血府逐瘀顆粒的制備工藝研究

崔 霞，畢建云，張震宇，吳秋焱，周 靜，畢經(jīng)會，張亞麗，蘇政華，戰(zhàn) 旗

(山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東 濟(jì)南 250355)

血府逐瘀顆粒的制備工藝研究

崔 霞，畢建云，張震宇，吳秋焱，周 靜，畢經(jīng)會，張亞麗，蘇政華，戰(zhàn) 旗*

(山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東濟(jì)南250355)

目的: 研究血府逐瘀顆粒的制備工藝。方法：采用正交試驗(yàn)，以干浸膏得率以及芍藥苷的含量為指標(biāo)，對血府逐瘀顆粒的提取、純化工藝進(jìn)行研究; 以合格顆粒得率為指標(biāo)，對顆粒的成型工藝進(jìn)行研究，優(yōu)選制劑的制備工藝。結(jié)果:將水提藥材加8倍量水(第二、三次加8倍)，回流提取3次，每次1.5 h；醇提藥材加8倍量乙醇(第二、三次加8倍)，回流提取3次，每次1.5 h。水煎液與醇提液在 60℃ 下干燥粉碎得干浸膏。當(dāng)歸、川芎、桃仁以揮發(fā)油提取器，加8倍量水，提取8h得三者的揮發(fā)油，揮發(fā)油以乙醇溶解。以糊精作稀釋劑，浸膏粉：輔料(1:0.8)；以溶解揮發(fā)油的70%乙醇溶液為潤濕劑制軟材，過 20 目篩制粒，60℃ 干燥 3 h，烘干，整粒，即得。結(jié)論: 優(yōu)選的血府逐瘀顆粒制備工藝穩(wěn)定可行。

府逐瘀顆粒; 提取工藝;制備工藝

血管性頭痛(Vascular headache)因?yàn)橐疬@類頭痛的原因都來自于血管，故統(tǒng)稱為血管源性頭痛。近年來中醫(yī)藥對血管性頭痛的治療有非常突出的優(yōu)勢與潛力?！夺t(yī)林改錯(cuò)》[]曰：“查患頭痛者無表證，無里證，無氣虛、痰飲等證，忽犯忽好，百方不效，用此方一劑(血府逐瘀湯)而愈”。方多為湯劑服用，口感不佳，反而會加重頭痛的程度，本課題組改進(jìn)組方的劑型為顆粒，方便實(shí)用，文章簡要概述了血府逐瘀顆粒的提取及制備工藝研究。

1 儀器與材料

1.1 儀器

芍藥苷(批號：110736-201328，中國食品藥品檢定研究院)供含量測定用。高效液相色譜儀(Ultimate 3000)，紫外檢測器、泵、控制器(Thermo)，數(shù)據(jù)處理器為chromeleon7工作站；KQ-250E型超聲波中藥處理機(jī)(昆山市超聲儀器有限公司)；FA1604N電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)；DZKW-S-6數(shù)顯電子恒溫水浴鍋(北京市永光明醫(yī)療儀器廠)，101A-3型電熱鼓風(fēng)干燥箱干燥箱( 上海實(shí)驗(yàn)儀器廠有限公司)；；SHZ-D(III)型循環(huán)水式真空泵(鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司)；AO33522分析天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)。水為純凈水(Millipore 公司純水器制備)；所用試劑為色譜純或分析純。

1.3 藥材

紅花為菊科植物紅花(Carthamus tinctorius L.)的干燥花。赤芍為毛茛科植物芍藥(Paeonia lactiflora Pall.)的干燥根。甘草為豆科植物脹果甘草( Glycyrrhiza inflataBat． ) 的 干 燥 根 莖。桔梗為桔梗科植物桔梗(Platycodon grandiflorum(Jacp.)A.DC.)的干燥根。枳殼為蕓香科植物酸橙(Citrus aurantium L.)及其栽培變種的干燥未成熟果實(shí)。川牛膝為莧科植物川牛膝(Cyathula officinalis Kuan)的干燥根。生地(Rehmannia glutinosa Libosch)為玄參科植物地黃的塊根。柴胡為傘形科植物柴胡 (Bupleurum chinense DC.)的干燥根。桃仁為薔薇科植物桃(Prunus persica(L.)Batsch)的干燥成熟種子。當(dāng)歸為傘形科植物當(dāng)歸(Angellica sinensis(Oliv)Diels.)的干燥根。川芎為傘形科植物川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)的干燥根莖，以上藥材經(jīng)山東中醫(yī)藥大學(xué)戰(zhàn)旗老師鑒定。

2 提取工藝研究

2.1 水提工藝研究[2]

根據(jù)文獻(xiàn)，筆者對紅花、桔梗、枳殼、赤芍、甘草等藥材進(jìn)行水提，同時(shí)根據(jù)藥材主要成分的性質(zhì)及該方的臨床應(yīng)用，以水提藥材赤芍中芍藥苷的得率及干膏得率為指標(biāo)，選擇考察因素為加水量、提取時(shí)間、提取次數(shù)，每個(gè)因素設(shè)三個(gè)水平，優(yōu)選出最佳水提工藝條件。因素水平表、正交試驗(yàn)結(jié)果和方差分析結(jié)果分別見表2～表4。

表2 正交試驗(yàn)因素水平表

*為第一次加水量，第2、3次加水量均與第一次相同

表3 正交試驗(yàn)結(jié)果

表4 方差分析結(jié)果

注：F0.1(2，4)=4.32，F(xiàn)0.05(2，4)=6.94，F(xiàn)0.01(2,4)=18.0；F0.1(2，2)=19.0，F(xiàn)0.05(2，2)=99.0，F(xiàn)0.01(2,2)=9.0

綜合兩種指標(biāo)的直觀分析與方差分析，同時(shí)從省時(shí)節(jié)能的角度考慮，綜合平衡確定最佳提取工藝為 A2B2C3。即加8倍量水(第二、三次加8倍)，回流提取3次，每次1.5 h。

2.2 醇提工藝研究[3-4]

2.2.1 樣品的制備方法

供試品溶液：按處方比例稱取含川牛膝9g、生地9g、柴胡3g的醇提取藥材共21g，加入8倍量的70%的乙醇，浸泡1h，煎煮1.5h，醇提2次，抽濾、靜置放冷后于250mL量瓶中以水稀釋至刻度.。

2.2.2 干膏得率測定方法

精密吸取樣品溶液 25 mL，移至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，于 105℃干燥至恒重，移至干燥器中，冷卻至室溫，迅速精密稱定干膏重量，計(jì)算干膏得率。

2.2.3 采用單因素優(yōu)選醇提工藝

以干膏得率為指標(biāo)，分別選擇考察因素為浸泡時(shí)間、乙醇濃度，每個(gè)因素三個(gè)水平，按按“2.2.1”項(xiàng)下樣品制備方法進(jìn)行單因素試驗(yàn)，并按 “2.2.2”項(xiàng)下干膏測定方法計(jì)算干膏得率。試驗(yàn)結(jié)果分別見表5-表6。

表5 浸泡時(shí)間單因素試驗(yàn)結(jié)果

表6 乙醇濃度單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果

通過干膏得率分析，同時(shí)從省時(shí)節(jié)能的角度考慮，應(yīng)選用70%乙醇，浸泡1h。

2.2.3 采用正交試驗(yàn)優(yōu)選醇提工藝

用70%乙醇，浸泡1小時(shí)基礎(chǔ)上，以干膏得率為指標(biāo)，選擇考察因素為乙醇量、提取時(shí)間、提取次數(shù)，每個(gè)因素設(shè)三個(gè)水平，按“2.2.1”項(xiàng)下樣品制備方法進(jìn)行L9(34) 正交試驗(yàn)，并按“2.2.2”項(xiàng)下干膏測定方法計(jì)算干膏得率。因素水平表、正交試驗(yàn)結(jié)果和方差分析結(jié)果分別見表7～表9。

表7 正交試驗(yàn)因素水平表

*為第一次加醇量，第2、3次加醇量均與第一次相同。

表8 正交試驗(yàn)結(jié)果

表9 方差分析結(jié)果

注：F0.05(2，2)=19.0，F(xiàn)0.01(2,2)=99.0

綜合干膏得率直觀分析與方差分析，同時(shí)從省時(shí)節(jié)能的角度考慮，綜合平衡確定最佳提取工藝為A2B2C3。即加8倍量乙醇(第二、三次加8倍)，回流提取3次，每次1.5 h。

3 成型工藝研究

3.1 樣品的制備方法

當(dāng)歸、川芎、桃仁以揮發(fā)油提取器，加8倍量水，提取8h得三者的揮發(fā)油，揮發(fā)油以乙醇溶解[5-6]。 將醇提液濃縮至相對密度1.3左右( 60℃熱測) ，將水提稠膏與醇提稠膏合并在 60℃下真空干燥，粉碎得干浸膏，使用糊精作為稀釋劑，干浸膏與輔料比例為 1∶0.8，以溶解揮發(fā)油的70%乙醇溶液為潤濕劑制軟材，20目篩制粒，60℃干燥3 h，整粒，即得。

3.2 考察指標(biāo)

以顆粒干燥均勻，色澤一致，無吸潮、結(jié)塊、潮解等現(xiàn)象，以及能過一號篩和不能通過五號篩的合格顆粒的百分率作為評價(jià)指標(biāo)。

3.3 采用正交試驗(yàn)優(yōu)選輔料[7-9]工藝

糖粉和糊精價(jià)格經(jīng)濟(jì)，且制粒成型性好，因此選用糖粉和糊精作稀釋劑。由于浸膏粉粘性較大，因此選用乙醇作潤濕劑選擇考察因素為糖粉：糊精、浸膏粉：醇濃度，每個(gè)因素設(shè)三個(gè)水平，按“3.1”項(xiàng)下樣品制備方法進(jìn)行 L9(34) 正交試驗(yàn)，并按“3.2”項(xiàng)下顆粒合格的評價(jià)指標(biāo)測顆粒合格率。因素水平表、正交試驗(yàn)結(jié)果和方差分析結(jié)果分別見表10～表12

表10 正交試驗(yàn)因素水平表

表11 正交試驗(yàn)結(jié)果

表12 方差分析結(jié)果

注：F0.05(2，2)=19.0，F(xiàn)0.01(2,2)=99.0

綜合顆粒的外觀性狀，聯(lián)合直觀分析與方差分析，同時(shí)從省時(shí)節(jié)能的角度考慮，綜合平衡確定最佳成型工藝中的輔料配比為A1B2C3即糖粉：糊精(0:1)；浸膏粉：輔料(1:0.8)；醇濃度為70%。

3.4 成型小試

按照3.1的工藝制備方法以糖粉：糊精(0:1)；浸膏粉：輔料(1:0.8)；醇濃度為70%條件進(jìn)行三組成型小試試驗(yàn)，顆粒外觀良好，流動性好，顆粒合格率較好。結(jié)果見表13。

表13 驗(yàn)證性試驗(yàn)結(jié)果

4 結(jié)論

紅花主要化學(xué)成分為黃酮醇及其苷類、查耳酮等，其中羥基紅花黃色素A為紅花的主要水溶性活血化瘀有效成分[10]。桔梗中含有皂苷，多聚糖、黃酮、聚炔、氨基酸揮發(fā)油等多種成分，其中以皂苷的藥理作用最強(qiáng)[11]。枳殼中主要含有黃酮、揮發(fā)油及少量生物堿三大類成分[12]黃酮主要以苷的形式存在，易溶于水。赤芍包含萜類及其苷、黃酮類及其苷、揮發(fā)油等多種化學(xué)成分，赤芍總苷是其主要有效成分[13]。牛膝中的活性成分主要為三萜皂苷、甾酮、多糖以及多肽類物質(zhì)[14]。生地化學(xué)成分含梓醇、多種氨基酸和糖、甘露醇等。柴胡根中主要成份為柴胡皂昔[15],其次含有植物幽醇、側(cè)金盞花醇等;地上部分主要含黃酮類、少量皂昔類、木脂素類、等成分[16]。由以上可知紅花、桔梗、枳殼、赤芍的主要有效成分均為苷類，為水溶性成分，牛膝、柴胡、生地主要成分易溶于乙醇，且水提法與醇提法，經(jīng)濟(jì)實(shí)惠、無污染、操作簡單，故前四味藥選用水提工藝，后三味藥選用醇提工藝。

[1] 王清任.醫(yī)林改錯(cuò)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2005.

[2] 楊 東,畢建云,郭艷偉,等正交試驗(yàn)優(yōu)選逐瘀止痛凝膠膏劑的水提工藝研究[J].藥學(xué)實(shí)踐雜志，2017,35(2)：146-149.

[3] 康愛榮,閆 明,彭 英,等.高良姜中高良姜素的醇提和純化工藝研究[J].中藥研究與開發(fā),2011,18(5):44-46.

[4] 汪海斌，吳電彩，馬 玲,等.正交試驗(yàn)研究枇杷清肺顆粒的醇提工藝[J].安徽醫(yī)藥，2015,19(2):222-224.

[5] 伍振峰，王賽君，楊 明,等.中藥揮發(fā)油提取工藝與裝備現(xiàn)狀及問題分析[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2014,20(14):224-228.

[6] 楊 林,羅曉星,王四旺,等.兩種提取當(dāng)歸川芎揮發(fā)油的工藝比較[J].藥劑研究,2006,15(10):1140-1141.

[7] 王宏順,熊學(xué)敏.中藥顆粒劑輔料篩選的研究[J].江西中醫(yī)藥,2010,7(41):65-67.

[8] 李 璐,王秀海,王永香,等.疏風(fēng)定喘顆粒輔料的篩選[J].中成藥,2017,39(4):731-736.

[9] 奚之駿,許麗雯,史秀峰,等.鎮(zhèn)驚瀉火顆粒的制備工藝研究[J].中國藥師,2015,18(12):2058-2061.

[10] 夏新華，吳 衛(wèi)，何 莉，等.均勻設(shè)計(jì)法優(yōu)選紅花提取工藝[J].中藥材，2006,29(11):1251-1253.

[11] 桂雙英，王舉濤，葉杰勝，等.正交試驗(yàn)法優(yōu)選桔?？傇碥盏奶崛」に嘯J].安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2011,30(5)：63-65.

[12] 蔣以號，王 晶，曹旻旻,等.中藥枳殼的研究概況[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)刊，2008,10(8):1238-1240.

[13] 陸小華，馬 驍，王 建，等.赤芍的化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展[J].中草藥，2015,46(4):595-602.

[14] 沈 舒,王 瓊,李友賓.牛膝的化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展[J].綜述與講座,2011,23(11):1-6.

[15] 王 樸.生地黃的現(xiàn)代藥理研究與臨床應(yīng)用[J].中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育,2008,6(08):986.

[16] 劉永春,叢培臣.柴胡的化學(xué)成分及藥理作用研究概況[J].黑龍江醫(yī)藥,2006,19(3):216-218.

(本文文獻(xiàn)格式：崔霞，畢建云，張震宇，.血府逐瘀顆粒的制備工藝研究[J].山東化工，2017，46(16)：24-27,30.)

Study on Preparation Technology of Xuefu Zhuyu Granule

Cui Xia,Bi Jianyun,Zhang Zhenyu,Wu Qiuyan,Zhou Jing,Bi Jinghui,Zhang Yali ,Su Zhenghua,Zhan Qi*

(Shandong University of Traditional Chinese Medicine,Jinan 250355,China)

Objective: To investigate the preparation procedure of Xuefu Zhuyu granules. Methods: The orthogonal experiment was carried out to study the extraction and purification of Xuefu Zhuyu granules by using the yield of dry extract and the content of paeoniflorin. Taking the yield of qualified particles as an index, the forming process of the granules is studied, and the preparation process of the preparation is preferred.Results: Water extract of herbs were added with 8 times the amount of water (second, three times plus 8 times), reflux Extracted 3 times, each 1.5 h; Alcoholic herbs plus 8 times the amount of ethanol (second, three times plus 8 times), reflux Extracted 3 times, each 1.5 h.Decoction and alcohol extract at 60 ℃ dry and dry to dry extract. Angelica, Chuanxiong, peach kernel with volatile oil extractor, add 8 times the amount of water, extraction 8h. The volatile oil was obtained and the volatile oil was dissolved in ethanol. To dextrin as a thinner, extract powder: accessories (1: 0.8) ; To dextrin as thinner, extract powder: accessories (1: 0.8). To dissolve the volatile oil 70% ethanol solution for the wetting agent soft material, then made into a 20 mesh sieve into particles, finally dried in an oven at 60 ° C for 3 h to obtain the desired particles. Conclusion: The optimal preparation method of Xuefu Zhuyu granule is stable and feasible.

Xuefu Zhuyu granules; alcohol precipitation process; granule preparation process

TQ461

：A

：1008-021X(2017)16-0024-04

2017-06-10

本實(shí)驗(yàn)在山東中醫(yī)藥大學(xué)國家級實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心平臺完成，獲得2016年國家級大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃，項(xiàng)目立項(xiàng)(項(xiàng)目編號：2016071)

崔 霞(1995—)，女，山東平度人，大學(xué)本科學(xué)生；通訊作者:戰(zhàn)旗(1966—)，女，藥學(xué)高級實(shí)驗(yàn)師，山東中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)室主任，研究方向：中藥學(xué)。