三種感染標(biāo)志物診斷兒童膿毒癥細(xì)菌感染的價(jià)值

莫慶儀，周濤，黃曉雯，梁桂明，馬力忠，盧象對(duì)

(南方醫(yī)科大學(xué)附屬中山博愛醫(yī)院兒科1、檢驗(yàn)科2，廣東中山528403)

三種感染標(biāo)志物診斷兒童膿毒癥細(xì)菌感染的價(jià)值

莫慶儀1，周濤1，黃曉雯1，梁桂明1，馬力忠1，盧象對(duì)2

(南方醫(yī)科大學(xué)附屬中山博愛醫(yī)院兒科1、檢驗(yàn)科2，廣東中山528403)

目的探討C反應(yīng)蛋白(CRP)、降鈣素原(PCT)及中性粒細(xì)胞CD64對(duì)兒童膿毒癥細(xì)菌感染的診斷價(jià)值。方法選取我院2015年6月至2016年12月間收治的膿毒癥細(xì)菌感染患者45例為觀察組，同時(shí)間段健康兒童45例為對(duì)照組。檢測并比較觀察組患者治療前后CRP、PCT及中性粒細(xì)胞CD64水平的差異，并與對(duì)照組受檢者進(jìn)行比較，觀察其診斷效力。結(jié)果治療前，觀察組患者和對(duì)照組的CRP[(21.4±6.5)mg/L vs(6.6±2.3)mg/L]、PCT [(11.9±3.6)μg/L vs(0.5±0.2)μg/L]及中性粒細(xì)胞CD64[(66.7±18.4)MFI vs(24.5±6.2)MFI]水平比較，觀察組均明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；觀察組患者治療前后的CRP[(13.6±4.2)mg/L vs(21.4±6.5)mg/L]、PCT [(4.8±1.7)μg/L vs(11.9±3.6)μg/L]及中性粒細(xì)胞CD64[(39.8±15.6)MFI vs(66.7±18.4)MFI]水平比較，治療后均明顯低于治療前，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但仍均明顯高于對(duì)照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；三種感染標(biāo)志物聯(lián)合應(yīng)用明顯提高了診斷效力，其診斷敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值及準(zhǔn)確度分別達(dá)95.6%、97.8%、97.7%、95.7及96.7%。結(jié)論膿毒癥細(xì)菌感染患者均存在CRP、PCT及中性粒細(xì)胞CD64水平升高，三者聯(lián)合應(yīng)用可以明顯提高診斷效力。

膿毒癥；細(xì)菌；C反應(yīng)蛋白；降鈣素原；中性粒細(xì)胞CD64

兒童膿毒癥細(xì)菌感染起病急驟、進(jìn)展迅速，若得不到及時(shí)診治，可能導(dǎo)致膿毒癥休克、多器官功能衰竭，患者死亡率極高。研究顯示，兒童膿毒癥細(xì)菌感染的死亡率高達(dá)23.3%～47.4%[1]。膿毒癥的早期診斷難度較大，主要依靠患者臨床表現(xiàn)、血常規(guī)檢查、細(xì)菌相關(guān)檢查等，但其均缺乏特異性[2]。C-反應(yīng)蛋白(CRP)及降鈣素原(procalcitonin，PCT)是細(xì)菌性感染敏感指標(biāo)，對(duì)評(píng)價(jià)感染病變存在、嚴(yán)重程度方面具有一定的價(jià)值[3]。中性粒細(xì)胞CD64可以識(shí)別IgGFc片段受體，能夠更敏感的反應(yīng)炎性反應(yīng)、免疫反應(yīng)的存在[4]。本研究旨在通過對(duì)照研究，探討CRP、PCT及中性粒細(xì)胞CD64對(duì)兒童膿毒癥細(xì)菌感染的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取我院2015年6月至2016年12月期間收治的膿毒癥細(xì)菌感染患者45例為觀察組，其中男性26例，女性19例；年齡3～13歲，平均(8.5± 1.2)歲；病程1～7 d，平均(4.1±1.1)d。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合膿毒癥診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]：體溫＞38.3℃或≤36℃，心率≥90次/min或高于同齡正常值2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差以上，嚴(yán)重水腫，血糖＞7.7 mmol/L；白細(xì)胞計(jì)數(shù)＞12×109/L或＜4×109/L，CPR及PCT高于正常值2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差以上；血氧降低＜90/60 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)；尿量＜0.5 mL/kg·h達(dá)2 h以上；乳酸＞1 mmol/L。②年齡＜14歲；③初次就診；④臨床、實(shí)驗(yàn)室檢查及影像學(xué)檢查資料完整；⑤符合知情同意原則。排除標(biāo)準(zhǔn)：①惡性腫瘤；②先天畸形；③自身免疫系統(tǒng)疾患及結(jié)締組織??；④嚴(yán)重創(chuàng)傷及應(yīng)激狀態(tài)；⑤2周內(nèi)手術(shù)史者；⑥嚴(yán)重心肝腎功能不全；⑦排除死亡及其他各種原因不能配合研究者。選擇同時(shí)間段健康兒童45例為對(duì)照組，其中男性25例，女性20例；年齡3～14歲，平均(8.2±1.5)歲。兩組受檢者在性別、年齡方面比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 治療方法入院后觀察組患者進(jìn)行血培養(yǎng)，根據(jù)藥敏實(shí)驗(yàn)給予抗感染治療，其他治療包括補(bǔ)液治療、維持酸堿、電解質(zhì)平衡治療等對(duì)癥支持治療。

1.3 觀察指標(biāo)檢測并觀察膿毒癥患者治療前后、對(duì)照組CRP、PCT及中性粒細(xì)胞CD64水平的差異。計(jì)算和比較CRP、PCT及中性粒細(xì)胞CD64對(duì)兒童膿毒癥細(xì)菌感染的診斷效力。

1.4 檢測方法分別于治療前、治療后2周抽取觀察組患者清晨空腹靜脈血5 mL，檢測CPR、PCT及中性粒細(xì)胞CD64。并取對(duì)照組受檢者清晨空腹靜脈血檢測CPR、PCT及中性粒細(xì)胞CD64為對(duì)照。血液標(biāo)本經(jīng)抗凝、離心(美國BECKMAN A1330011型離心機(jī)，3 000 r/min離心10 min)處理后冷藏(-20℃環(huán)境)備檢。檢查設(shè)備選擇美國Becton-Dickinson公司生產(chǎn)的流式細(xì)胞分析儀，CRP檢測采用免疫比濁法，PCT檢測采用免疫熒光雙抗體夾心法，中性粒細(xì)胞CD64檢測采用流式細(xì)胞術(shù)。試劑盒均由深圳國賽生物技術(shù)有限公司提供。以CRP≥8.0 mg/L、PCT≥0.5 ug/L、中性粒細(xì)胞CD64≥35 MFI為陽性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，正態(tài)分布的各統(tǒng)計(jì)指標(biāo)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示，組間數(shù)值比較采用t檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性分析，均以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 觀察組患者治療前后CRP、PCT及中性粒細(xì)胞CD64水平與對(duì)照組比較治療前，觀察組患者的CRP、PCT及中性粒細(xì)胞CD64水平均明顯高于對(duì)照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。治療后，觀察組患者CRP、PCT及中性粒細(xì)胞CD64水平均明顯低于治療前，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但仍均明顯高于對(duì)照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 觀察組患者治療前后CRP、PCT及中性粒細(xì)胞CD64水平與對(duì)照組比較()

表1 觀察組患者治療前后CRP、PCT及中性粒細(xì)胞CD64水平與對(duì)照組比較()

注：與對(duì)照組比較，at=8.765、9.857、10.654、3.482、4.812、5.235，P＜0.05；與觀察組治療前比較，bt=5.436、7.637、8.564，P＜0.05。

組別觀察組例數(shù)45時(shí)間治療前治療后對(duì)照組45 CRP(mg/L) 21.4±6.5a13.6±4.2ab6.6±2.3 PCT(mg/L) 11.9±3.6a4.8±1.7ab0.5±0.2中性粒細(xì)胞CD64(MFI) 66.7±18.4a39.8±15.6ab24.5±6.2

2.2 CRP、PCT及中性粒細(xì)胞CD64診斷膿毒癥細(xì)菌感染的效力三種感染標(biāo)志物中，CRP對(duì)膿毒癥細(xì)菌感染患者診斷效力最低，中性粒細(xì)胞CD64最高。三種聯(lián)合應(yīng)用明顯提高了診斷效力，其診斷敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值及準(zhǔn)確度分別達(dá)95.6%、97.8%、97.7%、95.7及96.7%。

表2 CRP、PCT及中性粒細(xì)胞CD64診斷膿毒癥細(xì)菌感染的效力

3 討論

若細(xì)菌感染得不到有效的控制，感染擴(kuò)散及反復(fù)的刺激會(huì)導(dǎo)致全身性惡性炎癥性反應(yīng)性疾病，稱為膿毒癥。膿毒癥患者體內(nèi)多個(gè)器官存在感染，細(xì)菌隨著血液循環(huán)播散，導(dǎo)致機(jī)體免疫系統(tǒng)激活、炎性因子大量釋放，患者病情變化復(fù)雜，死亡率高[6]。及時(shí)和準(zhǔn)確的診斷是采取合理治療方案的基礎(chǔ)，以往膿毒癥的診斷依靠臨床癥狀體征，體溫、實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)及白細(xì)胞計(jì)數(shù)等常規(guī)檢查指標(biāo)，診斷效力有限，不能滿足臨床診療的需要。

CRP由肝臟合成和釋放，在急性炎性反應(yīng)及應(yīng)激狀態(tài)下合成明顯增加，它屬于一種急性相蛋白，反映機(jī)體非特異性免疫機(jī)制的功能，一般認(rèn)為CRP水平高于100 mg/L代表存在嚴(yán)重的炎性病變[7]。PCT是一種糖蛋白，含116個(gè)氨基酸，是降鈣素的前肽物質(zhì)。正常人血清PCT含量極低，但在炎性反應(yīng)及應(yīng)激狀態(tài)下，患者PCT水平會(huì)明顯升高，這可能與甲狀腺C細(xì)胞以外的其他細(xì)胞大量分泌有關(guān)。有研究顯示，膿毒癥細(xì)菌感染患者會(huì)抑制PCT分解成降鈣素，導(dǎo)致血清內(nèi)PCT積聚增多[8]。也有研究顯示，在嚴(yán)重炎性反應(yīng)的刺激下，膿毒癥細(xì)菌感染患者肝臟、腎臟、肌肉中會(huì)產(chǎn)生和釋放大量的PCT，且隨著患者病情的加重，其血清PCT水平明顯升高[9]。中性粒細(xì)胞CD64是免疫球蛋白超家族的一員，其分子量為72 kD，可以識(shí)別IgGFc片段受體。在膿毒癥細(xì)菌感染患者，細(xì)菌直接刺激或者通過釋放相關(guān)的炎性因子刺激中性粒細(xì)胞表達(dá)大量的CD64，在患者發(fā)病4～6 h，中性粒細(xì)胞CD64即可以明顯升高[10]。

本研究中，觀察組患者CRP、PCT及中性粒細(xì)胞CD64水平均顯著高于對(duì)照組，治療后，觀察組患者CRP、PCT及中性粒細(xì)胞CD64水平均顯著低于治療前，但仍均顯著高于對(duì)照組，說明膿毒癥細(xì)菌感染患者體內(nèi)CRP、PCT及中性粒細(xì)胞CD64水平存在顯著的升高，三者可以用于膿毒癥細(xì)菌感染患者的診斷。通過對(duì)三種診斷效力的分析，本研究顯示，CRP對(duì)膿毒癥細(xì)菌感染患者診斷效力最低，中性粒細(xì)胞CD64最高。三種感染標(biāo)志物聯(lián)合應(yīng)用明顯提高了診斷效力，其診斷敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值及準(zhǔn)確度均達(dá)95%以上。提示中性粒細(xì)胞CD64檢測對(duì)膿毒癥細(xì)菌感染的診斷效力更高，且通過CRP、PCT及中性粒細(xì)胞CD64的聯(lián)合檢測，更有利于對(duì)膿毒癥細(xì)菌感染進(jìn)行準(zhǔn)確的診斷。

綜上所述，膿毒癥細(xì)菌感染患者均存在CRP、PCT及中性粒細(xì)胞CD64，三者聯(lián)合應(yīng)用可以明顯提高診斷效力。

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Value of three kinds of infection markers in the diagnosis of bacterial infection in children with sepsis.

MO Qingyi1, ZHOU Tao1,HUANG Xiao-wen1,LIANG Gui-ming1,MA Li-zhong1,LU Xiang-dui2.Department of Pediatrics1, Department of Clinical Laboratory2,BOAI Hospital of Zhongshan Affiliated to Southern Medical University,Zhongshan 528403,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo investigate the diagnostic value of C-reactive protein(CRP),procalcitonin(PCT)and neutrophil CD64 in children with sepsis.MethodsA total of 45 children with bacterial infection,wo admitted to our hospital from June 2015 to December 2016,were selected as the research subjects.At the same time,45 healthy children were selected as the control group.The differences of CRP,PCT and neutrophil CD64 levels in the observation group before and after treatment,which also were detected and observed in the control group,and the diagnostic effectiveness were observed.ResultsBefore the treatment,the levels of CRP,PCT and neutrophil CD64 in the observation group were respectively(11.9±3.6)ug/L,(21.4±6.5)mg/L and(66.7±18.4)MFI,which were significantly higher than(6.6+ 2.3)mg/L,(0.5±0.2)ug/L,(24.5±6.2)MFI in the control group(P＜0.05).After the treatment,the levels of CRP,PCT and neutrophil CD64 in the observation group were(13.6±4.2)mg/L,(4.8±1.7)ug/L,(39.8±15.6)MFI,which were significantly lower than those before the treatment(P＜0.05),but they were all still significantly higher than those in the control group(P＜0.05).The combined use of three kinds of infection markers significantly improved the diagnostic efficacy, the diagnostic sensitivity,specificity,positive predictive value,negative predictive value and accuracy were 95.6%, 97.8%,97.7%,95.7 and 96.7%,respectively.ConclusionThe children with sepsis bacterial infection have elevated levels of CRP,PCT and neutrophil CD64 levels,and The combined use of three kinds of infection markers significantly improved the diagnostic effectiveness.

Sepsis;Bacteria;C reactive protein(CRP);Procalcitonin(PCT);Neutrophil CD64

R726

A

1003—6350（2017）16—2647—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.16.021

2017-03-08)

廣東省中山市科技局2015年度科技計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào)：2015SYF0104)

周濤。E-mail：taozhoul@163.com