甲狀腺結節(jié)應用細針穿刺細胞學與BRAF基因突變的診斷價值研究

宋傳偉

甲狀腺結節(jié)應用細針穿刺細胞學與BRAF基因突變的診斷價值研究

宋傳偉

（山東菏澤市立醫(yī)院乳甲外科，山東 菏澤 274000）

目的 探討B(tài)RAF基因突變與細針穿刺細胞學運用在甲狀腺結節(jié)診斷中的臨床效果。方法 選擇甲狀腺結節(jié)患者101例為研究對象，術前均行BRAF基因突變與細針穿刺細胞學檢測，將術后病理診斷結果作為基本依據(jù)，對其診斷價值進行判斷。結果 細針穿刺細胞學檢測診斷甲狀腺結節(jié)的陰性預測值為85.15%（86/101）、陽性預測值為88.12%（89/101）、誤診率為6.93%（7/101）、漏診率為25.74%（26/101）、符合率為84.16%（85/101）；聯(lián)合BRAF基因突變診斷的陰性預測值為97.03%（98/101）、陽性預測值為98.02%（99/101）、誤診率為0.99%（1/101）、漏診率為8.91%（9/101）、符合率為94.06%（95/101）；同時，BRAF基因突變和FANC單一診斷與兩者聯(lián)合診斷的符合率、陰性預測值、陽性預測值等比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論 臨床上給予甲狀腺結節(jié)患者細針穿刺細胞學與BRAF基因突變聯(lián)合診斷可以提高準確率。

BRAF基因突變；細針穿刺細胞學；甲狀腺結節(jié)；陰性預測值；診斷價值

甲狀腺結節(jié)是比較常見的一種疾病，通常可以分為兩種類型，分別是良性結節(jié)和惡性結節(jié)，其中惡性結節(jié)的發(fā)病率較高，約為5%～15%左右，嚴重危害患者健康[1]。當前在診斷甲狀腺結節(jié)時，細針穿刺細胞學（FANC）是比較常用的一種檢查方法，但是因為取樣量少，無法將病灶組織的全貌充分反映出來，尤其是判斷轉移病灶，其局限性較大，具有較高的漏診率。因此，本文研究了甲狀腺結節(jié)運用BRAF基因突變與細針穿刺細胞學診斷的臨床價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇本院2014年8月～2015年9月期間收治的101例甲狀腺結節(jié)患者為研究對象，結節(jié)直徑0.5～ 4.8 cm，平均（2.6±1.1）cm，年齡10～75歲，平均（42.4± 19.5）歲，其中男41例，女60例。

1.2 方法

1.2.1 細針穿刺細胞學檢測 指導患者保持仰臥位，墊高頸部，頭朝后仰，使穿刺部位充分暴露，找好穿刺點，并進行標記。常規(guī)消毒穿刺部位后，鋪無菌方巾，運用利多卡因對患者進行局部麻醉，按照常規(guī)方法，在超聲引導下運用負壓穿刺器對患者進行穿刺取樣。需要注意的是，應該將患者的實際病情作為基本依據(jù)，對聚焦部位、增益以及深度進行調(diào)整，并且取樣時，將囊壁、囊實性結節(jié)以及微小鈣化作為重點部位，反復進行5次提插抽吸。完成取樣后，及時送至病理科進行涂片鏡檢，并且將甲狀腺病理細胞學Bethesda報告系統(tǒng)作為基本依據(jù)，對其進行分類。

1.2.2 BRAF基因突變檢測 在超聲引導下進行負壓穿刺取樣，運用上海星科生物科技有限公司提供的BRAF基因V600E突變檢測試劑盒對BRAF基因突變位點進行檢測。在UCSC Genome Bioinformatics中對BRAF基因序列進行檢索，對引物進行設計，下游：5’-GGC CAA AAA TTT AAT CAG TGG A-3’，上游：5’-TCA TAA TGC TTG CTC TGA TAG GA-3’，按照常規(guī)方法進行轉錄，使cDNA生成。操作的過程中，將試劑盒說明書作為基本依據(jù)，進行PCR實驗，對混合液進行解凍，并且以5∶0.25∶20的比例均勻混合待測DNA樣品和Taq酶，然后運用PCR儀進行擴增。擴增條件：（72℃、20 s，58℃，35 s；93℃、25 s）31個循環(huán)；95℃、5 min；（72℃、20 s，62℃，20 s，95℃、25 s）15個循環(huán)。于58℃時對HEX和FAM信號進行收集，其中陽性為Ct＜28，陰性為Ct≥28。

1.3 觀察指標 d/（c+d）×100%=陰性預測值；a/（a+b）× 100%=陽性預測值；b/（b+d）×100%=誤診率；c/（a+c）×100%=漏診率；（a+d）/總例數(shù)×100%=準確度，其中a為真陽性，b為假陽性，c為假陰性，d為真陰性。

1.4 統(tǒng)計學方法 運用SPSS17.5統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料用例數(shù)（n）表示，計數(shù)資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 BRAF基因突變檢查與聯(lián)合檢測的診斷價值比較 與FANC和BRAF基因突變單一檢查相比，聯(lián)合檢測的陽性預測值、陰性預測值以及符合率均較高，且漏診和誤診率低，對比差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 BRAF基因突變、FNAC檢查與聯(lián)合檢測的診斷價值對比[%（n）]

2.2 手術病理結果與BRAF基因突變和FNAC檢查結果 經(jīng)術后病理診斷，本組的101例患者中，60例為良性病灶，其中8例為腺瘤、13例為慢性甲狀腺炎、39例為結節(jié)性甲狀腺腫；41例為惡性病變，其中14例為甲狀腺髓樣癌、27例為甲狀腺乳頭狀癌；FNAC檢查，34例為惡性、6例為可疑惡性、4例為可疑濾泡性腫瘤及濾泡性腫瘤、6例為細胞非典型病變、46例為良性病變、5例無法診斷；FANC聯(lián)合BRAF基因突變診斷的特異度和靈敏度分別為98.02%、90.10%。見表2。

表2 BRAF基因突變、FANC檢查與手術病理結果

3 討論

當前臨床上在對甲狀腺良、惡性結節(jié)進行鑒別診斷時，通常將功能變化、囊實性、病變范圍以及結節(jié)大小等作為基本依據(jù)，并且大部分依靠實驗室化驗、影像學掃描以及觸診綜合完成[2]。BRAF作為具有生物學活性的一組DNA序列，其中V600E點突變是比較常見的一種遺傳病變，與侵襲性疾病的相關性較高，并且有報道顯示，V600E點突變是誘發(fā)甲狀腺疾病癌變的重要因素之一，與患者預后有著密不可分的聯(lián)系[3]。相比較細胞形態(tài)學改變而言，分子病理學的改變時間較早，檢測分子病理標記物，在一定程度上能夠對細胞形態(tài)學取樣不佳和不典型導致的診斷偏差，從而提高診斷準確率[4]。有研究發(fā)現(xiàn)，乳頭狀癌的發(fā)生和發(fā)展與BRAF突變密切相關，并且在乳頭狀癌患者中，BRAF突變的檢出率較高，約為29%～84%左右，而良性病變則不表達[5]。此外，BRAF突變與乳頭狀癌對周圍組織的高侵襲性相關，是預測中央淋巴結轉移率的一個重要因子，還能降低腫瘤細胞對放射性碘的攝取力，使治療失敗，是判斷預后的一個影響因素[6]。

在本次研究中，發(fā)現(xiàn)BRAF基因聯(lián)合細針穿刺細胞學診斷的符合率明顯高于單一細針穿刺細胞學，并且其漏診率和誤診率均較低。由此可見，在甲狀腺結節(jié)的臨床診斷中，聯(lián)合運用細針穿刺細胞學與BRAF基因突變診斷，能夠使準確率提高，具有一定的推廣價值。

[1] 張博茗,林元強,隋國慶.細針穿刺細胞學聯(lián)合BRAF-(V600E)基因突變檢測在甲狀腺結節(jié)診斷中的價值[J].腫瘤影像學, 2015,4（20）:259-263.

[2] 徐偉銘,楊佩濃,袁秋琦.細針穿刺細胞學與BRAF基因突變對甲狀腺結節(jié)的診斷價值[J].現(xiàn)代實用醫(yī)學,2016,5（12）:665-666.

[3] 陳思睿,曹仁賢.BRAF基因與甲狀腺癌分子診療的研究進展[J].中國醫(yī)學創(chuàng)新,2013,2（22）:161-163.

[4] H Gharib,E Papini,R Valcavi,et al.American Association of Clinical Endocrinologists and Associazione Medici Endocrinologi medical guidelines for clinical practice for the diagnosis and management of thyroid nodules[J].Journal of Clinical Endocrinology&Metabolism,2014,78(3):800-802.

[5] 羅雁,安寧,宋麗娟,等.FNAB聯(lián)合BRAF基因突變檢測在術前甲狀腺結節(jié)診斷中的應用[J].臨床與實驗病理學雜志,2016, 11（19）:1248-1251.

10.3969/j.issn.1009-4393.2017.22.053