血細胞形態(tài)學復(fù)檢標準的建立與應(yīng)用

劉萍 周淑美 江蘇省揚州市口腔醫(yī)院 （江蘇 揚州 225002）

血細胞形態(tài)學復(fù)檢標準的建立與應(yīng)用

劉萍 周淑美 江蘇省揚州市口腔醫(yī)院 （江蘇 揚州 225002）

目的：探討臨床樣本檢驗過程中血細胞形態(tài)學鏡檢標準的設(shè)立。方法：對本院2016年經(jīng)血液分析儀檢測中存在問題的臨床標本進行涂片鏡檢后原因統(tǒng)計和分析。結(jié)果：白細胞分類計數(shù)異常的占42.5%，血紅蛋白＜70g/L的占15.3%，血小板異常的占7.7%等。結(jié)論：當血液分析儀檢測結(jié)果白細胞總數(shù)高于20×109/L或低于4×109/L、血紅蛋白＜70g/L、血小板＞600×9/L或＜80×109/L時必須及時鏡檢，這樣才會使儀器檢測與傳統(tǒng)鏡檢完美結(jié)合，提高臨床應(yīng)用價值。

血細胞分析 復(fù)檢標準

隨著基礎(chǔ)醫(yī)學的深入研究和高新技術(shù)的應(yīng)用，血細胞分析儀的檢測水平進入了新的階段，新的檢驗參數(shù)為臨床提供了更多的診斷指標，促進了檢驗醫(yī)學的發(fā)展[1]，實現(xiàn)了真正意義上的全自動分析。

中華檢驗學會制訂復(fù)檢標準的原則，在保證篩選質(zhì)量的基礎(chǔ)上，盡量使復(fù)檢率降低[2]，本研究對本院經(jīng)血液分析儀檢測的大批量臨床檢驗標本結(jié)果進行了統(tǒng)計、篩查分析，探討臨床樣本檢驗過程中血細胞形態(tài)學鏡檢標準的設(shè)立，找到儀器高效性與鏡檢準確性的最佳結(jié)合點；通過儀器檢驗與鏡檢的比對，提高幼稚細胞、有核紅細胞等異常細胞形態(tài)學檢出率，增強臨床應(yīng)用價值。

1.材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣本。2013年1月～2016年12月經(jīng)血液分析儀檢測的10950次門診和住院患者，其中男5823人次，女5127人次。

1.1.2 儀器和試劑。光電MEK-7300P血細胞分析儀及其原裝配套試劑，奧林巴斯CX21顯微鏡。

1.2 方法

鏡檢時血涂片制備[3]采用手工推片法，盡量使用新鮮血液，若無新鮮血液則用混勻的抗凝血。在清潔干燥無塵無油脂的載玻片進1/3處，加一滴新鮮血液，用推片以30～45度角推出數(shù)張厚薄適宜，頭尾明顯，細胞分布均勻的合格涂片。采用瑞氏吉姆薩復(fù)合染色法后用普通光學顯微鏡人工分類200個有核細胞，并計算各類有核細胞所占百分率。相關(guān)操作參考《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進行。

2.結(jié)果

對2016年日本光電MEK-7300P血液分析儀檢測的10950份臨床標本結(jié)果進行了統(tǒng)計分析，其中儀器結(jié)果正常不需要復(fù)檢的標本數(shù)量為8160份，占檢測總數(shù)的74.4%，存在相關(guān)問題需要鏡檢標本為2790份，鏡檢率為25.5%。

2.1 根據(jù)國際血涂片復(fù)審準則[4-6]制定適合本院的鏡檢復(fù)審標準，見表1。

2.2 血細胞分析儀檢測結(jié)果異常需顯微鏡人工復(fù)檢標本的組成與例數(shù)，見表2。

2.3 經(jīng)顯微鏡鏡檢后存在的細胞學形態(tài)改變參考相關(guān)陽性圖片判斷標準[7]?？煞譃橐韵聨追N：

2.3.1 白細胞異常：細胞數(shù)量和比例改變，常見的包括中毒顆粒、空泡變性粒細胞可提示感染，見到原始細胞、及各幼稚階段細胞均提示白血病等惡性系統(tǒng)血液病。

2.3.2 紅細胞異常：成熟紅細胞明顯大小不一中央蒼白區(qū)擴大，提示缺鐵性貧血，可反過來對比儀器細胞直方圖分布，并檢查其與血紅蛋白檢測結(jié)果的相關(guān)性。

2.3.3 血小板異常：數(shù)量過多或過少均有臨床意義。對于儀器檢測血小板數(shù)量過少的標本，有部分病例在血片鏡檢中可見到5～7個血小板成簇可見的情況，若血片見到成簇血小板提示其數(shù)量不少，可能儀器在檢測體積偏小的血小板時由于光電的敏感性而導(dǎo)致遺漏。

3.討論

3.1 血細胞鏡檢標準的設(shè)立

在2790份臨床標本中，由于白細胞總數(shù)及分類異常復(fù)檢的標本量最多，占總復(fù)查樣本例數(shù)的47%。在出現(xiàn)報警中的白細胞總數(shù)、中性粒細胞百分比、幼稚粒細胞百分比、幼稚粒細胞的患者中，白細胞顯著增高，未分類等[8]。我們設(shè)定的標準為白細胞總數(shù)＞20×109/L，白細胞總數(shù)＜4×109/L，當儀器顯示白細胞分類計數(shù)無分類結(jié)果或伴有異常提示時，即使是白細胞數(shù)量在正常參考范圍內(nèi)，也是強制鏡檢的標準之一。

血紅蛋白＜70g/L需要鏡檢，往往與白細胞總數(shù)、血小板總數(shù)檢測結(jié)果具有相關(guān)性，此時必須復(fù)檢以防止再生障礙行貧血、免疫性溶血性貧血、白血病的存在，并對所有檢測數(shù)據(jù)比對評估方可發(fā)出檢驗報告。

當血小板數(shù)量＞600×9/L或血小板數(shù)量＜80×109/L，要及時鏡檢。由于血小板體積偏小，儀器的光電敏感性存在誤差，特別容易漏檢。復(fù)檢血片中血小板的形態(tài)非常重要，同時可以篩檢出血小板增多癥、免疫性血小板減少癥等特殊病例，大血小板增多，血小板凝集，血凝塊形成可使血小板假性減低[9]。

3.2 需要顯微鏡鏡檢2790份標本的異常血細胞形態(tài)特征分析

血涂片鏡檢是判斷血細胞形態(tài)病理變化的金標準，質(zhì)量高的鏡檢[10]包括觀察炎癥引起的白細胞“毒性”變化、白血病病理變化、貧血紅細胞形態(tài)變化、血小板形態(tài)特點，以及血液內(nèi)寄生蟲檢查，這些是任何血細胞分析儀不可取代的。有資料顯示[11]，國內(nèi)各醫(yī)院血細胞分析儀實際鏡檢率在0～15%，大部分＜5%。本組對所有鏡檢標本的異常情況做如下分析：

白細胞異常：白細胞總數(shù)＞20×109/L的64例中大多數(shù)因為急性感染和化膿性炎癥引起，涂片鏡檢可見核左移，桿狀核增多，伴少數(shù)晚幼粒、中幼粒細胞，有時可見中毒顆粒、空泡變性、核變性等質(zhì)的改變。白細胞總數(shù)＜4×109/L的76例中的涂片中常見核右移，分葉核增多，5葉核以上的細胞＞3%；淋巴細胞形態(tài)學的改變，其中有21例異常淋巴細胞均大于0.13，最多為0.56，且以不規(guī)則異常淋巴細胞為主，原始細胞、各幼稚階段細胞的存在均提示白血病等惡性系統(tǒng)血液病。

紅細胞異常：血紅蛋白＜70g/L的428例中最多見的是小細胞低色素性貧血，涂片中多為低色素小細胞，也可見淚滴狀、口形、棘形、球形、靶形、嗜堿性點彩紅細胞等。

表1 . 血細胞分析儀檢測結(jié)果異常需顯微鏡人工復(fù)檢的標準

表2 . 血細胞顯微鏡復(fù)檢原因分類

血小板異常：在217例血小板異常中多數(shù)為數(shù)量的改變，血小板形態(tài)正常，也有部分形態(tài)上有異常改變，巨大、退變及不典型畸形血小板。

3.3 通過本組大樣本臨床檢驗的統(tǒng)計和比對，我們初步從白細胞、紅細胞、血小板等方面設(shè)立了血細胞形態(tài)學鏡檢的標準，找到了儀器高效性與鏡檢準確性的最佳結(jié)合點，并對鏡檢過程中經(jīng)常出現(xiàn)的異常形態(tài)學特征進行了細致的分類分析，增加了儀器檢驗與手工檢驗的吻合度，標準制定的規(guī)則有效的[12]提高了血細胞檢驗的臨床應(yīng)用價值。由于儀器設(shè)備的配置不同，以及顯微鏡鏡檢的經(jīng)驗差異，在實際工作中我們還需根據(jù)具體情況，及時溝通臨床，以期得到更客觀更準確的檢驗結(jié)果。

[1] 叢玉隆,樂家新.再論血細胞分析技術(shù)進展與臨床應(yīng)用[J].中華檢驗醫(yī)學雜志,2007,30(4):365-369.

[2] 魏峰,潘楊.國際血液分析儀41條復(fù)檢規(guī)則的臨床應(yīng)用評價及實驗室復(fù)檢標準的建立[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2011,8(22):2727-2729.

[3] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜,等.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學出版社,2006:123.

[4] Barnes PW,McFadden SL,Machin SJ,et al.The internation consensus group for hematology review:suggested criteria for action following automated CBC and WBC differenial analysis [J].Lab Hematol,2005,11(2):83-90.

[5] XE-2100血細胞分析復(fù)檢標準制定協(xié)作組.Sysmex XE-2100自動血細胞分析和血細胞分類的復(fù)檢規(guī)則探討[J].中華檢驗醫(yī)學檢雜志,2008,31(2):752-757.

[6] 王厚芳,孫芾,于貴杰,等.國際血細胞復(fù)檢規(guī)則在貝克曼-庫爾特系列血細胞分析儀上的應(yīng)用及改進方案[J].中華檢驗醫(yī)學雜志,2008,31(1):758-762.

[7] 叢玉隆,王昌富,樂家新,等.血細胞自動化分析后血涂片復(fù)審標準制的原則與步驟[J].中華檢驗雜志,2008,31(7):729-730.

[8] 張書鳳,何艷群,焦炳欣,等.Sysmex XE-5000血液分析儀復(fù)檢規(guī)則的建立與評估[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2015,12(24):3527-3573.

[9] 劉非,梁綺華,姜志勇,等.血小板分布異常原因分析及對血小板計數(shù)的影響[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2014,35(6):726-728.

[10] 李小平,伍啟康,邱志琦.血涂片復(fù)審準則在血細胞分析儀中的適用性評估[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2010,31(5):432-433.

[11] 古旭東.5454份血涂片染色鏡檢分析[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2007,4(8):742-743.

[12] 陳亞芳,毛穎華.血細胞分析復(fù)檢規(guī)則的建立及其應(yīng)用[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2015,5(9):1297-1298.

Establishment and Application of Blood Cell Morphological Re - examination Standard

LIU Ping ZHOU Shu-mei Yangzhou Stomatological Hospital of Jiangsu Province (Jiangsu Yangzhou 225002)

Objective: To investigate the standard establishment of the microscopic examination of the blood cell morphology in the process of testing for clinical samples. Methods: The cause analysis and census of a smear of the clinical samples which have problems detected by the blood analyzer in our hospital in 2016. Results: Among those samples, abnormal WBC differential count accounted for 42.5%, hemoglobin＜70 g/L accounted for 15.3%, platelet abnormalities accounted for 7.7%, etc. Conclusion: When the detection results of blood analyzer in WBC amount more than 20×109/L or less than 4×109/L, hemoglobin＜70g/ L, platelet＞600×109/L or＜80×109/L, they must be timely microscopic examined, that will combine the instrument detection with traditional microscopic examination perfectly, and improve the clinical application value. Key words: blood cell analysis, criteria of reexamination

1006-6586(2017)16-0010-03

R446.1

A

2017-06-23

劉萍，副主任檢驗師。