分子印跡固相萃取-高效液相色譜法檢測(cè)奶粉中的雙氰胺

劉慧琳，倪天鴻，周凱文，王 靜*

分子印跡固相萃取-高效液相色譜法檢測(cè)奶粉中的雙氰胺

劉慧琳，倪天鴻，周凱文，王 靜*

（北京食品營(yíng)養(yǎng)與人類健康高精尖創(chuàng)新中心，北京市食品添加劑工程技術(shù)研究中心，北京工商大學(xué)，北京 100048）

通過一步聚合法制備以雙氰胺為模板分子，甲基丙烯酸為功能單體，乙二醇二甲基丙烯酸為交聯(lián)劑，偶氮二異丁腈為引發(fā)劑的分子印跡聚合物。通過掃描電子顯微鏡、紅外光譜、紫外光譜等對(duì)材料的物理及化學(xué)性能進(jìn)行表征。采用分子印跡固相萃取結(jié)合高效液相色譜法檢測(cè)實(shí)際奶粉樣品中的雙氰胺殘留。該方法的線性范圍為0.01～2.00 mg/L，線性相關(guān)系數(shù)R2為0.999 4，呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，檢出限（RSN=3）為0.57×10-2mg/L，樣品加標(biāo)回收率為102.5%～104%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.21%～0.86%之間。

雙氰胺；分子印跡聚合物；固相萃??；高效液相色譜

雙氰胺（dicyandiamide，DCD），又稱二氰二胺，是一種溶于水的白色粉末狀物質(zhì)。DCD常作為硝化抑制劑[1]來緩解氮肥的分解和轉(zhuǎn)化[2-3]，以提高對(duì)氮肥的利用率[4-6]。但殘留的DCD會(huì)通過食物鏈會(huì)進(jìn)入奶牛體內(nèi)從而對(duì)奶源造成污染[7]。2014年新西蘭的DCD污染事件引起了國(guó)內(nèi)外的廣泛關(guān)注。DCD的積累會(huì)對(duì)人體尤其是嬰幼兒的健康產(chǎn)生危害[8-9]，因此需要建立一種快速高效的檢測(cè)機(jī)制。

到目前為止，已有多種方法可用于DCD殘留的檢測(cè)，包括高效液相色譜（high performance liquid chromatograph，HPLC）法[10-11]、光譜法[12]、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[13-15]、氣相色譜法、熒光檢測(cè)法[16]、拉曼光譜法[17]等。HPLC法預(yù)處理步驟較多且樣品易受雜質(zhì)干擾；紫外檢測(cè)法前處理簡(jiǎn)單方便，但靈敏度較低；氣相色譜法靈敏度高，但需進(jìn)行衍生化處理，不夠便捷；液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法成本較高且需要復(fù)雜的預(yù)處理過程。

分子印跡技術(shù)作為一項(xiàng)新興技術(shù)，其合成的分子印跡聚合物（molecularly imprinted polymers，MIP）具有高選擇性、高穩(wěn)定性、高適用性等特點(diǎn)[18-21]。固相萃取技術(shù)作為一種吸附萃取技術(shù)，因其能良好地適應(yīng)各種成分復(fù)雜的實(shí)際樣品且試劑用量較少而被廣泛使用[22-23]。將兩者相結(jié)合不僅可以除去實(shí)際樣品中的干擾基質(zhì)，而且能夠有效地解決各種復(fù)雜實(shí)際樣品的內(nèi)源性干擾。樣品經(jīng)過處理后可直接進(jìn)入HPLC等儀器中進(jìn)行檢測(cè)。最近，分子印跡固相萃?。╩olecularly imprinted solid phase extraction，MISPE）由于其簡(jiǎn)單方便、成本低廉、精準(zhǔn)快速[24-26]，已成為一個(gè)新的研究熱點(diǎn)[27-30]。

本實(shí)驗(yàn)采用MISPE的方法，選取DCD為模板分子，甲基丙烯酸（methacrylic acid，MAA）為功能單體，乙二醇二甲基丙烯酸（ethylene glycol dimethacrylate，EGDMA）為交聯(lián)劑，偶氮二異丁腈（azobisisobutyronitrile，AIBN）為引發(fā)劑通過一步聚合法制備得到MIP。通過與固相萃取-HPLC技術(shù)聯(lián)用，高效、靈敏、準(zhǔn)確地分離檢測(cè)奶粉中的DCD殘留。本方法為復(fù)雜基質(zhì)中小分子有機(jī)物的分離富集提供了一種新型、高效的檢測(cè)方法。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

乙腈（分析純） 賽默飛世爾科技有限公司；無水甲醇、二水合磷酸二氫鈉（均為分析純） 西隴化工股份有限公司；乙二醇二甲基丙烯酸酯（純度99%） 北京索萊寶科技有限公司；甲基丙烯酸（純度99%）、氨水（分析純） 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；偶氮二異丁腈（純度99%）、DCD（純度99%）、氰胺（純度99%）、三聚氰胺（純度99%）、三聚氰酸（純度99%）北京百靈威科技有限公司；十二水合的磷酸氫二鈉（分析純） 北京化工廠。

1.2 儀器與設(shè)備

SHZ-82A恒溫振蕩器 常州國(guó)華電器有限公司；WG9220A電熱鼓風(fēng)干燥箱 天津市通利信達(dá)儀器廠；Cary 100 UV-Vis紫外分光光度計(jì) 安捷倫科技有限公司；VELOCITY 18R大容量冷凍離心機(jī) 澳大利亞Dynamica公司；DF-101S集熱式恒溫加熱磁力攪拌器予華儀器有限責(zé)任公司；Vertex 70傅里葉紅外光譜儀德國(guó)Bruker公司；S-4800掃描電子顯微鏡 日立集團(tuán)；MX-F渦旋振蕩器 大龍興創(chuàng)實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；LC-20AT HPLC儀 日本島津公司；UGC-24M氮吹儀北京優(yōu)晟聯(lián)合科技有限公司。

1.3 方法

1.3.1 HPLC條件

色譜柱：Inertsil ODS-SP（4.6 mm×150 mm，5 μm）；柱溫30 ℃；流速0.2 mL/min，流動(dòng)相：B相（乙腈）-A相（水）（3∶7，V/V），進(jìn)樣體積5 μL。

1.3.2 MIP制備

將DCD 84.08 mg與MAA 0.945 mL和EGDMA 0.945 mL按1∶4∶5的比例依次加入25 mL的圓底燒瓶中并加入45 mL的引發(fā)劑AIBN，密封后將其置于60 ℃的恒溫油浴鍋中反應(yīng)24 h。最后得到白色塊狀的固體，充分研磨后過篩，直到所有的MIP均能被篩下。最后用甲醇經(jīng)索氏提取器洗模板分子10～20 h，洗后將聚合物烘干備用。作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，制備了非印跡聚合物（non-imprinted polymer，NIP）其操作過程除不加模板分子DCD之外，一切操作皆和上述步驟相同。

1.3.3 pH7.5緩沖溶液的配制

取二水合磷酸二氫鈉6.2 g溶于蒸餾水中并定容至200 mL，并將其作為A液。再取14.3 g的二水合磷酸氫二鈉溶于蒸餾水中，定容至200 mL作為B液。取A液8 mL和B液42 mL充分?jǐn)嚢?、混勻后再取混合?0 mL并加蒸餾水定容至200 mL制成濃度為0.02 mol/L、pH 7.5的磷酸緩沖溶液。

1.3.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

取200 mg的DCD溶于蒸餾水中，充分混勻，靜置20 min，最后定容至200 mL容量瓶中制成1 g/L的DCD母液。臨用時(shí)通過梯度稀釋配制成質(zhì)量濃度0.01～5 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液。三聚氰胺、三聚氰酸、氰胺的標(biāo)準(zhǔn)溶液配制過程皆同上述操作步驟相同。

1.3.5 MIP吸附性檢測(cè)

1.3.5.1 MIP的靜態(tài)吸附

取20 mg的MIP加入到5 mL的DCD溶液中。該DCD溶液是取不同質(zhì)量DCD溶于pH7.5緩沖溶液之中而制成，質(zhì)量濃度范圍為0.001～1 mg/mL。將其放入恒溫振蕩器中室溫振蕩24 h。再放入大容量離心機(jī)中，在5 000 r/min離心20 min，離心后過濾，取上清溶液，稀釋200 倍，放入紫外分光光度計(jì)中檢測(cè)。測(cè)出的吸光度通過標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線算出DCD所對(duì)應(yīng)的質(zhì)量濃度，根據(jù)下式確定所對(duì)應(yīng)的吸附量（Q）：

式中：C0為該溶液的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量濃度；Cfree為所測(cè)得的吸光度對(duì)應(yīng)質(zhì)量濃度；V為DCD溶液的體積；W為所添加聚合物的質(zhì)量。

1.3.5.2 MIP的動(dòng)態(tài)吸附

取20 mg的MIP加入到1 mg/mL的DCD溶液中。在室溫的條件下經(jīng)過不同的振蕩時(shí)間（5、10、20、30、60、90、120、180、240 min），在5 000 r/min離心20 min，過濾，取上清液并稀釋200 倍。最后加入1 cm石英比色皿，以pH 7.5的緩沖溶液作為空白試劑，放入紫外分光光度計(jì)內(nèi)測(cè)得吸光度。所得的吸光度根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得出相對(duì)應(yīng)的質(zhì)量濃度。

1.3.5.3 MIP的競(jìng)爭(zhēng)性吸附

選取DCD、三聚氰胺、氰胺、三聚氰酸，各配制成0.01、0.001 mg/mL兩種質(zhì)量濃度的溶液，再分別在兩種濃度的溶液中添加20 mg的MIP和NIP，后放入恒溫振蕩器中振蕩24 h。在5 000 r/min離心20 min，過濾，取上層清液，稀釋200 倍。分別加入1 cm比色皿中，以pH 7.5的緩沖溶液作為空白試劑，4 種分析物分別在波長(zhǎng)為219、212、205、194 nm的條件下進(jìn)行吸光度檢測(cè)。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線得出不同的質(zhì)量濃度。

1.3.6 MISPE預(yù)處理

1.3.6.1 MISPE柱的制備

準(zhǔn)確稱取70 mg MIP添加到準(zhǔn)備好的固相萃取空柱之中，使萃取柱內(nèi)的聚合物不泄出。作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，制取非印跡固相萃?。╪on-imprinted polymer solid phase extraction，NISPE）柱，其操作除添加的柱料是NIP外皆同上述步驟相同。

1.3.6.2 MISPE柱洗脫液優(yōu)化

取1 g/L的DCD溶液，梯度稀釋成2 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液充當(dāng)MISPE的上樣液，以乙腈-甲醇（3∶1，V/V）為淋洗液，洗脫液分別為純甲醇、甲醇-氨水（9∶1，V/V）、甲醇-氨水（8∶2，V/V）為洗脫液。以相同質(zhì)量濃度的DCD溶液充當(dāng)NIP固相萃取柱的洗脫液，淋洗液相同，洗脫液為純甲醇。收集后，在50 ℃條件下氮吹，隨后以乙腈復(fù)溶，進(jìn)行HPLC儀檢測(cè)。

1.3.7 實(shí)際樣品的處理

1.3.7.1 奶粉樣品的處理

取2 g奶粉樣品加入到10 mL乙腈中，振蕩1 min，再超聲20 min后，在10 000 r/min條件下離心20 min。過濾，取上層清液，以此上清液為上樣液。乙腈-甲醇（9∶1，V/V）為淋洗液，洗脫液為甲醇-氨水（9∶1，V/V）。收集洗脫液并在氮吹濃縮儀中吹干，乙腈復(fù)溶后進(jìn)行HPLC檢測(cè)。

1.3.7.2 奶粉樣品的加標(biāo)處理

取不同量的DCD溶于乙腈之中，制成質(zhì)量濃度2、1、0.5 mg/L的DCD溶液，將其分別加入到上述處理的奶粉樣品中，進(jìn)行HPLC加標(biāo)回收檢測(cè)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

本實(shí)驗(yàn)皆重復(fù)3 次取平均值，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以 ±s表示。采用OriginPro 8.5.1軟件進(jìn)行繪圖，采用SPSS Statistics 17.0進(jìn)行顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 結(jié)構(gòu)表征

2.1.1 掃描電鏡檢測(cè)結(jié)果

圖1 MIP（a）和NIP（b）的掃描電鏡圖Fig. 1 Scanning electron micrographs of MIP (a) and NIP (b)

由圖1可以看出，MIP的表面結(jié)構(gòu)較為粗糙，這是因?yàn)楫?dāng)制備好的MIP經(jīng)過洗模板后，目標(biāo)物分子DCD被洗脫下來，MIP內(nèi)部形成一個(gè)特異性的空穴結(jié)構(gòu)。而NIP表面較為光滑，沒有很強(qiáng)的凹凸感，排列也相對(duì)致密一點(diǎn)，則是因?yàn)槠洳]有參與洗脫模板分子的過程。

2.1.2 傅里葉紅外光譜檢測(cè)

圖2 MIP（a）和NIP（b）傅里葉紅外光譜圖Fig. 2 FT-IR spectra of MIP (a) and NIP (b)

從圖2可以看出，二者具有一些相同的特征吸收峰，這是由于MIP和NIP本身具有相同的化學(xué)組成成分，1 723 cm-1處是—C＝O鍵的伸縮振動(dòng)特征吸收峰，代表著MIP和NIP都存在—COOH鍵。2 941 cm-1和2 989 cm-1（C—H），1 651 cm-1（C＝C），1 462 cm-1（帶芳香環(huán)C＝C），1 394 cm-1（C—O），1 154 cm-1（C—N），1 723 cm-1（C＝O），這些說明交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯酸酯已經(jīng)成功地將印跡聚合物進(jìn)行了交聯(lián)。

2.2 MIP的吸附性能分析

2.2.1 MIP的靜態(tài)吸附分析

圖3 DCD對(duì)MIP和NIP的靜態(tài)吸附曲線Fig. 3 Binding isotherms of MIP and NIP for DCD

如圖3所示，MIP和NIP對(duì)DCD的吸附性隨著初始質(zhì)量濃度的增加而增加。在0.001～0.1 mg/mL之間其聚合物吸附量的增加速率基本穩(wěn)定，而在0.1 mg/mL之后吸附量的增長(zhǎng)速率逐漸減少，吸附量趨于平衡。由此可以看出在質(zhì)量濃度0.1 mg/mL左右聚合物基本吸附完成。

圖4 MIP的Scatchard方程分析圖Fig. 4 Scatchard equation analysis of MIP

如圖4所示，兩條直線是對(duì)圖中散點(diǎn)分兩部分進(jìn)行線性回歸制成的，其方程分別為Q/C=405.81-865.16Q和Q/C=17.72-9.89Q，其中C為吸附后的平衡質(zhì)量濃度（mg/mL）。根據(jù)兩個(gè)方程的截距和斜率可以得出其最大吸附量Qmax分別為0.61 mg/g和1.79 mg/g，以及其解離常數(shù)Kd分別為0.001 2 mg/mL和0.101 mg/mL?？梢钥闯鯭/C和Q并不是呈線性關(guān)系。這是因?yàn)楫?dāng)質(zhì)量濃度較低時(shí)，吸附還未完全，主要是通過物理手段來進(jìn)行吸附的，所以Qmax值比較低。而質(zhì)量濃度較高時(shí)，吸附已經(jīng)完成，則是通過化學(xué)位點(diǎn)結(jié)合的方式完成吸附，吸附效果較好，Qmax值就較高。

2.2.2 MIP的動(dòng)態(tài)吸附分析

圖5 DCD對(duì)MIP和NIP的動(dòng)態(tài)吸附曲線Fig. 5 Binding kinetic curves of MIP and NIP for DCD

如圖5可知，DCD對(duì)MIP和NIP的吸附程度隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。在0～120 min內(nèi)的吸附量增長(zhǎng)速率基本趨于恒定，而在超過120 min后增長(zhǎng)速率突然減少，其曲線趨于平緩。聚合物在120 min左右的時(shí)間內(nèi)可以完成吸附。

2.2.3 MIP的競(jìng)爭(zhēng)性吸附分析

圖6 不同基質(zhì)對(duì)MIP和NIP（0.01 mg/mL）吸附對(duì)比Fig. 6 Binding behaviors of different substrates on MIP and NIP (0.01 mg/mL)

圖7 不同基質(zhì)對(duì)MIP和NIP（0.001 mg/mL）吸附對(duì)比Fig. 7 Binding behaviors of different substrates on MIP and NIP (0.001 mg/mL)

表1 不同質(zhì)量濃度的印跡因子和選擇性因子Table 1 Imprinting factor and selectivity factor at different concentrations

為了評(píng)價(jià)所制備材料的性能，選擇DCD結(jié)構(gòu)類似物氰胺、三聚氰胺和三聚氰酸進(jìn)行研究。實(shí)驗(yàn)選擇0.01 mg/mL和0.001 mg/mL兩個(gè)質(zhì)量濃度，如圖6、7所示，兩個(gè)質(zhì)量濃度下MIP對(duì)于DCD的選擇性較好，均大于其結(jié)構(gòu)類似物的選擇性。對(duì)其選擇性因子和印跡因子進(jìn)行計(jì)算，結(jié)果如表1所示，兩種質(zhì)量濃度下DCD的選擇性因子均大于1.7。說明所制備的MIP對(duì)于目標(biāo)物DCD具有較好的吸附效果，其原因在于MIP在制備過程中，加入了模板分子，洗脫后在聚合物的內(nèi)部及表面形成了對(duì)目標(biāo)物DCD的特異性孔穴。NIP在兩個(gè)質(zhì)量濃度下對(duì)DCD的吸附值相較于MIP均降低至原來的1/2，對(duì)其余競(jìng)爭(zhēng)物的吸附效果也不明顯，計(jì)算印跡因子均大于2，說明所制備的MIP的吸附性能遠(yuǎn)大于NIP。由此可以看出該MIP對(duì)DCD的特異選擇性良好，可用于充當(dāng)MISPE的柱料對(duì)DCD進(jìn)行分離、提取。

2.3 MISPE提取液優(yōu)化分析

圖8 不同甲醇-氨水比例洗脫液MISSPPEE/NISPE的HHPPLLCCFig. 8 MISPE/NISPE liquid chromatography with methanol-ammonia mixtures at different ratios as elution solutions

由圖8可知，在9.28～9.30 min時(shí)有明顯的峰面積出現(xiàn)。而相同質(zhì)量濃度下以甲醇-氨水（9∶1，V/V）為洗脫液的MISPE在HPLC中的峰面積最大，回收率為86%，而以純甲醇為洗脫液的MISPE所測(cè)得的回收率為34.5%，以甲醇-氨水（8∶2，V/V）為洗脫液的MISPE所測(cè)得的回收率為77%，由此可知以甲醇-氨水（9∶1，V/V）為洗脫液的洗脫效果最佳。而由圖8d可知，以純甲醇為洗脫液的NISPE所測(cè)得的色譜峰面積非常小，回收率僅為3%。以此相比，以相同洗脫液的MISPE回收率遠(yuǎn)高于NISPE。證明以MISPE的柱料較好，且洗脫液為甲醇-氨水（9∶1，V/V）最好。

2.4 DCD標(biāo)準(zhǔn)曲線

DCD的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=79 278x-849.827，線性范圍為0.01～2.00 mg/L，R2為0.999 4，檢出限（RSN=3）為0.57×10-2mg/L。

2.5 實(shí)際樣品HPLC分析

2.5.1 奶粉樣品的HPLC分析

圖9 奶粉樣品的HPLC圖Fig. 9 Liquid chromatogram of milk powder sample

從圖9可以看出，在9.28～9.30 min之間皆無明顯的峰面積。以此可知在實(shí)際樣品中DCD的含量非常微小，不足以被HPLC儀檢測(cè)出來。從圖9a可以看出，未過固相萃取的色譜圖雜峰較多，峰形較寬。而圖9b的色譜峰的雜峰較少且峰形較好，由此可以看出MISPE的效果良好。

2.5.2 奶粉樣品加標(biāo)的HPLC分析

為了驗(yàn)證所建立方法的準(zhǔn)確性，進(jìn)行了加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)。由表2可知，添加量分別為2、1 mg/L和0.5 mg/L，每個(gè)添加水平重復(fù)3 次。平均回收率別為102.5%、103%和104%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.21%～0.86%之間，樣品回收率較好。證明MISPE充當(dāng)吸附柱料對(duì)DCD的特異選擇性較好，所開發(fā)的方法可以用于實(shí)際樣品中DCD的檢測(cè)研究。

表2 奶粉中DCD的加標(biāo)回收率（n=3）Table 2 Recoveries of DCD spiked in milk powder (n=3)

此外，將所建立的分子印跡-固相萃取-HPLC技術(shù)與傳統(tǒng)的HPLC技術(shù)相比較，本實(shí)驗(yàn)的線性范圍明顯更寬，檢出限降低了2個(gè)數(shù)量級(jí)，說明所制備的分子印跡吸附材料具有較好的選擇特異性，將其作為固相萃取填料后，可以提高方法的精密度與準(zhǔn)確性。

3 結(jié) 論

在乳制品中殘留的痕量DCD會(huì)對(duì)人體健康構(gòu)成威脅，因此，本實(shí)驗(yàn)以MIP作為固相萃取吸附劑，結(jié)合HPLC技術(shù)，建立了一種DCD的檢測(cè)方法。該方法的線性范圍為0.01～2.00 mg/L，相關(guān)系數(shù)R2為0.999 4，檢出限為0.57×10-2mg/L。對(duì)于復(fù)雜樣品中DCD的檢測(cè)具有滿意的回收率和精確性，可用于實(shí)際樣品中對(duì)DCD殘留的測(cè)定。該方法的建立為開展DCD污染控制和形成機(jī)制研究提供一定的理論基礎(chǔ)和技術(shù)支持。

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Molecularly Imprinted Solid-Phase Extraction Coupled with High Performance Liquid Chromatography for the Detection of Dicyandiamide in Milk Powder

LIU Huilin, NI Tianhong, ZHOU Kaiwen, WANG Jing*
(Beijing Advanced Innovation Center for Food Nutrition and Human Health, Beijing Engineering and Technology Research Center of Food Additives, Beijing Technology & Business University (BTBU), Beijing 100048, China)

A novel molecularly imprinted polymer was developed by a one-step polymerization using dicyandiamide as template, methacrylic acid as functional monomer, ethylene glycol dimethylacrylate as cross-linker, and azobisisobutyronitrile as initiator. The physicochemical properties of the prepared material were characterized by scanning electron microscopy, Fourier transform infrared spectroscopy, and ultraviolet spectroscopy. A molecularly imprinted solid phase extraction coupled with high performance liquid chromatography method was developed using this material to detect dicyandiamide in real milk powder samples. The linear range of this method was from 0.01 to 2.00 mg/L, with a correlation coeffi cient (R2) equal to 0.999 4, which had a good linear relationship. The limit of detection (LOD) was 0.57 × 10-2mg/L(RSN= 3). The recovery was ranged from 102.5% to 104%, and the relative standard deviation was between 0.21% and 0.86%.

dicyandiamide; molecularly imprinted polymers (MIP); solid-phase extraction; high performance liquid chromatography (HPLC)

TS207.3

A

1002-6630（2017）20-0203-06

劉慧琳, 倪天鴻, 周凱文, 等. 分子印跡固相萃取-高效液相色譜法檢測(cè)奶粉中的雙氰胺[J]. 食品科學(xué), 2017, 38(20)∶203-208. DOI∶10.7506/spkx1002-6630-201720029. http∶//www.spkx.net.cn

LIU Huilin, NI Tianhong, ZHOU Kaiwen, et al. Molecularly imprinted solid-phase extraction coupled with high performance liquid chromatography for the detection of dicyandiamide in milk powder[J]. Food Science, 2017, 38(20)∶ 203-208. (in Chinese with English abstract) DOI∶10.7506/spkx1002-6630-201720029. http∶//www.spkx.net.cn

2016-10-14

國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目（31501559）；國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（31571940）；

北京市教委一般項(xiàng)目（201610011004）

劉慧琳（1987—），女，講師，博士，研究方向?yàn)槭称钒踩?。E-mail：liuhuilin@btbu.edu.cn

*通信作者：王靜（1976—），女，教授，博士，研究方向?yàn)槭称窢I(yíng)養(yǎng)與安全。E-mail：wangjing@th.btbu.edu.cn

DOI∶10.7506/spkx1002-6630-201720029