6—BA與TDZ對(duì)草莓葉片再生作用的比較

白玉+鄒海龍

前言

草莓是薔薇科草莓屬多年生草本植物。在世界小漿果生產(chǎn)中，草莓榮居首位。在草莓的葉片再生過程中，不同的激素種類及濃度配比控制著細(xì)胞的再分化方向和效果。為了篩選適宜的激素種類和濃度配比，本試驗(yàn)以MS為基本培養(yǎng)基，以‘全明星、‘圖得拉、‘豐香3個(gè)草莓主栽品種為試材，以葉片為外植體，研究了植物組織培養(yǎng)過程中6-BA與TDZ對(duì)不定芽再生效率的影響。

1 試驗(yàn)材料及方法

供試材料為MS培養(yǎng)基上生長健壯、大小一致的繼代試管苗，品種為‘全明星、‘圖得拉、‘豐香。選取生長4周左右的草莓試管苗葉片，剪成3至4mm寬的小條作為外植體。每瓶接6個(gè)外植體，每個(gè)處理4瓶，2次重復(fù)。培養(yǎng)溫度25℃，光照強(qiáng)度2000 Lux，光周期12 h/d 。以MS為基本培養(yǎng)基，蔗糖30g.L-1，瓊脂6.5g.L-1，Ph5.8，附加不同組合的激素制成的誘導(dǎo)再生培養(yǎng)基。

2 6-BA與NAA、IBA組合再生比較（表一）

將試材分別接入含6-BA（0.5、1.0、1.5、2.0、2.5）和NAA（0.2、0.4），IBA（0.2、0.4）的MS培養(yǎng)基中。當(dāng)培養(yǎng)基中附加0.5 mg·L-1 6-BA時(shí)，最高再生頻率為16.83%，葉片再生出1.8個(gè)不定芽，可見草莓葉片對(duì)細(xì)胞分裂素非常敏感。培養(yǎng)基中6-BA濃度在0.5至2.0 mg·L-1的范圍內(nèi)，草莓葉片的再生芽數(shù)隨著6-BA濃度的增加而增多，且再生頻率也隨著6-BA濃度增加而增加。生長素中IBA對(duì)草莓再生不定芽的效果要好于NAA，兩個(gè)濃度IBA再生效果接近。綜合看來，2.0 mg·L-1 BA與0.2 mg·L-1 IBA組合，再生效果均最好。

3 TDZ與NAA、IBA組合再生比較（表二）

自80年代以來，TDZ（噻重氮苯基脲）作為一活性較6-BA高得多的細(xì)胞分裂素，在草莓離體葉片誘導(dǎo)上已經(jīng)開始得到廣泛的應(yīng)用。本試驗(yàn)置同上述6-BA系列激素組合，只是以TDZ代替6-BA作為培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素。隨著TDZ濃度的增加，再生頻率及再生芽數(shù)均有提高的趨勢(shì)；但隨著TDZ濃度都增加，玻璃化現(xiàn)象也開始嚴(yán)重；生長素中IBA對(duì)草莓再生不定芽都效果好于NAA，兩個(gè)濃度IBA都再生效果接近。當(dāng)TDZ濃度為1.5 mg·L-1、IBA濃度為0.2 mg·L-1時(shí)，全明星草莓的再生率為90.58%，平均再生芽數(shù)為10.84，為最高；當(dāng)TDZ濃度為1.5 mg·L-1、IBA濃度為0.4 mg·L-1，圖得拉的再生率為98.66%，平均再生芽數(shù)為10.15，豐香再生率為73.22%，平均再生芽數(shù)為5.36，均為最高；總體來看，1.5mg·L-1 TDZ與0.2 、0.4mg·L-1 IBA組合都效果最好。

4 結(jié)論（6-BA與TDZ對(duì)草莓葉片再生作用的比較）

實(shí)驗(yàn)表明用TDZ代替6-BA能夠明顯提高再生不定芽的效率。當(dāng)培養(yǎng)基中附加6-BA時(shí)，再生出芽呈單芽狀態(tài)，芽直立性好，培養(yǎng)40 d以后即可剪下直接成苗，成苗快；當(dāng)培養(yǎng)基中附加TDZ時(shí)，再生出的芽呈叢生狀，直立性差。草莓葉片再生出的不定芽有不同程度的玻璃化現(xiàn)象，其中在附加TDZ的培養(yǎng)基上再生出的芽玻璃化程度較嚴(yán)重。

TDZ具有很強(qiáng)的細(xì)胞分裂素活性，對(duì)提高草莓葉片分化率有很大的促進(jìn)作用，由于附加TDZ的培養(yǎng)基的葉片再生芽數(shù)比附加6-BA的培養(yǎng)基的再生芽數(shù)高得多，因此應(yīng)選用TDZ代替6-BA。

作者單位：遼寧省阜新市農(nóng)業(yè)廣播電視學(xué)校endprint