固相萃取
——?dú)庀嗌V法測(cè)定地表水中甲拌磷

周守安，畢思遠(yuǎn),2*，李曉娜，王炳志，付輝，朱海

（1.深圳市通量檢測(cè)科技有限公司，廣東深圳518102；2.哈爾濱體育學(xué)院滑雪教學(xué)訓(xùn)練基地博士后科研工作站，黑龍江哈爾濱150008；3.深圳市易瑞生物技術(shù)有限公司，廣東 深圳518101）

固相萃取
——?dú)庀嗌V法測(cè)定地表水中甲拌磷

周守安1，畢思遠(yuǎn)1,2*，李曉娜1，王炳志3，付輝3，朱海3

（1.深圳市通量檢測(cè)科技有限公司，廣東深圳518102；2.哈爾濱體育學(xué)院滑雪教學(xué)訓(xùn)練基地博士后科研工作站，黑龍江哈爾濱150008；3.深圳市易瑞生物技術(shù)有限公司，廣東 深圳518101）

本文建立固相萃取柱富集，采取氣相色譜法測(cè)定地表水中甲拌磷。本方法操作簡(jiǎn)便，萃取時(shí)間短，富集效率高，檢出限低，精密度和加標(biāo)回收率符合分析測(cè)試要求，有機(jī)試劑用量少，適用于地表水中甲拌磷的測(cè)定。

固相萃取；氣相色譜法；地表水；甲拌磷

甲拌磷是透明的、有輕微臭味的油狀液體，是一種高效高毒的有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑，主要用途是內(nèi)吸殺蟲(chóng)、殺螨劑，具胃毒、觸殺和熏蒸作用。人體吸入、食入、經(jīng)皮吸收甲拌磷，會(huì)抑制膽堿酯酶活性，造成神經(jīng)生理功能紊亂及肺、肝、腎等損傷，對(duì)人體健康造成嚴(yán)重危害。由于甲拌磷在農(nóng)業(yè)方面使用較多，極易污染水體，對(duì)環(huán)境危害較大，因此準(zhǔn)確可靠測(cè)定水中甲拌磷的含量是有必要的。測(cè)定水中甲拌磷常采用氣相色譜法，但分析前需要對(duì)水樣進(jìn)行富集預(yù)處理[1]。目前，水中有機(jī)物前處理方法有液液萃取法、固相萃取法、頂空進(jìn)樣法和吹掃捕集法等，其中固相萃取法具有操作簡(jiǎn)單、省時(shí)省力、有機(jī)試劑用量少、易于自動(dòng)化和價(jià)格低等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于有機(jī)物的富集預(yù)處理中[2-4]。通過(guò)試驗(yàn)研究，采用Waters Oasis HLB固相萃取小柱對(duì)地表水樣品進(jìn)行富集前處理，選用乙酸乙酯作為洗脫劑，以氣相色譜法測(cè)定地表水中的甲拌磷，這個(gè)方法能夠滿足水中痕量甲拌磷的檢測(cè)要求。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要試驗(yàn)儀器和試劑

安捷倫7890N氣相色譜儀及化學(xué)工作站，配火焰光度檢測(cè)器（FPD）；美國(guó)睿科Auto SPE-06C型全自動(dòng)固相萃取儀；N-EVAP112型氮吹濃縮儀；Milli-Q A10型超純水機(jī)；Waters Oasis HLB固相萃取小柱。

甲醇、乙酸乙酯均為色譜純；鹽酸、氫氧化鈉和氯化鈉均為分析純；無(wú)水硫酸鈉，優(yōu)級(jí)純，于400℃下烘烤4小時(shí)以去除干擾物；100ug/ml甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)溶液，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科學(xué)研究所。

1.2 氣相色譜條件

色譜柱：DB-1毛細(xì)管色譜柱（30m×0．25mm，250μm）；載氣為高純氮?dú)猓兌取?9．999%），載氣流速為2．0mL/min，尾吹流量20mL/min；進(jìn)樣方式為分流進(jìn)樣，分流比為10∶1，進(jìn)樣量為1μL；進(jìn)樣口溫度200℃；FPD檢測(cè)器溫度250℃；柱溫140℃，保持10分鐘。

1.3 水樣采集及處理

將地表水樣沿玻璃采樣瓶壁緩緩倒入瓶中，水樣充滿后液面上不留有空間，塞緊瓶口使水樣處于密封狀態(tài)。水樣采集后最好當(dāng)天分析，如不能及時(shí)分析，應(yīng)將水樣放置在4℃冰箱中避光保存[5]。

將HLB固相萃取小柱安裝在全自動(dòng)固相萃取儀上，依次用5毫升乙酸乙酯、5毫升甲醇和5毫升超純水進(jìn)行淋洗、活化萃取柱。取200毫升經(jīng)0．45μm微孔濾膜過(guò)濾后的地表水樣品，用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值近中性，開(kāi)啟全自動(dòng)固相萃取儀真空泵，將水樣在真空作用下以4．0毫升/分鐘的流速通過(guò)活化后的HLB固相萃取小柱。水樣過(guò)完后繼續(xù)真空抽干萃取柱，去除柱中殘留的水分，用5毫升乙酸乙酯作為洗脫劑反相洗脫固相萃取柱。洗脫液收集后經(jīng)無(wú)水硫酸鈉脫水后，放置于氮吹濃縮儀氮?dú)獯祾呓?，用乙酸乙酯定容?．0毫升后，供測(cè)定用[6]。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制

準(zhǔn)確移取100μL濃度為100ug/L甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)溶液至10毫升容量瓶中，用乙酸乙酯定容至標(biāo)線，配制濃度為1000μg/L甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)中間液。用微量注射器準(zhǔn)確吸取1μL、4μL、10μL、20μL、30μL甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)中間液到1毫升乙酸乙酯溶液中，配制濃度為 1．00μg/L、4．00μg/L、10．0 μg/L、20．0μg/L、30．0μg/L的甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)系列。

2 結(jié)果與討論

2.1 線性回歸方程和方法檢出限

取甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)系列按照1．2氣相色譜條件由低濃度到高濃度依次進(jìn)樣分析，測(cè)定相應(yīng)的峰面積。以甲拌磷峰面積為縱坐標(biāo)，其質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，甲拌磷在1．00～30．0μg/L濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系，回歸方程為Y=2343X+28．67，相關(guān)系數(shù)r=0．9994。

在上述氣相色譜條件下對(duì)濃度為1．00g/L的甲拌磷溶液平行測(cè)定7次，計(jì)算其標(biāo)準(zhǔn)偏差S分別為0．0319μg/L。檢出限按MDL=S·t（n-1,0．99）計(jì)算，式中 t（n-1,0．99）為置信度為99%、自由度為n-1時(shí)t值，n為重復(fù)次數(shù)，當(dāng)n=7時(shí)，t值取3．143，計(jì)算出地表水中甲拌磷的檢出限為0．10μg/L[7]。

2.2 洗脫劑的選擇

洗脫液的選擇直接影響到甲拌磷測(cè)定結(jié)果的回收率，本文對(duì)濃度為10μg/L甲拌磷水樣按上述步驟進(jìn)行固相萃取后，分別選用正已烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、丙酮作為洗脫液，對(duì)萃取柱進(jìn)行洗脫后分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，由以上4種洗脫液對(duì)相同體積、相同濃度和相同萃取條件下測(cè)得甲拌磷的回收率，乙酸乙酯對(duì)HLB固相萃取小柱的洗脫效果最好，甲拌磷測(cè)定結(jié)果的回收率在90%。因此，本文選用乙酸乙酯作為洗脫液。

2.3 水樣流速的選擇

本文試驗(yàn)了濃度為 10μg/L甲拌磷水樣以 2mL/min、4mL/min、6mL/min、8mL/min流速通過(guò)活化后的HLB固相萃取小柱，考察甲拌磷在萃取柱上的富集效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，水樣在流速為2mL/min、4mL/min時(shí)甲拌磷回收率較高，但考慮到流速過(guò)低會(huì)影響樣品處理時(shí)間，因此本文選擇流速為4mL/min較合適。

2.4 色譜圖

本文選用DB-1型毛細(xì)管色譜柱對(duì)濃度為20μg/L的甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行色譜分析，根據(jù)色譜峰保留時(shí)間定性。在上述色譜條件下，甲拌磷出峰較快，峰形較好且靈敏度最高，見(jiàn)圖1。

圖1 甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖

2.5 方法精密度試驗(yàn)

在上述色譜條件下對(duì)濃度為10．0μg/L甲拌磷溶液平行分析7次，計(jì)算其測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1．47%，說(shuō)明本方法具有良好的重現(xiàn)性，見(jiàn)表1。

2.6 樣品加標(biāo)回收率試驗(yàn)

用上述方法對(duì)5份地表水樣品進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果每份水樣中均未檢出甲拌磷成分。在上述5份水樣中分別加入一定濃度的甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)溶液，按樣品的前處理方法制成待測(cè)溶液，在上述氣相色譜條件下進(jìn)行測(cè)定與分析，考察方法的加標(biāo)回收率（見(jiàn)表2）。甲拌磷的加標(biāo)回收率在93．6%～104．8%間，表明本方法滿足分析測(cè)試要求。

3 結(jié)論

本文建立了固相萃取——?dú)庀嗌V法測(cè)定地表水中甲拌磷的方法，實(shí)際操作表明，甲拌磷在1．00～30．0μg/L濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系，加標(biāo)回收率為93．6%～104．8%，7組水樣重復(fù)性RSD低于2%，測(cè)定結(jié)果令人滿意。本方法操作簡(jiǎn)單，富集效率高，檢出限低，精密度和加標(biāo)回收率符合分析測(cè)試要求，有機(jī)試劑用量少，適用于地表水中甲拌磷的測(cè)定。

[1]陸華．液液萃取——?dú)庀嗌V法測(cè)定地表水中17種有機(jī)氯農(nóng)藥研究[J]．環(huán)境科學(xué)與管理,2014,39(02):94-96．

[2]肖紅,馬莉,韓艷艷．液——液萃取氣相色譜法測(cè)定地表水中痕量苯酚[J]．化學(xué)分析計(jì)量,2016,25(04):84-86．

[3]王薈,李娟,章勇．吹掃捕集——?dú)庀嗌V/質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定地表水中氯丁二烯[J]．環(huán)境監(jiān)測(cè)管理與技術(shù),2010,22(01): 41-43．

[4]張曉暉．固相萃取氣相色譜法測(cè)定水中六六六和滴滴涕[J]．海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2004,10(06):38-39．

[5]國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局：《水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法》編委會(huì)．水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法[M]．第4版．北京：中國(guó)環(huán)境科學(xué)出版社．

[6]張豐,戴曉瑩．固相萃取——?dú)庀嗌V法測(cè)定水中硝基苯,硝基甲苯和四氯苯[J]．城鎮(zhèn)供水,2015(03):49-51．

[7]中華人民共和國(guó)環(huán)境保護(hù)部．HJ168-2010環(huán)境監(jiān)測(cè)分析方法標(biāo)準(zhǔn)制修訂技術(shù)導(dǎo)則[S]．2010．

表1 精密度試驗(yàn)

表2 加標(biāo)回收率試驗(yàn)

中國(guó)博士后科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No.2017M611382）；深圳市技術(shù)攻關(guān)項(xiàng)目（項(xiàng)目名稱：重20160117：水產(chǎn)品藥物殘留快速檢測(cè)關(guān)鍵技術(shù)研發(fā)，No.JSGG20160429184803117）

O657.7

A

10.14025/j.cnki.jlny.2017.15.010

周守安，大專學(xué)歷，研究方向：食品安全檢測(cè)。

畢思遠(yuǎn)，博士，副研究員，碩士生導(dǎo)師，研究方向：食品安全檢測(cè)。