PCR及細菌培養(yǎng)法應用于孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中的價值

靳紅

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2017.20.056

[摘要] 目的 對比研究PCR法及細菌培養(yǎng)法在應用于孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中的意義與價值。方法 該研究病例觀察時間段為2016年1—6月，方便收集該院產(chǎn)科收治疑似B族鏈球菌感染產(chǎn)婦共100例作為觀察對象，對患者臨床資料進行回顧性分析。所有患者分別應用PCR法以及細菌培養(yǎng)法進行檢測。以最終診斷結(jié)果為金標準，對比PCR法與細菌培養(yǎng)法在孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中的準確度以及特異性差異。結(jié)果 應用PCR法對B族鏈球菌感染檢測的準確度為97.37%（74/76），特異性為95.83%（23/24），應用細菌培養(yǎng)法對B族鏈球菌感染檢測的準確度為81.58%（62/76），特異性為70.83%（17/24）。兩組對比，PCR法用于孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測準確度、特異性均顯著高于細菌培養(yǎng)法，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結(jié)論 在孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中，應用PCR法的檢測效果明顯優(yōu)于細菌培養(yǎng)法，具有準確度高、特異性高的優(yōu)勢，值得推廣應用。

[關鍵詞] B族鏈球菌感染；孕婦；PCR；細菌培養(yǎng)

[中圖分類號] R446 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2017）07（b）-0056-03

Application Value of PCR and Germiculture in the Infection Test of Prenatal Group B Streptococcus

JIN Hong

Second Department of Clinical Laboratory， Laiwu Central Hospital of Xinwen Mining Group of Laiwu， Laiwu， Shandong Province， 271103 China

[Abstract] Objective To compare and research the significance and value of PCR and germiculture in the infection test of prenatal group b streptococcus. Methods 100 cases of delivery women suspected with group b streptococcus admitted and treated in our hospital from January 2016 to June were convenient selected and the clinical data were reviewed and all patients were tested by the PCR and germiculture， and the differences in the accuracy and specificity between the two methods were compared by taking the final diagnostic results as the golden standards. Results The accuracy and specificity of the PCR were obviously higher those of germiculture，[97.37%（74/76）， 95.83%（23/24） vs 81.58%（62/76）， 70.83%（17/24）]， and the differences were statistically significant（P<0.05）. Conclusion The test effect of PCR method in the prenatal group b streptococcus of delivery women is obviously better than that of germiculture with high accuracy and specificity， and it is worth promotion and application.

[Key words] Group b streptococcus infection； Delivery women； PCR； Germiculture

既往報道中指出，B族鏈球菌是侮辱鏈球菌，是臨床常見革蘭氏陽性鏈球菌，在直腸以及陰道組織中廣泛存在[1]。B族鏈球菌感染是導致產(chǎn)婦出現(xiàn)不良妊娠結(jié)局，如胎膜早破、早產(chǎn)、流產(chǎn)等的最主要因素之一。并且，B族鏈球菌具有一定的母嬰垂直傳播風險，新生兒垂直感染B族鏈球菌感染會增加其圍產(chǎn)期死亡風險[2]。因此，臨床必須盡早針對孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染帶菌情況進行診斷，以及時用抗菌藥物進行預防性之一。為對比研究PCR法及細菌培養(yǎng)法在應用于孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中的意義與價值，該研究中將該院2016年1—6月期間產(chǎn)科收治疑似B族鏈球菌感染產(chǎn)婦共100例作為觀察對象，分別應用PCR法以及細菌培養(yǎng)法進行檢測，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該研究病例觀察時間段為2016年1月—2016年6月，方便收集該院產(chǎn)科收治疑似B族鏈球菌感染產(chǎn)婦共100例作為觀察對象，對患者臨床資料進行回顧性分析。100例產(chǎn)婦中，85例為初產(chǎn)婦，15例為經(jīng)產(chǎn)婦，產(chǎn)婦年齡平均為（29.1±1.3）歲，孕周平均（36.7±0.3）周。

1.2 方法

1.2.1 PCR法 將患者陰道直腸拭子標本等級后于4.0℃冰箱中保存，檢測分析前將1.0 mL劑量清洗緩沖液加入拭子管內(nèi)，高速震蕩處理2.0 min后得到標本懸浮液，并在13 000轉(zhuǎn)/min的條件下進行離心處理，處理時間為5.0 min，經(jīng)離心處理后棄上層清液，沉淀部分加入100.0 μL劑量清洗緩沖液重懸，加入提取固形物，高速震蕩處理5.0 min，以達到破碎細胞的效果。在此基礎之上于95.0℃條件進行干浴處理2.0 min，后立即轉(zhuǎn)為冰浴處理5.0 min，再次按照13 000轉(zhuǎn)/min的條件下進行離心處理，處理時間為1.0 min，上層清液用于擴增。根據(jù)B族鏈球菌核酸檢測試劑盒以及PCR儀相關操作標準展開檢測，以熒光信號出現(xiàn)S型擴增，CT值低于33為B族鏈球菌感染陽性診斷標準。endprint

1.2.2 細菌培養(yǎng)法 將患者陰道直腸拭子細菌接種于濃度5.0%養(yǎng)血培養(yǎng)基中，培養(yǎng)箱溫度控制為37.0℃，培養(yǎng)時間為24.0 h，根據(jù)菌落形態(tài)、溶血特征以及顯微鏡下所見確定鏈球菌，在此基礎之上通過組合型特異性血清免疫實驗的方式最終明確診斷為B族鏈球菌感染。

1.3 觀察指標

以最終診斷結(jié)果為金標準，對比PCR法與細菌培養(yǎng)法在孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中的準確度以及特異性差異。

1.4 統(tǒng)計方法

數(shù)據(jù)以SPSS 19.0統(tǒng)計學軟件分析，以（x±s）表示計量資料，經(jīng)t檢驗；以率（%）表示計數(shù)資料，經(jīng)χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

以最終診斷結(jié)果為金標準，100例疑似B族鏈球菌感染孕婦中，共76例孕婦明確診斷為B族鏈球菌感染陽性，另24例孕婦B族鏈球菌感染檢測為陰性。應用PCR法對B族鏈球菌感染檢測的準確度為97.37%（74/76），特異性為95.83%（23/24），應用細菌培養(yǎng)法對B族鏈球菌感染檢測的準確度為81.58%（62/76），特異性為70.83%（17/24）。兩組對比，PCR法用于孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測準確度顯著高于細菌培養(yǎng)法（χ2=13.256，P<0.05），特異性顯著高于細菌培養(yǎng)法（χ2=11.005，P<0.05），差異有統(tǒng)計學意義。見表1、表2。

3 討論

目前臨床實踐中針對疑似B族鏈球菌感染帶菌者孕婦的檢測窗口時間已有共識[3]，即在的孕周35～37周時于陰道肛門同時取樣并進行分析。以往臨床以細菌培養(yǎng)法為B族鏈球菌感染的首選診斷方案[4]，但近來也有報道中指出PCR法在診斷B族鏈球菌感染方面的價值同樣確切[5]。該研究中觀察數(shù)據(jù)顯示：應用PCR法對B族鏈球菌感染檢測的準確度為97.37%（74/76），特異性為95.83%（23/24），應用細菌培養(yǎng)法對B族鏈球菌感染檢測的準確度為81.58%（62/76），特異性為70.83%（17/24）。兩組對比，PCR法用于孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測準確度、特異性均顯著高于細菌培養(yǎng)法，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。提示在孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染的診斷中，應用PCR法的效果優(yōu)于細菌培養(yǎng)法。該研究結(jié)果與陳明發(fā)等[6]研究結(jié)果“熒光定量PCR檢測法陽性率顯著高于細菌培養(yǎng)法（19.51% vs.9.72%），差異有統(tǒng)計學意義”基本一致，證實結(jié)論有高度可靠性。

作為一種快速且高效的臨床病原微生物檢測方法，PCR可通過對不同種屬特異性核算序列設計引物以及不同熒光染料標記探針的應用，在高通量檢測儀器的輔助下完成具有快速性、敏感性且高通量性的閉蓋檢測，具有檢測結(jié)果準確可靠，敏感性高的優(yōu)勢[7]。除此以外，在應用PCR法進行B族鏈球菌感染檢測的過程中，檢出時間可控制在6.0 h左右，明顯低于細菌培養(yǎng)法下的耗時，因此更具臨床實踐意義[8]。

綜上所述，在孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中，應用PCR法的檢測效果明顯優(yōu)于細菌培養(yǎng)法，具有準確度高、特異性高的優(yōu)勢，值得推廣應用。

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（收稿日期：2017-04-19）endprint