婁山野生華重樓種子發(fā)芽試驗

宋 楊 宋德勛

遵義醫(yī)藥高等專科學校，貴州 遵義 563007

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婁山野生華重樓種子發(fā)芽試驗

宋 楊 宋德勛*

遵義醫(yī)藥高等專科學校，貴州 遵義 563007

目的：提高野生華重樓種子的發(fā)芽率。方法：使用不同濃度多菌靈浸種，再用不同濃度的生根粉浸種不同時間，最后使用不同濃度的赤霉素拌種，采用L16(45)正交試驗表頭進行催芽處理試驗，并用采用SPSS19軟件對試驗結果進行方差分析。結果：用60ppm赤霉素拌種時發(fā)芽數(shù)最多；使用95%的多菌靈浸種1.5h時種子霉變最少；使用濃度為500mg/L的生根粉浸種1.5h發(fā)芽最多。結論：使用95%的多菌靈浸種1.5h，再使用濃度為500mg/L的生根粉浸種1.5h；使用60ppm的赤霉素拌種，是華重樓種子發(fā)芽的最佳方案，可以促進華重樓種子胚的成熟，打破種子的休眠，提高華重樓種子的發(fā)芽率。

華重樓；種子；發(fā)芽試驗

婁山野生重樓系華重樓ParispolyphyllaSmith var.chinensis(Franch.) Hara，別名七葉一枝花，具有清熱解毒、消腫止痛、涼肝定驚的功效[1]，用于疔腫癰腫、咽喉腫痛、毒蛇咬傷、跌仆傷痛、驚風抽搐[2]，是云南白藥、宮血寧膠囊、云南白藥創(chuàng)可貼、云南紅藥散、三七血傷寧散等43種中成藥的原料。該藥可用于功能性子宮出血產后出血[3]；止血[4]，鎮(zhèn)痛，消炎，愈創(chuàng)[5]；對胃癌腫瘤細胞有抑制作用[6]；有肝臟保護作用[7]；治療跌打損傷和風濕、毒蟲毒蛇咬傷抗病毒和治療呼吸道疾病[1]。該藥材為地方保護品種的主要原料藥材，因其療效確切，臨床需求逐年增加。而長期大量采集野生華重樓資源用于生產中成藥，使婁山野生華重樓資源嚴重枯竭，再加上重樓種子發(fā)芽能力弱，生長速度緩慢，難以滿足人們日益增長的需求。筆者對婁山野生華重樓的種子發(fā)芽進行試驗研究，為華重樓人工種植提供數(shù)據支撐。

1 儀器與材料

1.1 儀器 馬頭牌JYT-5架盤藥物天平(分度0.5g，最大稱量500g，上海激光儀器廠)；賽多利斯電子分析天平(季爾國際貿易(上海)有限公司，F(xiàn)A100g，精度0.1mg)。

1.2 材料 酒精95%(蘇州吳合經貿有限公司)，生根粉(98%，山東梁山鼎圣生物工程有限公司)，赤霉素(鄭州銀海化工有限公司)，多菌靈(PD20083931，天津市漢邦植物保護)。

華重樓種子是從婁山采摘下來的成熟種子，將其與華重樓的塊莖同時采回，并種植于校園內，塊莖生長出的植物植株經鑒定為華重樓ParispolyphyllaSmith var.chinensis(Franch.) Hara。

2 方法

2.1 華重樓種子處理 待華重樓果實裂開露出紅色種子時，將種子摘下，去掉紅色種皮，洗凈，晾干。

2.2 試驗方法 使用L16(45)正交試驗表頭進行試驗，A多菌靈消毒液濃度：75%、80%、90%、95%；B消毒時間：0.5h、1h、1.5h、2h；C生根粉濃度：500、600、700、800mg/L；D浸種時間：0.5h、1h、1.5h、2h；E赤霉素拌種濃度：50、60、70、80ppm。

2.3 試驗過程 首先將晾干的種子選取16份，每份100粒，按正交試驗設計方案，用不同濃度的多菌靈消毒不同時間；其后用不同濃度的生根粉進行浸泡；再是使用不同濃度的赤霉素進行拌種。

2.4 試驗地處理 尋找適當?shù)姆N植地，種植處有略25cm厚的腐殖土，將野生泥土破碎，草根、石塊撿去，使用處理好的種子按照設計進行播種100粒，3個平行。播種1年后，種子發(fā)芽，按下列公式計算發(fā)芽率：發(fā)芽率 = 發(fā)芽數(shù) (棵) /試驗播種量(粒) × 100%。

2.5 統(tǒng)計學分析 數(shù)據處理與分析采用 SPSS 19.0 進行進行方差分析，P<0.05 表示差異具有統(tǒng)計學意義。

3 結果與分析

3.1 結果 具體統(tǒng)計見表1，華重樓種子發(fā)芽生長情況如圖1、2、3。

表1 正交試驗統(tǒng)計結果

3.2 分析

3.2.1 生根粉濃度的影響 生根粉濃度對華重樓種子發(fā)芽率的影響：C4(800mg/L)﹤C3(700mg/L)﹤C2(600mg/L)﹤C1(500mg/L)，當生根粉濃度為C1(500mg/L)時為華重樓種子發(fā)芽的最佳條件。見表2、表3。

表2 生根粉濃度方差分析表

注：不同小寫字母者表示兩組間差異具有統(tǒng)計學意義 (P<0.05)。

表3 生根粉濃度多重比較分析表

續(xù)表2 表3 生根粉濃度多重比較分析表

注：華重樓種子發(fā)芽率與為同處理比較，標有不同小寫字母者表示兩組間差異具有統(tǒng)計學意義 (P<0.05)。

3.2.2 赤霉素拌種濃度的影響 赤霉素拌種濃度方差齊性檢驗結果E1、E3具有極顯著差異，結果E2具有統(tǒng)計學差異。方差分析無統(tǒng)計學差異，但是E2(60ppm)>E3(70ppm)>E1(50ppm)>E4(80ppm)；試驗結果顯示赤霉素拌種濃度為60ppm最為最佳。見表4。

注: 赤霉素濃度與5個因素之間比較，差異無統(tǒng)計學意義 (P>0.05)。

3.2.3 消毒濃度、消毒時間和浸種時間的影響 消毒濃度、消毒時間和浸種時間的方差分析均無統(tǒng)計學差異。消毒濃度對華重樓種子發(fā)芽的影響A4(95%)>A3(90%)>A2(80%)>A1(75%)，最高與最低差為18，消毒濃度對華重樓種子發(fā)芽的影響為A4(95%)最好；消毒時間對華重樓種子發(fā)芽的影響為B3(1.5h)>B2(1h)>B4(2.0h)>B1(0.5h)，最高與最低差為142，華重樓種子消毒B3(1.5h)其發(fā)芽率最高；浸種時間的影響D3(1.5h)>D2(1h)>D1(0.5h)>D4(2h),但是最高與最低差為124，浸種時間D3(1.5h)的影響最大，華重樓的霉變率最低。

4 討論

研究顯示，使用75%～95%多菌靈浸種均可以殺死各種微生物，但95%的多菌靈消毒最佳，可防止種子霉變腐爛，保證了種子的繼續(xù)發(fā)育生長；使用生根粉浸種可以促進華重樓種子的繼續(xù)分化成熟，形成種子的胚；使用赤霉素拌可以打破種子的休眠，從而使種子生長出胚根(圖1)，進而長出一片真葉(圖2)，促成華重樓種子發(fā)芽，形成真根和華重樓的莖(圖3)。

在使用華重樓種子進行繁殖時，其種子雖多，但是不易發(fā)芽，試驗使用不同濃度的多菌靈消毒液對種子進行消毒，防止華重樓種子被污染霉爛；消毒時間為1.5h對華重樓種子發(fā)芽的影響最大；使用濃度為500mg/L的生根粉溶液浸泡華重樓種子1.5h，華重樓種子的發(fā)芽率最高。因此，使用95%的多菌靈浸種1.5h，再使用濃度為500mg/L的生根粉浸種1.5h；使用60ppm的赤霉素拌種，是華重樓種子發(fā)芽的最佳方案，可促進華重樓種子生長胚根，進而長出一枚真葉和莖，促使華重樓種子的發(fā)芽率。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：243-244.

[2]陳清，閻姝．重樓的藥理作用及其毒性反應的研究進展[J]．醫(yī)藥導報，2012，31(7) : 886-888.

[3]江延姣，葉慧君，劉佳俐，等．重樓生化湯對剖宮產術后子宮內膜MMP-9及其抑制物TIMP-1表達及細胞C 反應蛋白的影響[J]．中國臨床藥理學與治療學，2014，19(5) : 542-547.

[4]叢悅，柳曉蘭，余祖胤，等．重樓皂苷H 誘導血小板聚集效應及其機制的研究[J]．解放軍醫(yī)學雜志，2010，35(12) : 1429-1432.

[5]王奇颯，孫東杰，何黎，等．重樓總皂苷及不同皂苷成分對痤瘡相關病原菌抑菌效果的評價[J]．中國皮膚性病學雜志，2016，30(9) :240-242.

[6]張珂，鄧清華，馬勝林，等．重樓醇提取物對胃癌SGC-7901細胞增殖和凋亡的影響[J]．中華中醫(yī)藥學刊，2016，34(1) :145-148.

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Study on Germination of seeds of wild LoushanParispolyphylla

SONG Yang SONG Dexun*

Zunyi Medical and pharmaceutical College，Zunyi 563007，China

Objective To improve the seed germination of wildparispolyphyllavar.chinensis(Franch.) Hara.Methods Using different concentrations of carbendazim seed soaking, with different concentrations of abt soaked with different time, at last use the concentration of gibberellin and adopting L16(45) orthogonal experiment header for the emergence, and the test results by using SPSS19 software analysis of variance. Result The maximum number of germination was when mixed with 60ppm gibberellin. The seed mildew was the lowest in the 1.5 hours. The maximum number of germination was found in the 1.5 hours of the growth of the root powder with a concentration of 500 mg/L. Conclusion Use 95% of the polymyl to soak for 1.5 hours, then use the concentration of 500mg/L to soak in 1.5 hours; Using 60ppm of gibberellin, it is the best solution for seed germination, which can promote the maturity of the seed embryo, break the seed dormancy, and raise the germination rate of the seed.

Parispolyphyllavar.chinensis(Franch.) Hara；Seeds；Germination test

遵義市聯(lián)合基金項目(遵市科合社字[2014]02號)；遵義市人才團隊項目(遵科合人字[2014]3號)；遵義市匯川區(qū)科技計劃項目(遵匯科合[2014]27號)。

宋楊(1989-)，女，漢族，本科，助理講師，研究方向為中藥材臨床試驗。E-mail：838086611@qq.com

宋德勛(1963-)，男，漢族，本科，教授，研究方向為藥材規(guī)范化種植。E-mail：277604215@qq.com

R282.2

A

1007-8517(2017)14-0035-04

2017-05-13 編輯：程鵬飛)