• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    β-谷甾醇在復(fù)雜體系中抗氧化作用的研究

    2017-08-07 03:37:17朱瑞濤馮麗霞張彩鳳謝文磊
    中國糧油學(xué)報(bào) 2017年2期
    關(guān)鍵詞:大豆磷脂谷甾醇乳狀液

    左 玉 朱瑞濤 馮麗霞 張彩鳳,2 謝文磊

    (太原師范學(xué)院化學(xué)系1,太原 030031) (山西省腐植酸工程技術(shù)研究中心2,太原 030031) (河南工業(yè)大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院3,鄭州 450001)

    β-谷甾醇在復(fù)雜體系中抗氧化作用的研究

    左 玉1朱瑞濤1馮麗霞1張彩鳳1,2謝文磊3

    (太原師范學(xué)院化學(xué)系1,太原 030031) (山西省腐植酸工程技術(shù)研究中心2,太原 030031) (河南工業(yè)大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院3,鄭州 450001)

    研究β-谷甾醇在非均相食品體系和非均相生物體系的抗氧化活性以及VC和VE對其抗氧化活性的影響。結(jié)果表明,不同濃度的β-甾醇均具有一定的抗氧化活性,但抗氧化能力隨濃度升高逐漸降低。β-谷甾醇與VC協(xié)同作用時(shí),F(xiàn)TC法測得在葵花油乳狀液中VC的加入使3種濃度β-谷甾醇抗氧化能力明顯提高;而在大豆磷脂脂質(zhì)體中,0.008 mg/mL β-谷甾醇和VC共同作用時(shí)的抗氧化效果最好;TBARS法測得0.001 6 mg/mL β-谷甾醇和0.008 mg/mL VC共同作用表現(xiàn)出較強(qiáng)的協(xié)同增效作用。在考察β-谷甾醇與VE的協(xié)同作用時(shí)發(fā)現(xiàn):在大豆磷脂脂質(zhì)體中,F(xiàn)TC法測得的0.008 mg/mL β-谷甾醇和0.001 6 mg/mL VE共同作用顯示抗氧化協(xié)同增效作用,其余各種不同濃度的β-谷甾醇與VC、VE共同作用時(shí)均不顯示協(xié)同增效作用。

    β-谷甾醇 脂質(zhì)氧化 抗氧化活性 協(xié)同作用

    自然界的甾醇主要存在于動植物的油類與脂肪中,有1 700多種。在眾多的甾醇中,目前已發(fā)現(xiàn)的40多種植物甾醇具有很強(qiáng)的代表性,其中以β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇和菜籽甾醇為主[1]。有關(guān)植物甾醇的性質(zhì)和作用已有較多文章進(jìn)行了綜述,說明其廣泛應(yīng)用于食品[2-3]、醫(yī)藥[4-5]、日用化學(xué)品[6]及紡織化工等領(lǐng)域[7]。許多植物甾醇還具有較強(qiáng)的抗氧化能力[8]。當(dāng)前,人們對植物甾醇中β-谷甾醇的介紹也較為普遍,但對其抗氧化活性,尤其是在如復(fù)合抗氧化劑體系、食品體系和生物膜體系等非均相復(fù)雜體系下,用多種抗氧化指標(biāo)對β-谷甾醇抗氧化活性的研究鮮見報(bào)道。

    本試驗(yàn)研究β-谷甾醇在由葵花油水包油乳狀液模擬的非均相食品體系和用大豆磷脂脂質(zhì)體模擬的非均相生物體系的抗氧化活性以及VC和VE對其抗氧化活性的影響。試驗(yàn)過程中,分別用硫氰酸鐵法(FCT)測定脂質(zhì)過氧化物和硫代巴比妥酸反應(yīng)物法(TBARS)檢測脂質(zhì)過氧化物降解產(chǎn)生的小分子醛丙二醛。試驗(yàn)以期明確β-谷甾醇及其協(xié)同作用的抗氧化機(jī)理,為進(jìn)一步應(yīng)用于食品和生命體的研究提供借鑒。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    葵花籽油:天津嘉里糧油工業(yè)有限公司;大豆磷脂:黑龍江前進(jìn)油廠;β-谷甾醇:北京百靈威化學(xué)技術(shù)有限公司;VE、TBHQ:Sigma公司;AAPH:Aldrich化學(xué)試劑公司;Tween 20:上海三浦化學(xué)試劑公司;FeCl2·4H2O:天津雙船化學(xué)試劑廠;TCA:上?;瘜W(xué)試劑采購供應(yīng)站;TBA:中國醫(yī)藥(集團(tuán))上海化學(xué)試劑公司;其他試劑均為國產(chǎn)分析純。

    722S型分光光度計(jì)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-52C、SHZ-DA(Ⅲ)循環(huán)水式真空泵、KQ-100超聲波清洗儀:鞏義市英裕予華儀器廠;TL80-2型醫(yī)用離心機(jī)、80-1型離心沉淀機(jī):江蘇姜堰市天力醫(yī)療器械有限公司;SHZ-C水浴恒溫振蕩器:江蘇省金壇市華鋒儀器有限公司。

    1.2 葵花油水包油乳狀液的制備

    葵花油水包油乳狀液的制備參考Chang等[9]和Yen等[10]的工作:將5.0 g葵花油置于100 mL圓底燒瓶中,依次加入25 mL含0.5 g 20 mg/mL Tween 20的pH為7.4的磷酸鹽緩沖溶液、1.0 mL 5 mg/mL AAPH、抗氧化劑和磷酸鹽緩沖溶液,使總體積為50 mL。在超聲波振蕩器中振蕩20 min,形成乳白色不透明乳狀液。由于β-谷甾醇為油溶性,需用氯仿溶解,再將其與葵花油混合,減壓蒸發(fā)除去氯仿。

    1.3 大豆磷脂脂質(zhì)體的制備

    大豆磷脂脂質(zhì)體的制備參考Aihua等[11]的薄膜法的工作:稱取10.0 g大豆磷脂,用氯仿溶解定容至250 mL(40 mg/mL),儲存于冰箱中備用。再量取10.0 mL磷脂的氯仿溶液于100 mL圓底燒瓶中,45 ℃減壓蒸去氯仿,加入一定量的磷酸鹽緩沖溶液,在超聲波振蕩器中振蕩20 min,制備脂質(zhì)體,脂質(zhì)體溶液呈乳白色不透明狀。在測定β-谷甾醇抗氧化性能時(shí),β-谷甾醇的氯仿溶液預(yù)先與磷脂溶液混合,然后減壓蒸去氯仿。

    1.4 脂質(zhì)的氧化

    向制備好的葵花油乳狀液中加入1.0 mL AAPH,或向大豆磷脂脂質(zhì)體中加入0.5 mL AAPH后,將體系置于轉(zhuǎn)速為175 r/min 的水浴恒溫振蕩器中,發(fā)生氧化反應(yīng)(恒溫37 ℃)。2種體系中β-谷甾醇的添加量分別為油重和大豆磷脂質(zhì)量的0.02%、0.05%、0.10%。

    1.5 抗氧化活性的測定

    1.5.1 硫氰酸鐵法(FTC)

    采用Mitsuda等[12]和Yen等[13]的方法:每隔1.5 h取0.1 mL反應(yīng)液,加4.7 mL 75%乙醇(V/V)、0.1 mL 3.94 mol/L硫氰酸銨和0.1 mL 0.02 mol/L的FeCl2/3.5%HCl溶液。室溫反應(yīng)3 min后,于500 nm處測吸光度。

    1.5.2 硫代巴比妥酸反應(yīng)物法(TBARS)

    采用Kosugi等[14]的方法測定脂質(zhì)過氧化物降解產(chǎn)生的丙二醛MDA,并稍有改動。每隔1.5 h取0.5 mL反應(yīng)液,加2 mL 0.02 mol/L TBA、2 mL 20%(m/V) TCA和1 mL 0.08%(m/V)TBHQ。置于沸水浴加熱20 min,冷卻10 min,加2 mL氯仿,3 000 r/min離心10 min。取上清液在532 nm處測其吸光度。

    1.6 抑制率的計(jì)算

    式中:A空白和A樣品分別為t時(shí)間空白試樣和對應(yīng)時(shí)間點(diǎn)被測樣品的吸光度。

    1.7 數(shù)據(jù)處理與分析

    至少平行進(jìn)行3次,取其中平行效果較好的3次結(jié)果,采用Origin 8.0等數(shù)據(jù)分析軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,采用單因素方差分析(ANOVA),并以平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差(SD)表示。對各組數(shù)據(jù)采用方差分析,P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 不同濃度β-谷甾醇抗氧化活性的研究

    2.1.1 葵花油水包油乳狀液

    由圖1可以看出,不同濃度β-谷甾醇在葵花油水包油乳狀液中對脂質(zhì)的氧化均具有抑制作用,在相同時(shí)間內(nèi),β-谷甾醇的加入降低了體系中脂質(zhì)過氧化物和TBARS的量,并且不同質(zhì)量濃度之間均以相同的規(guī)律遞變,即0.02 mg/mL>0.05 mg/mL>0.10 mg/mL,說明隨著β-谷甾醇濃度升高,抗氧化能力逐漸降低。在氧化反應(yīng)初期,β-谷甾醇的存在能使脂質(zhì)過氧化物的形成明顯減慢,抑制氧化的效果明顯,但是抑制脂質(zhì)過氧化物生成的能力隨著時(shí)間的增加下降較快,在反應(yīng)結(jié)束時(shí)的抑制率分別是38.40%(0.02 mg/mL)、27.71%(0.05 mg/mL)和26.80% (0.10 mg/mL)(顯著性分析結(jié)果表明P<0.05,以下均相同)。氫過氧化物是脂質(zhì)氧化的初級產(chǎn)物,容易分解。Satue等[15]的研究表明,抗氧化劑對氫過氧化物的形成和分解有不同的活性。在乳狀液中,可能β-谷甾醇抑制脂質(zhì)過氧化物分解的能力好于抑制它的生成,使得抑制TBARS生成的抑制率有所提高,抑制率分別為42.22%(0.02 mg/mL)、40.28%(0.05 mg/mL)和34.17%(0.10 mg/mL)。

    圖1 不同濃度β-谷甾醇在葵花油水包油乳狀液中抗氧化活性的研究

    2.1.2 大豆磷脂脂質(zhì)體

    由圖2可以看出,不同濃度β-谷甾醇在大豆磷脂脂質(zhì)體中對脂質(zhì)的氧化均具有抑制作用,在相同時(shí)間內(nèi),β-谷甾醇的加入降低了體系中脂質(zhì)過氧化物和TBARS的量,并且不同質(zhì)量濃度之間均以相同的規(guī)律遞變,即:0.001 6 mg/mL>0.004 mg/mL>0.008 mg/mL,說明隨著β-谷甾醇濃度升高,抗氧化能力逐漸降低,且用FTC法測得的抑制率低于TBARS法,在0.001 6、0.004、0.008 mg/mL時(shí)過氧化物的抑制率為22.51%、21.05%和18.42%,MDA的抑制率分別是50.36%、42.34%和40.86%。

    圖2 不同濃度β-谷甾醇在大豆磷脂脂質(zhì)體中抗氧化活性的研究

    2.2 不同濃度β-谷甾醇和VC抗氧化活性的研究

    在一些生物抗氧化劑里添加VC、VE或BHT、BHA等,其所形成的抗氧化劑復(fù)合體的抗氧化效果往往強(qiáng)于單一抗氧化劑的抗氧化效果,這種作用稱為協(xié)同作用[16]。研究β-谷甾醇與VC或VE共同作用時(shí)所形成的復(fù)合抗氧化劑的抗氧化活性,所得數(shù)據(jù)采用加和法和直接比較法進(jìn)行分析,加和法公式為Y=P(x1+x2)-(Px1+Px2),P(x1+x2)為復(fù)合抗氧化劑的抑制率,Px1和Px2分別為單一組分在相同濃度下的抑制率。Y>0,存在(正)協(xié)同作用;Y<0,存在負(fù)協(xié)同作用,即無協(xié)同作用[17-18]。直接比較法,復(fù)合抗氧化劑的抑制率大于等濃度的單一抗氧化劑的抑制率,表明組分間存在協(xié)同作用,反之無協(xié)同作用[19]。

    2.2.1 葵花油水包油乳狀液

    β-谷甾醇與VC在葵花油乳狀液中的協(xié)同作用如圖3和圖4。由圖3a和圖4a可以看出,在乳狀液中加入VC使得3種濃度的β-谷甾醇抗氧化能力明顯提高。在與0.02 mg/mL VC協(xié)同時(shí),當(dāng)β-谷甾醇的加入量為0.05 mg/mL時(shí),2種抗氧化劑共同作用表現(xiàn)出的抗氧化效果最好,其抑制率達(dá)到67.78%,其余2種組合的抑制率分別為61.86%和49.36%。在與0.10 mg/mL VC協(xié)同時(shí)脂質(zhì)過氧化物在4.5 h時(shí)的吸光度值均達(dá)到最大。隨β-谷甾醇加入量不同,抗氧化能力的順序?yàn)?.02 mg/mL β-谷甾醇+0.10 mg/mL VC>0.10 mg/mL β-谷甾醇+0.10 mg/mL VC>0.05 mg/mL β-谷甾醇+0.10 mg/mL VC,其抑制率分別是67.75%、57.17%和53.42%。VC的加入雖然增強(qiáng)了β-谷甾醇單獨(dú)作用時(shí)的抗氧化活性,但并沒有VC單獨(dú)存在時(shí)的抗氧化活性高,2種濃度下VC的抑制率分別是71.26%和73.45%。通過加和法進(jìn)行比較,說明組分間沒有協(xié)同作用。

    圖3 不同濃度β-谷甾醇和0.02 mg/mL VC在葵花油水包油乳狀液中抗氧化活性的研究

    圖4 不同濃度β-谷甾醇和0.10 mg/mL VC在葵花油水包油乳狀液中抗氧化活性的研究

    圖3b和圖4b是用TBARS法測得的結(jié)果。由9 h內(nèi)吸光度值的變化,發(fā)現(xiàn)β-谷甾醇和VC在不同濃度配比下表現(xiàn)出不同的抗氧化活性,2種抗氧化劑的混合使用與每種單獨(dú)作用時(shí)一樣,均有較好的抗脂質(zhì)氧化作用。在與0.02 mg/mL VC協(xié)同時(shí),當(dāng)β-谷甾醇加入量為0.02 mg/mL時(shí),吸光度值與VC單獨(dú)使用時(shí)的吸光度值比較接近,呈現(xiàn)了相近的抗氧化活性,其抑制率為72.50%。與0.05 mg/mL和0.10 mg/mL的β-谷甾醇共同作用時(shí),分別在反應(yīng)后期的7.5 h和9 h時(shí),吸光度值出現(xiàn)了超越β-谷甾醇單獨(dú)作用時(shí)的吸光度值,說明抗氧化劑消耗完畢,不能抑制脂質(zhì)氧化物生成。在與0.10 mg/mL VC協(xié)同時(shí),當(dāng)β-谷甾醇的加入量與VC相同時(shí),抑制脂質(zhì)氧化的效果達(dá)到最佳,此時(shí)的抑制率是63.61%;其次為與0.02 mg/mL β-谷甾醇作用時(shí)的抑制率41.11%,再次是與0.05 mg/mL β-谷甾醇作用時(shí)的抑制率28.61%,這2種濃度的組合使得反應(yīng)后期的抗氧化活性逐漸降低至不顯示活性。VC在0.01 mg/mL和0.02 mg/mL時(shí)表現(xiàn)出比復(fù)合物質(zhì)強(qiáng)的抗氧化活性,其抑制率分別是70.00%和73.89%。采用同上的分析方法驗(yàn)證是否存在協(xié)同作用,Y=P(x1+x2)-(Px1+Px2)=P(β-谷甾醇+VC)-(Pβ-谷甾醇+PVC),由于PVC>Pβ-谷甾醇或P(β-谷甾醇+VC),所以Y始終小于0,復(fù)合抗氧化劑不產(chǎn)生協(xié)同作用??梢钥闯?,復(fù)合物沒有對生成丙二醛的協(xié)同抑制作用。

    2.2.2 大豆磷脂脂質(zhì)體

    圖5和圖6表明了不同濃度β-谷甾醇和不同濃度VC在大豆磷脂脂質(zhì)體中對脂質(zhì)氧化的影響。VC的添加量分別為0.001 6 mg/mL和0.008 mg/mL時(shí)用FTC法所測得的結(jié)果如圖5a和圖6a??梢钥闯觯?dāng)β-谷甾醇中添加VC后,其抗氧化活性均有所提高,而且隨著VC添加量的增加,抑制率也不斷增加。加入0.001 6 mg/mL VC時(shí),復(fù)合物的抑制率如下:0.001 6 mg/mL β-谷甾醇+0.00 16 mg/mL VC,37.13%;0.004 mg/mL β-谷甾醇+0.001 6 mg/mL VC,34.50%;0.008 mg/mL β-谷甾醇+ 0.001 6 mg/mL VC,38.60%。加入0.008 mg/mL VC時(shí),按上述β-谷甾醇濃度配比的抑制率分別是39.47%、36.26%、40.06%。由2組數(shù)據(jù)可以看出,雖然添加了不同濃度的VC,但均是當(dāng)β-谷甾醇的質(zhì)量濃度為0.008 mg/mL,其抗氧化效果最好,其次是0.001 6 mg/mL β-谷甾醇,效果最差的是0.004 mg/mL β-谷甾醇添加量。

    圖5 不同濃度β-谷甾醇和0.001 6 mg/mL VC抗氧化活性的研究

    圖6 不同濃度β-谷甾醇和0.008 mg/mL VC抗氧化活性的研究

    圖6b和圖5b是用TBARS法所測得的結(jié)果。當(dāng)VC的添加量為0.001 6 mg/mL時(shí),在氧化反應(yīng)的前7.5 h,其吸光度值均大于β-谷甾醇單獨(dú)存在時(shí)的吸光度值,當(dāng)反應(yīng)進(jìn)行到后期,吸光度值才逐漸減少。在該VC濃度下,不同濃度配比的復(fù)合物的抑制率如下:0.001 6 mg/mL β-谷甾醇+0.001 6 mg/mL VC,30.77%;0.004 mg/mL β-谷甾醇+0.001 6 mg/mL VC,23.08%;0.008 mg/mL β-谷甾醇+0.001 6 mg/mL VC,21.15%。該濃度VC沒有表現(xiàn)出協(xié)同作用,反而使其復(fù)合抗氧化活性不如單一組分。當(dāng)VC質(zhì)量濃度為0.008 mg/mL時(shí),復(fù)合物的抑制率分別為:0.001 6 mg/mL β-谷甾醇+0.008 mg/mL VC,88.46%;0.004 mg/mL β-谷甾醇+0.008 mg/mL VC,81.75%;0.008 mg/mL β-谷甾醇+0.008 mg/mL VC,73.72%,隨β-谷甾醇濃度的升高,抑制率是逐漸下降的,但都大于β-谷甾醇或VC單獨(dú)作用的抗氧化活性(0.008 mg/mL VC的抑制率是61.31%)。通過加和法驗(yàn)證協(xié)同作用,說明只有0.001 6 mg/mL β-谷甾醇和0.008 mg/mL VC的共同作用可以起到抑制大豆磷脂脂質(zhì)體隨時(shí)間氧化的作用,即表現(xiàn)出較強(qiáng)的協(xié)同增效作用。

    2.3 不同濃度β-谷甾醇和VE對復(fù)雜體系中脂質(zhì)氧化的影響

    2.3.1 葵花油水包油乳狀液

    VE的添加量分別為0.02 mg/mL和0.10 mg/mL時(shí)用FTC法所測得的結(jié)果如圖7a和圖8a所示。當(dāng)添加相對少量的VE(質(zhì)量濃度為0.02 mg/mL)時(shí),2種抗氧化劑共同作用的抗氧化活性大于β-谷甾醇或VE單獨(dú)存在的抗氧化活性,抑制率分別是65.46% (0.02 mg/mL β-谷甾醇+0.02 mg/mL VE)、64.56%(0.05 mg/mL β-谷甾醇+0.02 mg/mL VE)和58.38%(0.10 mg/mL β-谷甾醇+0.02 mg/mL VE)。通過加和法驗(yàn)證協(xié)同作用,表明0.02 mg/mL VE的加入與β-谷甾醇不產(chǎn)生協(xié)同作用,但復(fù)合物的抗氧化活性高于單一組分。在體系中加入較大量的0.10 mg/mL VE后,抗氧化活性并不是隨抗氧化劑濃度的增加而增加,抑制率分別是38.66%(0.02 mg/mL β-谷甾醇+0.10 mg/mL VE)、22.55%(0.05 mg/mL β-谷甾醇+0.10 mg/mL VE)和41.75%(0.10 mg/mL β-谷甾醇+0.10 mg/mL VE)??梢钥闯?,0.10 mg/mL β-谷甾醇+0.10 mg/mL VE的組合表現(xiàn)出比單一β-谷甾醇作用時(shí)高的抑制率,但Y= 41.75%-26.80%-38.14%<0,仍不顯示協(xié)同作用。而0.10 mg/mL VE+0.02 mg/mL β-谷甾醇與0.02 mg/mL β-谷甾醇單獨(dú)作用的抗氧化活性相差不大,0.10 mg/mL VE+0.05 mg/mL β-谷甾醇比同濃度的β-谷甾醇的抑制率要小。

    圖7 不同濃度β-谷甾醇和0.02 mg/mL VE抗氧化活性的研究

    圖8 不同濃度β-谷甾醇和0.10 mg/mL VE抗氧化活性

    圖7b和圖8b是用TBARS法所測得的結(jié)果。當(dāng)與0.02 mg/mL VE協(xié)同作用時(shí),只有在體系中添加了0.02 mg/mL β-谷甾醇才顯示出低于同濃度β-谷甾醇或VE單獨(dú)使的吸光度值。若在體系中添加0.05 mg/mL或0.10 mg/mL β-谷甾醇,在反應(yīng)初期的1.5~3 h內(nèi)出現(xiàn)了低于同濃度β-谷甾醇單獨(dú)作用的吸光度值的現(xiàn)象,但隨著反應(yīng)的不斷進(jìn)行,吸光度值也明顯增加以至超出了相同濃度β-谷甾醇的吸光度值。3種濃度配比的抑制率分別是56.11% (0.02 mg/mL β-谷甾醇+0.02 mg/mL VE)、12.50%(0.05 mg/mL β-谷甾醇+0.02 mg/mL VE)和16.39%(0.10 mg/mL β-谷甾醇+0.02 mg/mL VE)。通過加和法計(jì)算表明,0.02 mg/mL VE的加入不使復(fù)合抗氧化劑顯示協(xié)同作用。當(dāng)與0.10 mg/mL VE共同作用時(shí),出現(xiàn)了不同于上述的現(xiàn)象,0.02 mg/mL β-谷甾醇+0.10 mg/mL VE和0.05 mg/mL β-谷甾醇+0.10 mg/mL VE這2種組合使得乳狀液氧化的進(jìn)程變緩,抑制率達(dá)到了58.06%和60.28%,而0.10 mg/mL VE+0.10 mg/mL β-谷甾醇的作用卻出現(xiàn)在反應(yīng)的4.5~6 h時(shí),吸光度值達(dá)到了最高值,但反應(yīng)的繼續(xù)進(jìn)行使得吸光度值呈下降趨勢,此種配比的抗氧化劑的總抑制率也達(dá)到了57.58%。通過與0.02 mg/mL和0.10 mg/mL VE單獨(dú)作用的抑制率(41.11%和42.78%)比較可發(fā)現(xiàn),0.10 mg/mL VE的加入仍舊不使復(fù)合抗氧化劑顯示協(xié)同作用,但其抑制率高于同濃度下β-谷甾醇或VE的抑制率。

    2.3.2 大豆磷脂脂質(zhì)體

    圖9a為在磷脂體系中β-谷甾醇與0.001 6 mg/mL VE共同作用時(shí)的抗氧化性能,隨著VE的加入,抗氧化活性有較大提高,例如,各濃度的吸光度值從β-谷甾醇單獨(dú)作用時(shí)的0.265、0.270和0.279變化到0.166、0.172和0.143,說明了β-谷甾醇和VE的共同作用具有比單一β-谷甾醇作用時(shí)更好的抗氧化活性。不同濃度配比的抑制率分別由22.51%(0.001 6 mg/mL β-谷甾醇)、21.05%(0.004 mg/mL β-谷甾醇)和18.42%(0.008 mg/mL β-谷甾醇)升高到51.46% (0.001 6 mg/mL β-谷甾醇+0.001 6 mg/mL VE)、49.71%(0.004 mg/mL β-谷甾醇+0.001 6 mg/mL VE)和58.19%(0.008 mg/mL β-谷甾醇+0.001 6 mg/mL VE)。采用加和法考察協(xié)同作用,不難看出,只有0.008 mg/mL β-谷甾醇和0.001 6 mg/mL VE共同作用時(shí)才顯示抗氧化協(xié)同增效作用。由圖10a所示的過氧化物濃度變化趨勢同樣可以看出,當(dāng)VE的添加量增加到0.008 mg/mL時(shí),仍具有2種抗氧化劑的共同作用比單一抗氧化劑作用時(shí)好的抗氧化活性的特征,但與添加0.0016 mg/mL VE相比,抑制率略有下降,分別為42.11% (0.001 6 mg/mL β-谷甾醇+0.008 mg/mL VE)、40.35%(0.004 mg/mL β-谷甾醇+0.008 mg/mL VE)和39.77%(0.008 mg/mL β-谷甾醇+0.008 mg/mL VE)。采用加和法考察其協(xié)同作用,結(jié)果表明該濃度的VE不顯示協(xié)同作用。

    圖9 不同濃度β-谷甾醇和0.0016 mg/mL VE抗氧化活性的研究

    圖10 不同濃度β-谷甾醇和0.008 mg/mL VE抗氧化活性的研究

    圖9b和圖10b是在VE的添加量分別為0.001 6 mg/mL和0.008 mg/mL時(shí)用TBARS法所測得的結(jié)果。無法看出VE的加入是否提高了β-谷甾醇的抗氧化能力,因?yàn)槲舛?時(shí)間曲線的差異不十分明顯,導(dǎo)致了不同組合的抗氧化劑具有相近的抗氧化活性。通過抑制率的計(jì)算,添加0.001 6 mg/mL VE時(shí)的抑制率分別是49.64%(0.001 6 mg/mL β-谷甾醇+0.001 6 mg/mL VE)、42.34%(0.004 mg/mL β-谷甾醇+0.001 6 mg/mL VE)和32.85%(0.008 mg/mL β-谷甾醇+0.0016 mg/mL VE),添加0.008 mg/mL VE時(shí)的抑制率分別是60.58%(0.001 6 mg/mL β-谷甾醇+0.008 mg/mL VE)、54.01%(0.004 mg/mL β-谷甾醇+0.008 mg/mL VE)和49.64%(0.008 mg/mL β-谷甾醇+0.008 mg/mL VE),經(jīng)粗略計(jì)算,β-谷甾醇與0.008 mg/mL VE共同作用時(shí),抑制大豆磷脂脂質(zhì)體氧化的能力比β-谷甾醇單獨(dú)作用時(shí)略微增強(qiáng),但并不顯著,而且也不顯示協(xié)同增效作用。

    3 結(jié)論

    3.1 在試驗(yàn)的2個(gè)復(fù)雜體系中,用FTC法和TBARS法測得不同濃度β-谷甾醇均具有抗氧化活性,但不同體系中其抗氧化活性并不相同。隨著β-谷甾醇濃度升高,抗氧化能力逐漸降低。

    3.2 在考察β-谷甾醇與VC的協(xié)同作用時(shí)發(fā)現(xiàn),在葵花油乳狀液中,F(xiàn)TC法測得VC的加入使3種濃度β-谷甾醇抗氧化能力明顯提高,其中,0.05 mg/mL β-谷甾醇+0.02 mg/mL VC和0.10 mg/mL β-谷甾醇+0.10 mg/mL VC的抗氧化活性最好。在大豆磷脂脂質(zhì)體中,F(xiàn)TC法測得添加VC后,0.008 mg/mL β-谷甾醇的抗氧化效果最好,其次是0.001 6 mg/mL β-谷甾醇,效果最差的是0.004 mg/mL β-谷甾醇添加量。TBARS法測得0.001 6 mg/mL β-谷甾醇和0.008 mg/mL VC共同作用表現(xiàn)出較強(qiáng)的協(xié)同增效作用。

    3.3 在考察β-谷甾醇與VE的協(xié)同作用時(shí)發(fā)現(xiàn),在大豆磷脂脂質(zhì)體中,F(xiàn)TC法測得的0.008 mg/mL β-谷甾醇和0.001 6 mg/mL VE共同作用顯示抗氧化協(xié)同增效作用。

    這說明β-谷甾醇作為一種抗氧化劑具有較好的應(yīng)用前景,對其藥理學(xué)研究和進(jìn)一步應(yīng)用于食品和生命體的研究提供理論依據(jù),并對食品科學(xué)、生命科學(xué)和深入理解抗氧化劑的保健功能具有參考價(jià)值。

    [1]Awad A B, Fink C S, Trautwein E A, et al. β-sitosterol stimulates ceramide metabolism in differentiated caco2 cells [J]. Journal of Nutritional Biochemistry, 2005, 16: 650-655[2]Toivo J, Phillips K, Lampi A M, et al. Determination of sterols in foods: recovery of free, esterified, and glycosidic sterols [J]. Journal of Food Composition and Analysis, 2001, 14: 631-643

    [3]Baker V A, Herpurn P A, Kennedy S J, et al. Safety evaluation of phytosterol esters. part l. Assessment of oestrogenicity using a combination of in vivi and in vitro assays [J]. Food and Chemical Toxicology, 1999, 37: 13-22

    [4]Patrick J D, Bounic. Sterols and sterolins: new drugs for the immune system [J]. Therapeutic Focus Reviews, 2002, 7(14): 775-778

    [5]Moon E J, You M L, Lee O H, et al. A novel angiogenic factor derived from Aloe vera gel: β-sitosterol, a plant sterol [J]. Angiogenesis, 1999, 3: 117-123

    [6]梁夢蘭.一些新型非離子表面活性劑的制備和應(yīng)用[J]. 日用化學(xué)品科學(xué),2000,1(23):170-175 Liang Menglan. Some novel nonionic surfactants-preparation and applications [J]. Detergent and Cosmetics, 2000, 1(23):170-175

    [7]彭鶯,劉福禎,高欣.天然植物甾醇的應(yīng)用與提取工藝[J]. 化工進(jìn)展,2002,21(1):49-53 Peng Ying, Liu Fuzhen, Gao Xin. Research on and application of phytosterols [J]. Chemical Industry and Engineering Progress, 2002,21(1):49-53

    [8]吳時(shí)敏,吳謀成.植物甾醇的研究進(jìn)展與趨向(II)-植物甾醇的應(yīng)用基礎(chǔ)和開發(fā)研究[J]. 中國油脂,2002,27(3): 60-63 Wu Shimin, Wu Moucheng. Advancement and tendency on phytosterol research (Ⅱ)-applied base and exploiture [J]. China Oils and Fats, 2002, 27(3):60-63

    [9]Chang L W, Yen W J, Huang S C, et al. Antioxidant activity of sesame coat [J]. Food Chemistry,2002, 78: 347-354

    [10]Yen W J, Chang L W, Duh P D. Antioxidant activity of peanut seed testa and its antioxidative component, ethyl protocatechuate [J]. Food Science and Technology,2005, 38: 193-200

    [11]Aihua Z, Qiang G, Quan G H, et al. Interaction of malachite green with iecithin iiposomes [J]. Colloids and Surfaces A: Physicochem. Eng Aspects, 2003, 224: 75-82

    [12]Mitsuda H, Yasumoto K, Iwami K. Antioxidative action of indole compounds during the autoxidation of linoleic acid [J]. Eiyo Shokuryou, 1966, 45: 13-19

    [13]Yen G C, Hsieh C L. Antioxidant activity of extracts from Du-zhong (Eucommiaulmoides) toward various lipid peroxidation models in vitro [J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry,1998, 43: 574-578

    [14]Kosugi H, Kojima T, Kikugawa, K. Thiobarbituric acid reactive substances from peroxidized lipids [J]. Lipids,1989, 24: 873-881

    [15]Satue M T, Huang S W, Frank E N. Effect of natural antioxidants in virgin olive oil on oxidative stability of refined, bleached, and deodorized olive oil [J]. Journal of the American Oil Chemists Society,1995, 72, 1131-1137

    [16]左玉,李鵬鴿,謝文磊.膽固醇在復(fù)雜體系中的抗氧化作用[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè),2014,40(8):100-108 Zuo Yu, Li Pengge, Xie Wenlei. The study of antioxidant activities of cholesterol in complicated systems [J]. Food and Fermentation Industries, 2014, 40(8):100-108

    [17]Dziedzic S Z,Hudson B J F. Phosphatidyl ethanolamine as a synergist for primary antioxidants in edible oils [J]. Journal of the American Oil Chemists Society, 1984, 61: 1042-1045

    [18]Saito H, Ishihara K. Antioxidant activity and active sites of phospholipids as antioxidants [J]. Journal of the American Oil Chemists Society,1997,74:1531-1536

    [19]左玉,馮麗霞,朱瑞濤,等. 歐李紅色素在復(fù)雜體系中抗氧化作用的研究[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè),2015,41(5):150-156 Zuo Yu, Feng Lixia, Zhu Ruitao, et al. The study of antioxidant activities of the red pigments extracted from Cerasus humilis in complicated systems [J]. Food and Fermentation Industries, 2015, 41(5):150-156.

    Antioxidant Activities of β-Sitosterol in Complicated Systems

    Zuo Yu1Zhu Ruitao1Feng Lixia1Zhang Caifeng1,2Xie Wenlei3

    (Department of Chemistry, Taiyuan Normal University1, Taiyuan 030031) (Humic Acid in Shanxi Province Engineering Technology Research Center2, Taiyuan 030031) (School of Chemistry and Chemical Energineering, Henan University of Technology3, Zhengzhou 450001)

    The antioxidant activity of β-sitosterol was investigated in heterogeneous food system and heterogeneous biological system, and the influence of VC and VE on antioxidant activity was studied. The results indicated that β-sitosterol with different concentrations had a certain antioxidant activity, but the antioxidant capacity was decreased with the increasing of concentration. It was clear that antioxidant activities of β-sitosterol with three concentrations were significantly increased by the addition of VC in sunflower oil-in-water emulsion system under FTC method during the synergistic interactions between β-sitosterol and VC. It was shown that the combination of 0.001 6 mg/mL β-sitosterol and 0.008 mg/mL VC in soybean PC liposome resulted in strong synergistic interactions by using TBARS test and the combination of 0.008 mg/mL β-sitosterol and 0.001 6 mg/mL VE had slightly synergistic interactions by using FTC assay. The combination of other β-sitosterol and α-tocopherol/ascorbic acid would not lead to synergistic interactions.

    β-sitosterol, lipid peroxidation, antioxidant activity, synergistic effects

    2015-07-10

    左玉,女,1982年出生,講師,應(yīng)用化學(xué)和天然產(chǎn)物的研究與應(yīng)用

    謝文磊,男,1965年出生,教授,應(yīng)用化學(xué)和天然產(chǎn)物的研究與應(yīng)用

    O69

    A

    1003-0174(2017)02-0080-08

    猜你喜歡
    大豆磷脂谷甾醇乳狀液
    β?谷甾醇藥理作用研究進(jìn)展
    大豆磷脂粉對蛋雞腹脂率及雞蛋膽固醇的影響
    亞麻籽膠-大豆分離蛋白乳狀液微滴聚集體的制備及其流變特性
    β-谷甾醇和豆甾醇對小鼠急性結(jié)腸炎的治療作用研究
    二氧化鈦納米線陣列富集與內(nèi)部萃取電噴霧電離質(zhì)譜聯(lián)用檢測大豆磷脂
    豆甾醇在葵花油水包油乳狀液中抗氧化作用的研究
    不同植物油對γ-谷維素與β-谷甾醇有機(jī)凝膠的影響
    大豆磷脂在畜牧業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用
    β-谷甾醇和γ-谷維素的鍵合物對軟質(zhì)奶油的水分分布影響
    大豆磷脂酰肌醇的提取工藝研究
    亚洲综合精品二区| 综合色丁香网| 成人国产av品久久久| av在线观看视频网站免费| 男女边摸边吃奶| 一区二区三区精品91| 国产 一区精品| 男人操女人黄网站| 午夜福利网站1000一区二区三区| 久久99一区二区三区| 天天操日日干夜夜撸| 亚洲av中文av极速乱| 日本av免费视频播放| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲一区二区三区欧美精品| 国产成人精品一,二区| 久久久精品免费免费高清| 免费看不卡的av| 老司机影院毛片| 天堂中文最新版在线下载| 中文字幕人妻熟女乱码| 国产亚洲欧美精品永久| 日本爱情动作片www.在线观看| videossex国产| 亚洲精品国产av成人精品| 最近的中文字幕免费完整| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 美女中出高潮动态图| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 欧美最新免费一区二区三区| 男女边摸边吃奶| 日本vs欧美在线观看视频| 男女边吃奶边做爰视频| 免费观看无遮挡的男女| 国内精品宾馆在线| 国产精品久久久久久精品古装| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产不卡av网站在线观看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 精品福利永久在线观看| 精品国产乱码久久久久久小说| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 亚洲国产精品999| 最近中文字幕2019免费版| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 最新中文字幕久久久久| 少妇的丰满在线观看| 成人影院久久| 大香蕉97超碰在线| 亚洲美女搞黄在线观看| 99国产精品免费福利视频| 亚洲精品aⅴ在线观看| 日韩制服骚丝袜av| 99久久中文字幕三级久久日本| 十分钟在线观看高清视频www| 校园人妻丝袜中文字幕| 又黄又粗又硬又大视频| 晚上一个人看的免费电影| 两个人免费观看高清视频| 伦精品一区二区三区| 男女免费视频国产| 国产 一区精品| 精品久久蜜臀av无| 精品卡一卡二卡四卡免费| 蜜桃国产av成人99| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲国产av新网站| 丰满乱子伦码专区| av在线播放精品| 美女福利国产在线| 在线 av 中文字幕| 亚洲av综合色区一区| 老熟女久久久| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 国产亚洲欧美精品永久| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 欧美激情 高清一区二区三区| 免费人妻精品一区二区三区视频| 精品第一国产精品| 久久久久久人妻| 国产免费现黄频在线看| 亚洲av福利一区| 婷婷色综合www| 亚洲第一av免费看| 22中文网久久字幕| 久久99热这里只频精品6学生| 美女视频免费永久观看网站| 少妇高潮的动态图| 亚洲伊人久久精品综合| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 亚洲,欧美,日韩| av福利片在线| 99久国产av精品国产电影| 国产又爽黄色视频| 超色免费av| 9色porny在线观看| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 色94色欧美一区二区| 日韩制服骚丝袜av| 51国产日韩欧美| 日韩成人伦理影院| 日韩制服骚丝袜av| 9热在线视频观看99| 免费人成在线观看视频色| 欧美精品一区二区大全| 日本av手机在线免费观看| 中文字幕免费在线视频6| 亚洲经典国产精华液单| 日韩三级伦理在线观看| 一级黄片播放器| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| kizo精华| 精品人妻一区二区三区麻豆| 插逼视频在线观看| 日韩av免费高清视频| 久久精品夜色国产| 性高湖久久久久久久久免费观看| 日本vs欧美在线观看视频| 国产精品嫩草影院av在线观看| 成年动漫av网址| 亚洲一区二区三区欧美精品| 天美传媒精品一区二区| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 国产成人精品在线电影| 女人精品久久久久毛片| 在线 av 中文字幕| 97超碰精品成人国产| 一区在线观看完整版| av卡一久久| 亚洲国产精品国产精品| 日本-黄色视频高清免费观看| 多毛熟女@视频| 久久久精品区二区三区| 岛国毛片在线播放| av免费在线看不卡| 成年人午夜在线观看视频| 18禁国产床啪视频网站| av免费观看日本| 午夜老司机福利剧场| 亚洲三级黄色毛片| 欧美日韩成人在线一区二区| 日日爽夜夜爽网站| 午夜福利视频在线观看免费| 男女啪啪激烈高潮av片| xxxhd国产人妻xxx| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 欧美xxⅹ黑人| av天堂久久9| 男人舔女人的私密视频| 天堂中文最新版在线下载| 91久久精品国产一区二区三区| 如何舔出高潮| 女人久久www免费人成看片| 爱豆传媒免费全集在线观看| 人妻少妇偷人精品九色| 久久av网站| 日韩精品有码人妻一区| 国产亚洲精品久久久com| 考比视频在线观看| 看非洲黑人一级黄片| av不卡在线播放| 热99久久久久精品小说推荐| 看非洲黑人一级黄片| 欧美 亚洲 国产 日韩一| av视频免费观看在线观看| 波多野结衣一区麻豆| 婷婷色综合www| 日韩在线高清观看一区二区三区| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 大香蕉97超碰在线| 免费在线观看完整版高清| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 国产精品熟女久久久久浪| 久久av网站| 99热网站在线观看| 国产精品99久久99久久久不卡 | 国产又爽黄色视频| 久久99蜜桃精品久久| 99久久综合免费| 日韩一区二区视频免费看| av免费观看日本| 2021少妇久久久久久久久久久| 免费看不卡的av| 亚洲国产av新网站| 九色亚洲精品在线播放| 日本黄色日本黄色录像| 日韩大片免费观看网站| 9热在线视频观看99| 国产欧美亚洲国产| xxx大片免费视频| 国产亚洲一区二区精品| 大陆偷拍与自拍| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 欧美xxⅹ黑人| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲图色成人| 一级片免费观看大全| 天堂8中文在线网| 老女人水多毛片| 蜜臀久久99精品久久宅男| 毛片一级片免费看久久久久| 精品一品国产午夜福利视频| 日韩伦理黄色片| 久久久久精品性色| 免费看光身美女| 五月玫瑰六月丁香| 亚洲精品中文字幕在线视频| 天堂中文最新版在线下载| 综合色丁香网| 亚洲第一av免费看| 哪个播放器可以免费观看大片| 国产精品久久久久成人av| 免费在线观看完整版高清| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 欧美成人午夜精品| 成人亚洲欧美一区二区av| 丰满乱子伦码专区| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲av中文av极速乱| 午夜91福利影院| 欧美激情 高清一区二区三区| 99久久中文字幕三级久久日本| 性色av一级| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 人人澡人人妻人| 国产精品久久久av美女十八| 亚洲天堂av无毛| 亚洲精品日本国产第一区| 国产一区二区激情短视频 | 国产乱来视频区| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 亚洲精品国产色婷婷电影| 韩国精品一区二区三区 | 午夜精品国产一区二区电影| 欧美精品一区二区大全| 精品少妇内射三级| 午夜免费观看性视频| 国产熟女午夜一区二区三区| 午夜福利影视在线免费观看| 精品国产一区二区三区四区第35| 热99国产精品久久久久久7| 极品少妇高潮喷水抽搐| videosex国产| 精品久久久久久电影网| 午夜福利视频精品| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 黑人高潮一二区| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产成人精品一,二区| 天堂中文最新版在线下载| 久久人人爽人人爽人人片va| 欧美日韩av久久| 久久久久久久亚洲中文字幕| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 99热全是精品| 97超碰精品成人国产| 国产熟女午夜一区二区三区| 日本欧美国产在线视频| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 亚洲国产精品一区二区三区在线| 青春草亚洲视频在线观看| 女性被躁到高潮视频| 午夜免费男女啪啪视频观看| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 久久国内精品自在自线图片| 国产av一区二区精品久久| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 黑人猛操日本美女一级片| 亚洲av综合色区一区| 国产男女超爽视频在线观看| 精品久久国产蜜桃| 久热久热在线精品观看| 国产成人精品在线电影| 我的女老师完整版在线观看| av女优亚洲男人天堂| 国产免费一区二区三区四区乱码| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 纯流量卡能插随身wifi吗| 大香蕉久久网| 日本wwww免费看| 亚洲四区av| 两个人免费观看高清视频| 街头女战士在线观看网站| 国产av国产精品国产| 国产在线一区二区三区精| 久久久久久久久久人人人人人人| 亚洲国产av新网站| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 十八禁高潮呻吟视频| 在线看a的网站| 国产精品欧美亚洲77777| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产一区二区三区综合在线观看 | 午夜激情av网站| 欧美日本中文国产一区发布| 男女高潮啪啪啪动态图| 男人添女人高潮全过程视频| 十分钟在线观看高清视频www| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 美女国产高潮福利片在线看| 全区人妻精品视频| 亚洲成人手机| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 欧美国产精品一级二级三级| 国产xxxxx性猛交| 我的女老师完整版在线观看| 亚洲美女搞黄在线观看| 日本午夜av视频| 久久久精品区二区三区| 一级,二级,三级黄色视频| 色婷婷久久久亚洲欧美| 大陆偷拍与自拍| 久久韩国三级中文字幕| 91精品三级在线观看| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 日韩欧美一区视频在线观看| 午夜激情久久久久久久| 男女午夜视频在线观看 | 日韩精品免费视频一区二区三区 | 老熟女久久久| av福利片在线| 黄色 视频免费看| 只有这里有精品99| 秋霞在线观看毛片| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 久久久久精品性色| 在线看a的网站| 精品卡一卡二卡四卡免费| 午夜免费观看性视频| 久久久久精品久久久久真实原创| 卡戴珊不雅视频在线播放| 精品亚洲成a人片在线观看| 男女边摸边吃奶| 日本爱情动作片www.在线观看| 成人二区视频| 国产一区二区激情短视频 | 这个男人来自地球电影免费观看 | 22中文网久久字幕| 久久97久久精品| 少妇精品久久久久久久| 亚洲av中文av极速乱| 毛片一级片免费看久久久久| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 久久午夜福利片| 少妇精品久久久久久久| 制服诱惑二区| 天堂俺去俺来也www色官网| 亚洲精品视频女| 久久久久网色| 高清黄色对白视频在线免费看| av不卡在线播放| 精品熟女少妇av免费看| 国产精品久久久久成人av| 日本免费在线观看一区| 午夜福利影视在线免费观看| 国产av码专区亚洲av| 国产免费一区二区三区四区乱码| 国产精品一区二区在线观看99| 亚洲精品久久午夜乱码| 精品少妇黑人巨大在线播放| 亚洲情色 制服丝袜| 18禁国产床啪视频网站| 亚洲国产精品一区三区| 午夜福利,免费看| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产毛片在线视频| 制服人妻中文乱码| 亚洲精品一二三| 激情五月婷婷亚洲| 考比视频在线观看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 久久久欧美国产精品| 成人影院久久| 久久亚洲国产成人精品v| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 中国美白少妇内射xxxbb| 丰满迷人的少妇在线观看| 亚洲欧美成人精品一区二区| 久久热在线av| 久久亚洲国产成人精品v| 黑人欧美特级aaaaaa片| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 日产精品乱码卡一卡2卡三| 狂野欧美激情性bbbbbb| 亚洲精品视频女| 青春草国产在线视频| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产69精品久久久久777片| 国产精品偷伦视频观看了| 妹子高潮喷水视频| 免费观看a级毛片全部| 亚洲精品国产av蜜桃| 久久这里只有精品19| 十八禁高潮呻吟视频| 十分钟在线观看高清视频www| 少妇精品久久久久久久| 久久久国产一区二区| 两个人免费观看高清视频| 成人影院久久| 99re6热这里在线精品视频| 亚洲精品久久午夜乱码| 成人免费观看视频高清| 最后的刺客免费高清国语| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲精品456在线播放app| 久久精品国产自在天天线| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 国产麻豆69| 男女午夜视频在线观看 | 高清视频免费观看一区二区| 久久99热这里只频精品6学生| 伦理电影大哥的女人| 日韩欧美精品免费久久| 久久99一区二区三区| 亚洲人与动物交配视频| 街头女战士在线观看网站| 中文字幕制服av| 亚洲av成人精品一二三区| 成年av动漫网址| 日日撸夜夜添| 久久狼人影院| 国产精品一区二区在线不卡| 精品少妇黑人巨大在线播放| 国产成人a∨麻豆精品| 黑丝袜美女国产一区| 又黄又粗又硬又大视频| 久久久久久久久久久久大奶| 亚洲精品成人av观看孕妇| 午夜av观看不卡| 美女视频免费永久观看网站| 精品国产一区二区久久| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 成人国产av品久久久| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 亚洲天堂av无毛| 99久久人妻综合| 黑人高潮一二区| 老女人水多毛片| 国产精品免费大片| 亚洲,欧美精品.| 亚洲精品av麻豆狂野| 黑丝袜美女国产一区| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 亚洲av国产av综合av卡| 晚上一个人看的免费电影| 日本vs欧美在线观看视频| 欧美97在线视频| 久久ye,这里只有精品| 国产探花极品一区二区| 成人无遮挡网站| 国产成人精品久久久久久| 99热6这里只有精品| 婷婷色综合大香蕉| 亚洲少妇的诱惑av| 大片电影免费在线观看免费| 日韩在线高清观看一区二区三区| 夫妻性生交免费视频一级片| 99久国产av精品国产电影| 人成视频在线观看免费观看| 性色av一级| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 久久久久久久亚洲中文字幕| 亚洲国产精品一区三区| 免费高清在线观看日韩| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产熟女午夜一区二区三区| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| www日本在线高清视频| 免费人妻精品一区二区三区视频| 久久精品国产a三级三级三级| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 亚洲精品一二三| 国产成人a∨麻豆精品| 在线看a的网站| 性色av一级| www.色视频.com| 久久狼人影院| 最近中文字幕高清免费大全6| 黑丝袜美女国产一区| 国产精品99久久99久久久不卡 | 2022亚洲国产成人精品| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 精品久久蜜臀av无| 伦精品一区二区三区| 咕卡用的链子| 国产黄色免费在线视频| 韩国精品一区二区三区 | 久久久久国产网址| 欧美 亚洲 国产 日韩一| av在线观看视频网站免费| 亚洲av在线观看美女高潮| 国产亚洲欧美精品永久| 欧美97在线视频| 伦理电影免费视频| 午夜福利,免费看| 精品少妇久久久久久888优播| 精品卡一卡二卡四卡免费| 宅男免费午夜| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 国产乱来视频区| 两性夫妻黄色片 | 成年动漫av网址| 激情五月婷婷亚洲| av在线app专区| 90打野战视频偷拍视频| av国产久精品久网站免费入址| 精品国产露脸久久av麻豆| 成年人午夜在线观看视频| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 少妇熟女欧美另类| 中文欧美无线码| a级毛色黄片| 香蕉国产在线看| 啦啦啦啦在线视频资源| av免费观看日本| 亚洲美女搞黄在线观看| 99热网站在线观看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 亚洲av福利一区| 日韩一区二区视频免费看| av一本久久久久| 人妻一区二区av| 久久97久久精品| 国产精品一区二区在线观看99| 丰满少妇做爰视频| 欧美xxⅹ黑人| 熟女人妻精品中文字幕| 一级,二级,三级黄色视频| 人妻系列 视频| 中文欧美无线码| 午夜精品国产一区二区电影| 亚洲国产av影院在线观看| 高清在线视频一区二区三区| 爱豆传媒免费全集在线观看| 日韩电影二区| www.熟女人妻精品国产 | 五月玫瑰六月丁香| 日韩一区二区视频免费看| 制服人妻中文乱码| 捣出白浆h1v1| 国产成人免费无遮挡视频| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 欧美国产精品va在线观看不卡| 国产精品 国内视频| 亚洲av综合色区一区| 少妇人妻 视频| videos熟女内射| 午夜激情久久久久久久| 热99久久久久精品小说推荐| 免费大片18禁| 成人免费观看视频高清| 亚洲精品国产av成人精品| 人成视频在线观看免费观看| 欧美成人午夜精品| 国产一区二区在线观看日韩| 国产乱人偷精品视频| 久久人人爽人人爽人人片va| 97超碰精品成人国产| av在线播放精品| 精品国产露脸久久av麻豆| 曰老女人黄片| 免费高清在线观看视频在线观看| 国产精品蜜桃在线观看| 亚洲综合色惰| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 纯流量卡能插随身wifi吗| 七月丁香在线播放| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 免费看av在线观看网站| av福利片在线| av在线app专区| 国产精品三级大全| 久久久久久久久久成人| 国产成人a∨麻豆精品| 天堂中文最新版在线下载| 丝袜脚勾引网站| 国产精品成人在线| 乱人伦中国视频| 一边亲一边摸免费视频| 国产精品不卡视频一区二区| 免费观看性生交大片5| 国产有黄有色有爽视频| 欧美日韩av久久| 制服诱惑二区| 91成人精品电影| 一级毛片电影观看| 十八禁网站网址无遮挡| 日韩欧美精品免费久久| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产一级毛片在线| av免费在线看不卡| 国产午夜精品一二区理论片| 亚洲色图综合在线观看| 久久人妻熟女aⅴ| 成人毛片a级毛片在线播放| 国产日韩欧美视频二区| 亚洲av成人精品一二三区| 国产色婷婷99| 久久热在线av| 亚洲成人av在线免费| 最近2019中文字幕mv第一页| 欧美bdsm另类| 国产免费又黄又爽又色| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 岛国毛片在线播放| 在线 av 中文字幕|