淺析有髯鳶尾雜交種成熟胚培養(yǎng)成苗技術(shù)

趙宇婷

摘 要：有髯鳶尾是一種垂瓣上有髯毛附屬物的鳶尾花，具有花大、花形奇特且花香艷麗的特點得到人們的青睞，也是世界范圍內(nèi)十分重要的宿根花卉之一。早在19世紀，人們在生物科技領域就利用了雜交技術(shù)，可以獲得更多不同性狀的品種，本文針對有髯鳶尾雜交種成熟胚培養(yǎng)成苗技術(shù)進行分析。

關(guān)鍵詞：有髯鳶尾；雜交技術(shù)；成苗技術(shù)

有髯鳶尾的觀賞價值非常高，在近代花卉觀賞中得到迅速發(fā)展，目前我國的有髯鳶尾都是通過從國外引進而來，有髯鳶尾的生長習性為喜排水，適合高爽的中性砂質(zhì)土壤，近年來我國在針對有髯鳶尾的育種方面均采用雜交的方式來進行培育以及新品種的開發(fā)。

一、材料與方法

1.試驗材料

本次試驗選取了有髯鳶尾“白與藍”ד印度首領”果實。

2.試驗方法

（1）消毒處理。將果實外包被的干黃苞片出去，使用洗衣粉浸泡后再使用自來水清洗20min，取出種子，再將種子沖洗30min后使用75%傳達的酒精進行消毒，然后將清洗好的種子進行解剖，取出種胚，再采取不同的處理方式并將材料放于MS培養(yǎng)基之中，再進行接種，接種完成后才可以放于培養(yǎng)室進行培養(yǎng)。

（2）種胚萌發(fā)誘導培養(yǎng)基的篩選。將胚種分別接種在不同濃度的6-BA、IBA以及NAA的MS細胞培養(yǎng)基當中，根據(jù)胚萌發(fā)和成苗的情況來研究植物生長調(diào)節(jié)劑的相應影響，并對種胚存在的體積膨大、彎曲等情況進行記錄并作為萌發(fā)標準，以成苗的葉片形成情況來作為成苗的標準，最后根據(jù)培萌發(fā)率以及成苗率來進行胚的培養(yǎng)方案的制定以及相應標準的研究。

（3）培養(yǎng)條件。向MS培養(yǎng)基中進行添加瓊脂、白砂糖等，并采用熟料封口的方式進行高溫滅菌，時間為19min，在進行培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)溫度應為24-26℃之間，光照時間應控制在12h之內(nèi)。

（4）練苗和移栽。查看幼苗的生長情況，將良好的幼苗進行練苗移栽，待試管苗根長到3cm左右時，將封口膜緩慢打開，分別取出進行練苗操作，將小苗取出并將根基殘留的培養(yǎng)基清洗干凈，使用過0.2%多菌靈溶液浸泡30s然后在分別將小苗移栽到滅菌后的基石上。

二、實驗結(jié)果

1.不同消毒處理對種子和種胚的污染率的影響

根據(jù)不同消毒處理后對種子和種胚的污染程度來看，影響程度差異很大，但是隨著消毒處理的時間的不斷增長，對種子的污染率也就逐漸降低，并且，種子在經(jīng)過2個星期的時間后，萌發(fā)率形成由上升到下降的趨勢，再根據(jù)消毒時間的長短來看，消毒時間過長對種胚會產(chǎn)生毒害作用，并不利于種胚的發(fā)芽。

2.雜交種植成熟胚誘導培養(yǎng)基的篩選

不同的激素濃度對雜交中胚萌發(fā)的影響各有不同，添加7次不同的6-BA、IBA、NAA進行處理，根據(jù)不同的激素本身的特性以及濃度可以得知，第6次的萌發(fā)率和成苗率最高，約為87%和86%，其他的幾次都要比第6次少很多。

3.增殖培養(yǎng)

（1）增殖培養(yǎng)基篩選。把叢生不定芽轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)26天后，只有1個出現(xiàn)了污染情況，并且芽叢增殖的非常明顯，通過對試管苗增殖以及生長情況的了解，增殖試管的苗可以分為三種，這三種苗都存在著增殖倍數(shù)的不同，不過三種苗的增殖倍數(shù)均在3到5之間。

4.生根培養(yǎng)

根據(jù)污染濃度的不同針對有髯鳶尾的培苗生根的程度也會不同，也就是說隨著濃度的增加，培苗生根的時間會先縮短再進行延長，一般是7天左右的時間。

三、綜合分析

1.種胚的獲取以及消毒

在對有髯鳶尾進行取胚時，應當先將種皮、胚乳等全部去除然后才能夠真正的取出完整的胚胎。完整的種子胚胎中是不會存在病毒的侵入，因此，種胚的培養(yǎng)過程中可以排除存在污染的問題，但是若種皮、胚乳處理不當，則會容易伴有細菌的滋生和入侵，從而導致種胚產(chǎn)生污染，也就說明了種胚的培養(yǎng)已經(jīng)失敗了。因此，在進行種胚的獲取工作中時，應當注意對種胚的二次消毒消毒，并且針對消毒時所使用的試劑以及消毒所需要的時間要進行相應的控制，否則，二次消毒也會給種胚帶來污染。

2.種胚的萌發(fā)

通過實驗可以發(fā)現(xiàn)，種胚在接種以后生長方式主要為脫分化形成愈傷組織后，再分化出無菌苗以及直接萌發(fā)出幼苗，然而幼苗的狀態(tài)又可以分為單苗或者是叢苗。

在日后的繁殖過程中，這兩種種胚的生長方式都能做到苗相整齊且增殖效果顯著。另外針對種胚直接萌發(fā)出幼苗的過程中，種胚在萌發(fā)時能夠首先出現(xiàn)下胚軸，接著是根環(huán)處膨大產(chǎn)生軸毛，然后是胚芽的位置開始膨大，能夠長出葉子，最后是胚根得到發(fā)育，形成根系組織。

3.繼代復壯

根據(jù)實驗可以得知，無菌苗普遍存在增殖倍數(shù)低、生長速度緩慢等問題，也存在玻璃化苗、褐化苗等情況，其中的大部分原因是由于隨著無菌苗繼代次數(shù)的不斷增多，體內(nèi)所包含的激素量過大，從而導致出現(xiàn)了此類情況的發(fā)生，也就是要在無菌苗繼代生長次數(shù)達到一定程度后就需要進行繼代復壯的培養(yǎng)了。由于無污染的程度較好，因此無菌苗生根的速度也會非常迅速，且株叢健壯，葉片顏色純正，在進行接下來的一段時間的培養(yǎng)中，部分的苗已經(jīng)生根，針對具體情況將生根苗的根系剪去，然后將其接種到處于最佳培養(yǎng)基中去，經(jīng)過一段時間觀察，能夠發(fā)現(xiàn)株叢葉片的寬度、顏色都已經(jīng)發(fā)生了許多變化。

四、結(jié)語

胚是能夠具有形成新植株的能力且離體萌發(fā)容易，胚的培養(yǎng)技術(shù)則是可以通過將種子的休眠狀態(tài)打破，促進萌發(fā)率的提升，進而產(chǎn)生整齊苗的出現(xiàn)，與莖尖、根莖以及花蕾等其他植被部位相比，胚的取材往往更具有方便性，而且在消毒、萌發(fā)以及繁殖速度反面都有顯著的效果。

參考文獻：

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