不同溫度下恩諾沙星及其代謝物在斑點(diǎn)叉尾鮰各組織中的殘留及消除規(guī)律比較

楊秋紅艾曉輝劉永濤胥 寧趙 鳳

(1.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所, 農(nóng)業(yè)部淡水魚類種質(zhì)監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心, 武漢 430223; 2.貴州省水產(chǎn)研究所, 貴陽(yáng) 550025)

不同溫度下恩諾沙星及其代謝物在斑點(diǎn)叉尾鮰各組織中的殘留及消除規(guī)律比較

楊秋紅1艾曉輝1劉永濤1胥 寧1趙 鳳2

(1.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所, 農(nóng)業(yè)部淡水魚類種質(zhì)監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心, 武漢 430223; 2.貴州省水產(chǎn)研究所, 貴陽(yáng) 550025)

分別在18℃和28℃水溫下, 以20 mg/(kg·d)魚體質(zhì)量對(duì)斑點(diǎn)叉尾鲙給藥恩諾沙星, 連續(xù)灌胃7d。給藥后在不同的時(shí)間點(diǎn)取樣, 用高效液相色譜熒光檢測(cè)器檢測(cè), 研究恩諾沙星及其主要代謝產(chǎn)物環(huán)丙沙星在斑點(diǎn)叉尾鲙體內(nèi)(血液、肌肉、皮膚、肝臟和腎臟)的殘留消除規(guī)律。結(jié)果表明, 恩諾沙星在不同組織、不同水溫消除速率不同: 水溫為18℃, 皮膚、肝臟、腎臟和肌肉中的消除曲線方程分別為C=1022.1e–0.034t、C=2601.3e–0.046t、C=2903.6e–0.072t和C=1186.5e–0.036t, 消除半衰期分別為31.79d、45.29d、16.15d和35.54d; 水溫為28℃, 皮膚、肝臟、腎臟和肌肉中的消除曲線方程分別為C=8805.5e–0.04t、C=3154e–0.08t、C=4145.1e–0.1t和C=1302.1e–0.068t, 消除半衰期分別為18.33d、6.26d、12.44d和10.34d。恩諾沙星在斑點(diǎn)叉尾鲙體內(nèi)可代謝為環(huán)丙沙星, 恩諾沙星在斑點(diǎn)叉尾鲙體內(nèi)的代謝速度較慢, 代謝物環(huán)丙沙星在斑點(diǎn)叉尾鲙體內(nèi)的消除速度比恩諾沙星快; 在18℃水溫下,斑點(diǎn)叉尾鲙肉中的恩諾沙星和環(huán)丙沙星完全消除需要150d以上; 在28℃水溫下, 斑點(diǎn)叉尾鲙肉中的恩諾沙星和環(huán)丙沙星完全消除需要120d。在實(shí)驗(yàn)條件下, 建議水溫為18℃和28℃時(shí), 休藥期分別為3240℃·日和4200℃·日。

斑點(diǎn)叉尾鲙; 恩諾沙星; 環(huán)丙沙星; 消除; 殘留

恩諾沙星(Enrofloxacin, EF)又名乙基環(huán)丙氟哌酸、乙基環(huán)丙沙星, 俗稱海達(dá), 屬第3代喹諾酮類藥物, 是化學(xué)合成的第三代喹諾酮類廣譜抗菌藥物,是一族新型殺菌性抗菌藥[1—3]。具有口服及肌注后吸收迅速、完全、消除半衰期較長(zhǎng)、體內(nèi)分布廣泛、表觀分布容積大等藥動(dòng)學(xué)特征, 因其具有抗菌譜廣、抗菌力強(qiáng)、作用迅速、體內(nèi)分布廣泛, 與其他抗菌藥之間無(wú)交叉耐藥性及敏感微生物的最小抑菌濃度MIC較低等特點(diǎn), 而廣泛用于動(dòng)物和人類多種感染性疾病的治療, 對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物多種細(xì)菌感染性疾病也具有很好的療效。但由于養(yǎng)殖人員缺乏相應(yīng)的理論指導(dǎo), 使用過(guò)程中導(dǎo)致藥物濫用, 而且恩諾沙星代謝緩慢, 易殘留于動(dòng)物體的肌肉、肝臟和腎臟等組織中, 其毒副作用逐漸顯現(xiàn), 加上人們對(duì)食品安全意識(shí)的不斷加強(qiáng), 其藥物及代謝產(chǎn)物環(huán)丙沙星(Ciprofloxacin, CF)殘留問(wèn)題已引起了國(guó)內(nèi)外的普遍重視[4—8]。

鑒于此, 國(guó)內(nèi)外已報(bào)道了恩諾沙星在養(yǎng)殖魚類如虹鱒、大西洋鮭、鰻鱺、鱸、眼斑石首魚和鯉等體內(nèi)的殘留情況, 有關(guān)恩諾沙星在斑點(diǎn)叉尾鲙(Ietalurus punetaus)體內(nèi)的殘留及消除規(guī)律研究尚未見(jiàn)報(bào)道。筆者主要研究了在不同水溫下, 多次口服恩諾沙星后, 其在斑點(diǎn)叉尾鲙各組織中的殘留和消除特點(diǎn), 據(jù)此確定合理的用藥方案, 確立休藥期,為藥物殘留標(biāo)準(zhǔn)的限量提供基礎(chǔ)性數(shù)據(jù), 為漁藥殘留監(jiān)控和食品安全提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康斑點(diǎn)叉尾鲙, 平均質(zhì)量為(60.13±15.23) g, 由湖北省仙桃市水產(chǎn)局提供, 試驗(yàn)在實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)箱中進(jìn)行。室溫由空調(diào)控制在16℃, 室內(nèi)水溫在(18±2)℃左右, 通過(guò)加熱棒調(diào)節(jié)水溫, 可控制水溫在(28±2)℃, 實(shí)驗(yàn)在這2種溫度下進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)前, 斑點(diǎn)叉尾鲙在室內(nèi)網(wǎng)箱(1 m×2 m×1.5 m)內(nèi)暫養(yǎng)一周, 每個(gè)網(wǎng)箱放置50尾, 共3個(gè)網(wǎng)箱。試驗(yàn)期間,每天上午8點(diǎn)和下午6點(diǎn)投喂飼料, 并記錄水溫。

試劑乙腈、正己烷、質(zhì)譜水(色譜純, 美國(guó)CNW公司), 四丁基溴化銨(分析純, 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司), 無(wú)水硫酸鈉(分析純, 國(guó)藥集團(tuán)),恩諾沙星標(biāo)準(zhǔn)品(純度>99.0%, Dr.Ehrenstorfer GmbH), 環(huán)丙沙星標(biāo)準(zhǔn)品(純度>95.0%, Dr.Ehrenstorfer GmbH), 水產(chǎn)用鹽酸恩諾沙星粉(純度99.8%,產(chǎn)品批號(hào)120418-8, 購(gòu)自浙江國(guó)邦藥業(yè)有限公司)。

儀器高效液相色譜(Waters515泵, 717自動(dòng)進(jìn)樣器, 2475多通道熒光檢測(cè)器, 配Empower色譜工作站, 美國(guó)Waters公司), METTLE-TOLEDO精密電子天平(AE-240, 梅特勒-托利多公司), 自動(dòng)高速冷凍離心機(jī)(20PR-520, 日本HITACH公司), 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(Hei-VAP, 德國(guó)Heidolph公司), 氮吹儀(KD200,杭州奧盛儀器有限公司), 渦旋混合器(HQ-60, 北方同正)。

1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

稱取鹽酸恩諾沙星原粉400 mg, 用5%冰醋酸溶解后, 加飼料10 g, 定容至100 mL, 此時(shí)EF含量為4 mg/mL, 使用20 mg/(kg·d)的劑量連續(xù)灌胃7d, 每天固定在上午9點(diǎn)喂藥。隨后定時(shí)投喂無(wú)藥的飼料,每天兩次, 并記錄水溫。在第7天投藥結(jié)束后, 立即采樣, 此樣品算作第0天樣品, 其后從最后一次灌胃算, 1、3、5、7、9、11、13、15、20、30、45、65d ￠ ￠￠￠￠￠后采樣, 算作第1、第3、第5、第7、第9、第11、第13、第15、第20、第30、第45、第65天￠￠￠￠￠￠的樣品。每次各取斑點(diǎn)叉尾鲙5尾作為平行樣, 現(xiàn)場(chǎng)取斑點(diǎn)叉尾鲙血漿、肌肉、皮膚、肝臟和腎臟,用均漿機(jī)或剪刀制成均勻樣品, 及時(shí)送至實(shí)驗(yàn)室處理和檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)時(shí)間2013年7月—2013年10月。

1.3 方法

樣品處理準(zhǔn)確稱取剪碎或研磨后的肌肉樣品5.00 g(肝臟、腎臟、皮膚各1.00 g, 血漿1.00 mL), 依次加入5 g無(wú)水硫酸鈉(肝臟、腎臟、皮膚、血漿各1 g)和10 mL酸化乙腈(肝臟、腎臟、皮膚、血漿各5 mL), 用渦旋儀混勻后, 超聲10—15min后, 6000 r/min離心5min, 去上層清液。往殘?jiān)欣^續(xù)加10 mL酸化乙腈(肝臟、腎臟、皮膚、血漿各5 mL), 重復(fù)操作, 合并上層清液, 于55℃氮吹儀上氮吹至干。用2.0 mL流動(dòng)相充分溶解, 渦旋并離心后, 并經(jīng)0.22 μm微孔過(guò)濾膜過(guò)濾后,供高效液相色譜儀測(cè)定。

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制和標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備準(zhǔn)確稱取0.020 g恩諾沙星和環(huán)丙沙星, 用乙腈稀釋, 并定容至100 mL, 配制成200 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。配制時(shí)使用棕色容量瓶, 低溫避光儲(chǔ)存, 有效期為6個(gè)月。將恩諾沙星和環(huán)丙沙星標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用流動(dòng)相依次稀釋, 配制恩諾沙星和環(huán)丙沙星的濃度為5、10、20、50和100 ng/mL的低濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線; 配制恩諾沙星和環(huán)丙沙星的濃度為100、200、500、1000和2000 ng/mL的高濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線。采用高效液相色譜熒光檢測(cè)器分析檢測(cè)。以恩諾沙星、環(huán)丙沙星濃度為橫坐標(biāo)X, 以其峰面積為縱坐標(biāo)Y, 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線, 并計(jì)算回歸方程及相關(guān)系數(shù)。

回收率和檢測(cè)限取不含恩諾沙星和環(huán)丙沙星藥物的斑點(diǎn)叉尾鲙組織(以下簡(jiǎn)稱空白樣品)加入一定量的恩諾沙星、環(huán)丙沙星標(biāo)準(zhǔn)溶液, 放置至少30min, 每個(gè)樣品同時(shí)做7個(gè)平行。再按照樣品預(yù)處理方法進(jìn)行處理后進(jìn)樣, 分別計(jì)算組織中恩諾沙星和環(huán)丙沙星的含量?？瞻讟悠分刑砑拥馁|(zhì)量濃度分別為: 1、4、20和100 μg/kg。以引起3倍基線噪音的藥量的質(zhì)量濃度作為最低檢測(cè)限。

色譜條件色譜柱: 反相色譜柱C18柱(250 mm× 4.6 mm, 5 μm); 流動(dòng)相鯰乙腈鯰四丁基溴化銨=10鯰90(v/v); 流速1.0 mL/min; 激發(fā)波長(zhǎng)280 nm, 發(fā)射波長(zhǎng)450 nm; 柱溫: 30℃; 進(jìn)樣量: 10 μL。

數(shù)據(jù)處理標(biāo)準(zhǔn)曲線, 消除方程及休藥期計(jì)算, 采用Microsoft Excel 2010進(jìn)行處理和繪制, 消除規(guī)律柱狀圖采樣Origin7.5進(jìn)行計(jì)算和繪制。消除方程采用C=C0e–kt, C表示藥物濃度, C0為殘留消除對(duì)數(shù)曲線的截距(μg/kg或ng/mL), k表示消除速率常數(shù)。

2 結(jié)果

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線與相關(guān)系數(shù)、方法檢測(cè)限及回收率

在5—100 ng/mL和100—2000 ng/mL內(nèi)恩諾沙星線性關(guān)系良好, 其線性方程分別為: Y=18101X–754315、Y=20404X–2×106; 相關(guān)系數(shù)r2均大于0.9980。在本試驗(yàn)條件下, 組織中恩諾沙星最低檢測(cè)限為1.0 μg/L, 環(huán)丙沙星最低檢測(cè)限為2.0 μg/L。各組織中低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度加標(biāo)水平的恩諾沙星和環(huán)丙沙星平均回收率在70.35%—90.63%, 分析方法滿足要求。

2.2 水溫為18℃時(shí), 恩諾沙星及其代謝物在斑點(diǎn)叉尾鲖體內(nèi)的殘留消除情況

從表 1可以很明顯地看出, 在水溫為18℃時(shí), 斑點(diǎn)叉尾鲙5種組織中EF的初始?xì)埩魸舛却笥贑F的殘留濃度, 而且在代謝過(guò)程中, EF代謝速率比CF快。第0天, 肝臟中EF濃度最高, 遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于其他組織中的濃度, 其次是腎臟和血液, 皮膚和肌肉中較低。隨后肝臟、腎臟和血液中的EF殘留濃度在停止用藥后第5天(以下簡(jiǎn)稱第5天), 濃度迅速下降至初始濃度的5%左右, 降解速率極快。至第9天, 皮膚和肌肉中的EF殘留濃度降至初始濃度的1/2以下。初始CF殘留濃度在肝臟中最高, 其次是腎臟和肌肉中, 皮膚和血液中最少。隨后時(shí)間, 血液中CF略有增加, 并在第9天消除至檢測(cè)限以下。腎臟中的CF殘留濃度在第3天也增高至971.88 μg/kg, 并于第30天消除完。肝臟和皮膚中的CF在第3天增至最高后, 逐步降低, 并均于第90天消除至檢測(cè)限以下。肌肉中CF濃度從第0天的558.61 μg/kg逐步降低, 第7天降至最高濃度1/2以下, 第120天完全消除。

表 1 在水溫為18℃條件下, 斑點(diǎn)叉尾鲙體內(nèi)的恩諾沙星及其代謝物殘留量Tab.1 Residues of enrofloxacin and its metabolites in tissues of channel catfish under the temperature of 18℃

2.3 水溫為28℃時(shí), 恩諾沙星及其代謝物在斑點(diǎn)叉尾鲖體內(nèi)的殘留消除情況

從表 2得出, 在水溫為28℃時(shí), 第0天斑點(diǎn)叉尾鲙5種組織中EF的初始?xì)埩魸舛纫彩谴笥贑F的殘留濃度, EF代謝速率比CF快。第0天肝臟、皮膚和腎臟中EF濃度較高, 肌肉和血液中略低。第 0天肝臟中EF濃度最高, 達(dá)到110861.49 μg/kg, 第3天迅速降至1979.68 μg/kg, 隨后在緩慢降低的過(guò)程中, 濃度偶有增加, 第90天完全消除。皮膚、腎臟和肌肉的EF濃度至第5天均降至初始濃度的10%以下。血液的EF濃度從最初的8831.38 μg/kg逐步降低, 至第30天降解完。從初始濃度至第3天, 血液中CF殘留濃度均降低50%以上, 第7天消除完。腎臟中CF濃度至第45天消除完, 肝臟中CF濃度至第65天消除完。而皮膚和肌肉中CF殘留濃度第90天才完全消除。

2.4 水溫18℃和28℃時(shí), 恩諾沙星及其代謝物在斑點(diǎn)叉尾鲖體內(nèi)的殘留消除比較

從初始濃度來(lái)看: 在2種水溫下, EF的初始濃度總是比CF濃度高。水溫為28℃, 皮膚和肌肉中EF的初始濃度比水溫為18℃高, 血液、肝臟和腎臟初始濃度則在18℃時(shí)較高, 這說(shuō)明在高水溫下血液循環(huán)加快, 使得藥物進(jìn)入外周室的速率加快, 18℃時(shí)血液、肝臟和腎臟的藥物吸收量大。除肌肉中CF的初始濃度略低外, 其余4種組織中, 水溫為28℃CF初始濃度較水溫為18℃時(shí)高, 這說(shuō)明水溫越高, EF轉(zhuǎn)化為CF的速率越高。

從降解趨勢(shì)來(lái)看: 水溫為18℃, 5種組織中的EF第0天達(dá)到最高濃度, 隨后迅速降解然后再緩慢降低; 除了肌肉中的CF是由第0d的最高逐步降解之外, 其余4種組織中的CF濃度都是先升高, 后降低。整體來(lái)說(shuō), 濃度降解趨勢(shì)比較明了。水溫為28℃,除肝臟中EF的濃度在第3天略有增加, 其余組織中CF和EF都是第0天初始達(dá)到最高濃度后開始降低,但是有一個(gè)很明顯的特點(diǎn), 在隨后的消除過(guò)程中, EF和CF的殘留濃度又會(huì)升高, 再降低, 出現(xiàn)反復(fù)吸收的過(guò)程。

從降解速率來(lái)看: 水溫為28℃時(shí), 不管是CF還是EF降解速率明顯比水溫為18℃的快。水溫在28℃, 皮膚中EF濃度第0天為69153.72 μg/kg, 第3天急劇降至6882.77 μg/kg, 降解率為90.0%; 而同樣情況, 腎臟降解率為91.3%。在水溫為28℃時(shí), 皮膚中CF濃度從第0到第3天降解率為87.5%, 腎臟降解率為61.5%。水溫為18℃, 皮膚中EF濃度從第0到第3天降解率為30.9%, 差不多是水溫為28℃時(shí)降解率的1/3; 同樣情況腎臟降解率為64.9%, 幾乎是水溫為28℃時(shí)降解率的2/3。

表 2 在水溫為28℃條件下, 斑點(diǎn)叉尾鲙體內(nèi)的恩諾沙星及其代謝物殘留量Tab.2 Residues of enrofloxacin and its metabolites in tissues of channel catfish under the temperature of 28℃

從消除時(shí)間來(lái)看: CF的消除時(shí)間比EF消除時(shí)間短。28℃水溫下藥物的消除時(shí)間比18℃水溫下藥物消除時(shí)間短。水溫18℃肝臟中的EF濃度至第150天仍殘留1.34 μg/kg, 而28℃水溫下, 第90天就已經(jīng)未檢出了。

2.5 皮膚、肝臟、腎臟和肌肉中EF的消除參數(shù)

采用Microsoft Excel處理得到藥物濃度(C)-消除時(shí)間(t)關(guān)系的回歸方程、相關(guān)系數(shù)(r2)以及消除半衰期(T1/2)(表 3)。在水溫為18℃時(shí), EF在皮膚、肝臟、腎臟和肌肉中的半衰期分別為31.79d、45.29d、16.15d和35.54d; 在水溫為28℃時(shí), EF在皮膚、肝臟、腎臟和肌肉中的半衰期分別為18.33d、6.26d、12.44d和10.34d。

3 討論

3.1 恩諾沙星的代謝情況

周帥等[9]的研究結(jié)果表明: 恩諾沙星在水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)反應(yīng)以原形物為主, 其代謝產(chǎn)物檢測(cè)到少量的環(huán)丙沙星, 且恩諾沙星在生物體內(nèi)脫乙基反應(yīng)生成環(huán)丙沙星, 然后進(jìn)一步加氫還原生成哌嗪環(huán)開環(huán)化合物。房文紅等[10]研究了恩諾沙星在在擬穴青蟹血淋巴中的代謝產(chǎn)物及其結(jié)構(gòu), 發(fā)現(xiàn)3種代謝產(chǎn)物,分別為環(huán)丙沙星, 羥基化恩諾沙星以及加氧恩諾沙星, 這表明, 恩諾沙星在不同動(dòng)物體內(nèi)的代謝存在較大的種屬差異, 主要原因可能是參與藥物代謝的酶組成和水平不同[11]。本研究結(jié)果表明, 采用恩諾沙星灌胃斑點(diǎn)叉尾鲙, 斑點(diǎn)叉尾鲙體內(nèi)可同時(shí)檢測(cè)到恩諾沙星和環(huán)丙沙星, 這表明恩諾沙星可代謝為環(huán)丙沙星, 但是代謝率較低。比如在結(jié)束灌藥后,即第0天的檢測(cè)結(jié)果來(lái)看, 18℃時(shí)EF為209864.87 μg/ kg, CF為5232.17 μg/kg, 后者是前者的2.5%; 28℃時(shí)EF為110861.49 μg/kg, CF為7103.73 μg/kg是前者的6.4%。

表 3 EF在斑點(diǎn)叉尾鲙皮膚、肝臟、腎臟和肌肉中的消除曲線方程和相關(guān)系數(shù)Tab.3 The equation of elimination curve and correlation index in skin, liver, kidney and muscle of channel catfish

3.2 溫度對(duì)藥物殘留消除的影響

此試驗(yàn)表明, 試驗(yàn)水溫對(duì)藥物的吸收和分布速度有直接的影響。Ellis等[12]認(rèn)為, 在一定水溫范圍內(nèi), 藥物在魚體中的代謝速率與水溫成正比, 溫度升高1℃, 魚的代謝活力增加10%。艾曉輝等[13]的研究表明: 水溫變化對(duì)水生動(dòng)物藥物代謝影響很大, 一般來(lái)說(shuō), 在一定范圍內(nèi), 藥物代謝強(qiáng)度與水溫成正比。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明: 水溫高有利于EF在皮膚和肌肉中的迅速分布, 有利于EF迅速轉(zhuǎn)化為CF并消除。有研究發(fā)現(xiàn)肝臟中各種細(xì)胞色素氧化還原酶負(fù)責(zé)藥物代謝, 在魚、蚌類等中都有這類酶。有研究證實(shí), 這種酶將EF代謝為CF, 而且該酶對(duì)溫度非常敏感, 28℃可能比較接近其最適溫度, 因此藥物消除快, 而18℃低于酶的最適溫度, 酶活性低, 所以藥物吸收和代謝時(shí)間延長(zhǎng)[14]。

3.3 休藥期的確定

本文研究了在不同水溫下, 恩諾沙星及其代謝物在斑點(diǎn)叉尾鲙各個(gè)組織中的殘留和消除規(guī)律, 為制定恩諾沙星在水產(chǎn)品中休藥期提供了科學(xué)依據(jù)。制定休藥期不僅要考慮最高殘留限量, 還應(yīng)該考慮水溫等水環(huán)境狀況。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果, 在18℃水溫下, 斑點(diǎn)叉尾鲙肉中的EF和CF完全消除需要150d以上; 在28℃水溫下, 斑點(diǎn)叉尾鲙肉中的EF和CF完全消除需要120d, 因此建議水溫為18℃和28℃時(shí)，休藥期分別為3240℃·日和4200℃·日。

[1]Song H B, Wu G H, Shen M F, et al.Risk evaluation of enrofloxacin in aquatic product [J].Fishery Modernization, 2008, 35(5): 39—42 [宋洪波, 吳光紅, 沈美芳, 等.恩諾沙星在水產(chǎn)品中殘留的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估.漁業(yè)現(xiàn)代化, 2008, 35(5): 39—42]

[2]Wang H Y, Li Z X, Xing L H, et al.Pharmacokinetics of enrofloxacin and its metabolite ciprofloxacin in flounder Paralichthys olivaceus [J].Progress in Fishery Sciences, 2014, 35(3): 44—49 [王洪艷, 李兆新, 邢麗紅, 等.恩諾沙星及其代謝產(chǎn)物環(huán)丙沙星在牙鲆體內(nèi)代謝消除規(guī)律.漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展, 2014, 35(3): 44—49]

[3]Tang X Z, Li Z X, Xing L H, et al.Analysis on the metabolites of enrofloxacin in the carp liver by using HPLC/Q-TRAP MS [J].Farm Products Processing, 2016, 37(1): 148—149 [唐錫招, 李兆新, 邢麗紅, 等.液相色譜-三重四級(jí)桿復(fù)合線性離子阱質(zhì)譜法分析恩諾沙星在鯉魚中的代謝產(chǎn)物.漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展, 2016, 37(1): 148—149]

[4]Ye J M, Wu K, Wu H L, et al.Research progress of pharmacokinetics and pharmacodynamics of enrofloxacin [J].Hubei Agricultural Sciences, 2015, 54(23): 5813—5815 [葉建美, 吳康, 吳洪麗, 等.恩諾沙星抗菌效果及藥代動(dòng)力學(xué)研究進(jìn)展.湖北農(nóng)業(yè)科學(xué), 2015, 54(23): 5813—5815]

[5]Zhou S, Hu L L, Fang W H, et al.Pharmacokinetics of enrofloxacin and its metabolite ciprofloxacin in mud crab (Scylla paramamosain) [J].Fisheries Science, 2011, 35(8): 1182—1188 [周帥, 胡琳琳, 房文紅, 等.恩諾沙星及其代謝產(chǎn)物環(huán)丙沙星在擬穴青蟹體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué).水產(chǎn)學(xué)報(bào), 2011, 35(8): 1182—1188]

[6]Ding F K, Cao J Y, Ma L B.Pharmacokinetics and tissue residues of difloxacin in crucian carp (Carassius auratus) after oral administration [J].Aquaculture, 2006(256): 121—128

[7]Sun H Y, Chen J Y, Wang Y F, et al.The residues and elimination of enrofloxacin and ciprofloxacin in loach Misgurnus anguillicaudatus [J].Progress in Fishery Sciences, 2015, 36(4): 128—131 [孫慧宇, 陳君義, 王云飛,等.恩諾沙星和環(huán)丙沙星在泥鰍體內(nèi)的殘留和消除規(guī)律.漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展, 2015, 36(4): 128—131]

[8]Bi T T, Zhao H Y, Zhang S L.Acute toxicity experience to goldfish of ofloxacin, norfloxacin lactate and enrofloxacin [J].Farm Products Processing, 2015, 8: 31—32 [畢田田, 趙海燕, 張雙靈.氧氟沙星、乳酸諾氟沙星和恩諾沙星對(duì)金魚的急性毒性試驗(yàn)研究.農(nóng)產(chǎn)品加工, 2015, 8: 31—32]

[9]Zhou S, Hu L L, Sun B B, et al.Analysis of the metabolites of enrofloxacin from Litopenaeus vannamei in vivo and in vitro using UPLC/Q-TOF MS [J].Marine Fisheries, 2012, 34(3): 347—348 [周帥, 胡琳琳, 孫貝貝, 等.恩諾沙星在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)和體外肝微粒體中的代謝產(chǎn)物比較分析.海洋漁業(yè), 2012, 34(3): 347—348]

[10]Fang W H, Hu L L, Chen Y L, et al.Analysis on the metabolites of enrofloxacin in the hemolymph of mud crab (Scylla serrata) by means of LC/MSn [J].Marine Fisheries, 2008, 30(4): 350—355 [房文紅, 胡琳琳, 陳玉露, 等.采用LC/MSn法分析恩諾沙星在鋸緣青蟹血淋巴中的代謝產(chǎn)物.海洋漁業(yè), 2008, 30(4): 350—355]

[11]Zhao D M, Li Y, Lu Y H.The role of drug metabolism in new drug development [J].Acta Pharmaceutica Sinica, 2000, 35(2): 156—160 [趙冬梅, 李燕, 盧業(yè)竑.藥物代謝研究在新藥開發(fā)中的應(yīng)用.藥學(xué)學(xué)報(bào), 2000, 35(2): 156—160]

[12]Ellis, A,E.The Anatomy and Physiology of Teleosts [M].In: Roberts R J (Eds.), Fish Physiology.Bailliere Tindall, London.1978, 13—54

[13]Ai X H, Liu C Z, Zhou Y T.A study on pharmacokinetic of sulphamethoxazole in grass carpat different temperatures and administration regimes [J].Acta Hydrobiologica Sinica, 2005, 29(2): 210—214 [艾曉輝, 劉長(zhǎng)征, 周運(yùn)濤.不同水溫和給藥方式下磺胺甲惡唑在草魚體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)研究.水生生物學(xué)報(bào), 2005, 29(2): 210—214]

[14]Wu G H, Zhang J B, Meng Y, et al.Pharmacokinetics of enrofloxacin in the Chinese mitten-handed crab, Eriochir sinensis at three water temperatures [J].Journal of Nanjing Agricultural University, 2008, 31(2): 105—110 [吳光紅, 張靜波, 孟勇, 等.不同水溫下恩諾沙星在中華絨螯蟹體內(nèi)藥物代謝動(dòng)力學(xué).南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 2008, 31(2): 105—110]

STUDIES ON ELIMINATION DYNAMICS OF ENROFLOXACIN RESIDUES AND ITS METABOLITES IN CHANNEL CATFISH AT TWO DIFFERENT WATER TEMPERATURES

YANG Qiu-Hong1, AI Xiao-Hui1, LIU Yong-Tao1, XU Ning1and ZHAO Feng2
(1.Freshwater Fish Germplasm Quality Supervision and Testing Center, Ministry of Agriculture, Yangtze River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Science, Wuhan 430223, China; 2.Fisheries Research Institute of Guizhou Province, Guiyang 550025, China)

At water temperature of 18℃ and 28℃, channel catfish was administered orally with enrofloxacin (EF) in dose of 20 mg/kg for 7 days, the time courses of concentrations of enrofloxacin and ciprofloxacin in fish tissues (plasma, muscle, skin, liver and kidney) were measured with high-performance liquid chromatography and a fluorescence detector.The results indicated that elimination of enrofloxacin was different in skin, liver, kidney and muscle at 18℃ and 28℃: the equations of elimination curve of enrofloxacin in skin, liver, kidney and muscle were C=1022.1e–0.034t, C=2601.3e–0.046t, C=2903.6e–0.072tand C=1186.5e–0.036t, the elimination half-lives were 31.79d, 45.29d, 16.15d and 35.54d at 18℃, respectively; the equations of elimination curve of enrofloxacin were C=8805.5e–0.04t, C=3154e–0.08t, C=4145.1e–0.1tand C=1302.1e–0.068t, the elimination half-lives were 18.33d, 6.26d, 12.44d and 10.34d at 28℃, respectively.Enrofloxacin was changed into ciprofloxacin, the metabolism and elimination of enrofloxacin in channel catfish was relatively slower; enrofloxacin and ciprofloxacin in the channel catfish tissues could not be found after 150 days at 18℃, and 120 days at 28℃.The predicted withdrawal time was 3240℃·d and 4200℃·d respectively.

Channel catfish (Ietalurus punetaus); Enrofloxacin; Ciprofloxacin; Elimination; Residues

S948

A

1000-3207(2017)04-0781-06

10.7541/2017.97

2016-07-13;

2016-11-05

公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201503108-CC-1)資助 [Supported by the Fund for Agro-scientific Research in the Public Interest (201503108-CC-1)]

楊秋紅(1986—), 女, 回族, 河南禹州人, 碩士; 研究方向?yàn)樗a(chǎn)動(dòng)物藥理及藥殘控制技術(shù)。E-mail: qmini1986@163.com

艾曉輝, E-mail: aixh@yfi.ac.cn