘦，口、鼻和胃黏膜潰瘍性炎癥為特征，牛、山羊以及鹿等多呈隱性感染，庫(kù)蠓為其主要傳播媒介。是我國(guó)牛羊產(chǎn)業(yè)面臨的新的潛在威脅性疫病。

近年來(lái)，重慶市充分利用草山草坡資源，積極發(fā)展牛羊產(chǎn)業(yè)，牛羊飼養(yǎng)量增長(zhǎng)迅猛。然而，重慶周邊省市皆有牛羊藍(lán)舌病血清學(xué)檢出陽(yáng)性的報(bào)道，該市牛羊面臨藍(lán)舌病感染、流行的壓力；同時(shí)，重慶于2015年起每年從澳大利亞進(jìn)口活牛50萬(wàn)頭，而澳大利亞是本病發(fā)生的重要疫病國(guó)，目前已發(fā)現(xiàn)的藍(lán)舌病病毒血清型10余種，這無(wú)疑加大了該市牛羊藍(lán)舌病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)；本病主要發(fā)生在南緯35°到北緯40°[3]，我市絕大部分區(qū)縣均分布于北緯40°以南，而現(xiàn)有的資料顯示，尚未見(jiàn)重慶市牛羊藍(lán)舌病檢出陽(yáng)性及相關(guān)研究的報(bào)道。為此，我們于2015年至2016年間對(duì)重慶市渝西地區(qū)牛羊的藍(lán)舌病流行情況進(jìn)行了調(diào)查，以期填補(bǔ)重慶市牛羊藍(lán)舌病相關(guān)研究的空白，同時(shí)也為該市牛羊藍(lán)舌病的防控提供重要參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 血清樣品制備 2015年10月至2016年9月在重慶市渝西地區(qū)的6個(gè)行政區(qū)隨機(jī)采集牛羊血樣，分離血清，共得354份血樣，其中牛血清160份，羊血清194份。血樣來(lái)自專(zhuān)業(yè)養(yǎng)殖戶及個(gè)體散養(yǎng)戶。血清置于-20 ℃保存，檢測(cè)前在室溫下自然解凍。

1.2 試劑 藍(lán)舌病病毒VP7蛋白抗體檢測(cè)試劑盒(競(jìng)爭(zhēng)性ELSA法)，批號(hào)320-02，購(gòu)自美國(guó)IDEXX公司。

1.3 試驗(yàn)方法 檢測(cè)步驟按照購(gòu)買(mǎi)的藍(lán)舌病病毒VP7蛋白抗體檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。將酶標(biāo)儀空氣調(diào)零，測(cè)量并記錄每個(gè)樣品在450 nm下的吸光值，計(jì)算結(jié)果。

1.4 結(jié)果判定 只有在陰性對(duì)照孔平均吸光大于或等于0.700，且小于或等于3.000，以及陽(yáng)性對(duì)照/陰性對(duì)照值小于20%，測(cè)定結(jié)果有效。

樣品的吸光值/陰性對(duì)照平均吸光值大于或等于80%，判定為藍(lán)舌病抗體陰性；樣品的吸光值/陰性對(duì)照平均吸光值大于70%而小于80%，判定為可疑，應(yīng)重新檢測(cè)；樣品的吸光值/陰性對(duì)照平均吸光值小于或等于70%，判定為藍(lán)舌病抗體陽(yáng)性。

2 結(jié)果

2.1 渝西地區(qū)牛羊藍(lán)舌病血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果 本試驗(yàn)共獲得354份牛羊血清樣品，采用C-ELISA法檢測(cè)藍(lán)舌病的血清陽(yáng)性率，結(jié)果表明，渝西6個(gè)區(qū)牛羊該病的平均陽(yáng)性率為14.87%；其中，羊血清陽(yáng)性率為22.16%；牛血清陽(yáng)性率為6.26%；羊藍(lán)舌病血清陽(yáng)性率顯著高于牛血清陽(yáng)性率(p<0.01)，說(shuō)明渝西6區(qū)羊感染藍(lán)舌病的比例比牛高。見(jiàn)表1。

表1 渝西地區(qū)牛羊藍(lán)舌病血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果

表中數(shù)字右肩上小寫(xiě)字母不同示兩樣本百分?jǐn)?shù)檢驗(yàn)差異顯著，P<0.05；大寫(xiě)字母不同示有極顯著差異，P<0.01;字母相同示差異不顯著，P>0.05，下表2、表5同

2.2 不同飼養(yǎng)模式下，牛羊藍(lán)舌病血清陽(yáng)性率 專(zhuān)業(yè)養(yǎng)殖戶中采集牛血清70份，檢出陽(yáng)性血清7份，陽(yáng)性率為10%；個(gè)體散養(yǎng)戶中采集牛血清90份，檢出陽(yáng)性血清3份，陽(yáng)性率3.33%；專(zhuān)業(yè)養(yǎng)殖戶中采集羊血清60份，檢出陽(yáng)性血清11份，陽(yáng)性率為18.33%；個(gè)體散養(yǎng)戶中采集羊血清134份，檢出陽(yáng)性血清32份，陽(yáng)性率為23.88%。專(zhuān)業(yè)養(yǎng)牛戶牛藍(lán)舌病感染率比個(gè)體散養(yǎng)戶高，而個(gè)體養(yǎng)羊戶羊藍(lán)舌病感染率則高于專(zhuān)業(yè)養(yǎng)羊戶，但經(jīng)百分率差異顯著性檢驗(yàn)，均無(wú)顯著性差異。見(jiàn)表2。

表2 不同飼養(yǎng)模式下牛羊藍(lán)舌病血清陽(yáng)性率

2.3 不同采樣地牛羊藍(lán)舌病血清陽(yáng)性率 結(jié)果表明，DZ區(qū)和YC區(qū)牛羊暫無(wú)藍(lán)舌病感染情況出現(xiàn)；RC區(qū)牛藍(lán)舌病血清陽(yáng)性率最高(達(dá)到12.5%)；TL區(qū)牛無(wú)藍(lán)舌病陽(yáng)性檢出，但該區(qū)羊藍(lán)舌病血清陽(yáng)性率最高，高達(dá)60%；HC區(qū)和TN區(qū)羊藍(lán)舌病血清陽(yáng)性率均在30%以上。由此說(shuō)明，渝西6區(qū)牛羊藍(lán)舌病血清陽(yáng)性檢出率存在較大差異。見(jiàn)表3、表4。

表3 不同區(qū)縣牛藍(lán)舌病血清陽(yáng)性率

表4 不同區(qū)縣羊藍(lán)舌病血清陽(yáng)性率

2.4 不同采樣時(shí)間段牛羊藍(lán)舌病血清陽(yáng)性率 依據(jù)藍(lán)舌病發(fā)病的季節(jié)性及傳播媒介-庫(kù)蠓活動(dòng)的特點(diǎn)，將采樣檢測(cè)數(shù)據(jù)分為10-4月和5-10月兩個(gè)區(qū)間，分別計(jì)算兩時(shí)間段牛羊藍(lán)舌病血清陽(yáng)性率。結(jié)果表明，渝西地區(qū)牛羊藍(lán)舌病血清檢出率均呈現(xiàn)出5-10月時(shí)間段顯著高于10-4月時(shí)間段，說(shuō)明該區(qū)域內(nèi)牛羊5-10月間存在感染藍(lán)舌病較高。見(jiàn)表5。

表5 不同采樣時(shí)間牛羊藍(lán)舌病血清陽(yáng)性率

3 討論

近年來(lái)，由于全球氣候的變暖，各類(lèi)商品貿(mào)易活動(dòng)的不斷加強(qiáng)，牛羊藍(lán)舌病的發(fā)生、流行范圍呈現(xiàn)出增加、擴(kuò)大的趨勢(shì)，已成為國(guó)際牛羊產(chǎn)業(yè)十分關(guān)注的重點(diǎn)疫病之一。本研究采用C-ELISA法對(duì)重慶西部6個(gè)行政區(qū)內(nèi)牛羊藍(lán)舌病血清學(xué)陽(yáng)性情況進(jìn)行了調(diào)查，結(jié)果表明，該區(qū)域內(nèi)羊血清陽(yáng)性率22.16%，牛血清陽(yáng)性率6.26%。已有的資料顯示，我國(guó)云南德宏州牛藍(lán)舌病的陽(yáng)性檢出率平均為85.21%，其中水牛的陽(yáng)性檢出率高達(dá)95.35%，黃牛為86.69%，放養(yǎng)牛群為89.53%，圈養(yǎng)牛為74.77%[4]；貴州省羊群藍(lán)舌病血清陽(yáng)性檢出率平均為25.79%[5]，西藏地區(qū)黃牛血清陽(yáng)性檢出率為14.66%[6]，四川紅原地區(qū)牦牛藍(lán)舌病血清陽(yáng)性檢出率為3.88%[7]，湖北省山羊藍(lán)舌病的血清陽(yáng)性檢出率為25.69%[8]，陜西部分地區(qū)羊藍(lán)舌病血清陽(yáng)性檢出率平均為3.03%[9]。本研究結(jié)果，渝西地區(qū)6個(gè)行政區(qū)內(nèi)牛藍(lán)舌病血清陽(yáng)性檢出率低于云南、西藏等重慶周邊省區(qū)的檢出率；山羊藍(lán)舌病血清陽(yáng)性檢出率與湖北、貴州等省的檢出率大體相近，但卻明顯高于陜西省的檢出率；說(shuō)明試驗(yàn)調(diào)查區(qū)域羊藍(lán)舌病的感染情況較嚴(yán)重，牛感染情況相對(duì)較輕，畜牧獸醫(yī)部門(mén)應(yīng)加強(qiáng)羊藍(lán)舌病的防控意識(shí)，采取必要措施避免該病的發(fā)生和流行。

研究發(fā)現(xiàn)，不同的采樣行政區(qū)內(nèi)牛羊藍(lán)舌病的血清學(xué)陽(yáng)性率不一致，2015年10月至2016年9月期間，渝西6區(qū)牛羊5-10月間有感染藍(lán)舌病較高的趨勢(shì)。重慶西部6個(gè)區(qū)，幅員面積較廣(達(dá)到9 500 km2)，各采樣地牛羊養(yǎng)殖動(dòng)物來(lái)源、飼養(yǎng)水平及環(huán)境條件、動(dòng)物疫病防控意識(shí)等均由一定的差距，造成了調(diào)查的6個(gè)行政區(qū)內(nèi)牛羊藍(lán)舌病的血清陽(yáng)性檢出率不相同?；ㄈ毫x等[10]報(bào)道，傳播動(dòng)物蟲(chóng)媒病毒的主要庫(kù)蠓-原野庫(kù)蠓、不濕庫(kù)蠓、尖喙庫(kù)蠓等在重慶有著廣泛分布，季恒靑等[11]進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，廣泛分布重慶的庫(kù)蠓有黃川、明斑、指突、端斑、原野、華鎣等4個(gè)屬19種，尖喙、原野庫(kù)蠓是重慶地區(qū)牛羊圈舍中的優(yōu)勢(shì)吸血蠓種，全年中表現(xiàn)為3月出現(xiàn)，6-10月份為數(shù)量高峰期，然后逐漸減少，12月末基本消失。本研究結(jié)果，一年期間渝西6區(qū)牛羊5-10月間牛羊感染藍(lán)舌病有較其他時(shí)間高的趨勢(shì)，也符合當(dāng)?shù)孛浇樯?庫(kù)蠓的生活習(xí)性，也再次證明了庫(kù)蠓在該病傳播中重要作用。

本研究表明，渝西地區(qū)牛羊群存在著藍(lán)舌病感染現(xiàn)象，其中羊群感染情況較嚴(yán)重(達(dá)到22.16%)，個(gè)別采樣區(qū)達(dá)到60%。而重慶地區(qū)多潮濕，空氣相對(duì)濕度大，適合庫(kù)蠓的生存，疫病發(fā)生和流行風(fēng)險(xiǎn)較高。建議當(dāng)?shù)叵嚓P(guān)部門(mén)重視藍(lán)舌病的防控，做好該病的防疫檢疫，搞好環(huán)境衛(wèi)生和滅蠓工作，以減少藍(lán)舌病對(duì)牛羊產(chǎn)業(yè)帶來(lái)的危害。

[1] 陳溥言.獸醫(yī)傳染病學(xué)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2006：282.

[2] 張念祖,李少華.中國(guó)藍(lán)舌病發(fā)現(xiàn)歷史、病毒分離及血清學(xué)研究[A].第一界東南亞太平洋地區(qū)藍(lán)舌病學(xué)術(shù)討論會(huì)論文匯編[C]，云南昆明：1995.

[3] Vellema P.Bluetongue in sheep:Question marks on blue-tongue virus serotype 8 in Europe[J]. Small Ruminant Research,2008,76:141-148.

[4] 曾順玉,陳汝琎,李樂(lè).云南亞熱帶地區(qū)牛藍(lán)舌病血清學(xué)研究[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊,2015,4:9-11.

[5] 王惠,覃嵐,尹鑫,等.2012年貴州羊藍(lán)舌病血清流行病學(xué)調(diào)查及影響因素分析[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫,2013,30(11):52-56.

[6] 韓晉玫,李坤,易俊,等.西藏部分地區(qū)黃牛藍(lán)舌病流行病學(xué)調(diào)查[J].中國(guó)奶牛,2014,34(22):62-63.

[7] 韓晉玫,李坤,韓照清,等.西藏、四川紅原地區(qū)牦牛藍(lán)舌病的血清學(xué)檢測(cè)[J].畜牧與獸醫(yī),2015,47(9):136-137.

[8] 段正贏,戴德強(qiáng),周丹娜,等.2013年湖北省山羊藍(lán)舌病血清學(xué)調(diào)查[J].畜牧與獸醫(yī),2016,48(2):110-112.

[9] 任曉玲,張志貞,逄國(guó)梁.陜西省某地區(qū)羊藍(lán)舌病血清學(xué)調(diào)查[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志,2004,40(4):22-23.

[10] 花群義,花群俊,陳兵,等.我國(guó)動(dòng)物蟲(chóng)媒病毒媒介庫(kù)蠓種類(lèi)及分布[J].上海畜牧獸醫(yī),2015,3:58-61.

[11] 季恒靑,馮紹全,劉南,等.重慶市吸血蠓蚋虻種類(lèi)及地理分布研究[J].中華衛(wèi)生殺蟲(chóng)藥械,2012,18(4):342-344.

S855.3

B

0529-6005(2017)09-0042-02

2016-12-19

重慶市科技支撐示范工程項(xiàng)目(jcsf121-2012-01-1)；西南大學(xué)青年基金項(xiàng)目(20700415)

袁媛(1993-)，女，碩士生，主要從事牛病防控技術(shù)研究，E-mail: 987493330@qq.com

李前勇，E-mail:qinyong_l@126.com