• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    有機(jī)質(zhì)對(duì)城市濕地微生物豐度的影響

    2017-11-04 06:34:33謝佳馬曉航代嫣然吳娟向東方成水平
    生物技術(shù)通報(bào) 2017年10期
    關(guān)鍵詞:古菌外源硝化

    謝佳 馬曉航 代嫣然 吳娟 向東方 成水平

    (同濟(jì)大學(xué)長(zhǎng)江水環(huán)境教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,上海 200092)

    有機(jī)質(zhì)對(duì)城市濕地微生物豐度的影響

    謝佳 馬曉航 代嫣然 吳娟 向東方 成水平

    (同濟(jì)大學(xué)長(zhǎng)江水環(huán)境教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,上海 200092)

    城市濕地不僅面臨著外源有機(jī)質(zhì)負(fù)荷不斷增加的問(wèn)題,而且濕地表層土壤的有機(jī)質(zhì)在城市建設(shè)過(guò)程中會(huì)被破壞。通過(guò)外加樟樹樹葉浸出液,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),模擬研究了外源有機(jī)質(zhì)增加對(duì)濕地土壤表層微生物豐度影響。結(jié)果表明,土壤結(jié)構(gòu)的改變顯著影響細(xì)菌、古菌及氮循環(huán)各環(huán)節(jié)功能基因的豐度。土壤有機(jī)質(zhì)含量下降,細(xì)菌及氮循環(huán)相關(guān)功能基因的豐度都顯著降低(P<0.05)。同時(shí)提高上覆水中的外源氮和DOM含量會(huì)顯著促進(jìn)濕地微生物以及氮功能基因豐度的增加。外加DOM會(huì)顯著影響NO2--N向N2O、NO的轉(zhuǎn)化過(guò)程的兩個(gè)基因。

    城市濕地;有機(jī)質(zhì);實(shí)時(shí)熒光定量PCR;微生物豐度

    城市濕地有機(jī)質(zhì)的研究多分為兩個(gè)方面:沉積物有機(jī)質(zhì)和水體中溶解性有機(jī)質(zhì)(DOM)。土壤/沉積物中的有機(jī)質(zhì)和水中的有機(jī)質(zhì)是濕地中有機(jī)質(zhì)的聯(lián)合體,二者相互轉(zhuǎn)化,共同作用于濕地環(huán)境,影響濕地生態(tài)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)及功能。因此,有必要將土壤有機(jī)質(zhì)和水體有機(jī)質(zhì)共同考慮。濕地中土壤和水體界面是氮循環(huán)的重要場(chǎng)所,氮循環(huán)也受到各種理化環(huán)境的影響,因此通過(guò)探究表層土壤中氮循環(huán)相關(guān)功能基因?qū)τ袡C(jī)質(zhì)的響應(yīng)及分布特征,可以幫助我們了解氮元素在濕地中遷移轉(zhuǎn)化的微生物學(xué)機(jī)制。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    圖1 模擬濕地裝置示意圖

    實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 構(gòu)建了小型模擬系統(tǒng)— —PVC板制成的頂部開(kāi)口的水箱(長(zhǎng)×寬×高=400 mm×400 mm×600 mm)。水箱底部填25 cm厚的濕地土壤,加25 cm深的上覆水,每個(gè)系統(tǒng)中種植10株挺水植物蘆葦(Phragmites australis)。裝置圖見(jiàn)圖1。

    實(shí)驗(yàn)設(shè)置6個(gè)處理組,每組3個(gè)平行,各實(shí)驗(yàn)處理組控制條件,見(jiàn)表1。

    表1 實(shí)驗(yàn)處理組設(shè)置

    A和B兩種土壤,均采自上海市江灣濕地,土壤A是濕地內(nèi)部河道的水岸交錯(cuò)帶土壤,土壤B是在周邊開(kāi)發(fā)建設(shè)過(guò)程中受到破壞(表層土壤有被鏟車清表)的濕地土壤。土壤A中總磷(TP)、總氮(TN)、有機(jī)質(zhì)(OM)初始濃度分別為4.17±0.05、1.19±0.01、24.3±0.02 g/kg干重,土壤 B 中總磷(TP)、總氮(TN)、有機(jī)質(zhì)(OM)初始濃度分別為1.13±0.02、0.57±0.01、13.7±0.04 g/kg干重。

    系統(tǒng)中的上覆水取自流經(jīng)同濟(jì)大學(xué)校園景觀河道,上覆水中TP、可溶性活性磷(SRP)、TN、氨氮()、硝氮(N)、亞硝氮()、溶解性有機(jī)碳(DOC)初始濃度分別為0.055±0.001、0.035±0.001、1.11±0.11、0.54±0.01、0.36±0.06、0.069±0.001、7.09±0.51 mg/L,即為低濃度處理組。高濃度處理組即在采集的景觀河道水中添加氯化銨、磷酸二氫鉀及制備的樟樹樹葉浸出液控制上覆水中TN、TP、DOC濃度為10 mg/L、0.5 mg/L和30 mg/L左右。

    蘆葦采自江灣濕地,預(yù)培養(yǎng)4周后,選取大小一致的健壯植株種植在各實(shí)驗(yàn)裝置中,每個(gè)實(shí)驗(yàn)裝置種植10棵(密度62.5株/m2)。

    1.2 方法

    1.2.1 樣品采集及保存 實(shí)驗(yàn)?zāi)┢谏细菜趴蘸螅凑彰坊ú键c(diǎn)法采集5個(gè)點(diǎn)位的0-5 cm表層土壤,剔除植物根系后將每個(gè)裝置的樣品混合均勻后放于密封袋中,置于-25℃下冷凍保存待測(cè)。

    1.2.2 土壤有機(jī)質(zhì)的分析 使用光度法[14]測(cè)定土壤有機(jī)質(zhì)含量,分析儀器為UV-2800紫外分光光度計(jì)。

    1.2.3 微生物的提取及分析 采用 OMEGA泥樣基因組提取試劑盒(D5625-01 Soil DNA Kit)進(jìn)行基因組DNA提取與純化。通過(guò)1%瓊脂凝膠電泳檢測(cè)提取基因組DNA,并儲(chǔ)存置于-25℃下冷凍保存。

    后續(xù)引物設(shè)計(jì)及實(shí)時(shí)熒光定量PCR的工作交由上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司完成。本次檢測(cè)所使用的目的基因引物信息見(jiàn)表2,并稀釋到10 μmol/L的濃度。對(duì)細(xì)菌的16S rRNA 基因、古菌的16S rRNA 基因、厭氧氨氧化菌的16S rRNA 基因,和以下功能基因的靶片段氨單氧化酶基因(amoA)、亞硝酸鹽氧化還原酶基因(nxrA)、與膜結(jié)合的硝酸還原酶基因(narG)、含銅亞硝酸鹽還原酶基因(nirK)、含細(xì)胞色素cd1亞硝酸鹽還原酶基因(nirS)、一氧化二氮還原酶基因(nosZ)進(jìn)行定量分析[15]。

    表2 目的基因引物[16-21]

    1.3 數(shù)據(jù)分析

    數(shù)據(jù)處理采用Excel 2013,數(shù)據(jù)取3組平行數(shù)據(jù)的平均值。各數(shù)據(jù)圖的繪制采用Origin Pro 8.0,數(shù)據(jù)協(xié)方差分析采用SPSS 19.0,運(yùn)用單因素方差分析,選取不同處理組為因素,考察6個(gè)實(shí)驗(yàn)處理組植物各項(xiàng)指標(biāo)在0.05水平上是否存在顯著性差異。

    2 結(jié)果

    2.1 濕地土壤理化參數(shù)

    表3為實(shí)驗(yàn)?zāi)┢诓煌瑢?shí)驗(yàn)組土壤ORP隨深度變化的數(shù)據(jù),各處理組土壤ORP值都隨著深度增加而降低。土壤A(W1、W2)ORP顯著低于土壤B(W3-W6)(P<0.05)。W1、W2兩個(gè)處理組在垂向上的差異則沒(méi)有顯著性(P>0.05),W3-W6四個(gè)處理組土壤ORP垂向上的差異具有顯著性(P<0.05)。

    圖2是各處理組土壤有機(jī)質(zhì)的含量,由圖2可知實(shí)驗(yàn)?zāi)┢诟魈幚斫M土壤表層有機(jī)質(zhì)含量相較于原土壤都有所升高。土壤A處理組有機(jī)質(zhì)含量顯著高于土壤B處理組(P<0.05);添加外源DOM的W1和W3兩個(gè)處理組土壤表層有機(jī)質(zhì)含量有顯著的升高(P<0.05)。

    2.2 微生物豐度

    2.2.1 細(xì)菌、古菌的基因豐度 圖3是各處理組表層土壤中細(xì)菌和古菌16S rRNA 基因的豐度。土壤A處理組(W1、W2)細(xì)菌豐度顯著高于土壤B處理組(W5、W6)(P<0.05),添加外源氮、磷的 W3、W4與W5、W6并未發(fā)現(xiàn)顯著性的變化(P>0.05),外源DOM的添加使得W1、W3、W5三個(gè)處理組細(xì)菌豐度要分別高于W2、W4、W6,上覆水中有機(jī)質(zhì)的增加提高了表層土壤中供微生物生長(zhǎng)的碳源。古菌的豐度要低于細(xì)菌,但同細(xì)菌類似,土壤A處理組中豐度更高。添加外源DOM的W3古菌豐度顯著高于 W4(P<0.05)。

    表3 各處理組土壤不同深度處ORP及顯著性分析結(jié)果*

    圖2 各處理組土壤表層有機(jī)質(zhì)含量的變化

    圖3 各處理組表層土壤細(xì)菌(A)、古菌(B)基因豐度

    2.2.2 硝化過(guò)程相關(guān)基因豐度 圖4所示為各處理組表層土壤中參與硝化過(guò)程的nxrA基因的豐度。nxrA基因是將NO2-N好氧轉(zhuǎn)化為NO3

    --N的標(biāo)志物[22]。W1、W2兩個(gè)處理組基因豐度要顯著高于其他4個(gè)處理組(P<0.05),W1與W2之間以及W3、W4、W5、W6相互間沒(méi)有顯著性差異(P>0.05),nxrA基因和反硝化相關(guān)的幾個(gè)基因相比,豐度要低很多。amoA基因由于引物設(shè)計(jì)出現(xiàn)問(wèn)題,在擴(kuò)增過(guò)程中一直得不到穩(wěn)定的結(jié)果。

    圖4 各系統(tǒng)表層土壤硝化過(guò)程相關(guān)基因絕對(duì)豐度

    2.2.3 反硝化過(guò)程相關(guān)基因豐度 圖5是參與反硝化過(guò)程的4個(gè)重要基因narG、nirK、nirS和nosZ的豐度,對(duì)比各反硝化相關(guān)基因的豐度與細(xì)菌的豐度發(fā)現(xiàn),反硝化細(xì)菌在總的細(xì)菌群落里所占的比例并不高,與Henry[23]的結(jié)果一致。

    圖5 各處理組表層土壤反硝化過(guò)程相關(guān)基因豐度

    nosZ是編碼N2O還原酶的基因,作用是完成N的徹底反硝化[26]。N2O還原為N2是反硝化作用的最后一步反應(yīng),受制于前反應(yīng),該基因在W1-W6處理組表層土壤中的豐度和narG基因、nirK基因一致。

    2.2.4 厭氧氨氧化細(xì)菌基因豐度 圖6是各處理組表層土壤厭氧氨氧化細(xì)菌的豐度,W1-W6表層土壤anammox豐度較高,實(shí)驗(yàn)中土壤一直處于淹水的狀態(tài),造成的厭氧的環(huán)境有利于anammox的增殖。W1、W2、W3三個(gè)處理組該細(xì)菌豐度要顯著高于其他幾個(gè)處理組(P<0.05),與表層間隙水ORP結(jié)果相一致。

    圖6 各處理組表層土壤厭氧氨氧化細(xì)菌豐度

    3 討論

    上覆水中的外源DOM會(huì)通過(guò)直接沉降或被生物體吸收利用后再經(jīng)過(guò)一系列的地球化學(xué)過(guò)程將其轉(zhuǎn)移到土壤中[27],增加濕地表層土壤有機(jī)質(zhì)含量[28]。本研究中,外源DOM添加條件下表層土壤有機(jī)質(zhì)含量的增幅較小。外源溶解性的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)土壤有機(jī)質(zhì)的貢獻(xiàn)需要通過(guò)生物的吸收、轉(zhuǎn)化及死亡后的沉降等是一個(gè)長(zhǎng)期的過(guò)程[27],表層土壤有機(jī)質(zhì)主要來(lái)自濕地植物凋落物的生物降解[28-29]。本研究實(shí)驗(yàn)周期為5月21日到9月4日,是蘆葦?shù)纳L(zhǎng)期,凋落物較少,因此DOM增幅較小。基于以上,濕地表層土壤一旦被破壞,通過(guò)自然過(guò)程恢復(fù)其有機(jī)質(zhì)含量很難,需要漫長(zhǎng)的時(shí)間。

    濕地表層土壤被破壞后可生物利用的有機(jī)質(zhì)含量下降,造成微生物數(shù)量銳減[13,30]。而可生物利用有機(jī)質(zhì)的增加不僅增加微生物的多樣性,還可增加微生物的基因豐度[31],濕地表層土壤中充足碳源也有助于古菌的生長(zhǎng)[32]。本研究上覆水中DOM的添加提高了表層土壤中供微生物生長(zhǎng)的碳提高微生物豐度,與Blanchet等[33]的研究一致。DOM的長(zhǎng)期輸入會(huì)使?jié)竦赝寥澜Y(jié)構(gòu)發(fā)生改變,從而使微生物群落發(fā)生變化[2]。

    硝化過(guò)程相關(guān)基因豐度也受到土壤有機(jī)質(zhì)含量的影響,有機(jī)質(zhì)的增加可顯著提高其基因豐度[34]。本研究中可能是土壤處于淹水狀態(tài),硝化作用受到抑制[35],硝化細(xì)菌nxrA基因的豐度在總的細(xì)菌群落里所占的比例并不高。

    上覆水添加DOM增加了反硝化的碳源,并提供了厭氧的條件,提高濕地表層土壤narG基因豐度[12,36]。Chen 等[37]的研究也表明加入植物濾液的反硝化細(xì)菌豐度明顯高于不加植物濾液的處理組,外加DOM有助于反硝化細(xì)菌的生長(zhǎng)。本研究中narG基因豐度較高,能夠減少NO3--N 的積累[15]。在氮源、碳源以及氧化還原條件更有利于反硝化作用的W1、W2、W3處理組系統(tǒng)中nirS基因豐度顯著要高于其他處理組(P<0.05),nirK基因的結(jié)果正相反,也可能是因?yàn)橄啾扔趎irK基因,nirS基因受碳源的影響更大[38]。

    對(duì)于nosZ基因來(lái)講,N2O的還原受制于前反應(yīng),因此nosZ基因豐度變化規(guī)律表現(xiàn)出了和narG基因、nirK基因的一致性[15]。本研究中反硝化過(guò)程各個(gè)環(huán)節(jié)的narG、nirK、nosZ三個(gè)基因的豐度變化規(guī)律表現(xiàn)出了一致性:有機(jī)質(zhì)較高的土壤A中各基因豐度顯著高于土壤B(P<0.05),因?yàn)榉磻?yīng)底物高且厭氧環(huán)境更適合反硝化的進(jìn)行;另外,上覆水添加氮和DOM的處理組中基因豐度顯著高于無(wú)添加的W5、W6(P<0.05),而只添加氮的W4則沒(méi)有發(fā)現(xiàn)顯著差異(P>0.05)。表明碳源在反硝化過(guò)程中起到了重要的作用[15]。各處理組nirK和nirS的基因豐度顯著高于nxrA基因的豐度,與Fu等[36]的研究一致,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可能存在短程硝化反硝化途徑。

    Anammox細(xì)菌基因豐度與表層間隙水ORP結(jié)果相一致,還原性的環(huán)境是影響厭氧氨氧化過(guò)程的關(guān)鍵因素。Trimmer等[39]研究指出土壤有機(jī)碳的含量和厭氧氨氧化的活性顯著正相關(guān),有機(jī)質(zhì)有助于厭氧氨氧化的進(jìn)行。Zhi等[15]研究結(jié)果表明當(dāng)有機(jī)質(zhì)含量高時(shí),濕地完全沒(méi)有亞硝氮和硝氮的積累,而厭氧氨氧化菌顯著增加。anammox細(xì)菌為自養(yǎng)型細(xì)菌,以CO2為碳源,有機(jī)碳的存在可能會(huì)厭氧氨氧化細(xì)菌利用有機(jī)碳取代基質(zhì)作為新的代謝途徑,展現(xiàn)多樣的代謝途徑[40]。有研究表明低濃度有機(jī)物存在時(shí)可促進(jìn)厭氧氨氧化菌的活性,但有機(jī)物濃度高時(shí),厭氧氨氧化菌活性大大降低[41-43]。厭氧氨氧化細(xì)菌在總的細(xì)菌群落里所占的比例較高,厭氧氨氧化成為濕地氮循環(huán)另一種途徑[15]。

    4 結(jié)論

    上覆水添加外源有機(jī)質(zhì),表層土壤有機(jī)質(zhì)含量增幅較小,沒(méi)有顯著性的變化(P>0.05),土壤特性的改變需經(jīng)歷動(dòng)植物殘?bào)w的沉降累積、元素的地球化學(xué)循環(huán)等,濕地表層土壤被破壞后的自然恢復(fù)是一個(gè)漫長(zhǎng)的過(guò)程。

    土壤有機(jī)質(zhì)含量顯著影響細(xì)菌、古菌及氮循環(huán)各環(huán)節(jié)相關(guān)基因的豐度。表層土壤被破壞,土壤中有機(jī)質(zhì)含量降低使得微生物及參與氮循環(huán)的基因豐度顯著下降(P<0.05)。同時(shí)提高上覆水中的外源氮和DOM含量會(huì)顯著促進(jìn)濕地微生物以及氮功能基因豐度的增加(P<0.05)。

    土壤有機(jī)質(zhì)含量增加顯著促進(jìn)反硝化過(guò)程相關(guān)的narG、nirS、nosZ三個(gè)基因的豐度,且nirS基因受外加碳源的影響更大。

    濕地土壤一直處于淹水狀態(tài),表層土壤中厭氧氨氧化基因豐度較高,具有較大厭氧氨氧化去除氮素的潛能。

    [1] 李春暉, 鄭小康, 牛少鳳, 等. 城市濕地保護(hù)與修復(fù)研究進(jìn)展[J]. 地理科學(xué)進(jìn)展, 2009, 28(2):271-279.

    [2] 吳豐昌. 天然有機(jī)質(zhì)及其與污染物的相互作用. 北京:科學(xué)出版社, 2010:311.

    [3] USEPA. A Handbook of Constructed Wetlands[M]. New York:USEPA, 1994.

    [4] 楊旭. 微污染飲用水源人工濕地預(yù)處理效能與作用機(jī)理研究[D]. 哈爾濱:哈爾濱工業(yè)大學(xué), 2008.

    [5] Ragusa SR, McNevin D, Qasem S, et al. Indicators of biofilm development and activity in constructed wetlands microcosms[J].Water Research, 2004, 38(12):2865-2873.

    [6] 王世和. 人工濕地污水處理理論與技術(shù)[M]. 北京:科學(xué)出版社, 2007:17-19.

    [7] 夏宏生, 蔡明, 向欣. 人工濕地凈化作用與微生物相關(guān)性研究[J]. 廣東水利水電, 2008(3):4-8.

    [8] 杜剛, 黃磊, 高旭, 等. 人工濕地微生物數(shù)量與污染物去除的關(guān)系[J]. 濕地科學(xué) , 2013, 11(1):13-20.

    [9] Angnes G, Nicoloso RS, Silva MLBD, et al. Correlating denitrifying catabolic genes with N2O and N2emissions from swine slurry composting[J]. Bioresource Technology, 2013, 140(3):368-375.

    [10] Faulwetter JL, Gagnon V, Sundberg C, et al. Microbial processes influencing performance of treatment wetlands:A review[J].Ecological Engineering, 2009, 35(6):987-1004.

    [11] 代嫣然, 梁威, 吳振斌. 低碳高氮廢水的人工濕地脫氮研究進(jìn)展[J]. 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào), 2010, 29:305-309.

    [12] Gao M, Liu J, Qiao Y, et al. Diversity and abundance of the denitrifying microbiota in the sediment of eastern china marginal seas and the impact of environmental factors[J]. Microbial Ecology, 2017, 73(3):602-615.

    [13] 裴希超, 許艷麗, 魏巍. 濕地生態(tài)系統(tǒng)土壤微生物研究進(jìn)展[J]. 濕地科學(xué) , 2009, 7(2):181-186.

    [14] 李婧. 土壤有機(jī)質(zhì)測(cè)定方法綜述[J]. 分析試驗(yàn)室, 2008, 27(S1):154-156.

    [15] Zhi W, Ji G, Quantitative response relationships between nitrogen transformation rates and nitrogen functional genes in a tidal flow constructed wetland under C/N ratio constraints[J]. Water Research, 2014, 64(7):32-41.

    [16] Grosskopf R, Janssen PH, Liesack W. Diversity and structure of the methanogenic community in anoxic rice paddy soil microcosms as examined by cultivation and direct 16S rRNA gene sequence retrieval[J]. Appl Environ Microbiol, 1998, 64(3):960-969.

    [17] Scala DJ, Kerkhof LJ. Nitrous oxide reductase(nosZ)genespecific PCR primers for detection of denitrifiers and three nosZ genes from marine sediments[J]. Fems Microbiology Letters,1998, 162(1):61-68.

    [18] Throback I. N, Enwall K, Jarvis A, Hallin S. Reassessing PCR primers targeting nirS, nirK and nosZ genes for community surveys of denitrifying bacteria with DGGE[J]. Fems Microbiology Ecology, 2004, 49(3):401-417.

    [19] Tsushima I, Kindaichi T, Okabe S. Quantification of anaerobic ammonium-oxidizing bacteria in enrichment cultures by real-time PCR[J]. Water Research, 2007, 41(4):785-794.

    [20] Yan TF, Fields MW, Wu LY, et al. Molecular diversity and characterization of nitrite reductase gene fragments(nirK and nirS)from nitrate- and uranium-contaminated groundwater[J].Environ Microbiol, 2003, 5(1):13-24.

    [21] Poly F, Wertz S, Brothier E, Degrange V. First exploration of Nitrobacter diversity in soils by a PCR cloning-sequencing approach targeting functional gene nxrA[J]. FEMS Microbiology Ecology, 2008, 63(1):132-140.

    [22] Wang H, Ji G, Bai X, He C. Assessing nitrogen transformation processes in a trickling filter under hydraulic loading rate constraints using nitrogen functional gene abundances[J].Bioresourouse Technology, 2015, 177:217-223.

    [23] Henry S, Bru D, Stres B, et al. Quantitative detection of the nosZ gene, encoding nitrous oxide reductase and comparison of the abundances of 16S rRNA, narG, nirK, and nosZ genes in soils[J]. Appl Environ Microbiol, 2006, 72(8):5181-5189.

    [24] López-Gutiérrez JC, Henry S, Hallet S, et al. Quantification of a novel group of nitrate-reducing bacteria in the environment by realtime PCR[J]. Journal of Microbiological Methods, 2004, 57(3):399-407.

    [25] García-Lledó A, Vilar-Sanz A, Trias R, et al. Genetic potential for N2O emissions from the sediment of a free water surface constructed wetland[J]. Water Research, 2011, 45(17):5621-5632.

    [26] Stres B, Mahne I, Avgustin G, et al. Nitrous oxide reductase(nosZ)gene fragments differ between native and cultivated Michigan soils[J]. Applied & Environ Microbiol, 2004, 70(1):301-309.

    [27] 李緒錄, 周毅頻, 夏華永. 大鵬灣表層沉積物中碳、氮、磷的多年調(diào)查結(jié)果和有機(jī)質(zhì)來(lái)源分析[J]. 環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào), 2012,32(5):1113-1119.

    [28] 馮璐, 施肥對(duì)祁連山濕地植物群落結(jié)構(gòu)及土壤有機(jī)質(zhì)的影響[D]. 西寧:青海師范大學(xué), 2015.

    [29] Xi M, et al. Assessment of the content, structure, and source of soil dissolved organic matter in the coastal wetlands of Jiaozhou Bay,China[J]. Physics and Chemistry of the Earth Parts Alblc.(2017),http://dx. doi. org/10. 1016/j. pce. 2017. 03. 004.

    [30] 劉樹, 梁漱玉. 蘆葦濕地土壤有機(jī)質(zhì)含量對(duì)蘆葦產(chǎn)能的影響研究[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技, 2008(7):232-234.

    [31] Landa M, Cottrel T, Kirchman D, et al. Changes in bacterial diversity in response to dissolved organic matter supply in a continuous culture experiment[J]. Aquatic Microbial Ecology,2013, 69(2):157-168.

    [32] 李露, 陳宏春, 高大文. 七星河濕地厭氧氨氧化古細(xì)菌多樣性及其與環(huán)境因子的相關(guān)性分析[J]. 環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào), 2015, 35(4):1097-1105.

    [33] Blanchet M, Femandez C, Joux F. Photoreactivity of riverine and phytoplanktonic dissolved organic matter and its effects on the dynamics of a bacterial community from the coastal Mediterranean Sea[J]. Prog Oceanogr, 2017. doi:10.1016/j.pocean.2017.03.003.

    [34] Riley KA, Stein OR, Hook PB. Ammonium removal in constructed wetland microcosms as influenced by presence and species of plants and organic carbon load[J]. J Environ Sci Health Part A,2005, 40(6-7):1109-1121.

    [35] 邱昭政, 羅專溪, 趙艷玲, 顏昌宇. 溶氧對(duì)富集培養(yǎng)的河口濕地表層沉積物氨氧化菌多樣性及氨氧化速率的影響[J].2013, 34(2):532-539.

    [36] Fu GP, Huang LK, Guo ZP, et al. Effect of plant-based carbon sources on denitrifying microorganisms in a vertical flow constructed wetland[J]. Bioresource Technology, 2017, 224 :214-221.

    [37] Chen Y, Wen Y, Zhou Q, et al. Effects of plant biomass on denitrifying genes in subsurface-flow constructed wetlands[J].Bioresource technology, 2014, 157:341-345.

    [38] Hallin S, Throb?ck IN, Dicksved J, et al. Metabolic profiles and genetic diversity of denitrifying communities in activated sludge after addition of methanol or ethanol[J]. Applied & Environ Microbiol, 2006, 72(72):5445-5452.

    [39] Trimmer M, Nicholls JC, Deflandre B. Anaerobic ammonium oxidation measured in sediments along the Thames estuary, United Kingdom[J]. Applied & Environ Microbiol, 2003, 69(11):6447-6454.

    [40] Lan CJ, Kumar M, Wang CC, et al. Development of simultaneous partial nitrification, anammox and denitrification(SNAD)process in a sequential batch reactor[J]. BioresourceTtechnology, 2011,102(9):5514-5519.

    [41] Zhang SY, Wu P, Song YL, et al. Nitrogen removal using ANAMMOX and denitrification for treatment of municipal sewage[J]. Environmental Science, 2015, 36(11):4174-4179.

    [42] Yang PB, Li X, Huang Y, et al. Short or long term influence of phenol on nitrogen removal efficiency of ANAMMOX sludge[J].Environmental Science, 2015, 36(10):3771-3777.

    [43] 管勇杰, 于德爽, 李津, 等. 有機(jī)碳源作用下厭氧氨氧化系統(tǒng)的脫氮效能[J]. 環(huán)境科學(xué), 2017, 38(2):654-664.

    Effects of Organic Matters on the Abundance of Microorganisms in the Urban Wetland

    XIE Jia MA Xiao-hang DAI Yan-ran WU Juan XIANG Dong-fang CHENG Shui-ping
    (Key Laboratory of Yangtze River Water Environment for Ministry of Education,Tongji University,Shanghai 200092)

    Urban wetland suffers from not only the constant increase of organic matter load,but also the issue of organic matter in the topsoil is damaged in the process of urban development and construction. By adding the dissolved organic matter(DOM)solution of Cinnamomum camphora leaves,together with real-time fluorescence quantitative PCR,the effects of exogenous organic matter on the abundance of microorganisms in the topsoil(0-5 cm)was studied in simulative way. The results showed that changes in soil structure significantly affected the abundances of bacteria,archaea and functional genes associated with nitrogen cycles. The abundances of bacteria and functional genes associated with nitrogen cycles decreased significantly while soil organic matter content decreased(P <0.05). The addition of nitrogen and DOM in the overlying water remarkably increased the abundances of microorganism and nitrogen functional genes in wetland. The exogenous DOM significantly affected the two genes in the transformation process of NO2--N to N2O and NO.

    urban wetland;organic matter;qPCR;abundance of microorganism

    10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0528

    城市化建設(shè)過(guò)程中,人類活動(dòng)會(huì)破壞濕地表層土壤結(jié)構(gòu),造成濕地土壤有機(jī)質(zhì)含量等理化性質(zhì)發(fā)生改變;另一方面,生產(chǎn)生活污廢水未經(jīng)處理排入濕地,帶來(lái)濕地有機(jī)質(zhì)含量增加[1]。城市濕地有機(jī)質(zhì)的改變對(duì)濕地的結(jié)構(gòu)和功能產(chǎn)生重要影響[2]。微生物是濕地生態(tài)系統(tǒng)中不可或缺的成員,這些微生物存在于濕地的土壤和植物的根系表面,通過(guò)參與營(yíng)養(yǎng)物的循環(huán)和改善填料氧化還原條件,以實(shí)現(xiàn)處理污水的功能[3]。研究表明人工濕地中的微生物豐度及其與污染物去除有一定相關(guān)性[4-7],濕地微生物豐度與TN去除率顯著正相關(guān)[8]。反硝化及厭氧氨氧化是最終去除污水中TN的途徑,有機(jī)質(zhì)及不同形態(tài)的氮是反硝化過(guò)程和厭氧氨氧化過(guò)程的電子供體或受體[9-10]。有機(jī)質(zhì)缺乏往往是反硝化微生物脫氮的限制性步驟[11],研究表明高濃度有機(jī)質(zhì)有利于反硝化微生物的生長(zhǎng)[12]。國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)濕地微生物的研究多集中于人工濕地微生物功能的研究,對(duì)城市濕地微生物基因豐度研究的報(bào)道相對(duì)較少[13],因此了解有機(jī)質(zhì)濃度對(duì)城市濕地微生物基因豐度的影響,將有助于對(duì)城市濕地的深入研究。

    2017-06-27

    國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(51578395),上海市創(chuàng)新行動(dòng)計(jì)劃(16DZ1204803)

    謝佳,女,碩士研究生,研究方向:水體生態(tài)修復(fù);E-mail:15801755628@163.com

    成水平,男,博士,教授,研究方向:生態(tài)修復(fù);E-mail:shpcheng@#edu.cn

    (責(zé)任編輯 狄艷紅)

    猜你喜歡
    古菌外源硝化
    不同pH和氧氣條件下土壤古菌與海洋古菌的競(jìng)爭(zhēng)適應(yīng)機(jī)制*
    具有外源輸入的船舶橫搖運(yùn)動(dòng)NARX神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)預(yù)測(cè)
    變油為氣,“榨干”廢棄油田
    大自然探索(2022年5期)2022-07-11 03:10:33
    海洋古菌
    外源鉛脅迫對(duì)青稞生長(zhǎng)及鉛積累的影響
    外源鈣對(duì)干旱脅迫下火棘種子萌發(fā)的影響
    MBBR中進(jìn)水有機(jī)負(fù)荷對(duì)短程硝化反硝化的影響
    外源添加皂苷對(duì)斑玉蕈生長(zhǎng)發(fā)育的影響
    厭氧氨氧化與反硝化耦合脫氮除碳研究Ⅰ:
    海水反硝化和厭氧氨氧化速率同步測(cè)定的15N示蹤法及其應(yīng)用
    精品人妻在线不人妻| 2018国产大陆天天弄谢| 亚洲国产色片| 美女中出高潮动态图| 青青草视频在线视频观看| 日韩av不卡免费在线播放| 国产爽快片一区二区三区| 国产一区亚洲一区在线观看| 一个人免费看片子| 最新的欧美精品一区二区| 久久久久精品人妻al黑| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 大香蕉久久网| 老女人水多毛片| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 视频区图区小说| 在线天堂中文资源库| 男人添女人高潮全过程视频| 亚洲精品一区蜜桃| 超碰97精品在线观看| av国产久精品久网站免费入址| 在线精品无人区一区二区三| 一区二区三区乱码不卡18| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 看十八女毛片水多多多| 少妇的逼水好多| 黄色 视频免费看| 亚洲高清免费不卡视频| 少妇人妻 视频| 国产av国产精品国产| 亚洲国产精品999| 美女视频免费永久观看网站| 好男人视频免费观看在线| 一区在线观看完整版| 国产免费福利视频在线观看| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 亚洲欧美一区二区三区国产| 在线观看国产h片| 久久久久精品久久久久真实原创| 一级,二级,三级黄色视频| 欧美激情 高清一区二区三区| 亚洲精品中文字幕在线视频| 春色校园在线视频观看| 亚洲国产精品一区三区| xxx大片免费视频| 一区二区av电影网| 成人毛片60女人毛片免费| 成年人免费黄色播放视频| 18+在线观看网站| 天天影视国产精品| 久久久精品区二区三区| 午夜老司机福利剧场| 亚洲色图综合在线观看| 女性生殖器流出的白浆| 一级毛片我不卡| 成人国产av品久久久| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产成人a∨麻豆精品| 搡老乐熟女国产| 日本wwww免费看| 一级片免费观看大全| 亚洲精品一二三| 一级爰片在线观看| 国产精品久久久久久精品古装| 午夜91福利影院| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 边亲边吃奶的免费视频| 国产探花极品一区二区| 精品视频人人做人人爽| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲色图综合在线观看| 精品少妇久久久久久888优播| xxx大片免费视频| 久久久久精品久久久久真实原创| 2022亚洲国产成人精品| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产精品久久久久久久久免| 日韩一区二区三区影片| 久久97久久精品| 精品一区二区免费观看| freevideosex欧美| 色网站视频免费| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 国产日韩欧美视频二区| 热99国产精品久久久久久7| 视频中文字幕在线观看| 国产男女内射视频| 免费在线观看黄色视频的| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产一区二区激情短视频 | 满18在线观看网站| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 免费黄网站久久成人精品| 久久99热6这里只有精品| 精品少妇内射三级| 国产一区亚洲一区在线观看| 最黄视频免费看| 日本与韩国留学比较| 国产精品不卡视频一区二区| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 熟妇人妻不卡中文字幕| 亚洲精品成人av观看孕妇| 男男h啪啪无遮挡| 国产av国产精品国产| 久久精品国产综合久久久 | 免费黄色在线免费观看| 免费观看性生交大片5| 天美传媒精品一区二区| av一本久久久久| 搡老乐熟女国产| 亚洲国产av影院在线观看| 亚洲国产精品专区欧美| 亚洲天堂av无毛| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| av在线观看视频网站免费| 91国产中文字幕| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 久久久久久久久久久免费av| 岛国毛片在线播放| 亚洲精品美女久久av网站| 日韩一区二区视频免费看| 亚洲三级黄色毛片| 老熟女久久久| 超碰97精品在线观看| 日韩 亚洲 欧美在线| 啦啦啦啦在线视频资源| 韩国精品一区二区三区 | 香蕉丝袜av| 欧美最新免费一区二区三区| 寂寞人妻少妇视频99o| 久久国产精品大桥未久av| 成年人免费黄色播放视频| 国产一区二区三区综合在线观看 | av免费在线看不卡| 色哟哟·www| 久久精品久久精品一区二区三区| 亚洲成国产人片在线观看| 亚洲av.av天堂| 草草在线视频免费看| 69精品国产乱码久久久| 国产精品一国产av| 久久这里只有精品19| 一区二区av电影网| 一区二区av电影网| www.色视频.com| 国产成人精品婷婷| 黑人猛操日本美女一级片| 精品久久国产蜜桃| 免费大片18禁| 一级毛片我不卡| 性色avwww在线观看| 午夜老司机福利剧场| videossex国产| 一本久久精品| 最近2019中文字幕mv第一页| 九色亚洲精品在线播放| 免费看av在线观看网站| 老女人水多毛片| 国产又色又爽无遮挡免| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲丝袜综合中文字幕| 欧美老熟妇乱子伦牲交| av视频免费观看在线观看| 成人综合一区亚洲| 欧美97在线视频| 久久久久精品人妻al黑| 99视频精品全部免费 在线| 国产男女超爽视频在线观看| 最近中文字幕2019免费版| 久久久亚洲精品成人影院| av播播在线观看一区| 99热网站在线观看| 亚洲av.av天堂| 久久久精品94久久精品| 日本av手机在线免费观看| 黄色毛片三级朝国网站| 午夜91福利影院| 一本久久精品| 99热6这里只有精品| 蜜桃国产av成人99| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 精品亚洲成a人片在线观看| 亚洲第一av免费看| 午夜视频国产福利| 国产伦理片在线播放av一区| 国产一区二区三区综合在线观看 | 久久久久久久精品精品| 成年人午夜在线观看视频| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 飞空精品影院首页| 精品一区二区三卡| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 成人亚洲欧美一区二区av| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲av欧美aⅴ国产| 免费在线观看黄色视频的| 成人国语在线视频| 国产亚洲欧美精品永久| 久久影院123| 最后的刺客免费高清国语| 五月天丁香电影| 一二三四在线观看免费中文在 | 乱码一卡2卡4卡精品| 精品国产一区二区三区四区第35| 伦精品一区二区三区| 久久久a久久爽久久v久久| 久久av网站| 高清黄色对白视频在线免费看| 精品国产乱码久久久久久小说| 一级毛片 在线播放| 久久影院123| 曰老女人黄片| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 免费黄频网站在线观看国产| 欧美人与善性xxx| 亚洲av欧美aⅴ国产| 欧美日韩视频精品一区| 午夜激情久久久久久久| av在线播放精品| 大香蕉97超碰在线| 婷婷色av中文字幕| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 一级,二级,三级黄色视频| 最黄视频免费看| 一级毛片电影观看| 丝袜美足系列| 下体分泌物呈黄色| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 日本欧美视频一区| 岛国毛片在线播放| 母亲3免费完整高清在线观看 | 十八禁网站网址无遮挡| 国产男女超爽视频在线观看| 欧美日韩视频精品一区| 五月玫瑰六月丁香| √禁漫天堂资源中文www| 欧美国产精品va在线观看不卡| 亚洲图色成人| 日韩在线高清观看一区二区三区| www.av在线官网国产| 美女主播在线视频| 在线观看三级黄色| 国精品久久久久久国模美| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产日韩欧美亚洲二区| 日本欧美视频一区| 午夜福利,免费看| 国产免费福利视频在线观看| 一区二区av电影网| 欧美少妇被猛烈插入视频| 亚洲综合精品二区| 丝袜在线中文字幕| 成人午夜精彩视频在线观看| 亚洲经典国产精华液单| 一级片免费观看大全| 免费人妻精品一区二区三区视频| 日韩中文字幕视频在线看片| 最近手机中文字幕大全| 久久精品国产亚洲av天美| 国产又色又爽无遮挡免| 久久99一区二区三区| 日韩大片免费观看网站| 丝袜美足系列| 黄色 视频免费看| 午夜免费观看性视频| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 波多野结衣一区麻豆| 青春草亚洲视频在线观看| 好男人视频免费观看在线| 一边摸一边做爽爽视频免费| 在线观看一区二区三区激情| 精品人妻熟女毛片av久久网站| av播播在线观看一区| 欧美精品国产亚洲| av国产久精品久网站免费入址| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 91精品三级在线观看| 高清黄色对白视频在线免费看| 日本av免费视频播放| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 又黄又爽又刺激的免费视频.| 亚洲在久久综合| 亚洲第一区二区三区不卡| 超色免费av| 美女主播在线视频| 国产亚洲最大av| av女优亚洲男人天堂| 免费黄频网站在线观看国产| 插逼视频在线观看| 婷婷色综合大香蕉| 男女国产视频网站| 在线 av 中文字幕| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲成人av在线免费| 日本wwww免费看| 日本爱情动作片www.在线观看| 亚洲人与动物交配视频| 午夜精品国产一区二区电影| 在线精品无人区一区二区三| 亚洲av国产av综合av卡| 久久久精品94久久精品| 精品一区二区三区视频在线| 久久精品国产亚洲av天美| 免费看光身美女| 男女下面插进去视频免费观看 | 国产爽快片一区二区三区| 两个人免费观看高清视频| 久久久久久久久久人人人人人人| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 激情五月婷婷亚洲| 欧美成人午夜精品| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲经典国产精华液单| 国产一区二区三区av在线| 免费在线观看黄色视频的| 午夜福利视频精品| 精品酒店卫生间| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 欧美日韩av久久| 久久久久人妻精品一区果冻| 水蜜桃什么品种好| 欧美97在线视频| av播播在线观看一区| 99九九在线精品视频| 青春草视频在线免费观看| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| av又黄又爽大尺度在线免费看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| www.av在线官网国产| 亚洲综合色惰| 五月天丁香电影| 人妻一区二区av| 香蕉国产在线看| 国产成人a∨麻豆精品| av线在线观看网站| av.在线天堂| 亚洲,一卡二卡三卡| 欧美97在线视频| 男女啪啪激烈高潮av片| 亚洲精品国产色婷婷电影| 妹子高潮喷水视频| 日本免费在线观看一区| 日韩成人av中文字幕在线观看| 青春草视频在线免费观看| 免费观看a级毛片全部| 欧美精品亚洲一区二区| 久久久久久久久久久免费av| 欧美另类一区| 97在线人人人人妻| 午夜av观看不卡| 国产片特级美女逼逼视频| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 高清欧美精品videossex| 国产精品不卡视频一区二区| 在线观看三级黄色| 丝袜在线中文字幕| 日韩av不卡免费在线播放| 丝袜美足系列| 色5月婷婷丁香| 亚洲av男天堂| 欧美xxxx性猛交bbbb| 免费大片黄手机在线观看| 草草在线视频免费看| 日韩欧美精品免费久久| 一级爰片在线观看| 日韩人妻精品一区2区三区| 欧美性感艳星| 九九爱精品视频在线观看| 国产免费福利视频在线观看| 观看美女的网站| 赤兔流量卡办理| 美女主播在线视频| 美女内射精品一级片tv| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 男女免费视频国产| 欧美精品av麻豆av| 自线自在国产av| 在线天堂最新版资源| 2018国产大陆天天弄谢| 国产乱来视频区| 亚洲精品美女久久av网站| 亚洲欧洲国产日韩| 亚洲欧美清纯卡通| 精品视频人人做人人爽| 日本午夜av视频| 午夜老司机福利剧场| 久热这里只有精品99| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 看免费成人av毛片| 亚洲精品色激情综合| 三级国产精品片| 国产成人精品在线电影| 日本wwww免费看| 久久国内精品自在自线图片| 亚洲精品自拍成人| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲精品国产av蜜桃| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 国产男人的电影天堂91| 韩国高清视频一区二区三区| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 大片免费播放器 马上看| 亚洲av在线观看美女高潮| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 免费av中文字幕在线| 如何舔出高潮| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 丰满乱子伦码专区| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 黄色视频在线播放观看不卡| 国产一区有黄有色的免费视频| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 美女主播在线视频| a级毛片黄视频| 日韩电影二区| 欧美精品一区二区大全| 国产精品欧美亚洲77777| 9热在线视频观看99| 99国产精品免费福利视频| 欧美日韩成人在线一区二区| 精品久久久精品久久久| 十八禁高潮呻吟视频| 插逼视频在线观看| 五月玫瑰六月丁香| 老司机影院成人| 亚洲成人av在线免费| 亚洲综合色惰| 一本大道久久a久久精品| 国产日韩欧美在线精品| 久久99一区二区三区| 中国国产av一级| 国产精品一二三区在线看| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 黑人高潮一二区| 亚洲伊人色综图| av播播在线观看一区| 一本大道久久a久久精品| 午夜福利视频在线观看免费| 18在线观看网站| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲av在线观看美女高潮| 99精国产麻豆久久婷婷| 亚洲av福利一区| 亚洲国产精品成人久久小说| 日韩伦理黄色片| 久久综合国产亚洲精品| 欧美日韩亚洲高清精品| 亚洲成色77777| 一级毛片 在线播放| 午夜福利影视在线免费观看| kizo精华| 日本色播在线视频| 国产1区2区3区精品| 国产一区有黄有色的免费视频| 亚洲av日韩在线播放| 高清不卡的av网站| 97在线人人人人妻| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 欧美另类一区| 国产一级毛片在线| 免费观看av网站的网址| 国产激情久久老熟女| 国产成人欧美| 欧美日韩综合久久久久久| 成人国语在线视频| 一边摸一边做爽爽视频免费| 日本黄色日本黄色录像| www.熟女人妻精品国产 | 免费观看在线日韩| 国产精品一区二区在线不卡| 飞空精品影院首页| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 天美传媒精品一区二区| 高清在线视频一区二区三区| 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产片内射在线| 丝袜喷水一区| 精品人妻偷拍中文字幕| xxxhd国产人妻xxx| 国产色爽女视频免费观看| 1024视频免费在线观看| 一本大道久久a久久精品| 欧美变态另类bdsm刘玥| 日本av免费视频播放| 美女内射精品一级片tv| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 九色成人免费人妻av| 乱人伦中国视频| 亚洲av欧美aⅴ国产| 日本爱情动作片www.在线观看| 亚洲国产精品国产精品| 日韩人妻精品一区2区三区| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 成年女人在线观看亚洲视频| 两性夫妻黄色片 | a级毛色黄片| 色网站视频免费| 丰满乱子伦码专区| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 日韩av在线免费看完整版不卡| 久久精品久久精品一区二区三区| 天天影视国产精品| 欧美日韩视频精品一区| 亚洲精品成人av观看孕妇| 久久久国产精品麻豆| 多毛熟女@视频| 九九爱精品视频在线观看| 中文天堂在线官网| 国产精品久久久久久av不卡| 国产淫语在线视频| 亚洲天堂av无毛| a级毛片黄视频| 免费大片黄手机在线观看| 夫妻午夜视频| 亚洲精品一区蜜桃| 免费高清在线观看视频在线观看| 水蜜桃什么品种好| 久久女婷五月综合色啪小说| 伦理电影免费视频| 天天影视国产精品| 美女主播在线视频| 日韩 亚洲 欧美在线| 精品国产露脸久久av麻豆| 欧美性感艳星| 久热这里只有精品99| 日韩伦理黄色片| 99久久精品国产国产毛片| 岛国毛片在线播放| 伦理电影免费视频| 国产高清三级在线| 亚洲熟女精品中文字幕| a级毛片黄视频| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 免费大片18禁| 在线观看免费视频网站a站| 桃花免费在线播放| 丝袜在线中文字幕| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 高清欧美精品videossex| 不卡视频在线观看欧美| 激情五月婷婷亚洲| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 国产极品粉嫩免费观看在线| 美女视频免费永久观看网站| 美女大奶头黄色视频| 最后的刺客免费高清国语| 久久久久久久久久久免费av| 在线观看国产h片| 成人综合一区亚洲| 一级毛片 在线播放| 国产精品蜜桃在线观看| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产在视频线精品| 亚洲中文av在线| 青青草视频在线视频观看| 精品一区二区三卡| 国产成人免费观看mmmm| av黄色大香蕉| 欧美bdsm另类| 欧美3d第一页| 一区在线观看完整版| 97人妻天天添夜夜摸| 日本免费在线观看一区| 国产在视频线精品| 90打野战视频偷拍视频| 精品久久久精品久久久| 熟女电影av网| 久久韩国三级中文字幕| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 少妇人妻久久综合中文| 久久久久久人妻| 国产精品国产三级专区第一集| 国产 精品1| a级毛片在线看网站| 在线 av 中文字幕| 亚洲第一区二区三区不卡| 一本久久精品| 99精国产麻豆久久婷婷| av卡一久久| 成人免费观看视频高清| 日本爱情动作片www.在线观看| 久久av网站| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产亚洲欧美精品永久| 精品视频人人做人人爽| 亚洲国产欧美在线一区| 极品少妇高潮喷水抽搐| 亚洲av男天堂| 高清在线视频一区二区三区| 草草在线视频免费看| 高清毛片免费看| 亚洲av成人精品一二三区| 久久久久久人人人人人| 日本av免费视频播放| 另类精品久久| 国产精品一国产av| 亚洲精品456在线播放app| 国产精品一国产av| 欧美3d第一页| 国产精品一国产av| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 欧美精品一区二区免费开放| 人妻系列 视频| av免费观看日本|