羊屠宰環(huán)節(jié)布魯氏菌病檢疫漏檢的初步定量風險評估

王君瑋，趙 格，雷宇平，熊仲良，蓋文燕，謝建華，王治維，李 巖，王玉東，王 娟

（1.中國動物衛(wèi)生與流行病學中心，農業(yè)部畜禽產品質量安全風險評估實驗室，山東青島 266032；2.山西省動物疫病預防控制中心，山西太原 030027；3.重慶市動物疫病預防控制中心，重慶 401120；4.新疆生產建設兵團畜牧獸醫(yī)工作總站，新疆烏魯木齊 830063）

羊屠宰環(huán)節(jié)布魯氏菌病檢疫漏檢的初步定量風險評估

王君瑋1，趙 格1，雷宇平2，熊仲良3，蓋文燕1，謝建華3，王治維2，李 巖4，王玉東1，王 娟1

（1.中國動物衛(wèi)生與流行病學中心，農業(yè)部畜禽產品質量安全風險評估實驗室，山東青島 266032；2.山西省動物疫病預防控制中心，山西太原 030027；3.重慶市動物疫病預防控制中心，重慶 401120；4.新疆生產建設兵團畜牧獸醫(yī)工作總站，新疆烏魯木齊 830063）

[目的] 評估屠宰環(huán)節(jié)布魯氏菌病漏檢對屠宰從業(yè)人員和消費環(huán)節(jié)羊肉消費者的潛在健康風險及其干預措施。[方法] 利用屠宰環(huán)節(jié)肉品風險評估專項監(jiān)測中的定量監(jiān)測數據，以及文獻檢索數據、專家咨詢和調研結果，采用@RISK軟件，分析估計屠宰環(huán)節(jié)布魯氏菌病檢疫漏檢情況下的感染人數和消費者因烹調不當發(fā)生布魯氏菌感染的風險。[結果] 構建了屠宰環(huán)節(jié)布魯氏菌病漏檢感染風險模型。假設接觸漏檢羊感染布魯氏菌病的概率為20%，那么0.001%、0.08%、1.5%三種漏檢概率可能導致的感染人數分別為0～4人、0～114人和7～1 829人（90%置信區(qū)間）；不同接觸感染概率的感染人數有較大差異：5%概率時每年有0～541人可能感染布魯氏菌?。?0%概率時，多數情況下有155人感染布魯氏菌病，最多可達到6 473人。應用該模型對某省居民消費漏檢布魯氏菌病羊肉后新增布魯氏菌病感染人數的估算結果表明：按照0.1%概率計算，該省2016年度屠宰313.25萬只羊可能新增布魯氏菌病感染病例111～148例（90%置信區(qū)間）。如果因廚房生熟不分、烹調不當等因素而使感染概率提高至1%，則可能出現1 234～1 352個新增病例。[結論] 羊屠宰環(huán)節(jié)存在布魯氏菌病檢疫漏檢現象，從業(yè)人員受布魯氏菌病感染風險較高；消費環(huán)節(jié)存在因烹調不當而導致的布魯氏菌病感染風險；應加強養(yǎng)殖環(huán)節(jié)羊群布魯氏菌病的控制和宰前檢疫，提升從業(yè)人員和消費者對布魯氏菌病危害的認知水平。

布魯氏菌??；風險評估；檢疫漏檢；感染；屠宰環(huán)節(jié)

布魯氏菌病是由布魯氏菌屬（Brucella）細菌引起的牛、羊、豬、鹿、犬等哺乳動物和人類共患的一種傳染病。我國將其列為二類動物疫病。該屬細菌包括羊種布魯氏菌（B.melitensis），又稱馬耳他布魯氏菌。感染母畜常表現流產、屢配不孕等癥狀[1]。人感染后易轉為慢性及反復發(fā)作，在全身多處引起遷徙性病變[2]。

目前，全球已有170多個國家和地區(qū)曾報告發(fā)生人畜布魯氏菌病疫情。20世紀50年代，我國布魯氏菌病疫情廣泛流行。20世紀80～90年代，由于國家加大防控力度，疫情降至歷史最低水平。近年來，隨著我國家畜飼養(yǎng)量不斷增加，動物及其產品流通頻繁，部分地區(qū)布魯氏菌病呈持續(xù)上升勢頭。據統(tǒng)計，2015年全國報告人間布魯氏菌病病例56 989例，人間病例處于歷史高位；對布魯氏菌病重點地區(qū)22個縣的248個定點場群的監(jiān)測與流行病學調查結果顯示，牛、羊的個體陽性率分別達到3.1%、3.3%，群體陽性率分別達到29%、34%[3]。人畜間布魯氏菌病疫情仍較嚴重。

飼養(yǎng)放牧是人感染布魯氏菌病的重要因素。接觸布魯氏菌病羊及其流產物、布魯氏菌污染的物品，從事屠宰、生鮮羊肉加工、銷售等活動均可引起布魯氏菌病[4-5]。此外，攝入未經完全烹飪處理的受布魯氏菌污染的羊肉及其制品也存在感染風險[4，6]。本研究對近年來屠宰環(huán)節(jié)羊血清中布魯氏菌感染抗體監(jiān)測結果分析，初步評估因檢疫漏檢可能導致人感染布魯氏菌病的風險，并提出風險管理建議。

1 材料與方法

1.1 數據來源

2015年以來畜禽產品病原微生物風險評估項目的監(jiān)測數據：共監(jiān)測進入屠宰線羊只2 927只，驗證血清樣品392份，檢疫漏檢率為0.27%。監(jiān)測樣品分別采自山東、重慶、山西、內蒙古和新疆等5個省份的7個羊屠宰場，共11批次（表1）。

表1 部分屠宰場屠宰環(huán)節(jié)羊血清樣品布魯氏菌病抗體狀況 （單位：只/份）

通過文獻檢索獲得的布魯氏菌流行率分別為：在畜群，個體流行率為3.3%[3]；經換算獲得的人間布魯氏菌病流行率為0.004%。2015—2016年羊屠宰數量部分數據，由中國肉類協(xié)會提供。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法。樣品檢測按照《國家布魯氏菌病防治計劃（2016—2020）》[3]要求和謝建華等[7]的確認方法進行。程序：采用RBPT（GB/T 18646）初篩，布魯氏菌cELISA試劑盒（INGEZIM BRUCELLA COMPAC 2.0，INGENASA）檢測確診。對RBPT或cELISA檢測陽性的樣品進一步用RIA試劑盒（INGEZIM IDR，INGENASA）進行免疫和自然感染鑒別檢測，以確定是否為布魯氏菌自然感染。

1.2.2 羊肉-布魯氏菌組合的模型假設。本研究構建的模型分為屠宰、消費兩個過程。假定在屠宰環(huán)節(jié)、羊肉消費前存儲環(huán)節(jié)的布魯氏菌在羊肉中的濃度沒有增長變化，從業(yè)人員屠宰過程中通過接觸羊肉，居民通過食用未熟透羊肉或廚房內交叉污染即食的涼菜而導致布魯氏菌感染的發(fā)生?？紤]到數據來源，本研究的評估模型分別采用進入屠宰線的羊只在屠宰過程中與屠宰從業(yè)人員接觸感染模型、羊肉消費過程中未完全烹調熟透消費模型，暫未采用廚房內交叉污染即食涼菜而被居民攝入感染的模型。模型所采用的主要變量、分布假設以及數據來源等見表2。此外，假定從不同感染羊只獲得的布魯氏菌對人均有相同的致病力，且食用漏檢羊肉，即有10%的感染概率。

表2 屠宰和消費環(huán)節(jié)定量風險評估的模型參數

1.2.3 模型擬合與分析。對所有數據通過EXCEL進行統(tǒng)計分析。羊肉-布魯氏菌組合模擬測算布魯氏菌病檢疫漏檢概率、檢疫漏檢后屠宰環(huán)節(jié)與屠宰從業(yè)人員接觸感染概率以及漏檢屠宰后攜帶布魯氏菌的羊肉進入消費鏈概率的定量風險評估模型運算，均采用@RISK軟件（Palisade Corporation，7.0.0專業(yè)版，2015）進行。模擬迭代10 000次，用情景分析方法評估干預措施對于降低屠宰環(huán)節(jié)布魯氏菌病感染風險的作用。

1.2.4 模型應用。應用構建的布魯氏菌檢疫漏檢感染模型，評估測算某省人間布魯氏菌病新增病例數。某省2015—2016年度羊群布魯氏菌病流行率為3.3%，經專項監(jiān)測發(fā)現屠宰環(huán)節(jié)布魯氏菌病感染漏檢率為0.08%。2016年，全省共屠宰羊313.25萬只。假設布魯氏菌病羊檢疫漏檢后每只羊的羊肉可供50人食用，進入人間消費鏈后引起人發(fā)生布魯氏菌病的概率為0.1%和1%，應用構建模型估算并比較兩種概率情況下，該省2016年度可能新增的人間布魯氏菌病感染病例數。

2 結果

2.1 羊群布魯氏菌檢疫漏檢屠宰羊只的流向情景樹

經調研分析，羊只經官方獸醫(yī)檢疫后進入屠宰環(huán)節(jié)。羊只經屠宰后，分割羊肉或帶骨羊肉直接進入市場銷售，進入居民消費環(huán)節(jié)。部分中大型屠宰場羊只屠宰后進一步分割加工處理，或冷凍暫時存放待售，或直接銷售（圖1）。

圖1 布魯氏菌病漏檢羊只進入屠宰、消費環(huán)節(jié)情景樹

2.2 部分省區(qū)每年羊屠宰環(huán)節(jié)布魯氏菌病檢疫漏檢數量的概率估計結果

按照每個屠宰場日屠宰量最少約10只，多數約150只，最多3 000只計算，全年屠宰200 d（200 d/360 d），每年屠宰羊只數量呈三角分布（RiskTriang（10，150，3 000））。根據近年來專項監(jiān)測結果分析，檢疫漏檢率最大值為2.7%，一般為0.08%（最可能值），經擬合后檢疫漏檢概率呈pert分布（RiskPert（0，0.08，2.7））。經模擬迭代10 000次后，該年屠宰規(guī)模下檢疫漏檢數量分布如圖2所示。從圖中可看出，最小漏檢數量為0，最大漏檢數量可達到9 542只，多數情況下可能漏檢布魯氏菌病羊88只。漏檢數量在42～3 600只之間的比例占到90%。因此，漏檢率（多數為0.08%）雖然不高，但由于屠宰基數大，總的漏檢數量仍不可忽視。

圖2 羊屠宰場全年布魯氏菌病漏檢離散概率模擬估計

2.3 屠宰環(huán)節(jié)從業(yè)人員感染布魯氏菌風險的估計

2.3.1 不同漏檢概率情況下屠宰線人員感染布魯氏菌病的人數估計比較。布魯氏菌病檢疫漏檢概率分布呈pert分布（RiskPert（0，0.08，2.7））。假設屠宰人員接觸檢疫漏檢羊只感染布魯氏菌病的風險概率為2%，且每只漏檢羊在屠宰線上與10人接觸，那么在多數情況下可能感染布魯氏菌病人數有15人，最多可達2 137人。按照2016年度風險監(jiān)測時漏檢率0.08%估算，感染布魯氏菌病人數可能在0～114人之間，其中9人感染的幾率最大。當漏檢率從0.001%提高到1.5%時（漏檢率提高1 500倍），人感染布魯氏菌病病例數將從0.001%漏檢率時可能沒有人感染，增加到1.5%漏檢率時至少有7人感染，最大程度的感染人數將增加457.3倍（1 829/4）。三種漏檢率情況下可能導致的感染人數90%可能分布在0～4人（num—0.2—001）、0～114人（num—0.2—08）和7～1 829人（num—0.2—15）（95%置信區(qū)間）（圖3）。

2.3.2 不同感染率情況下屠宰人員感染人數估計。調查15名專家意見，就屠宰人員接觸檢疫漏檢布魯氏菌病感染羊只感染發(fā)病的可能性進行估計，對提供的發(fā)病概率數據擬合呈極值分布（RiskExtvalue（0，0.6））。每年可能感染布魯氏菌病的人數為0～7 259人，90%的可能會出現7～1 862人感染布魯氏菌病。假設不同防護水平的屠宰環(huán)境可分別導致5%和60%的感染概率，則兩種不同感染概率情況下，屠宰人員感染人數有顯著差異（圖4）。人員接觸感染概率為5%時，每年有0～541人可能染病，多數情況下有1例布魯氏菌病感染病例。而因防護不當接觸感染概率提高至60%時，多數情況下可能約有155人發(fā)病，最多時可導致6 473人感染布魯氏菌?。?5%置信區(qū)間）。

圖3 羊屠宰環(huán)節(jié)布魯氏菌病不同漏檢率情況下引起從業(yè)人員感染的人數估計

圖4 屠宰環(huán)節(jié)布魯氏菌病漏檢羊只與屠宰人員接觸后感染布魯氏菌病的不同人數比較

2.4 居民消費布魯氏菌污染羊肉感染布魯氏菌病風險的模擬估計

根據專家意見分析，檢疫漏檢1只布魯氏菌病感染羊后，污染羊肉通過烹調（肉串、涮羊肉）處理導致消費者感染布魯氏菌病的概率約為0.1%（按每只羊可供50人食用）。根據模型計算，如果消費前烹飪得當，則漏檢羊只導致感染的幾率幾乎為0，但是如果未經熟透處理，則食用后最多感染布魯氏菌病人數將達到518人。多數情況下每年可能有1人感染布魯氏菌病，有90%可能感染的人數集中在2～181人之間（95%置信區(qū)間）（圖5）。

圖5 居民消費被布魯氏菌污染羊肉感染布魯氏菌病風險的概率估計

2.5 應用模型估算某省居民消費檢疫漏檢羊肉感染布魯氏菌病的新增人數

2016年度某省共屠宰羊313.25萬只（Sm）。按照文獻[3]調查結果羊布魯氏菌病個體陽性率3.3%計算，則全省每年在進入屠宰場前銷毀布魯氏菌病陽性羊只約為10.3萬只。按照布魯氏菌病漏檢率（Fd）為0.08%計算，則漏檢羊只為：

按照構建的羊肉-布魯氏菌消費模型假設，對漏檢羊只數Fm進行取整數計算ROUNDUP（Fm，0）=2 586；模型假設布魯氏菌病羊檢疫漏檢后每只羊的羊肉可供50人食用，進入人間消費鏈引發(fā)布魯氏菌病的概率為0.1%，則食用羊肉人數（mou）為：（ROUNDUP（Fm，0））×50。經模擬迭代10 000次后，該省2016年度可能因食用檢疫漏檢羊肉新增布魯氏菌病感染病例111～148例（90%置信區(qū)間），最多可達175例。如果因為廚房生熟不分、烹調習慣等而使感染概率提高至1%時，則可能出現1 234～1 352個新增病例（90%置信區(qū)間），最少有1 157例新增病例，最多可有1 428例新增病例（圖6）。隨著感染概率遞增，感染人數也會有一定程度的增加。

圖6 某省漏檢羊只導致新增感染人數估計比較（人感染概率為0.1%和1%）

3 討論

3.1 屠宰環(huán)節(jié)檢疫漏檢是布魯氏菌病由畜間向人間傳播的風險途徑之一

從模擬結果可知，不同漏檢率導致的屠宰線人員感染人數有很大差異，漏檢羊只肉品不完全烹調處理后食用也會給消費者帶來布魯氏菌病的染病風險。由于產地檢疫、宰前檢疫手段不足等諸多問題，我國布魯氏菌病檢疫漏檢現象時有發(fā)生[6-7]。從近年來開展的屠宰環(huán)節(jié)肉品質量安全風險評估專項監(jiān)測結果來看，布魯氏菌病血清學檢測發(fā)現存在一定的自然感染漏檢風險，漏檢率一般為0.08%左右，有的地區(qū)高達2.7%[7]。個別地區(qū)屠宰環(huán)節(jié)羊肉中布魯氏菌帶菌率達到0.78%～6.71%，甚至有的區(qū)域出現大中型羊屠宰場布魯氏菌污染風險（6.23%）高于小型屠宰場（0.48%）的現象[7]。此外，本研究在情景樹構建中僅考慮接受檢疫監(jiān)管部門檢疫的羊群，而沒有列入市場或餐館隨機屠宰和非受控屠宰的羊只。因此，羊只因檢疫漏檢而導致布魯氏菌病散播的風險概率可能會因區(qū)域不同而有較大差異。

3.2 布魯氏菌病由畜間向人間傳播的風險評估研究有待進一步加強

理論上講，布魯氏菌可通過飲用生鮮乳、接觸流產胎兒及分泌物、免疫接種、羊群采樣、剪毛、放牧、屠宰等多種途徑感染。但哪種途徑風險程度更大，這些途徑對布魯氏菌感染的貢獻大小排序如何，均沒有相應的數據支撐。歐洲食品安全局（EFSA）針對綿羊、山羊奶中的布魯氏菌危害開展了定量風險評估，認為飲用生鮮奶和人感染布魯氏菌病有著密切的關系[8]，但尚未有針對羊肉中存在布魯氏菌污染的風險評估報道。本研究僅對屠宰從業(yè)人員的風險進行了初步評估，但由于基礎數據缺乏，部分采用了專家意見的半定量評估方法，因此限制了評估結果輸出的精準性和科學性。此外，運輸儲存中布魯氏菌的消長變化，感染羊只屠宰后羊肉中的菌量大小，飲食用生鮮羊乳與肉品哪種對人感染布魯氏菌病貢獻值更大，布魯氏菌與受染人群的劑量-反應關系，等等，均有待于進一步研究和構建評估模型。

3.3 迫切需要加強對布魯氏菌病免疫與自然感染鑒別檢測技術的研究

《國家布魯氏菌病防治計劃（2016—2020年）》要求[3]：一類地區(qū)對羊群采取全面免疫措施；二類地區(qū)羊的個體檢測陽性率≥0.5%時，可以有條件地實施免疫。但免疫后如何鑒別疫苗免疫和自然感染又成為獸醫(yī)檢疫和動物衛(wèi)生監(jiān)督執(zhí)法人員的棘手問題，這一定程度上增加了自然感染羊只進入屠宰環(huán)節(jié)的風險。本研究對RBPT或cELISA檢測陽性的樣品，進一步采用基于poly-B抗體檢測的布魯氏菌放射免疫擴散實驗（RIA）試劑盒（INGEZIM IDR，INGENASA），進行免疫和自然感染鑒別檢測，取得了較好的效果。該方法用于區(qū)分牛布魯氏菌病野毒感染和疫苗免疫的特異性達92%以上[9]。其在西班牙布魯氏菌病凈化中發(fā)揮了重要作用。

3.4 屠宰從業(yè)人員防護意識需要加強

從問卷調查和調研情況看，屠宰環(huán)節(jié)的從業(yè)人員多數對布魯氏菌病感染風險和環(huán)節(jié)不了解，個人防護意識淡薄，屠宰過程中幾乎不采取個人防護措施。但養(yǎng)殖和屠宰環(huán)節(jié)從業(yè)人員感染布魯氏菌病現象時有報道[10-11]。寧華杰等[4]通過對2010—2016年湖南省長沙市家畜布魯氏菌病與人間布魯氏菌病感染情況比較發(fā)現，調查區(qū)域的屠宰銷售人員感染布魯氏菌病人數占總體感染人數的比例高達18%。因此，建議加強對從業(yè)人員布魯氏菌病危害與預防措施的宣傳，提高從業(yè)人員的防護意識。

3.5 完全熟制可避免布魯氏菌病漏檢羊肉感染消費者

從評估結果看，如果漏檢羊肉購回后消費前烹調不徹底，則存在很高的感染風險。廚房生熟菜板或刀具不分，攜帶有布魯氏菌的肉品污染了涼拌菜等都可能導致布魯氏菌在人間的感染散播。建議加大對我國居民正確烹調習慣的宣傳，消除或降低因烹調不熟，導致布魯氏菌病漏檢羊肉制品傳播布魯氏菌病的風險。

致謝：中國肉類協(xié)會劉蕾女士提供了部分肉類屠宰加工數據。

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（責任編輯：孫榮釗）

Preliminary Quantitative Risk Assessment on Failed Detection of Brucellosis in Sheep Slaughterhouse

Wang Junwei1，Zhao Ge1，Lei Yuping2，Xiong Zhongliang3，Gai Wenyan1，Xie Jianhua3，Wang Zhiwei2，Li Yan4，Wang Yudong1，Wang Juan1
（1. Laboratory of Quality and Safety Risk Assessment for Animal Products of Ministry of Agriculture，China Animal Health and Epidemiology Center，Qingdao，Shandong，266032；2. Animal Disease Prevention and Control Center of Shanxi Province，Taiyuan，Shanxi 030027；3. Chongqing Animal Disease Prevention and Control Center，Chongqing 401120；4. Animal Husbandry and Veterinary Work Station of Xinjiang Production and Construction Corps，Urumqi，Xinjiang 830063）

[Objective] To assess the risk and potential interventions of failed Brucellosis detection to butchering staffs in sheep slaughtering sector and to those mutton consumers. [Methods] Using the quantitative monitoring data in special monitoring of meat risk assessment project，the data of bibliographic information retrieval，the expert consultations and investigation results，the risk of Brucellosis infection due to failed detection in slaughtering sector and improper cooking of consumers in China was assessed through @ RISK software analysis. [Results] The infection risk model offailed Brucellosis detection to butchering workers in slaughterhouse was established. Assuming 20% people would infect the disease if contacting Brucellosis false negative animals，0～4，0～114 and 7～1 829 people would be respectively infected under the condition of three kinds of false dismissal probability including 0.001%，0.08% and 1.5%. In the case of different contact infection probability，the number of infection cases varied significantly. When the infection probability was 5%，the infection cases were between 0 and 541 per year，when the probability reached 60%，most likely 155 person would be infected and maximum number could be 6 473. Using the model to estimate the new Brucellosis infection cases after eating mutton carrying brucella in one province in 2016，the results showed that，slaughtering 3.132 5 million sheep could lead to 111～148 Brucellosis infection cases（90% confidence interval）in case that the infection rate was 0.1%. If the infection probability increased to 1% due to inseparated treatment of raw and cooked meat in kitchen or cooking habits，the new infection cases might increase to 1 234～1 352. [Conclusion] The phenomenon of failed detection of Brucellosis in sheep slaughtering sector existed，and the risk of brucella infection to workers was rather high. In the link of consumption，risk of brucella infection also existed due to improper cooking. At last，the control of Brucellosis in breeding sector should be strengthened，as well as the quarantine before being slaughtered，and the awareness level of workers and consumers to the harm of Brucellosis should be raised.

Brucellosis；risk assessment；failed detection；infection；the link of slaughtering

S851.34

C

1005-944X（2017）09-0031-06

10.3969/j.issn.1005-944X.2017.09.009

國家農產品質量安全風險評估項目計劃（GJFP201600703，GJFP201700703）