鼻腔鼻竇內(nèi)翻性乳頭狀瘤與微血管密度相關(guān)性分析

賀學(xué)勤，武宇鼎*

（內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬人民醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010010）

鼻腔鼻竇內(nèi)翻性乳頭狀瘤與微血管密度相關(guān)性分析

賀學(xué)勤，武宇鼎*

（內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬人民醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010010）

目的 檢測鼻腔鼻竇內(nèi)翻性乳頭狀瘤組織中微血管密度（microvasular density，MVD）的表達(dá)，為尋找預(yù)測和治療鼻腔鼻竇內(nèi)翻性乳頭狀瘤新方法提供依據(jù)。方法 選取我院2013～2015年收治的經(jīng)病例證實(shí)的NIP標(biāo)本30例作為研究對(duì)象，采用免疫組化SP法檢測10例鼻中膈偏曲矯正術(shù)后切除的下鼻甲組織中及30例鼻腔鼻竇內(nèi)翻性乳頭狀瘤組織中MVD的表達(dá)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，了解相關(guān)性。結(jié)果 二者組織中MVD分別是25.48±2.94、42.64±7.43相比差異有顯著性。結(jié)論 MVD可定量反映鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤血管生成情況，有可能成為判斷鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤的發(fā)生發(fā)展的良好指標(biāo)

內(nèi)翻性乳頭狀瘤；微血管密度；SP法檢測

鼻腔鼻竇內(nèi)翻性乳頭狀瘤（nasal inverted papilloma，NIP），是一種常見的鼻腔鼻竇良性腫瘤，患者癥狀出現(xiàn)較晚，就診較遲，研究顯示病因中人乳頭狀瘤病毒感染關(guān)系最為密切[1]。其在病理上屬于良性，但有很強(qiáng)的生長力，切除后易復(fù)發(fā)及惡變傾向。腫瘤的血管系統(tǒng)生成是近年來腫瘤研究的最活躍的領(lǐng)域之一，大量研究證實(shí)，血管生成在實(shí)體腫瘤的生長，惡變及轉(zhuǎn)移等方面起著重要作用，是腫瘤發(fā)生發(fā)展的基礎(chǔ)。[2]而目前認(rèn)為MVD是判斷腫瘤血管生成的金標(biāo)準(zhǔn)。CD34分子是一種階段特異性白細(xì)胞分化抗原，其中抗體對(duì)腫瘤組織內(nèi)小的血管內(nèi)皮細(xì)胞有較強(qiáng)的敏感性及穩(wěn)定性，因此，做為血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物具有很高的可相信度。介于NIP的易惡變易復(fù)發(fā)的特殊性，尋找細(xì)胞因子在腫瘤發(fā)病、惡變中發(fā)揮的作用，尋找一種能客觀定量判定其增生活性的指標(biāo)，對(duì)該病的進(jìn)一步研究有重要意義。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2013～2015年收治的經(jīng)病例證實(shí)的NIP標(biāo)本30例作為研究對(duì)象，其中男25例，女5例，年齡32～72歲；平均51.9歲，腫瘤分期：按Krouse腫瘤分期法：1期8例，2期10例，3期7例，4期5例，鼻中隔偏曲矯正術(shù)后切除的下鼻甲組織10例為對(duì)照組，其中男7例，女3例，年齡16～46歲，平均27.4歲。所有標(biāo)本均經(jīng)10%福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

免疫組化染色采用s-p法。

1.3 陰性對(duì)照

采用PBS緩沖液代替一抗，其它步驟不變。

1.4 染色結(jié)果判定

CD34：血管內(nèi)皮被染成棕褐色或棕黃色。微血管密度（microvessel density，MVD）按照Weidner等的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)，先在低倍鏡下尋找腫瘤內(nèi)的微血管密集區(qū)，然后在200倍鏡下尋找5個(gè)不同視野的微血管數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，后取其平均值。凡有管腔者管腔內(nèi)應(yīng)少于8個(gè)RBC方可被計(jì)數(shù)，無管腔者一個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞即可計(jì)數(shù)為一條血管，而帶有較厚肌層的血管和硬化區(qū)域的血管不參與計(jì)數(shù)。每一組均值以±s表示。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以“±s”表示，采用t檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 MVD在鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤和下鼻甲中的表達(dá)

在陰性對(duì)照中CD34抗原未見表達(dá)，CD34陽性表達(dá)呈現(xiàn)棕褐色或棕黃色顆粒狀，表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)，而在NIP主要表達(dá)于腫瘤間質(zhì)內(nèi)，于炎性細(xì)胞浸潤的部位及瘤團(tuán)周圍近基底膜的間質(zhì)內(nèi)較顯著，血管管腔多呈圓形、橢圓形，有少量迂曲、膨脹，表達(dá)低度無序（如圖2）。在下鼻甲粘膜固有層有散在管腔呈圓形、橢圓形的血管（如圖1）。在NIP、下鼻甲組織中MVD的表達(dá)分別為42.64±7.43，25.48±2.94，兩者相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

圖1 下鼻甲粘膜固有層有散在管腔呈圓形、橢圓形的血管

圖2 MVD在鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤

表1 MVD在NIP、下鼻甲組織中的表達(dá)（±s）

表1 MVD在NIP、下鼻甲組織中的表達(dá)（±s）

注：兩組計(jì)數(shù)經(jīng)t檢驗(yàn)，P＜0.05

±s（個(gè)）NIP 30 42.64±7.43下鼻甲粘膜 10 25.48±2.94組別 n x

2.2 MVD的表達(dá)在鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤臨床各期中的分布

MVD的計(jì)數(shù)在腫瘤臨床分期（T1、T2、T3、T4）中有顯著性差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），說明隨著病程進(jìn)展其值呈上升趨勢。見表2。

表2 NIP組臨床各期MVD計(jì)數(shù)的比較（±s）

表2 NIP組臨床各期MVD計(jì)數(shù)的比較（±s）

注：4組MVD計(jì)數(shù)兩兩比較，P均＜0.05

±s（個(gè)）T1 8 34.73±6.57 T2 10 41.16±1.27 T3 7 45.57±2.18 T4 5 54.16±1.34臨床分期 n x

3 討 論

鼻腔鼻竇內(nèi)翻性乳頭狀瘤（nasal inverted papilloma，NIP）屬上皮源性良性腫瘤，其臨床特征具有較高復(fù)發(fā)性，易向周圍破壞生長及有惡變傾向，因而NIP被認(rèn)為是一種臨界性腫瘤。

血管生成是指從已有的毛細(xì)血管或毛細(xì)血管后靜脈發(fā)展而形成新的血管，腫瘤組織生長速度快，呈浸入性生長，并且常伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，而腫瘤的以上生物學(xué)行為均依賴于腫瘤血管的形成，腫瘤細(xì)胞由于周圍血管的支持，為腫瘤組織提供生長必要的氧氣及營養(yǎng)物質(zhì)[3]，腫瘤誘導(dǎo)血管生成的能力取決于新生血管網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)增生的程度，進(jìn)而決定了腫瘤的生物學(xué)行為，因此有研究認(rèn)為早期腫瘤新生血管密度的增加預(yù)示腫瘤可能要表現(xiàn)出快速增長、惡變潛能增加及加速侵襲的特性。因此，高M(jìn)VD的腫瘤，表現(xiàn)出更快的生長速度和更強(qiáng)的侵襲性。

在本研究中我們發(fā)現(xiàn)，CD34的表達(dá)與腫瘤臨床分期有關(guān)，隨臨床分期的增高，微血管密度（microvasular density，MVD）的數(shù)量也呈逐漸增加趨勢，同時(shí)與對(duì)照組相比較，腫瘤血管有表現(xiàn)為不規(guī)則形，有扭曲分叉等現(xiàn)象。因此，我們從早期腫瘤中新生血管的密集程度可預(yù)知其惡變和復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)程度。

腫瘤的惡變、轉(zhuǎn)移是多種因素作用下的一個(gè)復(fù)雜過程，血管形成使腫瘤得以獲得足夠的營養(yǎng)物質(zhì)而持續(xù)性生長，腫瘤細(xì)胞進(jìn)入血液或淋巴系統(tǒng)并且再次傳出循環(huán)系統(tǒng)，入侵新的器官，誘導(dǎo)新生血管形成，最終形成轉(zhuǎn)移灶，在腫瘤發(fā)生的早期階段血管生成就表現(xiàn)活躍[4]，因此于癌前病變的活檢中，檢測 MVD指標(biāo)，從而評(píng)價(jià)癌前病變惡變傾向。介于NIP的特殊的生物學(xué)特性，我們研究目的在于為NIP的治療提供一種新的思路，即臨床中于手術(shù)之后通過給予抑制腫瘤新生血管生成的治療，從而達(dá)到控制或逆轉(zhuǎn)癌前病變的惡變，進(jìn)而減少惡性腫瘤的發(fā)病率。

[1] 張 羅,韓德民,等。鼻腔鼻竇內(nèi)翻性乳頭狀瘤[M]中國耳鼻咽喉頭頸外科,2008,15,10:45-46

[2] Di Maggio F,Arumugam P,Delvecchio FR,Batista S,Lechertier T,Hodivala-Dilke K,Kocher HM，Pancreatic stellate cells regulate blood vessel density in the stroma of pancreatic ductal adenocarcinoma. [J]Pancreatology.2016,16(6):995-1004.

[3] Gao ZH,Wang QQ.Curative effect of paclitaxel and cisplatin combined chemotherapy on cervical cancer and its relation with tissue micro vascular and lymphatic vessels density.[J]Pak J Pharm Sci.2015,28(5):1849-52

[4] Wang G,Wang Z,Li C,Wang P,Chai D,Cheng Z.[Relationship among the expression of lymphatic vessel density,microvessel density,carcinoembryonic antigenic mRNA,KAI1,and Kiss-1,and prognosis in patients with non-small cell lung cancer].[J]Zhongguo Fei Ai Za Zhi.2012,15(6):348-54.

本文編輯：趙小龍

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ISSN.2095-8242.2017.025.4808.02

武宇鼎，E-mail：yanwang 2100@126.com