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陳懸懸+李琴+劉雪梅+吳芝園
摘 要:本研究采用高效液相色譜法檢測(cè)了30種常見果味飲料中苯甲酸、山梨酸的含量。結(jié)果表明:果汁飲料中苯甲酸、山梨酸含量分別在0~100μg/mL 范圍內(nèi)呈線性關(guān)系(r>0.9998),RSD 為 0.38%和0.26%。用該方法測(cè)定的30種市售飲料中均未檢出苯甲酸,7種飲料被檢出山梨酸,均未超過最大添加量。該方法精密度、重復(fù)性和準(zhǔn)確度均良好,可用于果汁飲料中苯甲酸和山梨酸含量的測(cè)定。
關(guān)鍵詞:HPLC;果汁飲料;苯甲酸;山梨酸
食品中該兩項(xiàng)防腐劑的檢測(cè)方法主要有氣相色譜法[2]、高效液相色譜法[3-5]和紫外分光光度法[6]等。本研究利用高效液相色譜法對(duì)30種常見果味飲料中苯甲酸和山梨酸的含量進(jìn)行了測(cè)定。該方法成本低、步驟簡(jiǎn)單,適合所有果味飲料的測(cè)定。
1 儀器與試劑
1.1 儀器
普源3000 高效液相色譜儀(配有UV檢測(cè)器):北京普源;AP-01P真空泵:塞恩斯公司;As120型超聲波清洗器:塞恩斯公司;砂芯過濾裝置:塞恩斯公司;0.45μm 微孔濾膜(水系和有機(jī)系)和 0.45μm針頭式過濾器(水系和有機(jī)系):上海亞新;CP2250電子天平:塞特利斯公司。
1.2 試劑
甲醇(色譜純):天津大茂公司;氨水(分析純):天津大茂公司;乙酸銨(分析純):天津大茂公司;苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)品:南京春秋生物技術(shù)有限公司(CAS No.65-85-0);山梨酸標(biāo)準(zhǔn)品:南京春秋生物技術(shù)有限公司(CAS No.110-44-1);果汁飲料樣品:匯源等品牌果汁,均來源于當(dāng)?shù)卮笮统小?/p>
2 方法
2.1 流動(dòng)相與標(biāo)準(zhǔn)液的配制
2.1.1 乙酸銨溶液配制
精密稱取乙酸銨1.54g,加水溶解后定容至1000ml,并用0.45μm微孔濾膜抽濾,超聲脫氣。
2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制
精密稱取0.1001g苯甲酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品和0.1055g山梨酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品,分別用蒸餾水溶解并定容至100ml,其含量均為1.00mg/ml。
2.2樣品前處理
精密量取市售的果汁飲料少量于燒杯中,用氨水(1+1)調(diào)節(jié)pH值至中性,精密量取2ml,至10ml量瓶,用超純水定容至刻度,經(jīng)水系針頭式過濾器(0.45μm)過濾,備用。
2.3 色譜條件
色譜柱:C18色譜柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流動(dòng)相:甲醇-乙酸銨(5:95);流速:1.0ml/min;柱溫:30℃;檢測(cè)波長(zhǎng)230nm;進(jìn)樣體積10μl;實(shí)驗(yàn)用保留時(shí)間定性,外標(biāo)法定量。
3 結(jié)果與分析
3.1 系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)
在2.3的色譜條件下,用60μg/ml苯甲酸和山梨酸標(biāo)準(zhǔn)混合溶液進(jìn)樣,記錄色譜圖,如圖1所示。
3.2 精密度實(shí)驗(yàn)
取60μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)混合液,由2.3的方法,取 10μl注入液相色譜儀,進(jìn)行精密度試驗(yàn),進(jìn)行6次重復(fù)測(cè)定,記錄峰面積,計(jì)算RSD。見表2
3.3線性范圍實(shí)驗(yàn)
將濃度為0、20、40、60、80、100μg/ml的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液,各取10μl注入液相色譜儀,記錄色譜峰面積。并以各標(biāo)準(zhǔn)品濃度(xμg/ml)為橫坐標(biāo),峰面積y為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸,得苯甲酸和山梨酸的回歸方程及相關(guān)系數(shù),見表2。
3.4樣品測(cè)定
取市售30種果汁飲料樣品按照2.2的樣品處理方法和2.3的色譜條件進(jìn)行分析,得到30種樣品的色譜譜圖,記錄峰面積,計(jì)算樣品中苯甲酸和山梨酸含量。
4 結(jié)果與結(jié)論
通過實(shí)驗(yàn)研究和計(jì)算發(fā)現(xiàn),被檢的30種市售果汁飲料均未檢出苯甲酸,有7個(gè)樣品檢出山梨酸,但其含量均未超出國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。
實(shí)驗(yàn)中利用的HPLC法操作簡(jiǎn)單、結(jié)果準(zhǔn)確、成本低廉,具有較好的穩(wěn)定性和線性范圍,可滿足常規(guī)對(duì)這2種添加劑的檢測(cè)需要。
基金項(xiàng)目 江蘇省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃(201612688009Y)
參考文獻(xiàn)
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