不同尿紅細胞檢測方法在腎性血尿診斷中的臨床應用評價

王江峰，夏建新，石 梁

（紅安縣人民醫(yī)院，湖北 黃岡 438400）

不同尿紅細胞檢測方法在腎性血尿診斷中的臨床應用評價

王江峰，夏建新，石 梁

（紅安縣人民醫(yī)院，湖北 黃岡 438400）

目的 評價不同尿紅細胞檢測方法在腎性血尿診斷中的臨床應用價值。方法 選取我院2015年2月～2016年2月收集的尿沉渣鏡檢結(jié)果為血尿的標本110例，將其中腎性血尿標本50例作為實驗組，將其中非腎性血尿標本60例作為對照組；選擇相差顯微鏡對尿中紅細胞形態(tài)進行觀察，選擇Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀對紅細胞非均性和均一性進行檢測；選擇尿紅細胞微柱凝膠直接抗人球蛋白法對被免疫球蛋白致敏的尿紅細胞進行檢測。結(jié)果 相差顯微鏡法的敏感性、特異性分別為84.0%、85.0%；Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀的敏感性和特異性分別為90.0%、66.7%；尿紅細胞微柱凝膠直接抗人球蛋白法的敏感性和特異性分別為86.0%、71.7%；三種方法聯(lián)合檢測的敏感性、特異性分別為96.0%、71.7%；相差顯微鏡法和Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀聯(lián)合檢測的敏感性、特異性分別為84.0%、73.3%；相差顯微鏡法和尿紅細胞微柱凝膠直接抗人球蛋白法聯(lián)合檢測的敏感性、特異性分別為94.0%、76.7%；Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀和尿紅細胞微柱凝膠直接抗人球蛋白法聯(lián)合檢測的敏感性、特異性分別為88.0%、75.0%。結(jié)論 在對腎性血尿進行判斷時，三種不同尿紅細胞檢測方法在準確性方面存在一定差異，檢測特異性最高的檢測方法為相差顯微鏡法；在聯(lián)合應用中，相差顯微鏡法和尿紅細胞微柱凝膠直接抗人球蛋白法聯(lián)合檢測的敏感性最高，具有臨床應用價值。

尿紅細胞；檢測方法；腎性血尿；診斷；應用價值

血尿是指含血液的尿液，是臨床中發(fā)生率較高的一種臨床表現(xiàn)。有效鑒別診斷腎性血尿和非腎性血尿，對于臨床疾病的診斷和治療非常重要[1]。在對血尿來源進行區(qū)分時，臨床中可供選擇的檢查方法較多，相差顯微鏡檢查則是傳統(tǒng)最常用的方式之一，如果異性紅細胞超過30%則表示腎小球源性血尿。分析發(fā)現(xiàn)，尿液的酸堿度、滲透壓等會在一定程度上影響尿紅細胞形態(tài)，進而對相差顯微鏡檢測的特異性造成影響[2]。在診斷原因不明的單純性血尿時，臨床中也常常采用腎活檢，然而該方法卻存在一定的創(chuàng)傷，所以患者接受程度不高[3]。本研究主要分析了不同尿紅細胞檢測方法在腎性血尿診斷中的臨床應用價值，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2015年2月～2016年2月收集的尿沉渣鏡檢結(jié)果為血尿的標本110例，將其中腎性血尿標本50例作為實驗組，包括急性腎病綜合癥31例，IgA腎病2例，腎小球腎炎17例。將其中非腎性血尿標本60例作為對照組，前列腺增生8例，腎挫傷15例，腎結(jié)石37例。

儀器設備：相差顯微鏡；微柱凝膠卡、離心機、孵育器；Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀和相關配套試劑；選擇上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司的直接抗人球蛋白試劑盒。

1.2 方法

1.2.1 尿沉渣分析紅細胞形態(tài)參數(shù)法

Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀作為新型的尿液定量分析系統(tǒng)，在經(jīng)核酸熒光染色后，半導體激光束照射會在分析池中形成鞘流樣本，將粒子所產(chǎn)生的側(cè)向散射光、側(cè)向熒光信號和前向散射光轉(zhuǎn)變?yōu)楣怆娦盘?，對其分析，每一細胞的熒光強度不同，染色尿液細胞所發(fā)出的熒光能對細胞定量特性、電阻抗大小、前向散射光強度進行反映；Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀就是將各種光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?，并分析各種信號，進而獲得尿液標本的散射圖和直方圖，通過對圖形進行分析就能對每一細胞進行區(qū)分，并獲得細胞的形態(tài)分布曲線。選擇Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀對尿標本進行檢測，各種指標中包括研究參數(shù)信息3項和定量檢測參數(shù)12；其中紅細胞形態(tài)學信息參數(shù)是對血尿來源進行判斷的一項主要參考指標，選擇Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀對尿液鏡檢結(jié)果為血尿的標本，如果儀器檢測結(jié)果顯示紅細胞為非均一性，該參數(shù)則顯示尿紅細胞為異常形態(tài)；如果儀器檢測結(jié)果顯示紅細胞為均一性，該參數(shù)則顯示尿紅細胞為正常形態(tài)。

1.2.2 尿紅細胞微柱凝膠直接抗人球蛋白法

該檢測方法的原理為免疫化學抗原抗體特異反應、離心技術、生物化學凝膠過濾技術；如果紅細胞表面存在免疫球蛋，當和抗人球蛋白出現(xiàn)抗原抗體反應時，紅細胞就會相互結(jié)合，進而出現(xiàn)凝聚，在對其進行離心處理時，凝聚塊會留在凝膠上層，不會穿過凝膠間隙，表現(xiàn)為陽性反應，如果紅細胞未出現(xiàn)凝聚，通過離心處理紅細胞則能穿過凝膠間隙，然后在凝膠管底部沉積，表現(xiàn)為陰性反應；在尿標本完成鏡檢和尿沉渣分析后，及時離心分離紅細胞，選擇濃度為0.9%的氯化鈉溶液進行3次洗滌，然后選擇達亞美稀釋液配置成濃度為0.8%的紅細胞懸液，選擇微柱凝膠卡孔內(nèi)加入50 μL，并在微柱凝膠卡孔內(nèi)分別加入抗IgG、抗C3d、抗IgA各25 μL，如果室溫小于10攝氏度，則應進行15 min的37攝氏度孵育。

1.2.3 相差顯微鏡法

在對全部尿標本進行尿沉渣分析后，選擇相差顯微鏡對尿紅細胞形態(tài)進行觀察，對異性紅細胞的占比進行計算，如果尿中的異性尿紅細胞占比超過30%，則表示腎性血尿。

1.3 臨床觀察指標

對各種檢測方法的特異性、敏感性進行計算；并計算兩兩聯(lián)合和三種方法聯(lián)合檢測的特異性和敏感性。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計量資料采用t檢驗，計數(shù)資料采用x2檢驗；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 三種尿紅細胞檢測方法的結(jié)果觀察

相差顯微鏡法的敏感性、特異性分別為84.0%、85.0%；Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀的敏感性和特異性分別為90.0%、66.7%；尿紅細胞微柱凝膠直接抗人球蛋白法的敏感性和特異性分別為86.0%、71.7%。見表1。

表1 三種尿紅細胞檢測方法的結(jié)果觀察（n，%）

2.2 聯(lián)合檢測結(jié)果觀察

三種方法聯(lián)合檢測的敏感性、特異性分別為96.0%、71.7%；相差顯微鏡法和Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀聯(lián)合檢測的敏感性、特異性分別為84.0%、73.3%；相差顯微鏡法和尿紅細胞微柱凝膠直接抗人球蛋白法聯(lián)合檢測的敏感性、特異性分別為94.0%、76.7%；Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀和尿紅細胞微柱凝膠直接抗人球蛋白法聯(lián)合檢測的敏感性、特異性分別為88.0%、75.0%。見表2。

表2 聯(lián)合檢測結(jié)果觀察（n，%）

3 討 論

為了對尿紅細胞來源進行有效鑒別，有學者在1979年首次選擇相差顯微鏡來對尿中的紅細胞形態(tài)進行鑒別，進而來對非腎性血尿和腎性血尿進行區(qū)別，如果異性尿紅細胞超過30%，則表示腎性血尿[4]。分析本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相差顯微鏡法的敏感性、特異性分別為84.0%、85.0%；因為尿液的酸堿度、滲透壓等會在一定程度上影響尿紅細胞形態(tài)，進而影響相差顯微鏡檢測結(jié)果。

急性腎小球腎炎常常在鏈球菌感染后發(fā)生水腫、蛋白尿以及血尿等，病毒、其他細菌等也可能導致；免疫病理檢查結(jié)果顯示C3和IgG表現(xiàn)為粗顆粒狀，并沉積 在系膜區(qū)和毛細血管壁[5]。臨床研究發(fā)現(xiàn)，免疫復合物是導致腎炎的主要病因，選擇免疫金銀染色來對尿沉渣紅細胞進行檢測，利用尿中紅細胞上Ig染色來對非腎性血尿和腎性血尿進行區(qū)別[6]。有學者選擇免疫熒光定位方法來鑒別腎病患者的尿液紅細胞，結(jié)果顯示尿紅細胞免疫熒光染色具有較強的特異性，在對非腎性血尿和腎性血尿進行鑒別時，具有非常重要的作用[7]。微柱凝膠技術有機結(jié)合了凝膠技術和免疫血清技術，通過對凝膠濃度進行調(diào)節(jié)，進而來對凝膠間隙大小進行有效控制，只讓游離的紅細胞能經(jīng)過凝膠間隙，進而來有效分離聚集紅細胞和游離紅細胞。如果紅細胞位于微柱凝膠管傷側(cè)，則表明被Ig致敏的紅細胞和相應抗體出現(xiàn)凝聚，試驗結(jié)果表現(xiàn)為陰性[8]。分析本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，尿紅細胞微柱凝膠直接抗人球蛋白法的敏感性和特異性分別為86.0%、71.7%。

Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀是現(xiàn)階段對尿液有形成分進行測定的先進儀器，有機結(jié)合了電阻抗原理和流式細胞術，對細胞實施熒光染色，對其熒光脈沖寬度和熒光強度進行測定，并對前向散射光強度和其脈沖寬度進行測定，進而來技術尿液中的有形成分，并對其進行鑒別[9-10]。分析本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀的敏感性和特異性分別為90%、66.7%。因為紅細胞的染色性、形態(tài)大小和非晶形鹽、草酸鈣等結(jié)晶比較類似，兩者在散射圖上交叉分布，所以結(jié)晶會在一定程度上影響紅細胞形態(tài)分析。酵母樣菌、細菌的散點分布介于白細胞和紅細胞之間，正常情況下可以通過儀器進行區(qū)分，然而依然可能出現(xiàn)紅細胞重疊現(xiàn)象[11-12]。

分析本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，三種方法聯(lián)合檢測的敏感性、特異性分別為96.0%、71.7%；相差顯微鏡法和Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀聯(lián)合檢測的敏感性、特異性分別為84.0%、73.3%；相差顯微鏡法和尿紅細胞微柱凝膠直接抗人球蛋白法聯(lián)合檢測的敏感性、特異性分別為94.0%、76.7%；Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀和尿紅細胞微柱凝膠直接抗人球蛋白法聯(lián)合檢測的敏感性、特異性分別為88.0%、75.0%。研究結(jié)果顯示，在對腎性血尿進行判斷時，三種不同尿紅細胞檢測方法在準確性方面存在一定差異，檢測特異性最高的檢測方法為相差顯微鏡法；在聯(lián)合應用中，相差顯微鏡法和尿紅細胞微柱凝膠直接抗人球蛋白法聯(lián)合檢測的敏感性最高，具有臨床應用價值。

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本文編輯：趙小龍

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ISSN.2095-8242.2017.24.4677.03