精子庫1例B3亞型血捐精志愿者報(bào)告及建議

宋曉輝 王 麗

·臨床經(jīng)驗(yàn)·

精子庫1例B3亞型血捐精志愿者報(bào)告及建議

宋曉輝 王 麗*

山東大學(xué)生殖醫(yī)學(xué)研究中心；國家輔助生殖與優(yōu)生工程技術(shù)研究中心；生殖內(nèi)分泌教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（山東濟(jì)南 250001）

ABO血型系統(tǒng)是人類血型系統(tǒng)中抗原免疫原性最強(qiáng)的一個(gè)血型系統(tǒng)，根據(jù)紅細(xì)胞上是否存在A、B抗原和血清中是否存在抗A抗B抗體，ABO血型表現(xiàn)型分為A、B、O、AB血型。亞型是指屬同一血型抗原，但抗原結(jié)構(gòu)或抗原位點(diǎn)數(shù)有一定差異，ABO血型系統(tǒng)最常見的亞型出現(xiàn)在含A抗原的人群中，B亞型相對(duì)較少。雖然B亞型抗原性較弱，但在臨床上也有一定的意義。其中B3亞型通常是由ABO位點(diǎn)上的稀有等位基因所致[1]。B3亞型紅細(xì)胞最主要的特征是在顯微鏡下能與相應(yīng)的抗體出現(xiàn)混合視野外觀[2]。血型是人類精子庫捐精志愿者體檢中的一個(gè)項(xiàng)目，它在志愿者檔案分類管理、精液標(biāo)本的發(fā)送及臨床使用中起到重要的作用。本文對(duì)山東人類精子庫一例B3亞型血捐精志愿者作一報(bào)道，并對(duì)精子庫的管理提出一些相關(guān)建議。

臨床資料

患者 男性，31歲大學(xué)專科學(xué)歷，五官端正，到山東人類精子庫做捐精志愿者，對(duì)該男子進(jìn)行宣教后雙方簽訂了知情同意書，該男子符合《人類精子庫基本標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)規(guī)范》規(guī)定的供精者篩查程序及健康檢查標(biāo)準(zhǔn)[3]。人類精子庫輔助實(shí)驗(yàn)室對(duì)其血型進(jìn)行檢測(cè)時(shí)出現(xiàn)正反定型不一致現(xiàn)象。該志愿者自述無輸血史，無疾病史，無家族遺傳病史，立即送本院輸血科進(jìn)行復(fù)查懷疑為亞型血。后經(jīng)山東省血液中心檢測(cè)報(bào)告為B3亞型。

結(jié) 果

一、人類精子庫輔助實(shí)驗(yàn)室微柱凝膠法檢測(cè)

本實(shí)驗(yàn)室所用血型檢測(cè)卡為中山市生科試劑儀器有限公司生產(chǎn)的微柱凝膠正反定型檢測(cè)卡，離心機(jī)為TD-2Y醫(yī)用多功能離心機(jī)。該志愿者紅細(xì)胞與抗A反應(yīng)均沉積于凝膠管底部，與抗B反應(yīng)大部分紅細(xì)胞沉積于底部，極少量紅細(xì)胞懸于凝膠上層，呈現(xiàn)混合凝集（mf），與抗D反應(yīng)紅細(xì)胞全部懸于上層，Control管紅細(xì)胞全部沉積于底部；該志愿者血漿與A1細(xì)胞反應(yīng)呈現(xiàn)3+的凝集，與B、O及自身細(xì)胞均不凝集，結(jié)果見表1。

表1 微柱凝膠凝集法血型初步鑒定

二、本院輸血科試管法復(fù)查結(jié)果

使用試劑為上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)的抗A、抗B、抗AB、抗A1及抗H試劑，中山市生科試劑儀器有限公司生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)A細(xì)胞、B細(xì)胞、O細(xì)胞。分別再4℃、室溫及37℃放置30min進(jìn)行正反定型試驗(yàn)，提示患者紅細(xì)胞上有弱B抗原存在，結(jié)果見表2。

表2 試管法ABO血型復(fù)查

三、山東省血液中心檢測(cè)結(jié)果

不規(guī)則抗體篩選陰性，直接抗人球蛋白試驗(yàn)陰性。唾液血型物質(zhì)檢測(cè)到B、H物質(zhì)，綜合鹽水試管法正反定型和吸收放散試驗(yàn)結(jié)果，該捐精志愿者符合B3亞型血清學(xué)特征。

討 論

ABO亞型是由于紅細(xì)胞所攜帶的A或B抗原數(shù)量很少與標(biāo)準(zhǔn)的抗A或抗B血清反應(yīng)較弱，容易造成血型鑒定錯(cuò)誤。本實(shí)驗(yàn)室用微柱凝膠法檢測(cè)血型，因其穩(wěn)定靈敏度高，能檢測(cè)到十分微弱的抗原抗體反應(yīng)和不完全抗體等優(yōu)點(diǎn)已作為臨床血型鑒定常規(guī)方法[4]。對(duì)該捐精志愿者的血用微柱凝膠法進(jìn)行檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)了正反定型不一致現(xiàn)象，其紅細(xì)胞與抗B血清混合在微柱凝膠中出現(xiàn)混合視野，該志愿者自述無家族遺傳史和疾病史等，所以排除了生理因素和疾病因素造成的正反不一致現(xiàn)象。然后送本院輸血科用試管法進(jìn)行了復(fù)查，在4℃、室溫及37℃孵育30min后經(jīng)顯微鏡觀察證實(shí)了弱凝集的存在。該志愿者紅細(xì)胞與抗B血清混合在顯微鏡下觀察可見弱凝集，與抗AB反應(yīng)也呈弱凝集，其紅細(xì)胞與抗H反應(yīng)凝集比O細(xì)胞與抗H凝集強(qiáng)度弱，從而說明紅細(xì)胞上的B抗原很弱，H抗原較強(qiáng)，試管法初步判斷該志愿者紅細(xì)胞有弱B抗原存在。山東省血液中心結(jié)合鹽水試管法和吸收放散實(shí)驗(yàn)最后確定為B3亞型。

B3亞型的紅細(xì)胞與抗B血清呈弱凝集或混合外觀凝集，從而極易誤定為O（或A）型血。人類精子庫按照捐精志愿者的四種血型對(duì)其精液進(jìn)行分類編號(hào)，從而為不育患者提供與男方血型一致的精液。所以血型檢測(cè)正確性尤為重要。有研究指出[5]由亞型造成血型定型錯(cuò)誤占到了16%。建議人類精子庫對(duì)志愿者的血型檢測(cè)時(shí)嚴(yán)格按照正反定型標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，當(dāng)出現(xiàn)正反定型不一致的情況時(shí)及時(shí)找出原因，對(duì)于不明原因的應(yīng)向當(dāng)?shù)匮褐行乃蜋z。有報(bào)道指出[6,7]亞型無論從家系調(diào)查分析還是從分子生物學(xué)鑒定都具有遺傳性，如果后代為B3亞型有輸血需求時(shí)理論上只能輸B3亞型，但實(shí)際上很難找到，故只能用洗滌后的O型紅細(xì)胞配合輸注[8]。在血站一般也不接收亞型的獻(xiàn)血者，因?yàn)榕R床很難碰到相同亞型的患者，血液保質(zhì)期一到就報(bào)廢了。假如亞型血志愿者的精液用于臨床，亞型血的這種遺傳性不孕夫婦應(yīng)有完全知情權(quán)和標(biāo)本的選擇權(quán)，而且只有在知情的前提下才能行使選擇權(quán)。亞型所產(chǎn)生的問題同時(shí)也是個(gè)醫(yī)學(xué)倫理問題。目前為止合格捐精者的血型亞型問題人類精子庫和臨床供精還沒有具體的規(guī)定和措施，亞型的志愿者能否捐精或捐精后精液能否用于臨床是一個(gè)需要討論的問題。

2003年衛(wèi)生部組織有關(guān)專家結(jié)合我國實(shí)際情況重新修訂了《人類輔助生殖技術(shù)與人類精子庫倫理原則》，倫理原則中包含了有利于供受者、保護(hù)后代、保密、社會(huì)公益、知情同意等倫理原則，這些原則對(duì)于輔助生殖技術(shù)的發(fā)展發(fā)揮了重要作用。雖然人類精子庫的出現(xiàn)對(duì)男性不孕夫婦帶來了福音，但是供精人工授精的廣泛使用必然會(huì)產(chǎn)生一系列新的倫理和社會(huì)的等諸方面的問題。人類精子庫之間應(yīng)加強(qiáng)聯(lián)系和溝通，對(duì)出現(xiàn)的新問題應(yīng)多組織討論，爭(zhēng)取形成專家共識(shí)，以指導(dǎo)實(shí)際工作，使精子庫和輔助生殖技術(shù)朝著逐步完善的方向發(fā)展。為患者提供最佳的醫(yī)療服務(wù)。

小 結(jié)

到目前為止我國已經(jīng)建立了23家人類精子庫，但是我國人類精子庫初期建立階段處于一種無序狀態(tài)，雖然2001年2月和2003年10月我國衛(wèi)生部先后頒發(fā)了2個(gè)相關(guān)的管理辦法及其修訂版，精子庫運(yùn)行過程至今仍面臨種種問題[9]，尤其在精子庫倫理原則上，各人類精子庫在運(yùn)行時(shí)仍然不同程度的存在一些倫理問題，且未引起高度重視。所以衛(wèi)生部主管部門應(yīng)加強(qiáng)對(duì)精子庫工作的監(jiān)督管理，將人類精子庫的倫理原則體現(xiàn)在精子庫技術(shù)的每一環(huán)節(jié)中，如謹(jǐn)慎的工作態(tài)度，對(duì)志愿者血型檢查時(shí)務(wù)必堅(jiān)持做正反定型；充分考慮到供受者的利益，不盲目剝奪供精者供精的權(quán)利，也要尊重受精者知情同意的權(quán)利。

鑒于此種情況我們對(duì)此志愿者按B型血進(jìn)行分類編號(hào)，檔案做特殊標(biāo)記，假如染色體正常我們將對(duì)該志愿者供精結(jié)束6個(gè)月后復(fù)查HIV，對(duì)其所供精液進(jìn)行儲(chǔ)存，供后期科學(xué)研究和臨床上特殊用精使用。同時(shí)，考慮到該志愿者的精液在臨床使用會(huì)比較少，所以也控制其捐獻(xiàn)的次數(shù)。但該志愿者查體后并未前來捐獻(xiàn)，40d后染色體核型結(jié)果為chi 46,XX[32]/46,XY[68]，即具有XX和XY細(xì)胞系的異源嵌合體。我們通知本人并終止其捐獻(xiàn)過程，對(duì)其檔案按異常進(jìn)行管理。

血型抗原; 精子庫; 捐精

1 李勇, 馬學(xué)嚴(yán). 實(shí)用血液免疫學(xué): 血型理論和實(shí)驗(yàn)技術(shù).北京: 科學(xué)技術(shù)出版社, 2006: 243-245

2 杰夫?丹尼爾. 人類血型. 朱自嚴(yán), 譯. 北京: 科學(xué)出版社, 2007: 41-42

3 衛(wèi)生部科教司. 衛(wèi)生部關(guān)于修訂人類輔助生殖技術(shù)與人類精子庫相關(guān)技術(shù)規(guī)范、基本標(biāo)準(zhǔn)和倫理原則的通知, 2003

4 楊慧敏, 陳欽宏, 謝作聽. 微柱凝集法檢出B亞型血型及鑒定. 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志 2010; 20(12): 3348-3349

5 吳敏慧, 劉毅, 劉洪莉, 等. ABO血型正反定型不符確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)查分析. 臨床輸血與檢驗(yàn) 2005; 7(3): 198-199

6 劉啟明, 尹新燕, 閻澤君, 等. B3亞型1例及家系調(diào)查. 中國誤診學(xué)雜志 2008; 8(19): 4785

7 張韋, 欒希英. 1例B3亞型的分子機(jī)制及家系調(diào)查. 臨床輸血與檢驗(yàn) 2016; 18(4): 319-322

8 王燕菊, 蔣學(xué)兵, 李文靜, 等. B3亞型1例報(bào)告. 北京醫(yī)學(xué)2012; 34(2): 143

9 盧文紅, 陳振文. 中、外精子庫的發(fā)展和管理比較. 生殖與避孕 2014; 34(2): 102-107

（2017-05-27收稿）

10.3969/j.issn.1008-0848.2017.04.012

R 321-33

＊通訊作者，E-mail: wangli_0531@163.com