7種殺菌劑對設施番茄晚疫病菌的室內毒力測定

相棟

摘要 采用菌絲生長抑制法室內測定了7種殺菌劑對番茄晚疫病菌的毒力。結果表明：供試的7種殺菌劑對番茄晚疫病菌絲生長都有一定的抑制作用，化學殺菌劑23.4%雙炔酰菌胺懸浮劑對番茄晚疫病菌毒力最強，其 EC50值為 0.37 μg/mL；其次是58%甲霜·錳鋅可濕性粉劑，其 EC50值為 1.07 μg/mL；80%烯酰嗎啉水分散粒劑的毒力最差，其 EC50值為 2093.97 μg/mL；生物殺菌劑解淀粉芽孢桿菌生防菌株 B-1619和枯草芽孢桿菌Bs Y1336均對番茄晚疫病菌均有很強的抑菌活性。因此，23.4%雙炔酰菌胺懸浮劑、解淀粉芽孢桿菌生防菌株 B-1619和枯草芽孢桿菌Bs Y1336為理論上防治番茄晚疫病菌抑菌效果較好的藥劑，用量少且毒性低，驗證后可在生產中推廣使用。

關鍵詞 設施番茄；殺菌劑；番茄晚疫病菌；毒力測定

中圖分類號 S482.2 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2016）16-0106-02

番茄晚疫?。≒hytophthora infestans）是由卵菌（Oomycete）[1]中的致病疫霉[Phytophthora infestans（Mont.）de Bary] 侵染所致，是全世界番茄和馬鈴薯生產上的重大病害之一[2]，嚴重威脅番茄生產[3]。從20世紀80年代開始，西藏大面積新建溫室或大棚進行設施蔬菜生產，極大地滿足了當?shù)厝嗣駥Ω鞣N蔬菜的需求，西藏蔬菜播種面積由1985年占當年農作物播種面積的1.61%提高到2011年的9.49%[4]。設施條件下番茄和馬鈴薯的栽培四季不斷，從而給病原菌提供了合適的發(fā)生和傳播條件、場所，現(xiàn)已成為周年發(fā)生的重要病害之一，造成極大的經濟損失。生產上對該病害的防治仍主要依靠化學農藥，但化學農藥的長期使用易造成病原菌抗藥性增強，研究表明，許多國家出現(xiàn)某一類藥劑的致病疫霉抗性群體[5-6]，同時一味地增加化學農藥的用量和次數(shù)，不僅增加成本，還造成番茄產品的農藥殘留超標。為此，必須在有效控制番茄病害的同時，盡可能減少化學農藥使用[7]，因此，本試驗以西藏設施番茄晚疫病菌為對象，通過室內毒力測定，篩選出幾種對該病菌抑制作用較好的殺菌劑，以期為該病害的田間防治提供參考，減輕農業(yè)生產中的損失。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試病原菌株。2015年5—9月采自西藏林芝市各地具有典型晚疫病的番茄病樣，帶至西藏大學農牧科學院植物病理學與微生物學實驗室，在黑麥培養(yǎng)基上進一步分離、鑒定，獲得的純培養(yǎng)菌株。

1.1.2 供試藥劑。試驗選擇了生產上可購買到、防治番茄晚疫病常用的殺菌劑，包括化學殺菌劑：64%惡霜靈·錳鋅可濕性粉劑（瑞士先正達作物保護有限公司生產）、80%烯酰嗎啉水分散粒劑（陜西萬邦生物科學技術有限公司生產）、23.4%雙炔酰菌胺懸浮劑（瑞士先正達作物保護有限公司生產）、50%腐霉利可濕性粉劑（海南正業(yè)中農高科股份有限公司生產）、58%甲霜·錳鋅可濕性粉劑（青島孚潤德植?？萍加邢薰荆?；新型生物殺菌劑：1×1010 cfu/g枯草芽孢桿菌Bs Y1336（臺灣百泰生物科技股份有限公司）、1.2×108 cfu/g解淀粉芽孢桿菌生防菌株 B-1619（江蘇省農業(yè)科學院植物保護研究所研制，江蘇省蘇科農化有限公司生產），共7種。

1.1.3 供試培養(yǎng)基。黑麥蔗糖培養(yǎng)基：取50 g黑麥種子在適量去離子水中浸泡24～36 h，搗碎機搗碎，55～60 ℃水浴1～2 h，經2層紗布過濾，上清液補水至1 L，加入蔗糖20 g、瓊脂粉15 g，121 ℃高壓蒸汽滅菌。

1.2 測定方法

采用菌絲生長速率法[8]測定7種供試藥劑對番茄晚疫病菌菌絲生長的抑菌活性。在預試驗的基礎上，將供試藥劑配制成一定濃度的母液，然后按一定濃度和比例加入到融化好的黑麥培養(yǎng)基，制成含藥量為 0.5、10、50、200、500 mg/L的含藥平板培養(yǎng)基。用5 mm打孔器在預培養(yǎng)的菌落邊緣的同一圓周上打取菌餅，菌絲面朝下接種到含藥培養(yǎng)基平板中央，每個濃度4次重復，以不含藥劑加等量無菌水的黑麥培養(yǎng)基為空白對照。在 18 ℃恒溫培養(yǎng)箱黑暗培養(yǎng)7 d后，采用十字交叉法測定菌落直徑并記錄。根據(jù)以下公式計算生長抑制率：

1.3 數(shù)據(jù)分析

利用spss軟件統(tǒng)計分析，求出各藥劑對供試病菌的毒力回歸曲線方程y=a+bx、相關系數(shù)r以及有效抑制中濃度（EC50）。最后根據(jù)EC50值，比較不同藥劑對該菌生長的影響。

2 結果與分析

由表1可知，供試藥劑均對番茄晚疫病菌表現(xiàn)出一定的抑制作用。不同殺菌劑或同一殺菌劑的不同濃度之間表現(xiàn)出不同的殺菌效果。64%惡霜·錳鋅可濕性粉劑、585甲霜·錳鋅可濕性粉劑、23.4%雙炔酰菌胺懸浮劑、枯草芽孢桿菌Bs Y1336、解淀粉芽孢桿菌生防菌株 B-1619在所設置濃度下對致病疫霉的抑制效果差異非常明顯，說明番茄晚疫病菌對不同濃度的這幾種藥劑敏感性差異極顯著，即在防治中不同藥劑濃度的防治效果差別明顯。殺菌劑對病菌的EC50值代表殺菌劑對番茄晚疫病菌的毒力高低，由表2可知，5種供試化學殺菌劑中，23.4%雙炔酰菌胺懸浮劑對番茄晚疫病菌毒力最強，其 EC50值為 0.37 μg/mL；其次是58%甲霜·錳鋅可濕性粉劑，其 EC50值為 1.07 μg/mL；80%烯酰嗎啉水分散粒劑的毒力最差，其 EC50值為2 093.97 μg/mL。供試的 2種生物殺菌劑中，解淀粉芽孢桿菌生防菌株 B-1619對番茄晚疫病菌的抑菌活性優(yōu)于枯草芽孢桿菌Bs Y1336，但兩者對番茄晚疫病菌均有很強的抑菌活性。

3 結論與討論

本試驗通過室內毒力測定篩選出了幾種對番茄晚疫病較為敏感的殺菌劑，為該病害的防治提供了理論依據(jù)。室內毒力測定可以比較幾種藥劑毒力的大小，該結果可為田間試驗提供依據(jù)。化學藥劑是控制番茄晚疫病發(fā)生和減少損失的有效途徑之一。目前，在防治卵菌上的效劑主要用苯基酰胺類殺菌劑（PAFs）[9]，該類殺菌劑的典型藥劑為甲霜靈，其次為烯酰嗎啉（DMM），并且烯酰嗎啉與苯基酰胺類藥劑無交互抗性[10]。本次室內毒力測定試驗選擇的藥劑中，23.4%雙炔酰菌胺懸浮劑和58%甲霜·錳鋅可濕性粉劑理論上為防治番茄晚疫病較好的化學殺菌劑，由陜西萬邦生物科學技術有限公司生產的80%烯酰嗎啉水分散粒劑與張成玲等[11]測定的毒力效果相差較大，說明不同廠家生產的藥劑質量有明顯差異；解淀粉芽孢桿菌生防菌株 B-1619和枯草芽孢桿菌Bs Y1336 2種生物殺菌劑對番茄晚疫病菌均有很強的抑菌活性。但總的看來，本試驗所選用的各藥劑除80%烯酰嗎啉水分散粒劑和50%腐霉利可濕性粉劑外，其余5種菌劑對番茄晚疫病菌均具有較顯著的抑菌活性，并且烯酰嗎啉還有待進一步驗證，在該病害的藥劑防治中可據(jù)情況選用。

本試驗所選化學類殺菌劑均為本地區(qū)市場上易購藥劑，室內的毒力測定結果僅僅說明殺菌劑與病原菌直接接觸時，藥劑對病原菌絲生長的抑制作用，其優(yōu)點是條件易于控制、操作簡便迅速，但不能完全顯示不同藥劑對病菌孢子萌發(fā)的抑制及田間防治效果，也不能反映出藥劑的滲透能力及內吸性等，所以這些藥劑還需要在大田中進一步試驗篩選后推廣應用。

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