Skp2蛋白在肺癌癌組織中表達及與臨床病理特征的關(guān)系

李文見 丁凱利 王喆 彭盼盼

（商丘市中心醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，河南商丘476000）

Skp2蛋白在肺癌癌組織中表達及與臨床病理特征的關(guān)系

李文見 丁凱利 王喆 彭盼盼

（商丘市中心醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，河南商丘476000）

目的研究Skp2蛋白在肺癌癌組織中表達及與臨床病理特征的關(guān)系。方法選取2012年3月至2016年3月在我院就診經(jīng)病理檢查確診為肺癌患者的存檔蠟塊標(biāo)本78例。選取同期在我院進行檢查的30例健康患者的正常肺組織進行對照研究，進行免疫組化法檢測，比較Skp2蛋白在正常肺組織與肺癌組織之間的表達以及Skp2蛋白表達與臨床病理特征間的關(guān)系。結(jié)果肺癌組織中的Skp2蛋白陽性率為44.9%顯著高于正常肺組織的6.7%（P＜0.05）。Skp2的陽性表達與肺癌組分化程度、TNMT分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)（P＜0.05）。結(jié)論Skp2蛋白與肺癌的發(fā)生與發(fā)展存在密切聯(lián)系，參與肺癌組織的侵襲與轉(zhuǎn)移，對判斷肺癌患者預(yù)后具有重要意義。

肺癌；Skp2；免疫組化

肺癌是臨床最常見的惡性腫瘤之一，在生活方式改變、大氣環(huán)境污染等因素影響下，肺癌發(fā)病率呈逐年上升趨勢，對人類健康造成極大威脅[1]。肺癌的病因與具體發(fā)病機制目前尚未完全明確，隨著分子生物學(xué)進展，越來越多的研究表明肺癌與細(xì)胞周期蛋白存在密切聯(lián)系[2]。S期蛋白激酶相關(guān)蛋白2（S-phase kinase associated protein 2，Skp2）可能參與肺癌的發(fā)生與發(fā)展。目前針對Skp2蛋白在肺癌癌組織中表達及與臨床病理特征的關(guān)系研究較少，因此本研究通過免疫組織化學(xué)方法檢測正常肺部組織與肺癌組織中Skp2蛋白表達，分析Skp2蛋白表達與肺癌臨床病理特征之間的關(guān)系，以期為臨床診斷提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源：選取2012年3月至2016年3月在我院就診經(jīng)病理檢查確診為肺癌患者的存檔蠟塊標(biāo)本78例。其中男55例，女23例，年齡39～66歲，平均（42.56±13.38）歲；組織學(xué)分類：腺癌49例，鱗癌29例；分化程度：高分化26例，中分化32例，低分化20例；肺癌TNM分期：Ⅰ期19例，Ⅱ期36例，Ⅲ期23例。所有患者術(shù)前均為接受放化療、免疫治療等，臨床病理資料完整。選取同期在我院進行檢查的30例健康患者的正常肺組織進行對照研究。

1.2 免疫組織化學(xué)染色：采用切片機行4 μm石蠟連續(xù)切片，切片常規(guī)脫蠟、水化。分別進行免疫組化染色，具體操作過程參照S-P試劑盒說明書進行?？乖迯?fù)后滴加一抗，置入冰箱過夜后次日取出，滴加二抗，恒溫箱孵育30 min，滴加酶作用底物DBA溶液觀察顯色情況，沖洗后復(fù)染、脫水、封片。以PBS代替一抗做陰性對照，以已知的Skp2蛋白陽性標(biāo)本為陽性對照。

1.3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：Skp2蛋白表達以細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性。參考Gstaiger等[3]的方法，隨機選取5個高倍視野計數(shù)，≥500個細(xì)胞，取平均值為細(xì)胞陽性率，細(xì)胞陽性率＞20%為陽性，細(xì)胞陽性率≤20%為陰性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理：采用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行分析和處理，計數(shù)資料采取率（%）表示，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Skp2蛋白在肺癌組織與正常肺組織中的表達：Skp2在肺癌組織中的表達顯著高于正常肺組織（χ2=14.042，P＜0.05），提示Skp2高表達可能與肺癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)，詳見表1。

表1 Skp2蛋白在肺癌組織與正常肺組織中的表達

2.2 Skp2蛋白表達與肺癌臨床病理特征的關(guān)系：Skp2的陽性表達與年齡、性別、組織學(xué)類型無相關(guān)性（P＞0.05）。Skp2的陽性表達與肺癌組分化程度、TNMT分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)（P＜0.05），詳見表2。

3 討論

在全球范圍內(nèi)，肺癌發(fā)病率與死亡率呈逐年上升趨勢，對人類健康造成極大威脅[4]。周期蛋白表達紊亂導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞異常增生，是肺癌發(fā)生與發(fā)展的關(guān)鍵[5]。Skp2屬于F-box蛋白家族成員，可能與腫瘤的發(fā)生與發(fā)展存在緊密聯(lián)系。本研究顯示，Skp2高表達可能與肺癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)，Skp2的陽性表達與肺癌分化程度、TNMT分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。

Skp2蛋白是新近發(fā)現(xiàn)的一種癌基因，可以通過降解細(xì)胞周期蛋白與細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶復(fù)合體，參與細(xì)胞周期調(diào)控，引起細(xì)胞增殖。Skp2蛋白對肺癌患者的早期診斷與預(yù)后具有重要作用。TNM分期是目前國際上常用的腫瘤分期系統(tǒng)，分期越高表明腫瘤進展程度越高，在本研究中，Skp2蛋白陽性表達隨TNM分期提高而升高，Skp2蛋白參與肺癌的發(fā)生與發(fā)展。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是腫瘤最常見的轉(zhuǎn)移方式，表明腫瘤細(xì)胞有病灶開始向周圍組織及器官擴散轉(zhuǎn)移，在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌組織中Skp2蛋白陽性表達顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌組織，Skp2蛋白高表達參與肺癌組織的侵襲與轉(zhuǎn)移。肺癌分化程度常用來判斷腫瘤的程度，分化程度越低，癌細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與正常細(xì)胞結(jié)構(gòu)差異越大，本研究中低分化肺癌組織中Skp2蛋白陽性率顯著上升，Skp2蛋白表達與肺癌的預(yù)后存在密切聯(lián)系。

表2 Skp2蛋白表達與肺癌各項臨場病理特征的關(guān)系

綜上所述，Skp2蛋白的高表達在肺癌的發(fā)生與發(fā)展中具有重要作用，可以作為判斷肺癌患者預(yù)后的重要指標(biāo)。

［1］韓仁強，鄭榮壽，張思維，等.1989年-2008年中國肺癌發(fā)病性別、城鄉(xiāng)差異及平均年齡趨勢分析［J］.中國肺癌雜志，2013，16（9）：445-451.

［2］胡素賢，孔祥余，原陽陽，等.肺癌組織中AKAP95與細(xì)胞周期蛋白D1和E1及臨床病理學(xué)指標(biāo)的關(guān)系［J］.中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志，2013，31（12）：890-894.

［3］Gstaiger M，Jordan R，Lim M，et al.SKP2 is oncogenic and over-expressed in human cancers［J］.Proc Natl Acad Sci USA，2001，98（9）：5043-5048.

［4］姚曉軍，劉倫旭.肺癌的流行病學(xué)及治療現(xiàn)狀［J］.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2014，22（8）：1982-1986.

［5］王萍，宋玉仙，竇靜杰，等.新化合物D261抑制非小細(xì)胞肺癌NCI-H460細(xì)胞增殖及其作用機制［J］.中國藥理學(xué)通報，2013，29（3）：442-443.

Research on Relationship between Skp2 Protein Expression and Its Clinical Pathological Features in Lung Cancer Tissue

Li WenjianDing KailiWang ZhePeng Panpan
（Department of Medical Oncology，Shangqiu Central Hospital，Shangqiu，476000，China）

ObjectivesTo study the relationship between Skp2 protein expression and its clinical pathological features in lung cancer tissue.Methods78 wax specimens selected from lung cancer patients who had been diagnosed after pathological examination in our hospital during March 2012 and March 2015 were studied.Meanwhile，30 normal lung tissue specimens selected from healthy people who had been examined in our hospital during the same period were studied.The immunohistochemical methods were chosen to detest all the specimens.Compare the Skp2 protein expression in normal lung tissue and lung cancer tissue as well as the relationship between Skp2 protein expression and its clinical pathological features.ResultsThe positive rate of Skp2 protein expression in lung cancer tissue（44.9%）was significantly higher than in normal lung cancer tissue（6.7%）（P＜0.05）.The positive expression of Skp2 protein was in correlation with the differentiated degree of lung cancer tissue，TNMT stages and lymphatic metastasis（P＜0.05）.ConclusionSkp2 protein has close correlation with the occurrence and development of lung cancer.It also takes part in the invasion and metastasis of lung cancer tissue.Thus，it is of great important to judge the prognosis of lung cancer patients.

Lung cancer；Skp2；Immunohistochemical

R734.2

A學(xué)科分類代碼：32067

1001-8131（2017）03-0214-02

2016-11-30