生物活性肽膠囊對實驗小鼠增強免疫力功能的影響

朱 哲，騫秀芳，王 惠，李 燦

（武警北京總隊第二醫(yī)院，北京 100037）

生物活性肽膠囊對實驗小鼠增強免疫力功能的影響

朱 哲，騫秀芳，王 惠，李 燦

（武警北京總隊第二醫(yī)院，北京 100037）

目的 分析生物活性肽膠囊對實驗小鼠增強免疫力功能的影響，評價生物學(xué)活性肽的價值。方法 取實驗小鼠隨機分為5個單組，各10只，小劑量組、中劑量組、高劑量組、空白對照組、陽性對照組，均灌服1粒膠囊，1日1次。膠囊內(nèi)分別裝有性肽內(nèi)容物100 mg/（kg·d）、200 mg/（kg·d）、400 mg/（kg·d、蒸餾水10 mL/（kg·d）、維生素C400 mg（kg·d），連續(xù)給藥10日。末次灌藥后處死進行試驗。結(jié)果 五組肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、抗體生成水平、單核一巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)、NK激活率多組間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；高劑量組、陽性對照組肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、單核-巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)、NK激活率高于空白對照組、低劑量組、中劑量組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。小劑量組與中劑量組抗體生成水平、單核一巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)、NK激活率高于空白對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。中劑量組抗體生存水平高于小劑量、高劑量組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 生物活性肽膠囊可增強實驗小鼠增強免疫力，但對部分免疫功能存在劑量依賴、上限。

免疫功能；生物活性肽；小鼠；動物實驗

生物活性肽是一種很強生物活性與生理功能的一類化合物，具有抗菌、抗氧化功能、血血壓調(diào)節(jié)等作用[1]。本次研究試采用動物實驗，分析生物活性肽膠囊對實驗小鼠增強免疫力功能的影響?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

SPF級雄性小鼠，數(shù)量不限，6～8周齡，體重18～22 g，由實驗動物中心提供。常規(guī)不銹鋼籠飼養(yǎng)，采用標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類動物干燥飼料喂養(yǎng)2周。自由攝食飲水，溫度控制在20℃～25℃，相對濕度40%～60%。

1.2 儀器與試劑

生物活性肽膠囊，自制，內(nèi)容物為由內(nèi)外原性原料蛋白混合獲得，主要材料為動物皮，采用甲醇提取法提取獲得。主要材料，RPMI1640細(xì)胞培養(yǎng)液，小牛血清，2-疏基乙醇，谷氨酰胺，鏈霉素，鹽酸，異丙醇，MTT，二甲基亞砜，瓊脂糖，肝素，碳酸氫鈉溶液，生理鹽水等、。儀器包括旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，冷凍干燥劑，722行分光光度計，-80℃超低溫冰箱，-4℃冰箱，電子分析天平，酶標(biāo)儀，細(xì)胞計數(shù)板，水浴箱，顯微鏡等。

1.3 試驗方法

1.3.1 分組與給藥

取實驗小鼠（20±2），隨機分為5個單組，各10只。小劑量組：生物活性肽低劑量，1粒膠囊，按照體重計算，含生物活性肽內(nèi)容物100 mg/（kg·d）。中劑量組：生物活性肽中劑量，1粒，含生物活性肽內(nèi)容物200 mg/（kg·d）。高劑量組：生物活性肽高劑量，1粒膠囊，含生物活性肽內(nèi)容物400 mg/（kg·d）。正常對照組：單純有膠囊衣，灌入蒸餾水，10 mL/（kg·d）。陽性對照組：在膠囊內(nèi)置入維生素C，400 mg（kg·d）。連續(xù)給藥10日。

1.3.2 檢驗

末次給藥24 h，稱量體重，脫頸法猝死，取胸腺、脾臟，去掉血跡，沉重，計算胸腺、脾臟指數(shù)。同時進行ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗（MTT）、小鼠碳廓清試驗、抗體生成實驗試驗、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞（CRBC）實驗（半體內(nèi)法）、NK細(xì)胞活性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計量資料以“±s”表示，采用t檢驗；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

五組肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、抗體生成水平、單核-巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)、NK激活率多組間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），高劑量組、陽性對照組肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、單核一巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)、NK激活率高于空白對照組、低劑量組、中劑量組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。小劑量組與中劑量組抗體生成水平、單核一巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)、NK激活率高于空白對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。中劑量組抗體生存水平高于小劑量、高劑量組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 五組肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、抗體生成水平、單核一巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)、NK激活率對比（±s）

表1 五組肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、抗體生成水平、單核一巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)、NK激活率對比（±s）

注：與空白對照組相比，*P＜0.05；與劑量組相比，aP＜0.05；與中劑量組相比，bP＜0.05

組別（n=10） 肝臟指數(shù) 脾臟指數(shù) 抗體生成（106） 單核-巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù) NK激活率（%）空白對照組 0.013±0.011 0.31±0.05 20.12±2.53 0.51±0.14 55.14±8.56小劑量組 0.013±0.005 0.32±0.08 44.10±4.73* 0.60±0.15* 60.53±7.24*中劑量組 0.013±0.004 0.32±0.05 48.75±5.14*a 0.64±0.16* 67.23±11.43*a高劑量組 0.024±0.010*b 0.46±0.07*b 44.83±4.32*b 0.83±0.22*ab 77.43±12.31*b陽性對照組 0.020±0.004* 0.40±0.05* 49.10±3.72* 0.85±0.22* 66.59±9.31*

3 討 論

生物活性肽在改善抗體生成方面存在明顯的劑量上限，中劑量組便達(dá)到峰值，接近維生素C[2]。小劑量、高劑量組單核-巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)無顯著差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），而高劑量顯著上升，接近維生素C。高劑量NK激活率明顯高于陽性對照組。

本次研究顯示，生物活性肽膠囊可增強實驗小鼠增強免疫力，但對部分免疫功能存在劑量依賴、上限，在改善肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、NK激活率方面甚至優(yōu)于同劑量維生素C。生物活性肽并非藥物，但廣泛存在于自然界，來源廣，具有較高的經(jīng)濟價值，發(fā)展?jié)摿Υ螅窈笮枰_展更多的基礎(chǔ)研究，分析生物活性肽結(jié)構(gòu)、保健功能，為生物活性肽保健品的開發(fā)提供依據(jù)。

[1] 梁美艷,陳慶森.具有降低心血管疾病危險的相關(guān)生物活性膚的研究進展[J].專題論述,2009,30(19):335-340.

[2] 魯文玉,于文靜,孫德群,等.海洋生物活性肽在藥物研發(fā)中的應(yīng)用進展[J].有機化學(xué),2016(37):1-26.

本文編輯：趙小龍

R967

B

ISSN.2095-8242.2017.30.5748.02

朱哲（1984-），女，河北省秦皇島市人，本科，主管藥師，研究方向：臨床藥學(xué)方向