PCR技術(shù)在食品檢測中的應(yīng)用和發(fā)展

任瑞

所謂的食源性疾病指的就是當(dāng)人們進行攝食的時候，有毒的物質(zhì)以及有害的物質(zhì)會隨著食品進入人體，進而就會造成疾病。在這里面，致病菌污染食品要是被人們使用就會出現(xiàn)食物中毒的情況，所以需要增加對于食源性致病菌的研究力度，這樣可以促進對于病菌傳播的撞我，這樣也可以避免持續(xù)事物中毒的情況。現(xiàn)階段我們國家的監(jiān)測致病菌的形式還比較落后，使用的技術(shù)有：分離培養(yǎng)、形態(tài)觀察、生化鑒定以及血清分型。這樣的檢測形式操作比較復(fù)雜并且消耗的時間比較長，當(dāng)然也很難進行準(zhǔn)確的檢測，我們國家的食品行業(yè)得到了顯著的發(fā)展，所以需要及時的發(fā)展與之相關(guān)的檢測技術(shù)。這篇文章對于檢測食品致病微生物的檢測形式進行了詳細(xì)的研究，當(dāng)然也對于pcr技術(shù)進行了詳細(xì)的分析，并且把這種技術(shù)和國外的先進技術(shù)進行了比較，進而給有關(guān)的檢測工作以及研究工作提供可靠的保障。

檢測的形式

（1）傳統(tǒng)的檢測形式。這樣的一種檢測方法可以及時的對于食源性致病菌進行詳細(xì)的檢測，所以這也是最常見的檢測形式。最主要的原理就是根據(jù)致病菌的化學(xué)組成部分的不同，進而所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物也不一樣，之后由于存在生化反應(yīng)，再進行相關(guān)的鑒定工作。之前的檢測形式主要有這樣幾個步驟：前增菌、選擇性增菌、選擇性分離、生物化學(xué)篩選以及血清學(xué)鑒定。之后就是評價所存在的致病菌。之前的檢測形式消耗的時間比較差。但是也存在一定的優(yōu)勢，這項技術(shù)不需要特定的設(shè)備，并且方法可靠性較高，能夠直接明確病菌的形態(tài)。當(dāng)然也存在比較多的不足，消耗的時間長，消耗的資金多，并且靈敏性差。

（2）免疫學(xué)檢測的形式。免疫學(xué)的檢測形式的原理就是抗原抗體之間進行聯(lián)系。這些年來，對于金黃色葡萄球菌的檢測方式、對于沙門氏菌的檢測形式以及對于蠟樣芽胞桿菌的檢測形式越來愈多，不過可以將其進行分類，其中包括免疫熒光技術(shù)以及酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)；要是有關(guān)的檢測形式以抗體為基礎(chǔ)，其中可以分成：乳膠凝集試驗以及免疫磁性分離技術(shù)。這樣的一種形式有著特異性強。靈敏度高以及速度快的特點，不過也會存在一定的問題，比如不具備較強的客觀性，當(dāng)然所涉及的技術(shù)也相對復(fù)雜。

分子生物學(xué)檢測形式

（1）核算探針技術(shù)。這樣的一種技術(shù)主要的形式就是把存在的核苷酸序列DNA片段采取同位素或者是別的形式進行標(biāo)記，進而形成DNA樣品，當(dāng)然也存在這樣的一種情況，那就是樣品里面的同源序列的DNA片段產(chǎn)生雜交雙鏈，進而可以鑒定所存在的DNA。核酸探針技術(shù)的特異性比較輕，并且操作起來比較簡單，所消耗的時間也比較少。

（2）基因芯片技術(shù)。這項技術(shù)是一種新型的生物技術(shù)，并且可以對于生物學(xué)進行詳細(xì)的研究，之后把所得到的數(shù)據(jù)傳輸?shù)接嘘P(guān)的芯片里面，進而確保芯片的連續(xù)性以及微型性。這項技術(shù)的發(fā)展，可以增加對于食源性致病菌的檢測力度，進而也節(jié)省了不必要的工作，進而也就節(jié)省了實踐，這項技術(shù)可以促進食源性致病菌系統(tǒng)的成立?，F(xiàn)階段的芯片技術(shù)還存在比較多的不足，不過這項技術(shù)還是存在比較多的優(yōu)點，所以需要增加對于這項技術(shù)的研究力度，進而使得這項技術(shù)得到了廣泛的使用。

PCR檢測技術(shù)

所謂的PCR技術(shù)指的就是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)，所使用的方法就是把特定基因進行擴增，或者是擴增DNA序列。這些年來，PCR技術(shù)得到了廣泛的使用并且也得到了顯著的發(fā)展：

（1）食源性致病菌的檢測形式使用的就是PCR檢測技術(shù)，其中這項技術(shù)在二十年前就有記載，不過使用這樣的技術(shù)來檢測病原微生物的方法在近些年才得到了比較多的使用，現(xiàn)階段有關(guān)的專家通過使用這樣的一種技術(shù)進而發(fā)現(xiàn)了牛肉中存在的大腸桿菌污染。通過一定的改革，這項技術(shù)可以檢測出來單增利氏菌、腸出血性大腸桿菌、沙氏門菌、金黃色葡萄球菌。

（2）對于食品進行檢測只要是為了避免出現(xiàn)病況，例如，瘋牛病，這就需要檢測動物的成分，PCR技術(shù)具有簡潔性的特點，并且這項技術(shù)靈敏度高，所以得到了比較廣泛的使用。

（3）對于食品成分的檢測需要確保食品的質(zhì)量，當(dāng)然需要確保食品的有著足夠的色香味，并且也需要確保有關(guān)的營養(yǎng)成分能夠達標(biāo)，特別是那些加工食品，因為需要多次加工才能夠完成食品的加工，不過這個時候原材料已經(jīng)發(fā)生了比較大的變化，之前的手法很難檢測出原材料的具體成分，消費者也很難得到準(zhǔn)確的消息，所以這個時候有的廠家就會鉆這樣的漏洞，進而就會使用劣質(zhì)產(chǎn)品來代替好產(chǎn)品。所以在進行檢測加工食品的時候需要使用PCR技術(shù)，所以這項技術(shù)是特別重要的。

（4）對于轉(zhuǎn)基因食品的鑒定。PCR技術(shù)在現(xiàn)階段的轉(zhuǎn)基因檢測形式里面是比較成熟的技術(shù)，可以進行定性分析也可以進行定量分析。轉(zhuǎn)基因食品重組DNA的結(jié)構(gòu)有：啟動子、目的基因、終止子以及標(biāo)志基因。在現(xiàn)在這個時期，世界上已經(jīng)有比較多基因食品通過了國家的檢測，現(xiàn)階段多數(shù)的基因食品里面會存在轉(zhuǎn)錄啟動子、轉(zhuǎn)錄終止子和抗生素抗性基因，進而也就促進了PCR技術(shù)的發(fā)展。

對于食品檢測里面的PCR技術(shù)改進的措施

對于PCR技術(shù)的改進，指的就是把快速發(fā)展的生物技術(shù)以及新型技術(shù)和PCR技術(shù)進行聯(lián)系，這樣也就可以把控外源DNA的污染，進而可以把控所產(chǎn)生的變化，通過對于PCR技術(shù)的使用可以研發(fā)出新型的技術(shù)，所以這項技術(shù)在食品檢測里面得到了廣泛的使用。

（1）定時定量PCR技術(shù)。所謂的定時定量PCR技術(shù)指的就是在有關(guān)的反應(yīng)體系里面增加熒光基團，使用熒光信號可以按時的完成有關(guān)的檢測，使用這樣的一種技術(shù)能夠把有關(guān)的模版的定量用曲線的形式進行標(biāo)志，使用定量PCR技術(shù)可以進行完全閉管檢測，這樣也就不必進行后期處理，進而也就防止出現(xiàn)污染的情況，檢測全過程所消耗的時間比較少，并且操作簡潔，準(zhǔn)確性強。近段時間，定時定量PCR技術(shù)得到了檢測人員的高度重視，所以也就得到了廣泛的使用。這項技術(shù)在進行食品加工的施工可以控制DNA中的污染，并且可以對于病原微生物進行檢測，對于轉(zhuǎn)基因食品的檢測也是比較準(zhǔn)確的。

（2）多重PCR技術(shù)。所謂的多重PCR技術(shù)指的就是通過對于單種PCR技術(shù)進行延伸而來的技術(shù)，這可以把多條引物以及多條模版進行結(jié)合在一個體系里面進而產(chǎn)生不一樣的目的條帶，再有就是把多種引物以及一種模版進行混合在一個體系里面進而擴增出不一樣的片段，這樣的一種形式也適用于對于超長片段的擴增。跟之前的PCR技術(shù)進行比較，可以看出，改進之后PCR技術(shù)效率更高、系統(tǒng)性更強并且消耗資金也比較少。從上個世紀(jì)到現(xiàn)在這個技術(shù)得到了顯著的發(fā)展，多重PCR技術(shù)在生物醫(yī)藥方面也得到了廣泛的使用，在近段時期，多重PCR技術(shù)在食品檢測工作里面也得到了廣泛的使用。多重PCR技術(shù)在進行食品檢測的時候會存在比較多的不足，比如引物之間存在抑制情況，并且引物以及模版不能進行有效結(jié)合。所以，當(dāng)使用多重PCR技術(shù)進行檢測的時候，需要充分的明確引物之間的關(guān)系，并且也需要掌握引物和模版的管理，進而對于有關(guān)的設(shè)計工作進行改善，防止出現(xiàn)更嚴(yán)重的情況。

（3）定時熒光定量PCR技術(shù)。這項技術(shù)在進行檢測的時候會涉及到：同源的DNA背景以及異源DNA背景，也包括寡核苷酸雜交特異性、探針比例、細(xì)胞裂解效率、mRNA部分講解這些主要的影響，嚴(yán)重的話會造成定量結(jié)果出現(xiàn)誤差或者就是出現(xiàn)錯誤的結(jié)果，所以當(dāng)實施操作的時候要充分的研究設(shè)計引物的特點，進而提出相應(yīng)的改進措施。現(xiàn)階段多應(yīng)用的引物探針成本比較高，并且對于設(shè)施的要求也比較大，所以需要減少探針設(shè)備所消耗的成本，并且需要研發(fā)出新型的技術(shù)，之后通過更加深刻的研究進而改善現(xiàn)階段的技術(shù)，這樣也就促進了PCR技術(shù)的發(fā)展。

對于PCR技術(shù)應(yīng)用的展望

PCR技術(shù)對于食品致病菌的檢測工作，對于食品有效成分的檢測工作、對于食品成分種類以及轉(zhuǎn)基因食品的檢測來說都是特別重要的，之前的PCR技術(shù)存在比較多的不足，尤其是在進行定量檢測以及定性檢測的時候，所以需要增加技術(shù)的靈敏度和重復(fù)性、并且也需要改進現(xiàn)有的設(shè)備進而降低有關(guān)的成本，通過詳細(xì)的分析，進而增加對于PCR技術(shù)的了解程度。由于生物技術(shù)的持續(xù)發(fā)展，并且食品檢測的要求越來越高，所以PCR改進技術(shù)得到了顯著的發(fā)展。

通過PCR改進技術(shù)和之前的PCR技術(shù)進行比較之后可以發(fā)展，新型的技術(shù)具有更多的優(yōu)點，不僅簡化了mRNA的重復(fù)定量，也簡化了檢測的過程，由于新型技術(shù)精確性高、反應(yīng)速度快、并且特異性強，并且消耗的時間也比較少，進而也就增加了篩選的范圍。不過這些改進之后的技術(shù)也會有一定的不足，所以這些需要完善現(xiàn)階段的技術(shù)，進而促進食品檢測工作的發(fā)展。再有就是通過對于改進技術(shù)的整理，進而把有關(guān)的技術(shù)結(jié)合到一個體系里面，進而產(chǎn)生一套更加完整的方法，使得食品檢測技術(shù)靈敏度更高、特異性更強，操作起來更加簡單并且能夠獲取更多的經(jīng)濟利益，進而也就促進了食品檢測工作的發(fā)展。

PCR技術(shù)在食品檢測工作里面得到了廣泛的使用，不過這項技術(shù)也會存在一定的不足，所以由于這項技術(shù)的持續(xù)進步，進而所得到的結(jié)果也就越來越準(zhǔn)確， 進而使得PCR技術(shù)得到更加全面的發(fā)展。