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    木質(zhì)纖維素分解復(fù)合菌系的分解特性與細(xì)菌組成多樣性分析

    2017-10-27 14:31何水清艾士奇王建豪
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2017年16期
    關(guān)鍵詞:分解高通量測序

    何水清 艾士奇 王建豪

    摘要:利用木質(zhì)纖維素分解復(fù)合菌系BYND-8對稻稈進(jìn)行生物處理,研究其分解特性及其細(xì)菌組成多樣性,為應(yīng)用微生物方法處理木質(zhì)纖維素類資源提供理論依據(jù)。通過測定復(fù)合菌系在分解稻稈的過程中木質(zhì)纖維素各成分含量的變化,同時測定分解過程中培養(yǎng)基pH值的變化趨勢,研究其分解特性。運(yùn)用高通量測序技術(shù)對復(fù)合菌系rRNA基因的V3-V4區(qū)進(jìn)行測序,分析其細(xì)菌組成多樣性。結(jié)果表明,復(fù)合菌系BYND-8具有較高的木質(zhì)纖維素分解能力,對培養(yǎng)基的pH值具有自我調(diào)節(jié)能力;在綱、目、科3個分類水平上,分別將復(fù)合菌系中的細(xì)菌分成了73個綱、132個目和226個科,復(fù)合菌系中細(xì)菌在科的分類水平上比較豐富,其中相對量較高、占優(yōu)勢的細(xì)菌為紫單胞菌科(Porphyromonadaceae,1873%)、柄桿菌科(Caulobacteraceae,1203%)和理研菌科(Rikenellaceae,1196%)。木質(zhì)纖維素分解復(fù)合菌系BYND-8具有較高的細(xì)菌組成多樣性。

    關(guān)鍵詞:木質(zhì)纖維素;分解;復(fù)合菌系;高通量測序;多樣性分析;木質(zhì)纖維素分解機(jī)理

    中圖分類號: Q9399;S182文獻(xiàn)標(biāo)志碼:

    文章編號:1002-1302(2017)16-0241-06

    收稿日期:2016-09-20

    基金項目:黑龍江省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃(編號:20141022311);國家科技支撐計劃(編號:2015BAD21B04、2016YFD0800602);黑龍江農(nóng)墾總局科技攻關(guān)項目(編號:HNK125B-11-06A、HNK125B-11-11A、JCTG17-04)。

    作者簡介:何水清(1994—),男,江西寧都人,主要從事農(nóng)業(yè)廢棄物資源化利用與環(huán)境微生物分子生態(tài)學(xué)的研究。E-mail:616022790@qqcom。

    通信作者:王偉東,博士,教授,主要從事農(nóng)業(yè)廢棄物資源化利用與環(huán)境微生物分子生態(tài)學(xué)的研究。E-mail:wwdcyy@126com。

    為了減少化石燃料的過度開采而帶來的環(huán)境污染,木質(zhì)纖維素這一重要的生物質(zhì)資源越來越受到重視。中國是一個農(nóng)業(yè)大國,每年作物秸稈產(chǎn)量約8億t,其中含有大量的木質(zhì)纖維素資源。這些秸稈中約有30%沒有得到資源化利用,大部分被就地焚燒,不僅造成了資源的浪費(fèi),而且引起了嚴(yán)重的環(huán)境污染。近年來,秸稈等木質(zhì)纖維素類廢棄物資源化利用越來越受到政府和科研工作者的重視,其中高效、環(huán)保、廉價的生物處理法被日益采用[3]。崔宗均等從堆肥樣品中富集篩選、馴化得到1組可高效穩(wěn)定分解木質(zhì)纖維素的復(fù)合菌系MC1[4-5];趙聽等得到了能分解小麥秸稈的復(fù)合菌群FWD1,小麥秸稈的分解率達(dá)到7692%;劉長莉篩選馴化出復(fù)合菌系NSC-7,稻稈的分解率達(dá)447%。同樣也有分解木質(zhì)纖維素的單菌與復(fù)合菌系分解能力比較的研究報道,張曉倫等從垃圾堆腐物中分離得到了3株具有較強(qiáng)纖維素分解能力的真菌,發(fā)現(xiàn)由2種不同菌株組成的混合菌系比任何單一菌株的纖維素分解能力強(qiáng),CMC酶活性是單一菌株的15倍[8];陳耀寧等將1株黃孢原毛平革菌和1株歧皺青霉混合培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)木質(zhì)纖維素的分解率較單一菌株大大提高[9];溫雪等將2株具有較強(qiáng)木質(zhì)纖維素分解能力的菌株與2株無分解能力的菌株進(jìn)行組合,發(fā)現(xiàn)組合菌群的纖維素分解能力較單獨的菌株分解能力穩(wěn)定而高效[10]。Kato 等通過對復(fù)合系MC1中關(guān)鍵菌株的重新組合發(fā)現(xiàn)其纖維素的分解能力高于單一菌株[11]。單一菌株對木質(zhì)纖維素的分解能力遠(yuǎn)不及多種菌株協(xié)同作用[12-13]。因此,利用微生物復(fù)合菌系各菌株之間的協(xié)同作用來高效穩(wěn)定地分解木質(zhì)纖維素并分析其分解機(jī)理具有重要意義。

    本研究以實驗室構(gòu)建的中溫木質(zhì)纖維素分解復(fù)合菌系BYND-8為研究對象,運(yùn)用高通量測序技術(shù)分析其細(xì)菌組成多樣性,為復(fù)合菌系分解木質(zhì)纖維素的機(jī)理奠定基礎(chǔ)。

    1材料與方法

    11培養(yǎng)條件

    纖維素蛋白胨培養(yǎng)基(PCS):蛋白胨50 g,NaCl 50 g,CaCO3 20 g,酵母粉10 g,木質(zhì)纖維素(稻稈)50 g,蒸餾水1 L,pH自然,1×105 Pa滅菌15 min,按培養(yǎng)基體積的10%接種,30 ℃靜止培養(yǎng)。

    稻稈預(yù)處理方法:將稻稈剪切成5 cm的小段,用1%的NaOH溶液浸泡24 h,然后用自來水沖洗稻稈,再用鹽酸(1 mol/L)浸泡,之后用自來水沖洗并浸泡12 h,至pH值為70左右,105 ℃烘干至恒重備用。

    12復(fù)合菌系的篩選

    把旺盛產(chǎn)沼氣的培養(yǎng)液10 mL接種到裝有90 mL PCS培養(yǎng)基的三角瓶內(nèi),提前放入濾紙條作為分解的外觀指標(biāo),將05 g經(jīng)預(yù)處理的稻稈作為碳源,30 ℃靜止培養(yǎng)。當(dāng)濾紙條完全分解、稻稈軟化時,按體積10%的接種量接種到同樣的培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)。在繼代培養(yǎng)過程中,留下分解能力強(qiáng)的培養(yǎng)物,淘汰失去分解能力的培養(yǎng)物。如果培養(yǎng)物分解能力下降,則把不同的培養(yǎng)物相互組配,繼續(xù)傳代培養(yǎng)。保留分解能力高效且穩(wěn)定的培養(yǎng)物,用作后續(xù)研究。

    13復(fù)合菌系中稻稈及其木質(zhì)素、纖維素、半纖維素分解率的變化

    取三角瓶,將10 g稻稈加入90 mL PCS培養(yǎng)基中,按體積比接種10%的復(fù)合菌系,30 ℃靜止培養(yǎng)。將培養(yǎng)0、1、2、3、4、5、6、7 d的稻稈分別取出,每天取3瓶,5 000 r/min離心,棄上清,為消除菌體用硝酸和鹽酸的混合溶液沖洗稻稈,離心,用清水沖洗,離心,105 ℃烘干至恒重后稱質(zhì)量,計算每瓶稻稈的失重量和分解率[14],最后計算平均值。烘干后的稻稈經(jīng)粉碎過篩后用于測定木質(zhì)素、纖維素和半纖維素的含量。在纖維素分析儀(美國ANKOM220)上,用改良的范式洗滌法測定木質(zhì)素、纖維素和半纖維素的含量[15],計算分解率。

    14復(fù)合菌系pH值的動態(tài)變化

    141復(fù)合菌系pH值的變化

    100 mL三角瓶內(nèi)分裝 90 mL PCS培養(yǎng)基,按體積比接種10%的復(fù)合菌系,30 ℃靜止培養(yǎng)。每天按時取3瓶復(fù)合菌系,用pH計(日本HORIBA)測定其pH值,連續(xù)測定10 d。

    142不同的起始pH值對復(fù)合菌系培養(yǎng)基pH值的影響

    將PCS培養(yǎng)液的初始pH值分別調(diào)至4、5、6、7、8、9、10,按體積比接種10%的復(fù)合菌系,30 ℃靜止培養(yǎng)。每天按時取3瓶復(fù)合菌系,用pH計(日本HORIBA)測定其pH值,連續(xù)測定 7 d。

    15復(fù)合菌系的高通量測序

    151獲取測序樣品

    取稻稈分解能力旺盛階段(接種培養(yǎng)5 d)的液態(tài)培養(yǎng)物和稻稈表面的微生物。

    培養(yǎng)基中微生物的獲取方法:取適量培養(yǎng)基 12 000 r/min 離心10 min可得到菌體。

    稻稈表面微生物的獲取方法:取適量復(fù)合菌系處理5 d的稻稈,加入適量PBS緩沖液,150~200 r/min振蕩30~60 min,超聲5 min,再150~200 r/min振蕩30~60 min。取上清液加入到50 mL離心管中,120 00 r/min離心10 min得菌體。

    將所得培養(yǎng)基中的微生物和稻稈表面的微生物混合備用。

    152提取總DNA

    取適量所得的菌體,用氯化芐法提取其總DNA[16]。所提取的總DNA要保證濃度大于10 ng/μL,總量超過500 ng,D260 nm/280 nm在18~22之間。瓊脂糖凝膠電泳主帶清晰。

    15316s rDNA基因V3-V4區(qū)PCR擴(kuò)增及測序

    提取樣品總DNA后,根據(jù)細(xì)菌V3-V4區(qū)設(shè)計得到引物,合并引物接頭,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,對其產(chǎn)物進(jìn)行純化、定量及均一化,最后形成測序文庫。對構(gòu)建好的文庫進(jìn)行質(zhì)檢,質(zhì)檢合格的文庫用Illumina MiSeq PE300進(jìn)行測序。

    154細(xì)菌多樣性數(shù)據(jù)分析

    對序列進(jìn)行聚類,將相似性超過97%的序列劃分到同一個OTU(operational taxonomic units)。按眾數(shù)原則對序列進(jìn)行物種注釋。統(tǒng)計樣品在各個分類水平上的構(gòu)成,用餅圖進(jìn)行可視化。對統(tǒng)計樣品中在綱、目、科分類水平上的菌群作聚類,用相同顏色表示該分類水平所含的OTU序列豐度的相對高低。

    2結(jié)果與分析

    21復(fù)合菌系中稻稈及其木質(zhì)素、纖維素、半纖維素分解率的變化

    經(jīng)過連續(xù)的傳代培養(yǎng),已構(gòu)建出具有高效穩(wěn)定分解木質(zhì)纖維素能力的復(fù)合菌系BYND-8。經(jīng)前期的試驗驗證,復(fù)合菌系經(jīng)傳代培養(yǎng)和保存后,菌種組成和功能都已達(dá)到穩(wěn)定。在復(fù)合菌系培養(yǎng)過程中,可明顯觀察到濾紙分解,稻稈軟化成細(xì)絲狀。

    稻稈和稻稈中木質(zhì)素、纖維素、半纖維素的分解率的變化結(jié)果如圖1所示。在培養(yǎng)的前4 d秸稈被旺盛分解,4 d后分解能力減弱基本不再分解。在培養(yǎng)4 d時分解率達(dá)到最高值,稻稈和稻稈中木質(zhì)素、纖維素、半纖維素的分解率分別為392%、540%、317%、480%。稻稈經(jīng)過復(fù)合菌系處理7 d后,稻稈和稻稈中木質(zhì)素、纖維素、半纖維素的分解率分別為490%、555%、407%、536%。

    22復(fù)合菌系培養(yǎng)體系pH值的動態(tài)變化

    221復(fù)合菌系分解稻稈過程中培養(yǎng)體系pH值的變化

    由圖2可知,在培養(yǎng)的前4 d,培養(yǎng)基的pH值呈下降趨勢,到培養(yǎng)4 d時,pH值降到最低,從起始的74降到63。從培養(yǎng)5 d開始,培養(yǎng)基的pH值開始回升,到培養(yǎng)7 d時,培養(yǎng)基的pH值回升到70左右,并保持相對穩(wěn)定狀態(tài),一直到培養(yǎng) 10 d,培養(yǎng)基的pH值保持在72左右,與培養(yǎng)基的起始pH值相差不大。

    222不同的起始pH值條件下復(fù)合菌系培養(yǎng)基pH值的變化

    由表1可知,當(dāng)培養(yǎng)基的初始pH值為4時,接種復(fù)合菌系1 d后培養(yǎng)基的pH值上升至61,直至接種7 d時,培養(yǎng)基的pH值一直保持在61左右。當(dāng)培養(yǎng)基的初始pH值為5和6時,接種復(fù)合菌系1 d后培養(yǎng)基的pH值分別上升至62和65,分別在培養(yǎng)5、4 d時pH值達(dá)到最低值,但是到培養(yǎng) 6 d 時培養(yǎng)基的pH值回升到61并保持相對穩(wěn)定。當(dāng)培養(yǎng)基的初始pH值為7和8時,接種復(fù)合菌系1 d后培養(yǎng)基的pH值明顯下降,到培養(yǎng)4 d時培養(yǎng)基的pH值達(dá)到最低值,分別為62、63,到接種后6 d,培養(yǎng)基的pH值回升到70左右并保持相對穩(wěn)定狀態(tài)。當(dāng)培養(yǎng)基的初始pH值為9和10時,接種復(fù)合菌系1 d后培養(yǎng)基的pH值呈現(xiàn)明顯下降,且一直維持這一下降趨勢,到接種后7 d時,培養(yǎng)基的pH值分別達(dá)到63、60左右。

    在研究不同的起始pH值條件下復(fù)合菌系培養(yǎng)基pH值變化的同時,對不同的起始pH值條件下稻稈的分解率進(jìn)行了試驗。由圖3可知,當(dāng)pH值在40~100范圍內(nèi)時,稻稈都會發(fā)生分解,但是復(fù)合菌系對稻稈的分解程度各不相同。當(dāng)pH值為80時,稻稈的分解率最高,可達(dá)到535%;其次是[CM(25]當(dāng)pH值為70時,稻稈的分解率為518%;當(dāng)pH值為4和100時,稻稈的分解率則明顯下降。

    綜合以上結(jié)果可知,在培養(yǎng)基的起始pH值為4~10時,復(fù)合菌系的pH值隨著稻稈的分解而自動調(diào)節(jié),最終的pH值都保持在6~7之間,接近中性。在木質(zhì)纖維素分解的旺盛時期,培養(yǎng)基的pH值均可降到最低值。當(dāng)木質(zhì)纖維素分解完成后,培養(yǎng)基的pH值均可自動回升。當(dāng)培養(yǎng)基的初始pH值為4~10時,稻稈呈現(xiàn)不同的分解狀態(tài),分解率各不相同,而適宜復(fù)合菌系分解稻稈的初始pH值接近中性,培養(yǎng)基過酸過堿都不適宜復(fù)合菌系分解稻稈。

    23復(fù)合菌系的細(xì)菌組成多樣性

    對復(fù)合菌系進(jìn)行16s rDNA擴(kuò)增子高通量測序,將復(fù)合菌系在微生物的綱、目、科3個分類水平給出分類。復(fù)合菌系在微生物分類單元綱的水平上的物種相對豐度統(tǒng)計結(jié)果如圖4所示。

    復(fù)合菌系的細(xì)菌組成在綱的水平上包含73個綱的細(xì)菌,其物種相對豐度高于100%的可分類菌綱共有13個,包括擬桿菌綱(Bacteroidia)、鞘脂桿菌綱(Sphingobacteriia)、α-變形菌綱(Alphaproteobacteria)、梭菌綱(Clostridia)、纖維黏網(wǎng)菌綱(Cytophagia)、螺旋體綱(Spirochaetes)、互養(yǎng)菌綱(Synergistia)、黃桿菌綱(Flavobacteria)、ε-變形菌綱(Epsilonproteobacteria)、黏膠球形菌綱(Lentisphaeria)、γ-變形菌綱(Gammaproteobacteria)、β-變形菌綱(Betaproteobacteria)和未培養(yǎng)細(xì)菌,其物種相對豐度分別為3675%、1600%、1284%、789%、581%、344%、307%、277%、253%、195%、148%、141%、107%。

    復(fù)合菌系在微生物分類單元目的水平上的物種相對豐度統(tǒng)計結(jié)果如圖5所示。

    復(fù)合菌系的細(xì)菌組成在目的水平上包含132個目的細(xì)菌,其物種相對豐度高于100%的可分類菌目共有9個,包括擬桿菌目(Bacteroidales)、鞘脂桿菌目(Sphingobacteriales)、柄桿菌目(Caulobacterales)、梭菌目(Clostridiales)、嗜纖維菌目(Cytophagales)、螺旋體目(Spirochaetales)、Synergistales、黃桿菌目(Flavobacteriales)、彎曲菌目(Campylobacterales),其物種相對豐度分別為3816%、1661%、1197%、818%、602%、357%、319%、287%、263%。

    復(fù)合菌系在微生物分類單元科的水平上的物種相對豐度統(tǒng)計結(jié)果如圖6所示。

    對復(fù)合菌系進(jìn)行高通量測序后發(fā)現(xiàn)細(xì)菌的組成在科的水平上比較豐富。復(fù)合菌系的細(xì)菌組成在科的水平上包含226個科的細(xì)菌,其物種相對豐度高于100%的可分類菌科共有14個,包括紫單胞菌科(Porphyromonadaceae)、柄桿菌科(Caulobacteraceae)、理研菌科(Rikenellaceae)、?;疲∕arinilabiaceae)、嗜纖維菌科(Cytophagaceae)、瘤胃菌科(Ruminococcaceae)、互養(yǎng)菌科(Synergistaceae)、彎曲菌科(Campylobacteraceae)、螺旋體科(Spirochaetaceae)、黃桿菌科(Flavobacteriaceae)、Christensenellaceae和3個未培養(yǎng)的細(xì)菌,其物種相對豐度分別為1873%、1203%、1196%、733%、603%、371%、323%、266%、258%、219%、123%,3個未培養(yǎng)的細(xì)菌相對豐度共占了1628%。復(fù)合菌系中相對豐度低于1%的可分類菌科共有212個,由于這些細(xì)菌在復(fù)合菌系中的相對豐度極小,共占復(fù)合菌系的1205%。

    3討論

    利用限制性培養(yǎng)技術(shù)從產(chǎn)沼氣旺盛的沼液中篩選具有分解木質(zhì)纖維素分解能力的復(fù)合菌系BYND-8,用稻稈的分解率作為指標(biāo),培養(yǎng)7 d后,稻稈及稻稈中木質(zhì)素、纖維素和半纖[CM(25]維素的分解率分別為490%、555%、407%、536%。雖[CM)]

    然與已報道的復(fù)合菌系相比其木質(zhì)纖維素能力相對較低[2,4,7,11,14],但BYND-8與它們的篩選樣品來源不同,是從沼氣發(fā)酵體系中篩選得到,沼氣發(fā)酵體系是厭氧環(huán)境,在此也證明不同的培養(yǎng)條件對于纖維素分解能力影響較大。該復(fù)合菌系可能應(yīng)用于將來的以稻稈為原料的沼氣發(fā)酵的預(yù)處理。

    通過復(fù)合菌系在分解稻稈過程中pH值變化趨勢、調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的不同起始pH值復(fù)合菌系對稻稈的分解率來看,復(fù)合菌系可以自我調(diào)節(jié)培養(yǎng)環(huán)境的pH值,這充分體現(xiàn)了該復(fù)合菌系較純培養(yǎng)菌株分解木質(zhì)纖維素的優(yōu)勢所在。崔宗均等構(gòu)建的木質(zhì)纖維素分解復(fù)合菌系的pH值隨著培養(yǎng)時間先下降后升高最后趨于穩(wěn)定并與初始pH值較一致[4,17],這與本研究的結(jié)果相吻合。復(fù)合菌系培養(yǎng)體系的pH值對于木質(zhì)纖維素的分解具有明顯的影響。

    不同菌株協(xié)同作用可高效穩(wěn)定地分解木質(zhì)纖維素,宋亞彬曾通過傳統(tǒng)的平板分離法和變性梯度凝膠電泳法分析了復(fù)合菌系的菌種組成多樣性,她發(fā)現(xiàn)復(fù)合菌系的微生物組成主要分為腸桿菌科(Enterobacteriaceae)、產(chǎn)堿桿菌科(Alcaligenaceae)、黃單胞菌科(Xanthomonadaceae)、芽孢桿菌科(Bacillaceae)和一個未知的菌科[18]。但是通過對復(fù)合菌系進(jìn)行16S rDNA擴(kuò)增子高通量測序,分析復(fù)合菌系的細(xì)菌組成及多樣性,發(fā)現(xiàn)高通量測序技術(shù)與傳統(tǒng)的分子生物學(xué)手段相比,更加全面、準(zhǔn)確,它將復(fù)合菌系在科的分類水平上分成226個科的細(xì)菌,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)的多樣性分析方法。而且通過高通量測序分析可知,腸桿菌科、產(chǎn)堿桿菌科、黃單胞菌科、芽孢桿菌科的相對豐度分別為011%、086%、006%、0008%,遠(yuǎn)低于高通量測序得到的優(yōu)勢菌株。說明傳統(tǒng)的分析方法存在一定的局限性,不能表征復(fù)合菌系涵蓋的全部微生物。而高通量測序可以揭示不同種類的細(xì)菌在木質(zhì)纖維素分解過程中的功能,分析不同菌種之間存在的協(xié)同關(guān)系。通過對復(fù)合菌系進(jìn)行高通量測序,可以得到復(fù)合菌系中相對量較高的占優(yōu)勢的菌株,進(jìn)而可以揭示分解木質(zhì)纖維素的功能菌。紫單胞菌科屬于擬桿菌門,適宜在中溫厭氧條件下生長,能發(fā)酵多種單糖和二糖,產(chǎn)生有機(jī)酸,如丙酸、乙酸和少量丁酸等[19],曾在石油烴污染土壤及肥育豬后腸分離得到,參與了烴類的厭氧降解及纖維降解[20-21]。蘇增建等從石油污染土壤樣品中得到以石油烴為唯一生長碳源的細(xì)菌菌株,研究了其石油降解能力,結(jié)果表明柄桿菌具有一定的石油降解能力[22],推測柄桿菌在復(fù)合菌系中起到分解木質(zhì)纖維素中長鏈烷烴的作用。高鳳芹對馴化后的瘤胃液和傳統(tǒng)的沼液進(jìn)行高通量測序分析,結(jié)果表明瘤胃液的細(xì)菌主要分布在瘤胃球菌科、理研菌科等,而沼液中含量大于8%的細(xì)菌群落只有理研菌科和瘤胃球菌科,發(fā)揮了高效降解纖維素和甲烷生成的功能[23]。而本研究復(fù)合菌系正是從產(chǎn)沼氣旺盛的沼液中富集篩選得到,理研菌科與瘤胃菌科同樣起到分解木質(zhì)纖維素的作用。瘤胃菌科適合厭氧生長,部分細(xì)菌可氫化不飽和脂肪酸,有的能分解芳香族化合物、肉桂酸和巴豆酸酯[24]。嗜纖維菌科能溶解植物纖維及水解纖維素[25]。黃桿菌科專性需氧。螺旋體科也具有專一性降解半纖維素的作用[26]。互養(yǎng)菌科的細(xì)菌屬于厭氧發(fā)酵菌,可以利用有機(jī)酸發(fā)酵產(chǎn)生乙酸,利于菌系的對烴的降解[27]。在對復(fù)合菌系中優(yōu)勢菌株的分析后發(fā)現(xiàn),分解木質(zhì)纖維素的細(xì)菌在分解木質(zhì)纖維素時,產(chǎn)生了大量的有機(jī)酸,由于有機(jī)酸的積累導(dǎo)致復(fù)合菌系在分解木質(zhì)纖維素旺盛時期pH值降到最低。在這些優(yōu)勢菌中既有好氧細(xì)菌又有厭氧細(xì)菌,而起木質(zhì)纖維素分解作用的主要都是厭氧細(xì)菌,好氧細(xì)菌的存在是將整個體系創(chuàng)造成無氧環(huán)境,進(jìn)而厭氧纖維素分解細(xì)菌發(fā)揮作用。正是由于復(fù)合菌系具有較高的微生物組成多樣性,才使得復(fù)合菌系具有較高的分解木質(zhì)纖維素的能力。

    4結(jié)論

    木質(zhì)纖維素分解復(fù)合菌系BYND-8具有高效穩(wěn)定的分解能力,初始培養(yǎng)基接近中性時其分解效果最好。復(fù)合菌系BYND-8中細(xì)菌在科的分類水平上相對量較高,占優(yōu)勢的細(xì)菌為紫單胞菌科(Porphyromonadaceae)、柄桿菌科(Caulobacteraceae)和理研菌科(Rikenellaceae),主要參與木質(zhì)纖維素的分解。本研究為進(jìn)一步研究復(fù)合菌系協(xié)同分解木質(zhì)纖維素的機(jī)理奠定理論基礎(chǔ)。

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