信陽(yáng)地區(qū)豬偽狂犬病免疫狀況調(diào)查

徐 華，王俊鋒

（1.信陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南 信陽(yáng) 464000；2.信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院牧醫(yī)工程學(xué)院，河南 信陽(yáng) 464001；3.信陽(yáng)市動(dòng)物健康養(yǎng)殖營(yíng)養(yǎng)工程技術(shù)研究中心，河南 信陽(yáng) 464001）

信陽(yáng)地區(qū)豬偽狂犬病免疫狀況調(diào)查

徐 華1，王俊鋒2，3*

（1.信陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南 信陽(yáng) 464000；2.信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院牧醫(yī)工程學(xué)院，河南 信陽(yáng) 464001；3.信陽(yáng)市動(dòng)物健康養(yǎng)殖營(yíng)養(yǎng)工程技術(shù)研究中心，河南 信陽(yáng) 464001）

豬偽狂犬?。╬orcine Pseudorabies，PR）是由偽狂犬病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的一種急性傳染病[1]。豬偽狂犬病主要引起新生仔豬發(fā)熱、神經(jīng)癥狀及消化系統(tǒng)等疾病，并造成大量死亡；成年豬多為隱性感染，并引起妊娠母豬流產(chǎn)、死產(chǎn)、木乃伊胎，公豬表現(xiàn)為繁殖障礙和呼吸道癥狀；給豬場(chǎng)造成較大損失。目前，全國(guó)每個(gè)省份均有豬偽狂犬病的發(fā)生，對(duì)養(yǎng)豬生產(chǎn)造成嚴(yán)重影響。

根據(jù)《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）》的要求，到2020年底完成所有種豬場(chǎng)偽狂犬病的凈化，信陽(yáng)市作為河南省的生豬大市，豬偽狂犬病也時(shí)有發(fā)生，部分豬場(chǎng)還較嚴(yán)重，任重而道遠(yuǎn)，馬超鋒等[2]2013年調(diào)查信陽(yáng)地區(qū)豬場(chǎng)偽狂犬病場(chǎng)陽(yáng)性率為62%，個(gè)體陽(yáng)性率為22．7%。豬偽狂犬病作為病毒性疾病，主要防控方法就是疫苗免疫，免疫后抗體水平的高低對(duì)豬群是否有保護(hù)力至關(guān)重要。為了解信陽(yáng)市近年來(lái)豬偽狂犬病免疫情況，采用美國(guó)IDEXX生產(chǎn)的豬偽狂犬病病毒gB抗體檢測(cè)試劑盒對(duì)全市豬群進(jìn)行檢測(cè)，以獲得較全面的數(shù)據(jù)，為該病的防控和凈化提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 采樣時(shí)間及地點(diǎn)

2014—2016年，信陽(yáng)市所轄7縣2區(qū)（浉河區(qū)、平橋區(qū)、淮濱縣、息縣、新縣、光山縣、羅山縣、潢川縣、商城縣）的不同規(guī)模豬場(chǎng)。

1.2 樣品的采集及制備

通過(guò)前腔靜脈或耳靜脈無(wú)菌采集每頭豬全血2～3 mL，離心后取上清液于滅菌離心管中、統(tǒng)一編號(hào)，-20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 檢測(cè)試劑及儀器設(shè)備

1.3.1 檢測(cè)試劑 豬偽狂犬病病毒gB抗體檢測(cè)試劑盒購(gòu)自美國(guó)IDEXX公司。

1.3.2 儀器設(shè)備 10～1 000μL單道移液器及25～300μL多道移液器，德國(guó)Eppendorf公司；303系列電熱恒溫培養(yǎng)箱，上海樹(shù)立儀器儀表有限公司；TDZ5-WS臺(tái)式低速離心機(jī)，長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司；Thermo FC酶標(biāo)儀，美國(guó)thermo公司；恒溫振蕩器；超聲波清洗器；96孔聚苯乙烯反應(yīng)板。

1.4 方法

采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）方法操作，按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

測(cè)量并且記錄每個(gè)被檢樣品和對(duì)照的A(650)值，計(jì)算結(jié)果，結(jié)果判定。

1.4.1 快速孵育模式（1h孵育/室溫：18～25℃） 如果S／N值低于或等于0．60，樣品應(yīng)判定為PRV抗體陽(yáng)性；如果S／N值大于0．60但小于或等于0．70，樣品應(yīng)重測(cè)；如果S／N值大于0．70，樣品應(yīng)判定為PRV抗體陰性。

1.4.2 過(guò)夜孵育模式（16～18h/

2～8℃） 如果S／N值低于或等于0．50，樣品應(yīng)判定為PRV抗體陽(yáng)性；如果S／N值大于0．50但小于或等于0．60，樣品應(yīng)重測(cè)；如果S／N值大于0．60，樣品應(yīng)判定為PRV抗體陰性。

2 檢測(cè)情況

2.1 2014-2016年總體檢測(cè)情況

從表1可以看出，2014—2016年共檢測(cè)樣品2 735份，合格2 450份，合格率89．58%，2014—2016年樣品合格率分別為91．77%、79．32%、93．68%，均高于70%的國(guó)家合格率標(biāo)準(zhǔn)。

2.2 2014—2016年不同月份檢測(cè)情況

從表2可以看出，信陽(yáng)市全年各個(gè)月份豬偽狂犬病免疫抗體合格率有差異，各月份均在70%以上，10月份最高為100%、5月份次高為96．28%，最低的8月份為70．24%、6月次低76．87%。

2.3 不同規(guī)模豬場(chǎng)檢測(cè)情況

2014—2016年，規(guī)模豬場(chǎng)PR免疫抗體合格率為90．02%，高于散養(yǎng)戶的84．84%；2014—2016年每年度規(guī)模場(chǎng)免疫抗體合格率（分別為92．87%、84．05%和95．94%）均高于當(dāng)年散養(yǎng)戶的合格率（90．08%、69．38%和88．41%），只有2015年散養(yǎng)戶豬偽狂犬病免疫抗體合格率低于70%，具體情況見(jiàn)表3。

3 討論

本次對(duì)信陽(yáng)市PR免疫抗體檢測(cè)，歷時(shí)3年，覆蓋信陽(yáng)地區(qū)不同規(guī)模的豬場(chǎng)，較全面地代表全市的豬偽狂犬病免疫狀況。2014—2016年共監(jiān)測(cè)樣品2 735份，合格率89．58%，高于國(guó)家規(guī)定的70%的群體合格率標(biāo)準(zhǔn)，能夠給信陽(yáng)地區(qū)豬群提供較好的保護(hù)。需要注意的是，PRgB抗體既可來(lái)源于疫苗免疫，也可來(lái)源于野毒感染產(chǎn)生的抗體，評(píng)價(jià)豬偽狂犬病的整體保護(hù)效果時(shí)還要結(jié)合野毒抗體檢測(cè)情況和豬群的臨床表現(xiàn)來(lái)評(píng)估。

從本次檢測(cè)結(jié)果看，每個(gè)月份均PR免疫抗體水平都較高，均在70%的群體合格率之上，但月份之間有差異，最高的3個(gè)月（10月、5月、4月）分別為100%、96．28%、96．11%，最低的3個(gè)月（8月、6月、3月）陽(yáng)性率為70．24%、76．87%和78．53%。

本次調(diào)查有規(guī)模場(chǎng)和散養(yǎng)戶，規(guī)模場(chǎng)的PR免疫抗體合格率為92．02%，高于散養(yǎng)戶的84．84%，這可能與規(guī)模場(chǎng)較為重視豬偽狂犬病的免疫有關(guān)。

表1 2014-2016年信陽(yáng)市豬偽狂犬病免疫抗體檢測(cè)情況統(tǒng)計(jì)

表2 2014—2016年信陽(yáng)市不同月份豬偽狂犬病免疫抗體檢測(cè)情況統(tǒng)計(jì)

表3 2014—2016年信陽(yáng)市不同類型豬場(chǎng)豬偽狂犬病免疫抗體檢測(cè)情況統(tǒng)計(jì)

近年來(lái)，豬價(jià)一直居高不下，養(yǎng)豬戶養(yǎng)殖熱情高漲，盲目擴(kuò)大養(yǎng)豬規(guī)模，但忽視豬場(chǎng)生物安全，造成豬場(chǎng)疫病的發(fā)生，特別是豬偽狂犬病等病毒性疾病，給豬場(chǎng)帶來(lái)較大的損失。豬場(chǎng)要凈化和根除PR，需采取綜合防控措施：1）做好引種檢測(cè)，確保陰性豬進(jìn)場(chǎng)；2）定期抽檢豬群，掌握豬群動(dòng)態(tài)，發(fā)現(xiàn)帶毒豬，立即淘汰；3）采用科學(xué)免疫程序，給豬群免疫高效優(yōu)質(zhì)豬偽狂犬疫苗，確保豬群抗體水平；4）豬場(chǎng)制定嚴(yán)格的進(jìn)出制度，控制人流、車流、物流，豬群實(shí)行全進(jìn)全出；5）做好豬場(chǎng)消毒管理工作，切斷PR傳播途徑。

[1] 陳溥言．獸醫(yī)傳染病學(xué)［M］．5版．北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2006：377-381．

[2] 馬超鋒，劉琨，張軼，等． 信陽(yáng)地區(qū)規(guī)模化豬場(chǎng)偽狂犬病血清學(xué)調(diào)查[J]． 畜牧與獸醫(yī)，2013，45(11)：73-76．

2017-05-14）

河南省高等學(xué)校重點(diǎn)科研項(xiàng)目計(jì)劃資助項(xiàng)目（201601-201712）；河南省高等學(xué)校青年骨干教師資助計(jì)劃項(xiàng)目（2015GGJS-267）；信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院“大別山區(qū)畜禽生態(tài)養(yǎng)殖技術(shù)”校級(jí)科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)

徐華（1971-），女，河南新縣人，獸醫(yī)師，?？?，主要從事動(dòng)物疫病防治工作

*為通訊作者