GC-MS法分析紅木香藥材根和果實(shí)中的揮發(fā)油成分Δ

姜澤靜，黃澤豪（1.上海市皮膚病醫(yī)院，上海 200443；2.福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，福州 350122）

GC-MS法分析紅木香藥材根和果實(shí)中的揮發(fā)油成分Δ

姜澤靜1＊，黃澤豪2#（1.上海市皮膚病醫(yī)院，上海 200443；2.福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，福州 350122）

目的：分析紅木香藥材根和果實(shí)中的揮發(fā)油成分。方法：采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法。色譜條件：色譜柱為HP-5MS石英彈性毛細(xì)管柱，載氣為高純氮?dú)?，流速?.9 mL/min，進(jìn)樣口溫度為250℃，色譜柱初始溫度為50℃（程序升溫），柱壓為80 kPa，分流進(jìn)樣，分流比為40∶1，進(jìn)樣量為1.0 μL。質(zhì)譜條件：離子源為電子轟擊離子源，電子能量為70 eV，接口溫度為230℃，質(zhì)量掃描范圍m/z 40～400，掃描間歇時間為1.0 s。結(jié)果：從紅木香根的揮發(fā)油中總共檢出43個色譜峰，鑒定出其中24個，占總量的91.5%；主要成分為倍半萜和單萜類化合物，其中（+）-δ-杜松烯、γ-畢澄茄烯和異朱欒倍半萜相對含量較高。從紅木香果實(shí)的揮發(fā)油中總共檢出52個色譜峰，鑒定出其中36個，占總量的82.2%；主要成分為倍半萜和單萜類化合物，其中石竹烯、γ-畢澄茄烯和紫穗槐烯相對含量較高。結(jié)論：該研究基本明確了紅木香藥材根和果實(shí)揮發(fā)油中的主要成分，并且二者存在明顯差異。

紅木香；揮發(fā)油；氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

ABSTRACTOBJECTIVE：To analyze volatile oil from the roots and fruits of Kadsura longipedunculata.METHODS：GC-MS method was adopted.The determination was performed on HP-5MS quartz capillary column with nitrogen as carrier gas at the flow rate of 0.9 mL/min.The temperature of sample inlet was 250℃，the initial temperature of column was set at 50℃（temperature programming）.The column pressure was 80 kPa；the ratio of split sampling was 40∶1.The sample size was 1.0 μL.Mass chromatography was as follows：electron bombardment ion source as ion source；electron energy of 70 eV；inlet temperature was 230℃；scanning range of m/z 40-400，scanning interval time of 1.0 s.RESULTS：Totally 43 chromatographic peaks were detected in volatile oil from the roots of K.longipedunculata，and 24 peaks were identified，accounting for 91.5%；main components were sesquiterpenes and monoterpenoids，among which the relative contents of（+）-delta-cadinene，γ-cadinene and isovalencene were in high level.Totally 52 chromatographic peaks were detected in volatile oil from the fruits of K.longipedunculata，and 36 peaks were identified，accounting for 82.2%；main components were sesquiterpenes and monoterpenoids，among which relative contents of carophyllene，γ-cadinene and valencene were in high level.CONCLUSIONS：The study basically confirm main volatile components in volatile oil from the roots and fruits of K.longipedunculata，and the roots and fruits of K.longipedunculata have significant difference.

KEYWORDSKadsura longipedunculata；Volatile oil；GC-MS

紅木香，又名土五味、米篩子、雞母拖、拳頭藤等，是木蘭科植物長梗南五味子Kadsura longipedunculata的干燥根，具有行氣消腫、活血止痛的功效，常用于治療氣滯腹脹痛、胃痛、傷痛等[1-2]。其在我國南方民間應(yīng)用廣泛，稱為南五味子根，曾收載于1977年版《中國藥典》（一部）[3]。據(jù)《福安畬醫(yī)畬藥》記載，其果實(shí)在民間也供藥用，但用法與根不同，主要用于治療肺虛咳嗽等[1]。目前對紅木香的根已有較多研究[4-5]，但對其果實(shí)的有效成分卻知之甚少。根據(jù)文獻(xiàn)報導(dǎo)，揮發(fā)油是五味子科植物的主要活性成分之一[4]，為了闡明紅木香根與果實(shí)的揮發(fā)油類成分，本課題組擬采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GCMS）對其揮發(fā)油成分進(jìn)行分析。

1 材料

1.1 儀器

6890N GC/5975 MS型GC-MS儀（美國Agilent公司）；CPA225D型電子天平（德國Sartorius公司）；揮發(fā)油提取器（上海禾汽玻璃儀器有限公司）。

1.2 試劑

試驗(yàn)所用試劑均為分析純，水為純化水。

1.3 藥材

紅木香藥材于2010－2015年采集于福建省福安縣穆云鄉(xiāng)，經(jīng)福建中醫(yī)藥大學(xué)黃澤豪副教授鑒定為真品。

2 方法與結(jié)果

2.1 揮發(fā)油的提取

稱取經(jīng)干燥后的藥材樣品適量，粉碎過2號篩，置于圓底燒瓶中，連接揮發(fā)油提取裝置，參照2015年版《中國藥典》（四部）“揮發(fā)油測定法”甲法[6]提取6 h，至油量不再增加為止，以無水硫酸鈉干燥得揮發(fā)油部分。

2.2 試驗(yàn)條件

2.2.1 色譜條件 色譜柱：HP-5MS石英彈性毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；載氣：高純氮?dú)?；流速?.9 mL/min；進(jìn)樣口溫度：250℃；程序升溫：初始溫度為50℃，以50℃/min升溫至110℃，再以1℃/min升溫至145℃，最后以10℃/min升溫至230℃；柱壓：80 kPa；分流進(jìn)樣，分流比：40∶1；進(jìn)樣量：1 μL。

2.2.2 質(zhì)譜條件 離子源：電子轟擊離子源（EI）；電子能量：70 eV；接口溫度：230℃；質(zhì)量掃描范圍m/z：40～400；掃描間歇時間：1.0 s。

2.3 定性分析

2.3.1 分析方法 通過標(biāo)準(zhǔn)品、NIST 05.L譜庫檢索，并結(jié)合保留指數(shù)、參考相關(guān)文獻(xiàn)及網(wǎng)站（www.vcf-online. nl）等共同進(jìn)行定性分析。按照文獻(xiàn)[7]計(jì)算Kovats保留指數(shù)（Kovats index，KI），公式如下：

KI＝100 n+100×tR－tRn/tRn+1－tRn

式中：n和n+1分別為未知物流出前、后正構(gòu)烷烴碳原子數(shù)；tRn和tRn+1分別為相應(yīng)正構(gòu)烷烴的保留時間（min）；tR為未知物在氣相色譜中的保留時間（min），tRn＜tR＜tRn+1。

2.3.2 分析結(jié)果 取“2.1”項(xiàng)下?lián)]發(fā)油1 μL，按“2.2”項(xiàng)下試驗(yàn)條件進(jìn)樣測定（見圖1），再按“2.3.1”項(xiàng)下方法分析，以面積歸一化法確定各成分的相對含量。根據(jù)所得的質(zhì)譜信息并結(jié)合有關(guān)文獻(xiàn)[7]、Class 5000色譜軟件和基峰、相對豐度、KI等幾個方面進(jìn)行直觀比較，從而確定了其中的部分化學(xué)成分。結(jié)果表明，從紅木香藥材根的揮發(fā)油中總共檢出43個色譜峰，鑒定出其中24個，占總量的91.50%。主要成分為倍半萜和單萜類化合物。其中，（+）-δ-杜松烯（27.60%）、γ-畢澄茄烯（23.74%）、異朱欒倍半萜（12.99%）等相對含量較高；從紅木香藥材果實(shí)的揮發(fā)油中總共檢出52個色譜峰，鑒定出其中36個，占總量的82.20%。主要成分為倍半萜和單萜類化合物，其中，石竹烯（12.61%）、γ-畢澄茄烯（9.90%）、紫穗槐烯（8.15%）等相對含量較高，詳見表1（表中“-”為未檢測到）。

圖1 總離子流圖Fig 1 Total ion chromatograms

由表1可知，由于來自同種植物，兩者的揮發(fā)油成分存在一定的相似性，主成分類型皆為倍半萜和單萜，有9個共有成分，共有成分在根中占揮發(fā)油總量的66.30%，在果中占揮發(fā)油總量的53.70%。當(dāng)然，兩者之間也存在明顯的區(qū)別：根中幾個主要成分含量較高，分別為（+）-δ-杜松烯（27.60%）、γ-畢澄茄?。?3.74%）和異朱欒倍半萜（12.99%）；而果實(shí)中成分比較多樣，主要成分含量差距不大，分別為石竹烯（12.61%）、γ-畢澄茄烯（9.90%）和紫穗槐烯（8.15%）。對于根中檢測到的成分，有15個在果實(shí)中未檢測到，占根中揮發(fā)油總量的25.30%；對于果實(shí)中檢測到的成分，有28個在根中未檢測到，占果實(shí)中揮發(fā)油總量的28.50%。并且，兩者共有的9個成分中，含量的高低也存在明顯的不同。

表1 紅木香藥材根和果實(shí)揮發(fā)油成分及相對含量Tab 1 Constituents and relative contents of volatile oil from roots and fruits of K.longpedunculata

3 討論

本試驗(yàn)采用GC-MS對紅木香藥材根和果實(shí)的揮發(fā)油成分進(jìn)行了分析，并采用峰面積歸一化法計(jì)算各成分相對含量。通過質(zhì)譜庫檢索，結(jié)合圖譜解析，共鑒定出52個化合物。

中藥的不同入藥部位，通?；瘜W(xué)成分亦不同[7]，如長梗南五味子的不同部位中揮發(fā)油成分通常有明顯差別[8-9]。紅木香藥材根與果實(shí)揮發(fā)油的主要成分及其含量同樣存在差異，這很可能是兩者在民間按不同的功效供藥用的原因之一。紅木香在福建乃至中國南方分布較多、民間應(yīng)用較為廣泛，其有效成分值得深入探究，其開發(fā)應(yīng)用前景值得期待。

[1] 鐘隱芳.福安畬醫(yī)畬藥[M].福州：海風(fēng)出版社，2010：261.

[2] 鐘雷興.閩東畬族文化全書：醫(yī)藥卷[M].北京：民族出版社，2009：166.

[3] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[S].1977年版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，1977：396.

[4] Song L，Ding JY，Tang C，et al.Compositions and biological activities of essential oils of Kadsura longepedunculata and Schisandra sphenanthera[J].Am J Chin Med，2007，35（2）：353-364.

[5] 黃澤豪，范世明.紅木香中兩個7，8位開環(huán)型木脂素的結(jié)構(gòu)鑒定[J].時珍國醫(yī)國藥，2012，23（5）：1226-1227.

[6] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：四部[S].2015年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：203.

[7] 徐玉琴，王志輝，周日寶，等.HPLC法測定廣升麻植株中不同部位蛻皮甾酮的含量[J].中國藥房，2016，27（15）：2147-2149.

[8] 田恒康，閆文玫，馬冠成.長梗南五味子根皮揮發(fā)油的研究[J].中國中藥雜志，1993，18（3）：165-166.

[9] 徐新剛，葛平亮，張晶.紫荊皮揮發(fā)油化學(xué)成分分析[J].中醫(yī)藥學(xué)刊，2005，23（9）：1703.

Analysis of Volatile Oil from Roots and Fruits of Kadsura longipedunculata by GC-MS

JIANG Zejing1，HUANG Zehao2（1.Shanghai Dermatology Hospital，Shanghai 200443，China；2.College of Pharmacy，F(xiàn)ujian University of TCM，F(xiàn)uzhou 350122，China）

R284.1；917

A

1001-0408（2017）21-2992-03

2016-09-01

2016-11-30）

（編輯：張 靜）

國家中醫(yī)藥管理局中醫(yī)藥行業(yè)科研專項(xiàng)項(xiàng)目（No.201407002）

＊藥師。研究方向：中藥資源化學(xué)。E-mail：gingerjzj@163.com

#通信作者：副教授，博士。研究方向：中藥資源化學(xué)。E-mail：huangzehao@fudan.edu.cn

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.21.31