OSAHS患者血清KL-6、SP-A、SP-D水平變化及意義

趙丹,趙遠(yuǎn)琴,石慶柳,劉維佳,葉賢偉,張湘燕

(1貴州大學(xué)醫(yī)學(xué)院·貴州省人民醫(yī)院·貴州省呼吸疾病研究所，貴陽550000；2貴州醫(yī)科大學(xué))

OSAHS患者血清KL-6、SP-A、SP-D水平變化及意義

趙丹1,趙遠(yuǎn)琴2,石慶柳2,劉維佳1,葉賢偉1,張湘燕1

(1貴州大學(xué)醫(yī)學(xué)院·貴州省人民醫(yī)院·貴州省呼吸疾病研究所，貴陽550000；2貴州醫(yī)科大學(xué))

目的 探討阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征(OSAHS)患者血清Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原6(KL-6)、肺泡表面活性蛋白A(SP-A)、肺泡表面活性蛋白D(SP-D)水平的變化及意義。方法 根據(jù)多導(dǎo)睡眠監(jiān)測的睡眠呼吸暫停低通氣指數(shù)(AHI)將67例受試者隨機分為輕、中、重度OSAHS組，并設(shè)立正常對照組。采用ELISA法檢測各組血清KL-6、SP-A和SP-D水平，并進行比較；分析上述指標(biāo)與AHI、最長呼吸暫停低通氣時間(LA/HT)、最低血氧飽和度(LSaO2)、血氧飽和度小于90%的時間(T<90%)之間的相關(guān)性。結(jié)果 與正常對照組比較，輕、中、重度OSAHS組AHI、LA/HT均升高，血清KL-6、SP-A水平升高(P均<0．05)；中、重度OSAHS組血清SP-D水平升高(P均<0．05)；重度OSAHS組夜間LSaO2降低，T<90%延長(P均<0．05)。與輕、中度OSAHS組比較，重度OSAHS組AHI、LA/HT、T<90%均升高，LSaO2降低，血清SP-A、SP-D水平升高(P均<0．05)?；颊哐錝P-A、SP-D水平與AHI、LA/HT呈正相關(guān)，SP-D水平與T<90%呈正相關(guān)(P均<0．05)。結(jié)論 OSAHS患者血清KL-6、SP-A、SP-D水平升高，血清SP-A、SP-D水平與OSAHS病情嚴(yán)重程度有關(guān)。

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征；Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原6；肺泡表面活性蛋白A；肺泡表面活性蛋白D

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征(OSAHS)是一種臨床常見病，由于睡眠過程中反復(fù)發(fā)生的間歇低氧，可累及機體多個系統(tǒng)損害。越來越多的研究表明OSAHS患者存在亞臨床肺損傷[1]。間歇性低氧大鼠模型肺泡壁間隔增寬，間質(zhì)水腫、充血，少量炎性細(xì)胞浸潤，部分肺泡結(jié)構(gòu)破壞、融合，提示間歇性低氧可引起肺組織損傷[2]。Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原6(KL-6)、肺泡表面活性蛋白A(SP-A)、肺泡表面活性蛋白D(SP-D)主要由肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞分泌，在肺間質(zhì)纖維化[3]、肺泡蛋白沉積癥[4]、肺部慢性感染[5]、機化性肺炎[6]等疾病中表達均升高，能有效反映肺損傷程度[7]。血清KL-6、SP-A、SP-D水平在OSAHS患者中的水平變化及其與病情嚴(yán)重程度相關(guān)性的研究較少，本研究對此進行了相關(guān)探討，為臨床預(yù)防和治療OSAHS繼發(fā)性肺部疾病提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2016年8～12月貴州省人民醫(yī)院門診及住院就診的OSAHS患者67例，均符合阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征診治指南—2011年修訂版[8]中的標(biāo)準(zhǔn)?；颊吣?1例、女26例，年齡16～76(50.95±12.22)歲,體質(zhì)量指數(shù)(26.97±3.71)kg/m2，頸圍(39.57±3.53)cm，胸圍(98.47±8.48)cm，腰圍(98.31±10.47)cm，日間愛波沃斯嗜睡評分(ESS)(7.47±3.99)分。按多導(dǎo)睡眠監(jiān)測(PSG)的睡眠呼吸暫停低通氣指數(shù)(AHI)分為輕度OSAHS組(AHI 5～<15次/h)20例、中度OSAHS組(AHI 15～<30次/h)17例、重度OSAHS組(AHI≥30次/h)30例。并將14例行PSG的健康人群作為正常對照組(AHI <5次/h)，男8例、女6例，年齡20～72(47.98±13.14)歲,體質(zhì)量指數(shù)(23.75±3.24)kg/m2，頸圍(33.08±3.30)cm，胸圍(94.15±8.22)cm，腰圍(88.81±11.34)cm，ESS(7.86±3.46)分。排除其他疾病，如慢性阻塞性肺疾病、哮喘、肺間質(zhì)纖維化、惡性腫瘤、結(jié)締組織病、結(jié)核病、嚴(yán)重心力衰竭、代謝性疾病及肝、腎功能不全者,近期采用手術(shù)、激素、營養(yǎng)支持治療者。各組年齡、性別有可比性。

1.2 PSG 在正式進行PSG前，運用ESS評估患者白天嗜睡程度，該評估在安靜環(huán)境里由受試者獨立完成，并測量頸圍、胸圍、腰圍，計算體質(zhì)量。 PSG：采取美國飛利浦Alice 5 多導(dǎo)睡眠監(jiān)測系統(tǒng)，監(jiān)測腦電圖、眼電圖、下頜肌電圖、心電圖、口鼻氣流、胸部呼吸運動、腹部呼吸運動、血氧飽和度、體位、鼾聲、脛前肌電圖等。監(jiān)測時間自晚9點至次日晨6點共9 h。

1.3 血清KL-6、SP-A、SP-D水平的檢測 采用ELISA法。所有研究對象在行PSG后的次日晨6時,空腹抽取外周靜脈血4 mL，注入非抗凝管中，室溫靜置30 min后，4 ℃、3 000 r/min離心10 min，留取血清，用于檢測KL-6、SP-A、SP-D水平。KL-6、SP-A、SP-D試劑盒均由美國 R&D公司提供。

2 結(jié)果

2.1 各組PSG指標(biāo)比較 與正常對照組比較，輕、中、重度OSAHS組AHI、最長呼吸暫停/低通氣時間(LA/HT)均升高，重度OSAHS組夜間最低血氧飽和度(LSaO2)降低，血氧飽和度小于90%的時間(T<90%)延長(P均<0．05)。與輕度OSAHS組比較，中度OSAHS組AHI升高，重度OSAHS組AHI、LA/HT、T<90%均升高，LSaO2降低(P均<0．05)。與中度OSAHS組比較，重度OSAHS組AHI、LA/HT、T<90%均升高，LSaO2降低(P均<0．05)。詳見表1。

表1 各組PSG指標(biāo)比較

注：與正常對照組比較，aP<0．05；與輕度OSAHS組比較，bP<0．05；與中度OSAHS組比較，cP<0．05。

2.2 各組血清KL-6、SP-A、SP-D水平比較 詳見表2。

表2 各組血清KL-6、SP-A、SP-D水平比較

注：與正常對照組比較，aP<0．05；與輕度OSAHS組比較，bP<0．05；與中度OSAHS組比較，cP<0．05。

2.3 各組血清KL-6、SP-A、SP-D水平與PSG指標(biāo)之間的關(guān)系 患者血清SP-A、SP-D水平與AHI呈正相關(guān)(rs分別為0.339、0.278,P均<0．05)，與LA/HT呈正相關(guān)(rs分別為0.209、0.147，P分別為0.001、0.041)，SP-D水平與T<90%呈正相關(guān)(rs=0.217，P<0．05)。KL-6與各指標(biāo)均無相關(guān)性(P均>0．05)。

3 討論

OSAHS是睡眠時反復(fù)發(fā)生的上呼吸道塌陷阻塞，導(dǎo)致慢性間斷缺氧及睡眠片段化，患者常表現(xiàn)為打鼾、自覺窒息而覺醒、白天睡眠增多、注意力難以集中等。慢性間斷缺氧致氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)增強，損傷肺泡屏障致肺泡部位內(nèi)皮細(xì)胞損傷、上皮細(xì)胞滲透性增高，最終導(dǎo)致肺部損害。人的肺泡上皮主要由肺泡Ⅰ型及Ⅱ型上皮細(xì)胞構(gòu)成。肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞較多，被認(rèn)為是合成和分泌肺泡表面活性物質(zhì)(PS)及其相關(guān)蛋白的主要細(xì)胞，同時具有增殖分化、肺水轉(zhuǎn)運、參與固有免疫等多種功能，對維持肺泡結(jié)構(gòu)和功能及局部環(huán)境穩(wěn)態(tài)具有重要作用[8,9]。

KL-6是一種高分子黏液素樣蛋白，主要在Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞頂端及支氣管上皮細(xì)胞表達[10]。在生理情況下，外周血循環(huán)中KL-6水平很低。本研究發(fā)現(xiàn)，OSAHS患者血清KL-6水平高于正常對照組。其機制可能是OSAHS患者夜間間斷缺氧及再氧合損傷肺泡屏障致肺泡部位內(nèi)皮細(xì)胞損傷,使KL-6分泌增多，同時肺泡上皮及內(nèi)皮功能失調(diào)，引起局部血管內(nèi)皮通透性升高，導(dǎo)致KL-6滲透入血增多，使外周血循環(huán)中KL-6水平升高[11]。因此，KL-6可作為反映OSAHS患者肺泡上皮細(xì)胞受損的指標(biāo)。在氧化損傷的肺組織中KL-6表達升高，其對肺泡具有保護作用。

PS是復(fù)雜的脂類蛋白質(zhì)混合物，其中蛋白質(zhì)約10%。蛋白質(zhì)主要為肺泡表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白(SP)，分布于支氣管表面和肺泡氣液界面的單分子層， 能起到降低肺泡表面張力、維持肺內(nèi)穩(wěn)態(tài)、參與局部防御、調(diào)節(jié)肺部免疫和炎性反應(yīng)的作用，具有肺特異性，可用來評價肺氣血屏障的完整性[12]。SP-A和SP-D是水平較豐富的PS，主要由肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞及下呼吸道的Clara細(xì)胞分泌，在其他的組織及腺體上皮細(xì)胞也少量分泌[13]，屬凝集素家族。SP-A和SP-D在肺部起天然免疫防御作用,通過調(diào)理吞噬結(jié)合過敏原、與多種免疫分子相互作用來調(diào)節(jié)急慢性炎癥反應(yīng)。健康人因肺泡-毛細(xì)血管屏障完好無損，可以阻止SP-A和SP-D進入血液循環(huán)，血清中只能檢測到少量SP-A和SP-D。本研究發(fā)現(xiàn)，OSAHS患者血清SP-A、SP-D水平高于正常對照組。機制可能為慢性間歇性低氧，導(dǎo)致氧化應(yīng)激產(chǎn)生大量致炎因子，包括TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8等，這些炎癥介質(zhì)刺激Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞分裂增殖，SP-A、SP-D合成增多，其合成速率大于消耗速率，使肺組織SP-A、SP-D水平維持在高水平，以增強肺局部免疫能力[14]；同時某些致炎因子又可直接損傷血管內(nèi)皮，使血管通透性升高，從而使肺組織SP-A和SP-D滲出到血液中，血清SP-A、SP-D水平增加。

患者血清SP-A、SP-D水平與AHI、LA/HT有明顯的相關(guān)性，呼吸暫停次數(shù)越多、呼吸暫停時間越長、血氧飽和度越低，血清SP-A、SP-D水平越高，可能與肺損傷時支氣管肺泡中的SP分泌增加，以減輕氣道壁萎陷及防止液橋形成等來降低氣道阻力和維持小氣道穩(wěn)定有關(guān)。SP-A、SP-D在肺組織的表達遠(yuǎn)高于其他組織，并且其水平和肺損傷程度密切相關(guān)，肺部損傷越重血清中SP-A、SP-D水平就越高，檢測患者血循環(huán)中SP-A、SP-D水平可以判斷肺損傷程度，預(yù)測疾病轉(zhuǎn)歸情況[15]。本研究中OSAHS患者病情嚴(yán)重程度與KL-6無相關(guān)性，可能與樣本量小有關(guān)，期待大樣本多中心研究加以證實。

綜上，OSAHS患者血清KL-6、SP-A、 SP-D水平升高，SP-A、 SP-D水平與患者病情嚴(yán)重程度相關(guān)，同時KL-6、SP-A、SP-D可能參與OSAHS所致肺損傷過程，此為臨床預(yù)防和治療OSAHS繼發(fā)性肺部疾病提供了依據(jù)。

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貴州省科技合作計劃資助項目(黔科合LH字[2015]7127號)；貴州省人民醫(yī)院青年基金資助項目(GZSYQN[2016]16號)；貴州省科技支撐計劃社會發(fā)展攻關(guān)項目(黔科合SY字[2009]3052)。

趙丹(E-mail：zhaodan800@foxmail.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.29.017

R473.5

B

1002-266X(2017)29-0052-03

2017-01-07)