現(xiàn)代生物技術(shù)在植物檢疫中的作用

李雪琴+李紅梅++++++馮鋒++湯長(zhǎng)征

[摘要]：當(dāng)前，我國(guó)的動(dòng)植物產(chǎn)品大量出口到國(guó)外，也有很多產(chǎn)品從國(guó)外進(jìn)口，使得我國(guó)的植物檢疫需求不斷提升。在本文中，我們將對(duì)現(xiàn)代生物技術(shù)進(jìn)行簡(jiǎn)要的介紹，并探尋其在植物檢疫中的重要作用。

[關(guān)鍵詞]：現(xiàn)代生物技術(shù)；植物檢疫；重要作用

[引言]：我國(guó)植物檢疫技術(shù)雖然經(jīng)過了一段時(shí)間的發(fā)展，但是其檢測(cè)手段過于陳舊，已經(jīng)無法滿足當(dāng)前我動(dòng)植物產(chǎn)品進(jìn)出口貿(mào)易的需求，因此，我們應(yīng)注重對(duì)檢疫手段的創(chuàng)新和升級(jí)。當(dāng)前，免疫學(xué)、生物學(xué)等生物技術(shù)在植物檢疫中發(fā)揮了優(yōu)秀作用，因此在下文中，我們將對(duì)這些現(xiàn)代生物技術(shù)進(jìn)行介紹和分析。

1、免疫學(xué)技術(shù)在植物檢疫中的應(yīng)用

1.1免疫熒光技術(shù)

免疫熒光技術(shù)主要是以抗體作為基礎(chǔ)的檢測(cè)手段，在植物檢疫中發(fā)揮了重要作用，當(dāng)前主要用在植物組織、種子和土壤中細(xì)菌和真菌的檢測(cè)當(dāng)中。通過對(duì)免疫熒光技術(shù)的使用，能夠有效檢測(cè)出導(dǎo)致菜豆發(fā)橫生能萎蔫的病菌，并且靈敏度非常高，能夠有效對(duì)假陽性反應(yīng)問題進(jìn)行解決。免疫熒光技術(shù)分為直接免疫熒光法和間接免疫熒光法兩種。其中，間接免疫熒光法的應(yīng)用范圍比較廣，能夠使一抗與含有熒光色素的二抗進(jìn)行結(jié)合，他們發(fā)出的熒光能夠由免疫熒光顯微進(jìn)行檢測(cè)。不過，免疫熒光技術(shù)在應(yīng)用的過程中也存在著一定的局限性，對(duì)于設(shè)備的要求比較高，設(shè)備造價(jià)比較昂貴，操作所需時(shí)間比較多，并且有的時(shí)候會(huì)受到植物和土壤中熒光的干擾，從而給觀察帶來了一定的阻礙。

2、1.2

酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)自從誕生以來，廣泛應(yīng)用在植物病毒、真菌等檢測(cè)之中，例如，在病毒方面，能夠用作種子中的大豆花葉病毒、苜?；ㄈ~病毒、大麥條紋花葉病毒、煙草花葉病毒、黃瓜花葉病毒、煙草環(huán)斑病毒、等病毒的診斷和檢測(cè)；真菌方面，疫霉、腐霉、黑盤菌、等真菌的ELISA試劑盒已被商業(yè)化生產(chǎn)，并已廣泛應(yīng)用。

1.3免疫電鏡技術(shù)

免疫電鏡技術(shù)是從上世紀(jì)六七十年代開始投入應(yīng)用的，具有快速、準(zhǔn)確、節(jié)約材料等特點(diǎn)，并且保存時(shí)間比較長(zhǎng)，還可以郵寄，因此免疫電鏡技術(shù)當(dāng)前已經(jīng)得到廣泛的應(yīng)用，尤其是在植物病原真菌、病毒等類似檢測(cè)中得到了應(yīng)用。免疫電鏡技術(shù)與酶聯(lián)免疫法相比，雖然在靈敏度上相似，但是比酶聯(lián)免疫發(fā)更加直觀和準(zhǔn)確，對(duì)于一些難以鑒定的木本植物病毒也能夠?qū)崿F(xiàn)檢測(cè)。免疫電鏡技術(shù)可以直接檢測(cè)感染病毒的組織抽取也，處理對(duì)病毒定性之外，還能夠用在植物粗汁液中病毒粒體的定量分析中。由于免疫電鏡技術(shù)具有非常多的優(yōu)點(diǎn)，因此在當(dāng)前受到了歡迎，是較為理想的檢測(cè)技術(shù)之一。

2、核酸技術(shù)在植物檢疫中的作用

核算技術(shù)最開始是在上世紀(jì)八十年代至九十年代出現(xiàn)的，剛開始利用核酸雜交技術(shù)對(duì)植物病原進(jìn)行檢測(cè)，并且對(duì)核酸雜交技術(shù)和免疫學(xué)技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行對(duì)比，其中能夠明確得出，核酸雜交技術(shù)不管是在速度上還是靈敏度上還是在檢測(cè)率上都比免疫學(xué)方法有著大幅度的提升。尤其是PCR技術(shù)，能夠直接對(duì)病原物序列進(jìn)行檢測(cè)，從而使檢測(cè)準(zhǔn)確性大大提升。核酸技術(shù)主要包括核酸探針、RFLP技術(shù)、PCR技術(shù)等。

2.1核酸技術(shù)

核酸探針是使用經(jīng)過標(biāo)志（同位素或非同位素）并用于檢測(cè)出互補(bǔ)核酸序列的一段寡聚核苷酸。當(dāng)前，核酸探針技術(shù)已運(yùn)用于植物病害診斷和植物病原物的檢測(cè)之中。典型的核酸雜交技術(shù)是將少批的核酸注入在硝酸纖維膜或尼龍膜上，再浸入含特異性探針的雜交液中，經(jīng)過放射顯影或酶標(biāo)顏色反響檢測(cè)。核酸雜交技術(shù)雖然在檢測(cè)病原菌方面表現(xiàn)出它的優(yōu)勢(shì)，但由于其煩瑣操作以及缺少靈敏的探針標(biāo)志而限制了其普及運(yùn)用。同位素標(biāo)志靈敏度高，但同位素標(biāo)志費(fèi)用高、實(shí)驗(yàn)條件嚴(yán)峻，且有放射性危害，標(biāo)志好的探針在幾周內(nèi)其放射活性就衰退到不能運(yùn)用，因而不宜大規(guī)模推行。非放射性的生物素抑制了這些缺陷，因而非放射生物素-親和性系統(tǒng)被運(yùn)用于各種病害檢測(cè)，而在類病毒的檢測(cè)上光生物素標(biāo)志探針具有與同位素標(biāo)志一樣的靈敏度。目前運(yùn)用于柑桔裂皮病檢測(cè)的3種生物素：光生物素、生物素肼標(biāo)志中，DIG標(biāo)志的靈敏度最高，運(yùn)用最廣，由于非同位素標(biāo)志具有同位素標(biāo)志無與倫比的優(yōu)越性；靈敏度高、費(fèi)用少、對(duì)人體無害、保管時(shí)間長(zhǎng)并且比較穩(wěn)定，非常適宜進(jìn)出口檢疫技術(shù)的需求，它必將成為一種有力的檢測(cè)工具。

2.2PCR技術(shù)

PCR技術(shù)的全程叫做生物學(xué)的聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)，是一種DNA體外擴(kuò)增技術(shù)，能夠?qū)⒑兴钄U(kuò)增的靶DNA雙鏈經(jīng)過高溫變性成為單鏈，然而在退火中加入的寡聚合核苷酸引物與DNA模板進(jìn)行結(jié)合，在經(jīng)過十幾個(gè)循環(huán)之后，靶DNA的含量將特異性增長(zhǎng)了百萬倍，因此使得DNA分子的分析能力和檢測(cè)能力得到有效提升。由于生物學(xué)的聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)能夠快速、簡(jiǎn)便地進(jìn)行檢測(cè)，因此在植物病害診斷和病原物檢測(cè)方面發(fā)揮了非常大的作用和潛力。隨著研究的不斷深入，PCR技術(shù)在應(yīng)用的過程中需要比較昂貴的儀器設(shè)備和專業(yè)化的技術(shù)支持，當(dāng)前僅僅在實(shí)驗(yàn)室中才能夠操作，難以實(shí)現(xiàn)普及和推廣。

3、結(jié)語

隨著時(shí)代的不斷發(fā)展，生物技術(shù)也實(shí)現(xiàn)了不斷地創(chuàng)新和發(fā)展，在植物檢疫中得到了更加廣泛的應(yīng)用，我們應(yīng)積極對(duì)當(dāng)前快速發(fā)展的生物技術(shù)進(jìn)行了解，從而提高植物檢疫的效果。

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