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    射干傳統(tǒng)功效考證及其實(shí)驗(yàn)藥理學(xué)驗(yàn)證*

    2017-08-31 12:11:04溫雯馬躍海朱竟赫鄒桂欣秦文艷李國信
    關(guān)鍵詞:射干本草咽喉

    溫雯,馬躍海,朱竟赫,鄒桂欣,秦文艷,李國信**

    射干傳統(tǒng)功效考證及其實(shí)驗(yàn)藥理學(xué)驗(yàn)證*

    溫雯1,馬躍海2,朱竟赫2,鄒桂欣2,秦文艷2,李國信2**

    (1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)沈陽110847;2.遼寧省中醫(yī)藥研究院沈陽110034)

    目的:通過古籍文獻(xiàn)及現(xiàn)代文獻(xiàn),了解射干從古至今的功效演變及治療病種變化,利用藥理藥效實(shí)驗(yàn)手段,對其主要功效進(jìn)行驗(yàn)證,將傳統(tǒng)中藥特色優(yōu)勢與現(xiàn)代化科學(xué)技術(shù)相結(jié)合,有助于推進(jìn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化進(jìn)程,對中藥新藥研發(fā)有效成分、治療病種的選擇具有重要意義。方法:從本草考證射干功能主治、從醫(yī)籍考證射干治療病癥、基于《普濟(jì)方》數(shù)據(jù)庫管理系統(tǒng)分析射干復(fù)方治療病種,對射干主要功效主治進(jìn)行總結(jié),結(jié)合現(xiàn)代藥理研究射干主要成分抗炎作用機(jī)制,篩選動物模型和考查指標(biāo),對射干功效進(jìn)行初步驗(yàn)證。結(jié)果:綜合古典本草醫(yī)籍應(yīng)用情況和方藥數(shù)據(jù)庫分析結(jié)果表明射干有消痰、利咽的功效,是治療咽痛喉痹的要藥;現(xiàn)代研究中實(shí)驗(yàn)組血清及咽喉組織中IL-4、血清及肺組織中IgE、血清中LTC4水平均較模型組顯著降低(P<0.05)。結(jié)論:射干提取物對慢性咽炎的治療作用可能是通過降低血清及肺組織中IgE水平,抑制血清及咽喉組織中IL-4和血清中LTC4的表達(dá)等來實(shí)現(xiàn)。

    射干功效慢性咽炎《普濟(jì)方》數(shù)據(jù)庫管理系統(tǒng)

    射干為鳶尾科植物射干Belamcanda chinensis(L). DC干燥根莖,為臨床常用中藥,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》[1]。本文考察歷代本草文獻(xiàn),結(jié)合古代醫(yī)籍含射干復(fù)方的病癥分布,借助《普濟(jì)方》[2]數(shù)據(jù)庫管理系統(tǒng)分析射干復(fù)方治療病種,由此確認(rèn)射干古代臨床實(shí)際取用的傳統(tǒng)功效,并通過現(xiàn)代先進(jìn)科技手段進(jìn)行驗(yàn)證。

    1 功效考證

    1.1 本草考證

    清熱:《神農(nóng)本草經(jīng)》載射干治療“食飲大熱”,后世諸多本草都收載此功效?!缎滦薇静荨穂3]在總結(jié)前人經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,補(bǔ)充“散胸中熱氣”?!兜崮媳静荨穂4]載“療咽喉熱毒,一切熱毒等癥”,提到了清熱的功效。

    解毒:首次提出是在《證類本草》[5]射干項下?!兜崮媳静荨份d“攻散瘡癰,一切熱毒等癥”。

    消痰:《本草綱目》[6]認(rèn)為“利積痰”?!侗静輷褚V目》[7]總結(jié)射干有“消痰”、“行太陰厥陰之積痰”的作用。

    利咽:大部分本草都記載射干治療喉痹咽痛。《滇南本草》記載射干“治咽喉腫痛,咽閉喉風(fēng)”。《本草衍義》[8]認(rèn)為其“治喉痹為佳”,突出了射干對咽喉疾病的治療作用?!侗静菥V目》稱其“古方治喉痹咽痛為要藥”。

    止咳:諸多本草如《神農(nóng)本草經(jīng)》、《本草經(jīng)集注》[9]、《新修本草》、《本草易讀》[10]、《本草擇要綱目》等射干條下均載“主咳逆上氣”。明代最具代表性的著作《本草綱目》咳嗽篇中射干療“咳唾氣臭”。

    散結(jié):諸多本草載治“腹中邪逆”,《本草擇要綱目》歸納為“散結(jié)氣”。

    通經(jīng):《本草易讀》、《本草擇要綱目》均提到通經(jīng)功效。

    明目:《本草擇要綱目》中增加“鎮(zhèn)肝明目”的功效。

    消瘀:《本草綱目》腰痛篇中“射干利積痰瘀血疝毒陰疝痛刺”;瘀血篇中“射干消瘀血老血在心脾間”?!侗静菀鬃x》中有祛瘀記載。

    綜合歷代本草所述,射干功效以清熱、解毒、消痰、利咽為主,是治療咽痛喉痹要藥;還具有消癰毒、散結(jié)、逐瘀血、通經(jīng)、明目、平喘、消食、化濕、利大小便等功效;也可用于治療咳逆上氣、急氣、腹中邪逆、食飲大熱、老血在心肝脾間、咳唾、言語氣臭、散胸中熱氣、時氣病、鼻塞、陰毒、胸脅脹滿、咽閉喉風(fēng)、乳蛾、二便不利、女子月經(jīng)不調(diào)及瘡腫癰毒等。

    1.2 醫(yī)籍考證

    咽喉肺系疾?。骸督饏T要略》[11]收載的射干麻黃湯以射干為主藥,用于治療“咳而上氣,喉中水雞聲”。《華佗神方》[12]療小兒咽腫、喉痹、咳嗽唾血方含射干?!秱浼鼻Ы鹨健穂13]在治療“胸脅滿、咳逆上氣、唾粘如膠并唾血”、“小兒咳逆喘息如水雞聲”、“小兒咽痛不得息,若毒瓦斯哽咽及毒攻咽喉”用射干組方?!锻馀_秘要》[14]中治療傷寒咽喉痛、口干苦傷寒春冬咳嗽、喉痹、咳嗽膿血、咳嗽上氣、小兒喉痹痛、大人小兒咳逆上氣等都有射干的應(yīng)用?!短绞セ莘健穂15]重點(diǎn)突出射干治療喉痹咽痛的臨床應(yīng)用。咽喉閉塞不通、咽喉生谷賊腫痛可含化射干丸;脾實(shí)熱、咽干頭痛、傷寒咽喉痛、時氣熱毒攻咽喉、熱病咽喉腫痛、風(fēng)毒攻咽喉、咽喉中如有物噎塞宜服射干散方;對射干治療胸脅脹滿、氣逆亦有記載,如治療喉痹氣隔、胸滿咽腫宜服犀角散方。

    癰腫瘰疬疾?。骸吨夂髠浼狈健穂16]中提到療瘰風(fēng)結(jié)腫氣痛的五香連翹湯中配伍射干。《備急千金要方》在治療“毒腫無定處,敕澀惡寒,心腹刺痛煩悶”、“癰發(fā)背”以射干組方。《外臺秘要》中治療寒熱瘰、惡核瘰、癰疽發(fā)背、小兒癰腫、瘭疽、妒乳乳癰都有射干的應(yīng)用?!短绞セ莘健酚蒙涓膳湮樯橹委熒涔ざ灸[生瘡?!妒┛備洝穂17]射干湯治療諸風(fēng)腫欲成膿、發(fā)背;射干丸治瘰惡寒壯熱,久不瘥成;射干飲治毒腫無定處。

    口瘡:《備急千金要方》中療“熱病口爛咽喉生瘡水漿不得入”方中有射干?!锻馀_秘要》中治天行口瘡用射干?!妒┛備洝飞涓筛嘀委熆诏徰腊b。

    皮膚?。骸度A佗神方》中記載治療風(fēng)疹?!秱浼鼻Ы鹨健分兄委煱a疹。

    眼疾:《華佗神方》和《太平圣惠方》中以射干組方都有療雀目記載。

    月經(jīng)病:《華佗神方》中治女子月經(jīng)不調(diào)及經(jīng)閉方中含射干。

    大小便疾病:《圣劑總錄》中射干湯治療小腸實(shí)熱,小便赤澀疼痛。

    通過對醫(yī)籍中有關(guān)射干效用梳理,了解以射干入藥方劑大多治療咽喉肺系疾病、癰腫瘰疬、口瘡、皮膚病、雀目、月經(jīng)病、大小便疾病等。

    1.3 方藥數(shù)據(jù)庫考察

    方藥數(shù)據(jù)庫是古代方藥數(shù)字化、智能化知識挖掘系統(tǒng),收錄明代以前二百四十余種古代方書中近六萬首方劑。通過庫中檢索可以獲取藥物、藥對、方劑、方劑加減與病、證、癥狀和癥狀集合間復(fù)雜關(guān)系的規(guī)律性聯(lián)系,揭示方劑配伍規(guī)律,病、證、癥狀和癥狀集合用藥規(guī)律。以射干為關(guān)鍵詞,利用《普濟(jì)方》數(shù)據(jù)庫檢索系統(tǒng)進(jìn)行檢索,含射干復(fù)方主治病癥分布情況一覽無遺。共得含射干復(fù)方435個,用于207種病癥。為便于含射干方劑所治病癥構(gòu)成分析,對配伍應(yīng)用頻次大于或等于2次的病癥進(jìn)行歸類整理。

    根據(jù)檢索結(jié)果,將含射干方劑用于治療咽喉腫痛、喉痹、傷寒咽喉痛、咽喉中如有物妨悶、時氣熱毒攻咽喉、脾實(shí)熱咽喉不利、熱病咽喉腫痛、咽喉不利、尸咽喉、語聲不出、傷寒后咽喉閉塞不通、上氣喉中如水雞聲、咽干、五噎、膈氣咽喉噎塞、癭病咽喉噎塞等病癥,統(tǒng)稱咽喉??;用于諸癰疽、咽喉生癰、熛疽、毒、產(chǎn)后乳結(jié)癰、瘰疬寒熱、胃脘癰、乳癰、射工人中、咽喉生瘡、諸毒瘰疬、瘡瘍、惡核腫等,歸為瘡瘍癰疽瘰疬;用于傷寒咳嗽、喘嗽、咳嗽上氣唾膿血、熱嗽、呷嗽、久嗽、諸咳嗽、咳嗽上氣、咳逆上氣等,統(tǒng)稱咳嗽;用于肺氣面目四肢浮腫、氣腫、咳嗽面目浮腫、石水、風(fēng)腫等,歸為水腫;用于乳石發(fā)腳氣、腳氣上氣、腳氣沖心、江東嶺南瘴毒腳氣等,統(tǒng)稱腳氣?。挥糜谌箤?shí)熱、胃實(shí)熱、膀胱實(shí)熱等歸為諸熱;用于月水不通、月水不調(diào)等,統(tǒng)稱月經(jīng)不調(diào);用于時氣口瘡、口舌瘡中風(fēng)口噤、傷寒口舌生瘡等,歸為口瘡。

    另外,含射干復(fù)方還用于肝實(shí)、傷寒舌腫、傷寒、癭氣、陽毒、虛勞唾稠粘、上氣胸膈支滿、肺氣喘急、胎赤眼、脾勞、惡脈、風(fēng)腰腳疼痛、五色丹毒、沙石淋、骨蒸、結(jié)陽、惡脈及其他難以辨識性質(zhì)的病癥。將歸納后居前14位的病癥與方劑數(shù)量列表(見表1)。

    表1 古代含射干方劑治療病癥

    從表1可以看出,古代含射干復(fù)方常用于治療咽喉病、瘡瘍癰疽瘰疬和咳嗽。在這三類病癥中,含射干復(fù)方占配伍射干全部方劑數(shù)量的44%,由此構(gòu)成了射干功能主治的主體。此外,該藥還廣泛用于水腫、腳氣病、諸熱、月經(jīng)不調(diào)、口瘡、肝實(shí)、傷寒舌腫、傷寒、癭氣、陽毒等病癥的治療。

    綜合古典本草醫(yī)籍應(yīng)用情況和方藥數(shù)據(jù)庫分析結(jié)果表明射干有消痰、利咽的功效,為射干功效驗(yàn)證研究提供理論依據(jù)。

    2 現(xiàn)代研究

    國內(nèi)外文獻(xiàn)報道射干主要成分為黃酮類及三萜類化合物等,包括德鳶尾素[18]、野鳶尾黃素[19,20]、鳶尾黃素[19,21]、次野鳶尾苷元[19,22]、射干苷[23,24]、野鳶尾苷[25]、白射干素[19,26]等約20個。最有意義的是異黃酮類成分,為主要的藥理活性成分,有明顯抗炎[27]、止咳[28]、抗病毒[29]、抑菌[30]、抗氧化[31]、雌激素樣作用[32]、抗腫瘤[33]等藥理作用。有研究報道[34]鳶尾黃素、野鳶尾黃素、次野鳶尾黃素具有抗炎作用,鳶尾黃素與肺泡及血清的白介素Interleukin-4(IL-4)呈負(fù)相關(guān),野鳶尾黃素與血清IL-4細(xì)胞因子呈負(fù)相關(guān);鳶尾黃素還能顯著降低炎性介質(zhì)白三烯LeukotrieneC4(LTC4)含量。筆者通過藥理藥效實(shí)驗(yàn)手段,對射干消痰、利咽功效進(jìn)行初步驗(yàn)證。

    2.1 實(shí)驗(yàn)材料

    2.1.1 主要儀器與試藥

    喉頭噴霧器(泰興市輝春醫(yī)療器械有限公司);高速冷凍離心機(jī)(日立工機(jī)株式會社);美國Elx800TM型酶標(biāo)儀(英國BioTek公司);扁桃體注射針、自制兔開口器、壓舌板。

    試劑:氨水(國藥集團(tuán)),松節(jié)油(長沙化學(xué)試劑廠,分析純),LTC4、IL-4、IgE(免疫球蛋白ImmunoglobulinE)ELISA試劑盒(南京建成生物工程研究所有限公司)

    表2 血清IL-4、IgE、咽喉組織IL-4、肺組織IgE、血清LTC4測定結(jié)果(xˉ±s,n=10)

    試藥:射干藥材采集于湖北團(tuán)風(fēng),批號:150619,經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)李峰教授鑒定為鳶尾科射干屬植物(Belamcanda chinensis(L).DC)的干燥根莖。射干提取物:射干藥材1 kg,加70%乙醇回流提取2次,合并提取液,濃縮至無醇味,用乙醇調(diào)整至含醇量為30%,上于D101大孔吸附柱上,用2倍量30%乙醇除雜,繼用80%乙醇洗脫,收集洗脫液,回收乙醇,干燥,收率為4.83%。生藥量為48.3 mg·g-1藥材。、

    2.1.2 實(shí)驗(yàn)動物

    3月齡大耳白家兔30只,雌雄各半,體重1.8-2.3 kg。檢疫后在我院實(shí)驗(yàn)動物中心合格動物房飼養(yǎng)1周,每日定時清潔。動物房合格證號:SYXK(遼)2012-0003。

    2.2 實(shí)驗(yàn)方法

    將30只家兔隨機(jī)分為空白組、模型組、實(shí)驗(yàn)組,每組10只,模型組、實(shí)驗(yàn)組家兔用喉頭噴霧器內(nèi)裝濃度2.5%的氨水噴咽,每日兩次,上、下午各一次,每次噴3撳,連續(xù)噴17天。其中在第8-17天用扁桃體注射針將松節(jié)油注射于免咽部黏膜下,每次0.2 mL;空白組用生理鹽水噴咽及注射,操作方法與模型組、實(shí)驗(yàn)組相同。于造模第20天開始灌胃給藥,每天1次,空白組、模型組給予等量蒸餾水,實(shí)驗(yàn)組給予射干提取物400 mg·kg-1。連續(xù)給藥7天后,處死動物,取標(biāo)本。

    2.3 血及組織中IL-4和LTC4指標(biāo)的測定

    采用ELISA試劑盒測定法,測定血清及咽喉組織中的細(xì)胞因子IL-4;血清及肺組織中的IgE;血清中炎性介質(zhì)LTC4含量。。

    2.4 統(tǒng)計學(xué)處理

    采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件處理,數(shù)據(jù)以xˉ±s表示,采用方差分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    3 結(jié)果

    模型組血清中IL-4、IgE、咽喉組織中IL-4、肺組織中IgE、血清中炎性介質(zhì)LTC4含量顯著高于空白組(P<0.05);實(shí)驗(yàn)組與模型組血清中IL-4、IgE咽喉組織中IL-4、肺組織中IgE、血清中炎性介質(zhì)LTC4含量比較均降低,差異顯著(P<0.05或P<0.01)。結(jié)果見表2。

    4 討論

    慢性咽炎是咽喉干燥、咽痛不適、咽內(nèi)異物感,經(jīng)久不愈的一種慢性咽部疾病,屬中醫(yī)“慢喉痹”范疇,可能由病毒、細(xì)菌及變態(tài)反應(yīng)因素引起。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為,細(xì)胞因子在慢性炎癥的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。細(xì)胞因子IL-4調(diào)節(jié)B細(xì)胞合成免疫球蛋白IgE、轉(zhuǎn)化生長因子(Transforming growth factor-β,TGF-β)促進(jìn)成纖維母細(xì)胞合成膠原,神經(jīng)生長因子與氣道神經(jīng)纖維相互作用,IL-4能夠刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)黏附分子,促進(jìn)炎癥細(xì)胞的浸潤。也有研究資料報道[35]花生四烯酸在變態(tài)反應(yīng)性炎癥中起著重要作用,它的代謝產(chǎn)物白三烯包括LTC4等,白三烯是引起和加重氣道炎癥的重要炎癥介質(zhì)。本實(shí)驗(yàn)?zāi)P徒M血清及咽喉組織中細(xì)胞因子IL-4、血清及肺組織中IgE、血清中炎性介質(zhì)LTC4均比空白組有顯著升高,提示選擇氨水和松節(jié)油直接作用于日本大耳白兔咽部黏膜制備慢性咽炎病理模型,與臨床慢性咽炎發(fā)病機(jī)制相似,符合慢性咽炎動物模型的生物學(xué)特征,故可作為射干功效驗(yàn)證研究模型。

    本文從本草考證射干功效主治,以及醫(yī)籍考證射干治療病癥,基于《普濟(jì)方》數(shù)據(jù)庫管理系統(tǒng)分析射干復(fù)方治療病種,總結(jié)出射干有消痰、利咽的功效。以現(xiàn)代藥理研究射干主要成分抗炎作用機(jī)制與IL-4、LTC4有關(guān)為依據(jù),選用氨水和松節(jié)油直接作用于日本大耳白兔咽部黏膜制備慢性咽炎病理模型,通過藥理藥效實(shí)驗(yàn)手段對射干消痰、利咽功效進(jìn)行驗(yàn)證,實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,射干提取物對慢性咽炎的治療作用可能是通過降低血清及肺組織中IgE水平,抑制血清及咽喉組織中IL-4和血清中LTC4的表達(dá)等來實(shí)現(xiàn)。本研究是傳統(tǒng)中藥特色優(yōu)勢與現(xiàn)代化科學(xué)技術(shù)相結(jié)合,有助于推進(jìn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化進(jìn)程,對中藥新藥研發(fā)有效成分、治療病種的選擇具有重要意義。

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    34康愿濤,鄒桂欣,尤獻(xiàn)民,等.射干異黃酮成分對5-脂氧合酶的作用研究.中藥與臨床,2015,6(1):43-45.

    35劉瑩,陳政,尚爾昌,等.花生四烯酸代謝網(wǎng)絡(luò)研究:從關(guān)鍵酶的單靶標(biāo)抑制劑到多靶標(biāo)抑制劑.藥學(xué)學(xué)報,2009,43(3):231-241.

    參考文獻(xiàn)

    Textual Research on Traditional Effect Verification of Belamcanda chinensis and Its Pharmacological Experimental Verification

    Wen Wen1,Ma Yuehai2,Zhu Jinghe2,Zou Guixin2,Qin Wenyan2,Li Guoxin2
    (1.Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Shenyang 110847,China; 2.Liaoning Provincial Academy of Traditional Chinese Medicine,Shenyang 110034,China)

    Through reviewing ancient and modern literatures,the effect evolution and disease treatment changes of Belamcanda chinensis were understood.The pharmacological experiments were used to verify its main effects.The combination of featured advantages of traditional Chinese medicine(TCM)and modern science and technology contributed to the promotion of TCM modernization.It had important significance for the development of effective components,selection of disease types in the treatment for research and development of new TCM drugs.The indication of Belamcanda chinensis was verified from textual research.The treatment of disease types by Belamcanda chinensis was verified from medical books.The treatment of disease types by Belamcanda chinensis compound was analyzed based on the Pujifang database management system.Main indications of Belamcanda chinensis were summarized.Modern pharmacological studies on anti-inflammatory mechanism of main components of Belamcanda chinensis were combined to screen animal models and investigation indexes for the preliminary verification of the efficacy of Belamcanda chinensis. The comprehensive application of classical herbal medicine books and prescription database analysis results showed that removing phlegm and relieving sore throat were the efficacy of Belamcanda chinensis,which was an important medicine in the treatment of pharyngitis and sore throat.In the modern research,serum of experimental group,IL-4 in throat tissues,as well as IgE and LTC4 level in serum and lung tissues were significantly reduced compared to the model group (P<0.05).It was concluded that the treatment effect of Belamcanda chinensis extract to chronic pharyngitis may be through the decreasing of IgE level in serum and lung tissues,inhibiting IL-4 expression in serum and throat tissues,and the LTC4 expression in serum.

    Belamcanda chinensis,efficacy,chronic pharyngitis,Pujifang database management system

    10.11842/wst.2017.05.023

    R285.5

    A

    (責(zé)任編輯:陳寧,責(zé)任譯審:王晶)

    2017-05-12

    修回日期:2017-06-11

    *國家自然科學(xué)基金委面上項目(81273927):中藥射干抗氣道變應(yīng)性炎癥多靶點(diǎn)作用機(jī)制及配伍關(guān)系研究,負(fù)責(zé)人:李國信。

    **通訊作者:李國信,博士,教授,博士生導(dǎo)師,主要研究方向:臨床藥理學(xué)。

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