克拉霉素制劑的穩(wěn)定性及其在胃液中的溶出與降解研究

隋思博，程 晶，宮麗婷，李 竹

（1.吉林省藥品檢驗(yàn)所，吉林 長(zhǎng)春 130033；2.遼寧惠康檢測(cè)評(píng)價(jià)技術(shù)有限公司，遼寧 沈陽(yáng) 110000；3.長(zhǎng)春金賽藥業(yè)有限責(zé)任公司，吉林 長(zhǎng)春 130000）

?實(shí)驗(yàn)研究?

克拉霉素制劑的穩(wěn)定性及其在胃液中的溶出與降解研究

隋思博1，程 晶2，宮麗婷1，李 竹3

（1.吉林省藥品檢驗(yàn)所，吉林 長(zhǎng)春 130033；2.遼寧惠康檢測(cè)評(píng)價(jià)技術(shù)有限公司，遼寧 沈陽(yáng) 110000；3.長(zhǎng)春金賽藥業(yè)有限責(zé)任公司，吉林 長(zhǎng)春 130000）

目的探索克拉霉素制劑的穩(wěn)定性，對(duì)其在胃液中的溶出與降解進(jìn)行研究。方法考察溫度、濕度對(duì)克拉霉素制劑的性狀、有關(guān)物質(zhì)以及含量的影響；采用HPLC法測(cè)定克拉霉素在人工胃液中的溶出與降解率，并對(duì)過(guò)程進(jìn)行分析。結(jié)果克拉霉素顆粒、膠囊、片劑、分散片的含量與有關(guān)物質(zhì)對(duì)溫度很穩(wěn)定，在60℃40天內(nèi)無(wú)明顯變化；RT90%放置的樣品比較穩(wěn)定，性狀、有關(guān)物質(zhì)總量、含量均無(wú)明顯變化；克拉霉素在酸性的胃液環(huán)境下易降解，最大只能達(dá)到17%的溶出率，其他都以降解產(chǎn)物的形式存在，主要降解產(chǎn)物為去克拉啶糖的克拉霉素。結(jié)論克拉霉素制劑在不同溫度濕度條件下穩(wěn)定性較好，建議延長(zhǎng)考察藥物長(zhǎng)期穩(wěn)定性的時(shí)間，制定合理的藥物保存期限；克拉霉素在胃液的降解情況為其做成緩釋制劑提供了依據(jù)。

克拉霉素；穩(wěn)定性；溶出；降解

藥物的穩(wěn)定性用于評(píng)價(jià)藥物安全性和有效期，也是核定藥物使用期的主要依據(jù)[1]，影響藥物穩(wěn)定性的因素主要包括處方因素和環(huán)境因素。處方因素包括輔料、溶液酸堿度、溶劑、表面活性劑等因素，環(huán)境因素包括溫度、濕度、光線以及包裝材料等[2-3]。大環(huán)內(nèi)酯類藥物在胃液中均較容易降解，生物利用度比較低。如紅霉素，作為第一代大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的代表，由于6位氫氧根、8位氫和9位羰基的相互作用，其活性降低，因此紅霉素在胃酸中及不穩(wěn)定，失去了抗菌活性，被降解為無(wú)活性的副產(chǎn)物，降低了生物利用度[4-5]。第二代大環(huán)內(nèi)酯類抗生素——克拉霉素、阿奇霉素、羅紅霉素等相繼產(chǎn)生，并于二十世紀(jì)九十年代上市[6]。本文探索克拉霉素片在胃液中的溶出過(guò)程與降解過(guò)程，為真實(shí)反映克拉霉素片在人體內(nèi)吸收前的過(guò)程提供依據(jù)，為克拉霉素緩釋劑型的合理性提供參考。

1 儀器與試劑、試藥

RC806溶出度測(cè)定儀，sartorius BT25S電子天平，島津LC-20A液相色譜儀，色譜乙腈，超純水，試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 克拉霉素制劑穩(wěn)定性考察

樣品裸露在相對(duì)濕度30%、溫度分別為40℃、60℃條件下，分別對(duì)放置3天、10天、20天、40天樣品的性狀、有關(guān)物質(zhì)、含量進(jìn)行測(cè)定；在相對(duì)濕度90%、溫度20℃條件下，分別對(duì)放置3天、10天、20天、40天樣品的性狀、有關(guān)物質(zhì)、含量進(jìn)行測(cè)定?？疾鞙囟?、濕度對(duì)克拉霉素制劑的影響。

2.2 克拉霉素在胃液中的溶出與降解

2.2.1 溶出度實(shí)驗(yàn)參數(shù)：溶出介質(zhì)為人工胃液，漿法，溶出介質(zhì)900 ml，轉(zhuǎn)速50轉(zhuǎn)/分。

2.2.2 HPLC參數(shù)：流動(dòng)相A相：磷酸鹽緩沖液，流動(dòng)相B相：乙腈。梯度洗脫，0～31 minA相-B相（75:25），32～34 minA相-B相（40:60）；35～42 minA相-B相（75:25）。進(jìn)樣量為20μl，柱溫為40℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為205 nm，流速為1.1 ml/min。

2.2.3 樣品：取上海雅培制藥0.25 g規(guī)格的克拉霉素片6片，投入同一溶出杯中，分別在1 min、2 min、3 min、4 min、5 min、8 min、10 min、15 min、20 min、30 min、45 min、60 min時(shí)精密量取續(xù)濾液2.5 ml置50 ml量瓶（量瓶中預(yù)先加入40 ml pH5.5的磷酸鹽乙腈緩沖液），再用pH5.5磷酸鹽乙腈緩沖液稀釋至刻度，濾過(guò)，進(jìn)樣20 μl，測(cè)定主峰面積與降解產(chǎn)物峰面積。

2.2.4 對(duì)照溶液：精密稱取克拉霉素對(duì)照品，用pH5.5磷酸鹽乙腈緩沖液制成55 μg/ml的溶液，作為對(duì)照溶液。

2.2.5 空白輔料：取雅培混合輔料，按主藥與輔料的處方比例配制成空白輔料溶液，進(jìn)樣20 μl，采用非標(biāo)有關(guān)物質(zhì)方法測(cè)定。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

3.1 克拉霉素制劑穩(wěn)定性考察結(jié)果

3.1.1 溫度的影響：表1顯示在40℃放置40天的樣品比較穩(wěn)定，性狀、有關(guān)物質(zhì)、含量均無(wú)明顯變化。在60℃放置40天的樣品性狀、有關(guān)物質(zhì)無(wú)明顯變化，含量稍微增高，可能與高溫環(huán)境下，水分含量降低有關(guān)。

結(jié)果顯示克拉霉素顆粒、膠囊、片劑、分散片的含量與有關(guān)物質(zhì)對(duì)溫度很穩(wěn)定，在60℃40天內(nèi)無(wú)明顯變化。說(shuō)明克拉霉素制劑在高溫環(huán)境的穩(wěn)定性較好。

3.1.2 濕度的影響：結(jié)果顯示，在25℃，RT90%放置的樣品穩(wěn)定，性狀、有關(guān)物質(zhì)總量、含量均無(wú)明顯變化。說(shuō)明在高濕環(huán)境的穩(wěn)定性較好。

3.2 克拉霉素在胃液中的溶出與降解結(jié)果

3.2.1 HPLC結(jié)果：克拉霉素主峰保留時(shí)間為12.1 min，主要降解產(chǎn)物在4.9 min出峰，次要降解產(chǎn)物在18.0 min出峰。

3.2.2 溶出與降解過(guò)程分析：從3 min左右開(kāi)始檢測(cè)到克拉霉素，在克拉霉素的溶出的同時(shí)開(kāi)始了降解過(guò)程，8 min左右開(kāi)始檢測(cè)到降解產(chǎn)物，克拉霉素的溶出度在20 min達(dá)到了峰值17%，此后降解行為超過(guò)溶出行為，降解產(chǎn)物逐漸增多，在60 min時(shí)達(dá)到74%，主峰逐漸減小，到60 min降解到4.3%。說(shuō)明克拉霉素在酸性的胃液環(huán)境下非常容易降解，最大只能達(dá)到17%的溶出率。其降解產(chǎn)物一般被認(rèn)為是3-O-去克拉啶糖基克拉霉素[7-8]。見(jiàn)表2。

表1 高溫（40℃，RT30%）加速試驗(yàn)樣品各項(xiàng)指標(biāo)變化情況

表2 克拉霉素片隨時(shí)間的溶出率與降解率

4 結(jié) 論

藥物的穩(wěn)定性是有關(guān)藥品安全性的重要方面，考察其穩(wěn)定性有助于制定適宜的儲(chǔ)存條件，尋找影響藥品質(zhì)量的因素?？死顾刂苿┰诟邷兀?0℃）、高濕環(huán)境（濕度90%）的性狀、有關(guān)物質(zhì)、含量均無(wú)明顯變化，穩(wěn)定性較好。由于溫度、濕度對(duì)樣品的影響很小，故克拉霉素制劑的在適宜的保存條件下可適當(dāng)放寬保存期限，原研藥廠雅培的克拉霉素片的保存期限為60個(gè)月，而國(guó)產(chǎn)藥物的保存期限一般為24個(gè)月，為避免不必要的浪費(fèi)，建議藥廠延長(zhǎng)考察藥物長(zhǎng)期穩(wěn)定性的時(shí)間，制定合理的藥物保存期限。

從第一代大環(huán)內(nèi)脂類抗生素的研制至今已有40余年，其中以酮內(nèi)酯類為主的第三代大環(huán)內(nèi)脂類，因其具有不良反應(yīng)少，不會(huì)引起細(xì)菌的耐藥性成為研究的熱點(diǎn)[9]。可見(jiàn)降低或消除細(xì)菌的耐藥性成為抗生素研發(fā)的主要問(wèn)題之一，頭孢氨芐緩釋膠囊是國(guó)內(nèi)第一個(gè)抗生素緩釋制劑[10]，至此以后緩釋制劑在醫(yī)藥領(lǐng)域蓬勃發(fā)展，緩釋制劑不僅僅局限于釋藥速度的控制，更要注重于定位定時(shí)定速釋藥[11]可以堅(jiān)信，隨著科技的進(jìn)步，現(xiàn)代儀器的分析聯(lián)用技術(shù)，以及研究方法的多元化[12-13]，抗生素新型制劑的研發(fā)技術(shù)具有極大的提升空間，對(duì)于推動(dòng)制藥工業(yè)具有重要意義。

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本文編輯：李新剛

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ISSN.2095-8242.2017.029.5564.02