不規(guī)則抗體檢驗在臨床輸血中的檢驗效果及對患者治療預(yù)后的影響研究

河南省南陽市中心血站（473000）靖春旭

在現(xiàn)代醫(yī)療中，臨床輸血已成為挽救人們生命安全的必要手段，一旦出現(xiàn)差錯，可能會危及生命，因此除了慎重應(yīng)對其操作外，必須選擇更為妥善的技術(shù)方法，保證其準確性和及時性，保障受血者的生命健康。在臨床輸血中，血型免疫抗體的檢出率維持在為0.30%～2.00%，進行輸血前的篩查可以排除不同血型的免疫抗體，對于保障受血者生命安全有著積極意義。現(xiàn)代醫(yī)療技術(shù)的進步已經(jīng)能夠?qū)BO血型鑒定[1]誤差的發(fā)生率控制在一個很低的水平，然而對于因輸血、妊娠導(dǎo)入不規(guī)則抗體所引起的溶血性不良反應(yīng)還難以避免。眾所周知，人體血型抗體分為規(guī)則抗體和不規(guī)則抗體，前者由ABO血型中的抗-A、抗-B[2]和抗-AB等規(guī)則抗體組成，后者來自于ABO血型以外的免疫抗體，如IgG抗體、IGM抗體等。臨床輸血不良反應(yīng)的主要原因即是不規(guī)則抗體的篩查，輸血前如不能合理選擇血型，將加大溶血性不良反應(yīng)的發(fā)生率。本文分析大樣本臨床資料，旨在探討輸血前不規(guī)則抗體篩查的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取我院2013年5月～2015年8月入治的1600名受血者的臨床資料，男性971人，女性529人，年齡在15～65歲之間，平均年齡為(35.4±2.5)歲。所有患者均為符合臨床輸血適應(yīng)證的患者。

納入標準：①經(jīng)臨床確診，具有輸血指征；②臨床資料完整；③年齡不超過85歲，具備穩(wěn)定的生命體征[3]；④主動配合治療。另有排除標準如下：①有急性感染、各種心肌炎、心肌病者，須通過CT、MRI等頭部檢查來證實排除；②患者存在心肝腎功能不全；③近期服用糖皮質(zhì)激素或免疫抑制劑；④凝血功能障礙者；⑤臨床資料不完整者；⑥病例有感染性心內(nèi)膜炎[4]、風濕性心臟病。⑦沒有取得患者及其家屬的同意和簽署知情同意書。

1.2 方法 對受血者的操作須遵照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》。采集其靜脈血3～5mL，需注意取血前3d空腹，進行10分鐘的3000r/min離心操作，分離出血清標本。做好臨床常規(guī)操作指導(dǎo)，并詳細記錄其個人信息，篩選標記紅細胞并制作抗人球蛋白凝膠卡。采用低濃度溶液調(diào)整紅細胞或譜細胞至0.7%左右，實驗微管注意制作標記，繼續(xù)加檢者血清入微管，37℃溫度下孵育試劑15分鐘進行離心操作，本次研究使用BYL型血型離心機，觀測結(jié)果。受血者的血液中存在不規(guī)則抗體是導(dǎo)致其出現(xiàn)遲發(fā)性免疫反應(yīng)和溶血性輸血反應(yīng)的重要原因。在篩選不規(guī)則抗體的操作中，先在待測管中滴入受血者血清和紅細胞懸液，對照1-H號譜細胞進行鑒定，篩查陽性細胞抗體使用抗人球蛋白凝膠卡輔助鹽水試管法來鑒定抗體，繼而完成抗體類型的堅定。

1.3 結(jié)果判定標準 陽性(+)判定標準：凝膠柱上部或中部出現(xiàn)紅細胞凝集、懸浮[5]。陰性(-)判定標準：紅細胞的沉降發(fā)生在凝膠柱底部，顯示為陽性的游離篩檢抗體與譜細胞進行對照，相符者可判斷為抗體陽性。

1.4 統(tǒng)計數(shù)據(jù) 本次使用的統(tǒng)計軟件為SPSS19.0，以計量資料t來代表計算臨床數(shù)據(jù)并檢驗分析，以x2來進行單因素分析的檢驗，視P<0.05為差異有效，具備統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不規(guī)則抗體篩查結(jié)果 在1600例患者中，共篩出不規(guī)則抗體陽性者6例，男4例，女2例，陽性檢出率為0.37%。6例不規(guī)則抗體陽性患者均存在妊娠史[6]或輸血史，而其中4人患血液系統(tǒng)疾病，占比66.67%，其他疾病患者2例，占33.33%，二者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見附表1。

2.2 不規(guī)則抗體特異性鑒定 本次研究中的不規(guī)則抗體陽性患者有4例Rh系統(tǒng)抗體陽性(66.67%)，其中抗-D抗體、抗-DC抗體各1例，分別占16.67%，抗-E抗體[7]陽性2例(33.33%)。另檢出MNS系統(tǒng)抗-M抗體陽性2例，占33.33%。見附表2。

3 討論

輸血患者在入院后需輸注血液以展開治療，而輸血安全檢驗是臨床輸血的前提?，F(xiàn)代血型鑒定技術(shù)快速發(fā)展，由血型鑒定而引發(fā)的輸血事故已幾乎杜絕，但是由于血型系統(tǒng)本身的不規(guī)則抗體導(dǎo)致的不良反卻仍難以控制。近10年來的數(shù)據(jù)統(tǒng)計，臨床輸血中不規(guī)則抗體的檢出率維持在為0.30%～2.00%，然而一旦出現(xiàn)未被篩查出的情況，多會導(dǎo)致遲發(fā)性輸血反應(yīng)，情況嚴重時甚至危及受血者生命安全。血型免疫抗體是引發(fā)輸血不良反應(yīng)（如溶血反應(yīng)）的關(guān)鍵原因，所以必須確認患者體內(nèi)存在不規(guī)則抗體[8]的可能性，這對于輸血安全來說至關(guān)重要。

附表1 患者不規(guī)則抗體篩查結(jié)果[n(%)]

附表2 不規(guī)則抗體特異性鑒定結(jié)果[n(%)]

為提高配血的準確性，受血者多會在提前一天篩查體內(nèi)的特異性不規(guī)則抗體?？谷饲虻鞍捉橘|(zhì)法和酶介質(zhì)法是使用最多的兩種配血方法，前者主要用于檢測有輸血史或流產(chǎn)史患者的血型抗體。而檢測患者體內(nèi)的Rh系統(tǒng)免疫性抗體則主要通過酶介質(zhì)法，一般適用于有輸血史和妊娠史的患者。在快速配血、排除血漿特異性蛋白干擾方面，抗人球蛋白介質(zhì)法有著更大優(yōu)勢[9]。檢測患者不規(guī)則抗體可以強化抗體特異性的發(fā)現(xiàn)，幫助患者匹配血型，有效降低輸血后發(fā)生溶血反應(yīng)的可能，提高了輸血的安全性。

輸血和妊娠是產(chǎn)生ABO血型系統(tǒng)以外的不規(guī)則抗體的主要原因，共有特點是引發(fā)溶血和紅細胞致敏，導(dǎo)致血細胞在鹽水介質(zhì)不能中發(fā)生凝集。Rh系統(tǒng)的抗-E抗體，抗-DC抗體，抗-D抗體和抗-e抗體是ABO血型系統(tǒng)以外最主要的不規(guī)則抗體，包括MNS系統(tǒng)的抗-M抗體。在Rh抗原中，D抗原、DC抗原、e抗原的陽性率都高于E抗原[10]，所以抗-E抗體的檢出率高于其他抗體。在低離子介質(zhì)進入后，能夠較好地實現(xiàn)介質(zhì)離子強度的降低，促進抗體和紅細胞發(fā)生相關(guān)反應(yīng)[10][11][12]。作為陽離子聚合物，溶解后帶有大量的正電荷，能夠使得紅細胞表面的負電荷得到中和，緩解唾液酸的作用，同時減少非特異性的凝集。酌情加入重懸液，紅細胞會出現(xiàn)散開的景象，而假陽性發(fā)生率的減少正得益于非特異性凝集的緣故，使得假陽性的誤檢率大衛(wèi)減少甚至避免[13]。輸血后一周左右是免疫性抗體的效價高峰，也是發(fā)生溶血反應(yīng)的高峰期，因抗體效價和溶血反應(yīng)強度存在正相關(guān)關(guān)系，所以應(yīng)對其加強臨床重視。部分較少見的抗體，如抗-Lea抗體也能導(dǎo)致輸血后溶血反應(yīng)，所以輸血前的檢查力度不能松懈[14][15][16]。

總的來說，ABO血型系統(tǒng)以外的不規(guī)則抗體多出現(xiàn)在Rh系統(tǒng)和MNS系統(tǒng)中，輸血或妊娠是其產(chǎn)生的重要誘發(fā)因素。不規(guī)則抗體檢測在臨床輸血中檢驗效果是影響患者的重要因素，降低甚至避免發(fā)生溶血性輸血反應(yīng)的可能性，還可以幫助患者匹配血型，提高患者輸血的安全性，可以進行臨床推廣。