西寧及海東地區(qū)規(guī)模豬場豬鏈球菌型抗體調(diào)查

豬鏈球菌是一種人畜共患的急性，熱性，敗血性傳染病，現(xiàn)在已經(jīng)成為規(guī)模化養(yǎng)豬場中最常見的細菌性疾病之一，主要病原體為2型豬鏈球菌。該病在臨床上可表現(xiàn)為敗血癥型、腦膜炎型、關(guān)節(jié)炎型、淋巴結(jié)膿腫型等多種類型。本次調(diào)查通過對西寧及海東地區(qū)9個規(guī)模豬場進行采樣，血清學(xué)檢測，初步掌握了豬鏈球菌2型感染情況，現(xiàn)將檢測情況總結(jié)如下。

一、材料與方法

1.材料

（1）血樣。共采集血樣592份，來自湟源成農(nóng)生豬養(yǎng)殖有限公司，宏源仔豬繁育合作社，互助八眉豬原種繁育場，互助恒豐養(yǎng)殖場，大通樺林德隆仔豬繁育場，大通縣種豬場，樂都容生生態(tài)養(yǎng)殖有限公司，樂都福樂牧業(yè)有限公司，樂都豐源仔豬繁育有限公司，共計9個規(guī)模養(yǎng)豬場，分離血清-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

（2）試劑。豬鏈球菌2型ELISA抗體檢測試劑盒，試劑生產(chǎn)廠家為武漢科前生物，試劑批號120903。

2.方法

（1）試驗方法。

① 洗滌液配制 。使用前，濃縮的洗滌液恢復(fù)至室溫（20-25℃），并搖動使沉淀溶解，用蒸餾水作20倍稀釋，，混勻。

②樣品稀釋液配制。 將2.5g脫脂奶粉溶于50ml稀釋液瓶中，作為待檢血清和對照血清的稀釋液。

③待檢血清和對照稀釋。 將待檢血清在血清稀釋板中用樣品稀釋液按1：40的比例稀釋，陽性和陰性對照用樣品稀釋液按1：4稀釋。

④取抗原包被板，先用稀釋好的洗滌液洗版2次，再將稀釋好的待檢血清、陰性對照血清和陽性對照血清各取100ul加入到抗原包被板孔中。陰性對照和陽性對照各設(shè)2孔。輕輕振勻孔中樣品，置37℃溫育30分鐘。

⑤甩掉板孔中的溶液，每孔加入稀釋好的洗滌液200ul，靜置3分鐘后倒掉，并在吸水紙上拍干，共計洗滌5次。

⑥每孔加酶標二抗100ul，置37℃溫育30分鐘。

⑦ 甩掉板孔中的溶液，洗滌方法同1.2.1.5，共計洗滌5次。

⑧每個反應(yīng)孔先加底物液A50ul，再加底物液B50ul，混勻，室溫（18-25℃）避光顯色10分鐘。

⑨ 待顯色完成后每個反應(yīng)孔加終止液50ul，10分鐘內(nèi)測到結(jié)果。

（2） 結(jié)果判定。

在酶標儀上測各孔OD630值，試驗成立條件是陽性對照孔OD630值均應(yīng)≥0.8；陰性對照孔OD630均應(yīng)<0.3。如果樣品OD630值≥0.35，判為陽性；如果樣品OD630值<0.35，則判為陰性。

二、結(jié)果

三、分析與討論

1.本次檢測所抽樣的9個規(guī)模豬場均未進行過豬鏈球菌2型的免疫，但是均檢測出其抗體陽性，說明各個規(guī)模場均存在不同程度感染。其中6個規(guī)模豬場的陽性率高于40%，說明豬鏈球菌2型在我省規(guī)模豬場處于高發(fā)狀態(tài)。

2.豬鏈球菌2型抗體陽性率表現(xiàn)為仔豬﹤育肥豬﹤種公豬、母豬；這可能是因為隨著豬齡的增加，配種、產(chǎn)仔等生產(chǎn)活動頻繁，與外界環(huán)境接觸時間變長，其受感染的概率和程度增加有關(guān)。同時說明生產(chǎn)母豬和種公豬在這些疫病的傳播中起著極為重要的作用。

3.鑒于當前我省豬鏈球菌2型感染率較高的形勢，各規(guī)?；B(yǎng)殖場應(yīng)當通過疫病監(jiān)測，制定符合自身實際情況且科學(xué)有效的免疫程序，同時要制定嚴格的疫苗接種操作規(guī)程，做到按程序免疫保證接種質(zhì)量。對于已經(jīng)感染的病豬，要及時隔離，消毒，并給予敏感抗菌藥治療。

與此同時要進一步加強種公豬引種檢疫工作。在引種前最好開展血清學(xué)和病原學(xué)監(jiān)測工作，杜絕染疫動物入群并污染整個豬場。同時還要做好入圈前的隔離觀察工作，確保無疫方可入群。

作者簡介：游瀟倩（1987-10-），女，籍貫：山東省，學(xué)歷：本科，畢業(yè)于南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，現(xiàn)有職稱：助理獸醫(yī)師，研究方向：實驗室診斷。