葛根芩連結(jié)腸定位片對(duì)濕熱內(nèi)蘊(yùn)型潰瘍性結(jié)腸炎模型兔結(jié)腸組織PPAR-γ、NF-κB p65蛋白表達(dá)的影響Δ

宋信莉，張石宇，郭光偉，劉 文#，章 宏（.貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，貴陽(yáng) 55000；.貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院藥劑科，貴陽(yáng) 55000；.貴州拜特制藥有限公司，貴陽(yáng) 55000）

葛根芩連結(jié)腸定位片對(duì)濕熱內(nèi)蘊(yùn)型潰瘍性結(jié)腸炎模型兔結(jié)腸組織PPAR-γ、NF-κB p65蛋白表達(dá)的影響Δ

宋信莉1＊，張石宇2，郭光偉1，劉 文1#，章 宏3（1.貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，貴陽(yáng) 550002；2.貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院藥劑科，貴陽(yáng) 550002；3.貴州拜特制藥有限公司，貴陽(yáng) 550002）

目的：觀察葛根芩連結(jié)腸定位片（GGQLJC）對(duì)濕熱內(nèi)蘊(yùn)型潰瘍性結(jié)腸炎（UC）模型兔結(jié)腸組織過(guò)氧化物酶增殖物激活受體（PPAR-γ）和核因子κB（NF-κB p65）蛋白表達(dá)的影響。方法：將56只家兔隨機(jī)分為正常組（生理鹽水）、模型組（生理鹽水）、柳氮磺胺吡啶片（SASP）組（陽(yáng)性對(duì)照，0.300 g/kg）、葛根芩連片（GGQL）組（0.225 g/kg）和GGQLJC高、中、低劑量組（1.036、0.518、0.259 g/kg），每組8只。除正常組外，其余各組兔復(fù)制濕熱內(nèi)蘊(yùn)型UC模型，于造模結(jié)束后次日ig給藥，每天1次，連續(xù)14 d。對(duì)兔疾病活動(dòng)度指數(shù)（DAI）、結(jié)腸黏膜損傷指數(shù)（CMDI）、組織學(xué)損傷（TDI）進(jìn)行評(píng)分，測(cè)定結(jié)腸、脾、胸腺指數(shù)，并檢測(cè)結(jié)腸組織中PPAR-γ、NF-κB p65蛋白表達(dá)。結(jié)果：與正常組比較，模型組兔DAI、CMDI和TDI評(píng)分以及結(jié)腸指數(shù)、脾指數(shù)、結(jié)腸組織中NF-κB p65蛋白表達(dá)水平均顯著升高（P＜0.01），胸腺指數(shù)、結(jié)腸組織中PPAR-γ蛋白表達(dá)水平均顯著降低（P＜0.01）；與模型組比較，各給藥組兔上述指標(biāo)均顯著改善（P＜0.05或P＜0.01）；與GGQL組比較，SASP組和GGQLJC高、中劑量組兔DAI和TDI評(píng)分、脾指數(shù)、結(jié)腸指數(shù)、結(jié)腸組織中NF-κB p65蛋白表達(dá)水平以及SASP組和GGQLJC高劑量組兔CMDI評(píng)分均顯著降低（P＜0.05），SASP組和GGQLJC高、中劑量組兔結(jié)腸組織中PPAR-γ蛋白表達(dá)水平顯著升高（P＜0.05或P＜0.01）。結(jié)論：GGQLJC對(duì)濕熱內(nèi)蘊(yùn)型UC模型兔有一定改善作用，且作用優(yōu)于GGQL；其機(jī)制可能與上調(diào)結(jié)腸組織中PPAR-γ蛋白表達(dá)和下調(diào)NF-κB p65蛋白表達(dá)有關(guān)。

葛根芩連結(jié)腸定位片；濕熱內(nèi)蘊(yùn)型潰瘍性結(jié)腸炎；過(guò)氧化物酶增殖物激活受體；核因子κB；家兔

潰瘍性結(jié)腸炎（Ulcerative colitis，UC）是一種非特異性結(jié)腸和直腸炎癥性慢性疾病，病因不明，是胃腸道較嚴(yán)重的疾病之一。該病的發(fā)生與遺傳、環(huán)境、免疫及炎癥介質(zhì)等因素密切相關(guān)，其中免疫紊亂是關(guān)鍵環(huán)節(jié)[1]。研究表明，過(guò)氧化物酶增殖物激活受體（PPAR-γ）具有強(qiáng)大的抗炎及調(diào)節(jié)免疫的作用，其主要是通過(guò)抑制核因子κB（NF-κB）介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路發(fā)揮抗炎作用。NF-κB是一種具有多向性轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)作用的核蛋白因子，最常見(jiàn)的存在形式是由p65與p50亞基組成的異二聚體，UC的發(fā)病與NF-κB p65的表達(dá)密切相關(guān)[2]。

葛根芩連片（簡(jiǎn)稱為“GGQL”）源于張仲景《傷寒論》中的葛根芩連湯，具有解表清里的功效，多用于治療太陽(yáng)表邪內(nèi)陷所致熱下利證，對(duì)濕熱內(nèi)蘊(yùn)型UC療效顯著[3]。但GGQL口服給藥后藥物容易在胃和小腸部位被吸收，真正達(dá)到結(jié)腸的藥物不多，影響了其療效。為了解決這一問(wèn)題，本課題組前期進(jìn)行了葛根芩連結(jié)腸定位片（簡(jiǎn)稱為“GGQLJC”）的研究，該定位片在人工胃液中放置2 h、在人工腸液中放置4 h指標(biāo)性成分均基本不釋放；當(dāng)其到達(dá)結(jié)腸后，指標(biāo)性成分開(kāi)始釋放，在結(jié)腸12 h內(nèi)的累積釋放率達(dá)92%[4]，體現(xiàn)了定位釋放的特點(diǎn)。本研究旨在探討GGQLJC對(duì)濕熱內(nèi)蘊(yùn)型UC家兔結(jié)腸黏膜PPAR-γ、NF-κB p65蛋白表達(dá)的影響，以探討GGQLJC治療濕熱內(nèi)蘊(yùn)型UC的作用機(jī)制，同時(shí)比較其與傳統(tǒng)GGQL的療效差異。

1 材料

1.1 儀器

BX-51顯微鏡（日本Olympus公司）；MK-4酶標(biāo)儀（芬蘭雷勃公司）；IMS圖象分析系統(tǒng)（上海哈靈生物技術(shù)有限公司）；D5100數(shù)碼相機(jī)（日本Nikon公司）。

1.2 藥品與試劑

GGQLJC（貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院自制，批號(hào)：20150211，規(guī)格：0.044 g/片）；GGQL（太極集團(tuán)四川綿陽(yáng)制藥有限公司，批號(hào)：150121501，規(guī)格：0.5 g/片）；柳氮磺胺吡啶片（SASP，上海中西三維藥業(yè)有限公司，批號(hào)：20150208，規(guī)格：0.25 g/片）；兔NF-κB p65一抗（美國(guó)Sigma公司，批號(hào)：SAB4504488）；兔PPAR-γ一抗（英國(guó)AmyjetScientific公司，批號(hào)：ab68542）；羊抗鼠/兔免疫球蛋白G（IgG）聚合物（福州邁新生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：282840407JF）；蜂蜜（貴州夜郎蜂業(yè)科技有限公司，批號(hào)：111455K2）；白酒（52°，北京紅星股份有限公司，批號(hào)：GB/T20832）。

1.3 動(dòng)物

健康家兔56只，♀♂各半，體質(zhì)量為2～2.5 kg，購(gòu)自貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心[許可證號(hào)：SCXK（黔）2012-001]。

2 方法

2.1 分組、造模與給藥

將56只兔隨機(jī)分為7組，每組8只，分別為正常組、模型組、GGQL組（0.225g/kg）、SASP組（0.300g/kg）[5]和GGQLJC高、中、低劑量組（1.034、0.518、0.259g/kg）[5]。動(dòng)物適應(yīng)性喂養(yǎng)7d后，除正常組外，其余6組兔均采用高脂高糖飲食加化學(xué)刺激法[5]建立濕熱內(nèi)蘊(yùn)型UC模型，并于造模結(jié)束后次日開(kāi)始給藥（藥物均以生理鹽水溶解），每天ig給藥1次，連續(xù)14d，期間正常飲食；正常組和模型組兔ig生理鹽水。

2.2 一般情況觀察

每天記錄兔的飲食、體質(zhì)量、大小便、毛色、精神等情況。

2.3 標(biāo)本采集及檢測(cè)

末次給藥后家兔禁食不禁水1d，空氣栓塞處死并解剖，取脾、胸腺并稱質(zhì)量；取結(jié)腸并測(cè)定其總長(zhǎng)度，并自距離肛門2cm處向上取結(jié)腸8cm，沿腸系膜縱向剪開(kāi)腸腔，用生理鹽水沖洗干凈并吸干水分，稱質(zhì)量；肉眼觀察結(jié)腸（生理鹽水漂洗3次并吸干水分）大體形態(tài)，并對(duì)結(jié)腸黏膜損傷指數(shù)（CMDI）進(jìn)行評(píng)分；剪取病變明顯結(jié)腸段標(biāo)本作病理切片，蘇木精-伊紅（HE）染色后觀察病理變化，對(duì)組織學(xué)損傷（TDI）進(jìn)行評(píng)分；采用免疫組化法檢測(cè)結(jié)腸組織中PPAR-γ、NF-κBp65蛋白表達(dá)。

2.4 疾病活動(dòng)情況觀察

分別在給藥第1、7、14天對(duì)兔進(jìn)行疾病活動(dòng)指數(shù)（DAI）評(píng)分，記錄兔的體質(zhì)量變化、大便性狀、大便隱血情況，分別按0～4分的分值范圍對(duì)體質(zhì)量下降百分比、大便性狀和大便血便情況進(jìn)行評(píng)分；DAI＝（體質(zhì)量下降百分比評(píng)分+大便性狀評(píng)分+大便隱血評(píng)分）/3[5-6]。

2.5 結(jié)腸指數(shù)、脾指數(shù)和胸腺指數(shù)測(cè)定

根據(jù)“2.3”項(xiàng)下數(shù)據(jù)，計(jì)算兔臟器（結(jié)腸、脾、胸腺）指數(shù)[臟器質(zhì)量（mg）/體質(zhì)量（g）]。

2.6 CMDI評(píng)分

[7-8]中方法進(jìn)行CMDI評(píng)分。肉眼觀察結(jié)腸黏膜變化：0分（黏膜無(wú)損傷），1分（黏膜充血、水腫，無(wú)潰瘍），2分（黏膜充血、水腫、輕度糜爛，無(wú)潰瘍），3分（黏膜充血、水腫、中度糜爛，有單個(gè)潰瘍），4分（黏膜充血、水腫、高度糜爛，有多個(gè)潰瘍），5分（黏膜充血、水腫、重度糜爛，有＞1cm的潰瘍）。

2.7 TDI評(píng)分

參考文獻(xiàn)[9]中方法進(jìn)行TDI評(píng)分：0分（未見(jiàn)明顯損傷），1分（腸絨毛結(jié)構(gòu)無(wú)破壞），2分（中等水平淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)、腸隱窩加深、腸壁增厚但未侵及肌層，無(wú)潰瘍），3分（呈高水平淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)、腸壁增厚且侵及肌層，無(wú)潰瘍），4分（明顯淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)、腸隱窩加深變形、腸壁增厚且侵及肌層，伴潰瘍）。

2.8 結(jié)腸組織中PPAR-γ、NF-κBp65蛋白表達(dá)測(cè)定

采用鏈霉親和素-生物素復(fù)合物（SABC）法[10]測(cè)定。切片脫蠟后滴加3%過(guò)氧化氫，放置15min，然后將切片浸入枸櫞酸鹽緩沖液中冷卻至室溫，滴加5%牛血清白蛋白封閉液封閉20min，分別加入兔PPAR-γ、NF-κB p65一抗，4冷凍過(guò)夜；滴加羊抗鼠/兔IgG聚合物，于37培養(yǎng)箱中孵育20min，然后滴加SABC，在37培養(yǎng)箱中孵育20min，再加入二氨基聯(lián)苯胺顯色劑，蘇木精輕度復(fù)染；經(jīng)乙醇脫水、二甲苯透明，最后中性樹(shù)膠封片，顯微鏡觀察結(jié)果。PPAR-γ、NF-κBp65蛋白表達(dá)陽(yáng)性為胞質(zhì)呈棕黃色顆粒，顏色越深即表達(dá)越強(qiáng)；未出現(xiàn)棕黃色顆粒則為陰性。采用BI-2000圖象分析系統(tǒng)，對(duì)每張切片隨機(jī)選取5個(gè)視野測(cè)量陽(yáng)性細(xì)胞平均積分光密度值（IOD），IOD值越大則表明蛋白表達(dá)越強(qiáng)。

2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以±s表示，當(dāng)資料滿足正態(tài)分布且方差齊時(shí)，采用單因素方差分析；如不滿足上述條件則采用非參數(shù)秩和檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 一般情況觀察結(jié)果

造模前，兔毛色潔白有光澤，反應(yīng)靈敏，喜活動(dòng)，大小便及糞便質(zhì)地均正常。造模中，兔站立不穩(wěn)、呼吸加快，隨后出現(xiàn)嗜睡懶動(dòng)的現(xiàn)象，后期出現(xiàn)大便黏滯不爽、腹瀉等癥狀。造模后，兔出現(xiàn)黏液膿血便、稀便，肛周污穢，與正常組兔糞便差別明顯；不喜活動(dòng)，無(wú)食欲，倦怠。造模48h內(nèi)模型組死亡2只，GGQLJC低劑量組及GGQL組各死亡1只。連續(xù)給藥10d后，各給藥組兔一般情況均有顯著改善，黏液、膿血便等癥狀明顯減少或消失，但整體狀態(tài)與正常組仍有差距，其中GGQLJC高劑量組和SASP組兔恢復(fù)最好。

3.2 DAI評(píng)分結(jié)果

給藥第1、7、14天后，與正常組比較，各組兔DAI評(píng)分均顯著升高（P＜0.05或P＜0.01）。給藥第7天后，與模型組比較，各給藥組兔DAI評(píng)分均顯著降低（P＜0.01）。給藥第14天后，與模型組比較，各給藥組兔DAI評(píng)分均顯著降低（P＜0.01）；與GGQL組比較，SASP組和GGQLJC高、中劑量組兔DAI評(píng)分顯著降低（P＜0.05），且GGQLJC高、中劑量組與SASP組降低程度相當(dāng)（P＞0.05），結(jié)果詳見(jiàn)表1。

3.3 結(jié)腸指數(shù)、脾指數(shù)及胸腺指數(shù)測(cè)定結(jié)果

與正常組比較，各組兔結(jié)腸指數(shù)、脾指數(shù)顯著升高（P＜0.01），胸腺指數(shù)顯著降低（P＜0.01）；與模型組比較，各給藥組兔結(jié)腸指數(shù)、脾指數(shù)均顯著降低（P＜0.05或P＜0.01），胸腺指數(shù)均顯著升高（P＜0.05）；與GGQL組比較，SASP組和GGQLJC高、中劑量組兔結(jié)腸指數(shù)和脾指數(shù)顯著降低（P＜0.05），且GGQLJC高、中劑量組與SASP組降低程度相當(dāng)（P＞0.05），結(jié)果詳見(jiàn)表2。

3.4 CMDI、TDI評(píng)分結(jié)果

與正常組比較，各組兔CMDI、TDI評(píng)分均顯著升高（P＜0.01）；與模型組比較，各給藥組兔CMDI、TDI評(píng)分均顯著降低（P＜0.05或P＜0.01）；與GGQL組比較，SASP組和GGQLJC高劑量組兔CMDI、TDI評(píng)分以及GGQLJC中劑量組兔TDI評(píng)分均顯著降低（P＜0.05），且GGQLJC高劑量組與SASP組降低程度相當(dāng)（P＞0.05），結(jié)果詳見(jiàn)表3。

表1 各組兔DAI評(píng)分結(jié)果（±s）Tab 1 Resultsof DAIscoring of rabbits in each group（±s）

表1 各組兔DAI評(píng)分結(jié)果（±s）Tab 1 Resultsof DAIscoring of rabbits in each group（±s）

注：與正常組比較，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；與模型組比較，##P＜0.01；與GGQL組比較，ΔP＜0.05；與SASP組比較，☆P＜0.05Note：vs.normal group，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；vs.model group，##P＜0.01；vs.GGQL group，ΔP＜0.05；vs.SASPgroup，☆P＜0.05

給藥第14天0.042±0.118 2.954±0.743＊＊0.667±0.509＊##0.375±0.425＊##Δ0.458±0.396＊##Δ0.583±0.427＊##Δ0.581±0.378＊##☆組別正常組模型組GGQL組SASP組GGQLJC高劑量組GGQLJC中劑量組GGQLJC低劑量組n8678887給藥第1天0.042±0.118 2.611±0.574＊＊2.619±0.300＊＊2.625±0.330＊＊2.542±0.248＊＊2.625±0.576＊＊2.762±0.418＊＊給藥第7天0.042±0.118 2.944±0.743＊＊1.286±0.678＊＊##0.958±0.518＊＊##1.042±0.653＊＊##1.292±0.547＊＊##1.381±0.621＊＊##

表2 各組兔結(jié)腸指數(shù)、脾指數(shù)及胸腺指數(shù)測(cè)定結(jié)果（±s，mg/g）Tab 2 Results of colon index，sp leen index，thymus index of rabbits in each group（±s，m g/g）

注：與正常組比較，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；與模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01；與GGQL組比較，ΔP＜0.05；與SASP組比較，☆P＜0.05Note：vs.normal group，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；vs.model group，#P＜0.05，##P＜0.01；vs.GGQL group，ΔP＜0.05；vs.SASPgroup，☆P＜0.05

胸腺指數(shù)1.291±0.111 0.751±0.131＊＊0.929±0.170＊＊#0.967±0.131＊＊#0.962±0.164＊＊#0.939±0.089＊＊#0.958±0.122＊＊#組別正常組模型組GGQL組SASP組GGQLJC高劑量組GGQLJC中劑量組GGQLJC低劑量組n8678887結(jié)腸指數(shù)0.334±0.034 1.145±0.187＊＊0.587±0.111＊＊##0.503±0.045＊＊##Δ0.539±0.086＊＊##Δ0.524±0.110＊＊##Δ0.642±0.118＊＊##☆脾指數(shù)0.288±0.031 0.458±0.057＊＊0.364±0.033＊##0.347±0.031＊##Δ0.345±0.051＊##Δ0.353±0.046＊##Δ0.367±0.024＊##☆

表3 各組兔CMDI、TDI評(píng)分結(jié)果（±s）Tab 3 Results of CMDI，TDI scoring of rabbits in each group（±s）

表3 各組兔CMDI、TDI評(píng)分結(jié)果（±s）Tab 3 Results of CMDI，TDI scoring of rabbits in each group（±s）

注：與正常組比較，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；與模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01；與GGQL組比較，ΔP＜0.05；與SASP組比較，☆P＜0.05Note：vs.normalgroup，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；vs.modelgroup，#P＜0.05，##P＜0.01；vs.GGQLgroup，ΔP＜0.05；vs.SASPgroup，☆P＜0.05

TDI 0.128±0.355 3.671±0.520＊＊2.432±0.978＊##1.630±0.519＊##1.753±0.717＊##Δ2.111±0.758＊##Δ☆2.720±0.761＊##☆組別正常組模型組GGQL組SASP組GGQLJC高劑量組GGQLJC中劑量組GGQLJC低劑量組n8678887 CMDI 0.126±0.344 4.177±0.743＊＊3.020±0.567＊#2.130±0.631＊##2.248±0.457＊##Δ3.136±0.989＊#☆3.285±0.949＊#☆

3.5 結(jié)腸組織中PPAR-γ、NF-κB p65蛋白表達(dá)測(cè)定結(jié)果

與正常組比較，各組兔結(jié)腸組織中PPAR-γ蛋白表達(dá)減弱、NF-κB p65蛋白表達(dá)增強(qiáng)（P＜0.01）；與模型組比較，各給藥組兔結(jié)腸組織中PPAR-γ蛋白表達(dá)增強(qiáng)、NF-κB p65蛋白表達(dá)減弱（P＜0.05或P＜0.01）；與GGQL組比較，SASP組和GGQLJC高、中劑量組兔結(jié)腸組織中PPAR-γ、NF-κB p65蛋白表達(dá)均顯著改善（P＜0.05或P＜0.01），且GGQLJC高劑量組兔結(jié)腸組織中PPAR-γ、NF-κB p65蛋白表達(dá)以及GGQLJC中劑量組兔結(jié)腸組織中NF-κB p65蛋白表達(dá)與SASP組改善程度相當(dāng)（P＞0.05），免疫組化圖詳見(jiàn)圖1、蛋白測(cè)定結(jié)果詳見(jiàn)表4。

4 討論

圖1 各組兔結(jié)腸組織中PPAR-γ、NF-κB p65蛋白表達(dá)免疫組化圖（×200）Fig 1 Imm unohistochem istry pictures of PPAR-γ，NF-κB p65 protein expression in colon tissue of rabbits in each group（×200）

中醫(yī)認(rèn)為，UC屬于中醫(yī)學(xué)“泄瀉”“久痢”“腸癖”“腹痛”“腸風(fēng)”“下血”等范疇[1]。西醫(yī)治療UC多采用水楊酸制劑、腎上腺皮質(zhì)激素、免疫抑制劑等，取得了一定療效，其中SASP是臨床上公認(rèn)的治療UC的化學(xué)藥，但SASP存在不良反應(yīng)大、價(jià)格昂貴等問(wèn)題。

在本研究中，筆者通過(guò)對(duì)兔一般情況進(jìn)行觀察，對(duì)DAI、CMDI、TDI進(jìn)行評(píng)分，以及檢測(cè)臟器（結(jié)腸、脾、胸腺）指數(shù)等，比較了SASP與不同劑量GGQLJC以及傳統(tǒng)劑型GGQL治療濕熱內(nèi)蘊(yùn)型UC兔的作用強(qiáng)弱，并通過(guò)檢測(cè)結(jié)腸組織中PPAR-γ、NF-κB p65蛋白表達(dá)探討了其作用機(jī)制。結(jié)果，給藥后能夠緩解濕熱內(nèi)蘊(yùn)型UC兔的一般癥狀，降低DAI、CMDI、TDI評(píng)分，降低結(jié)腸指數(shù)、脾指數(shù)，升高胸腺指數(shù)，其中以高劑量GGQLJC及SASP作用效果最優(yōu)，且比傳統(tǒng)GGQL效果更顯著。GGQLJC還能夠上調(diào)模型兔結(jié)腸組織中PPAR-γ蛋白表達(dá)和下調(diào)NF-κB p65蛋白表達(dá)。

綜上，本研究結(jié)果證實(shí)了GGQLJC能夠上調(diào)兔結(jié)腸組織中PPAR-γ蛋白表達(dá)、下調(diào)結(jié)腸組織中NF-κB p65蛋

表4 各組兔結(jié)腸組織中PPAR-γ、NF-κB p65蛋白表達(dá)測(cè)定結(jié)果（±s）Tab 4 Results of PPAR-γ，NF-κB p65 protein expressions in colon tissue of rabbits in each group（±s）

表4 各組兔結(jié)腸組織中PPAR-γ、NF-κB p65蛋白表達(dá)測(cè)定結(jié)果（±s）Tab 4 Results of PPAR-γ，NF-κB p65 protein expressions in colon tissue of rabbits in each group（±s）

注：與正常組比較，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；與模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01；與GGQL組比較，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01；與SASP組比較，☆P＜0.05，☆☆P＜0.01Note：vs.normal group，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；vs.model group，#P＜0.05，##P＜0.01；vs.GGQL group，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01；vs.SASP group，☆P＜0.05，☆☆P＜0.01

組別正常組模型組GGQL組SASP組GGQLJC高劑量組GGQLJC中劑量組GGQLJC低劑量組NF-κBp65 0.138±0.020 0.312±0.040＊＊0.244±0.034＊#0.191±0.025＊＊##Δ0.208±0.036＊##Δ0.221±0.027＊##Δ0.286±0.067＊＊#☆☆n8678887 PPAR-γ 0.333±0.028 0.185±0.008＊＊0.268±0.025＊##0.315±0.031##ΔΔ0.304±0.012##ΔΔ0.283±0.019＊##Δ☆0.258±0.026＊##☆☆

白表達(dá)，這可能是其治療UC的免疫學(xué)機(jī)制之一。

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Effects of Gegenqin lian Colon Positioning Tablet on Colon Tissue PPAR-γ，NF-κB p65 Protein Expressions of M odel Rabbitsw ith Damp-heat Type Ulcerative Colitis

SONG Xinli1，ZHANG Shiyu2，GUO Guangwei1，LIUWen1，ZHANG Hong3（1.School of Pharmacy，Guiyang University of Chinese Medicine，Guiyang 550002，China；2.Dept.of Pharmacy，the First A ffiliated Hospital of Guiyang University of Chinese Medicine，Guiyang 550002，China；3.Guizhou Beit Pharmaceutical Co.，Ltd.，Guiyang 550002，China）

OBJECTIVE：To observe the effects of Gegenqinlian colon positioning tablet（GGQLJC）on colon tissue PPAR-γ，NF-κB p65 protein expressions ofmodel rabbitsw ith damp-heat type ulcerative colitis（UC）.METHODS：56 rabbitswere randomly divided into normal group（normal saline），model group（normal saline），sulfasalazine tablet（SASP）group（positive control，0.300 g/kg），Gegenqinlian tablet（GGQL）group（0.225 g/kg）and GGQLJC high-dose，medium-dose，low-dose groups（1.036，0.518，0.259 g/kg），8 in each group.Except for normal group，rabbits in other groupswere cultured for damp-heat-type UC model，intragastrically adm inistrated in the second day of last adm inistration，once a day，for 14 d.Disease activity index（DAI），colonic mucosal damage index（CMDI），histological damage（TDI）were scored；colon，spleen and thymus indexes were determ ined；PPAR-γ，NF-κB p65 protein expressions in colon tissue were detected.RESULTS：Compared w ith normal group，DAI，CMDI，TDI scores and spleen index，colon index，NF-κB p65 protein level in colon tissue in model group were significantly increased（P＜0.01）；thymus index，PPAR-γprotein level in colon tissue were significantly reduced（P＜0.01）.Compared w ithmodel group，above-mentioned indexes in each adm inistration group were significantly improved（P＜0.05 or P＜0.01）.Compared w ith GGQL group，DAI and TDI scores，spleen index，colon index，NF-κB p65 protein level in colon tissue in SASP group，GGQLJC high-dose，medium-dose groups were significantly decreased（P＜0.05）；PPAR-γprotein level in colon tissue in SASP group，GGQLJC high-dose，medium-dose groups were significantly increased（P＜0.05 or P＜0.01）.CONCLUSIONS：GGQLJC has certain improvement effects on model rabbits w ith damp-heat type UC，which is superior to GGQL.Themechanism may be related to increasing PPAR-γprotein level and decreasing NF-κB p65 protein level in colon tissue.

Gegenqinlian colon positioning tablet；Damp-heat type ulcerative colitis；PPAR-γ；NF-κB p65；Rabbit

R283.6

A

1001-0408（2017）16-2186-05

2016-08-07

2017-03-12）

（編輯：林 靜）

貴州省優(yōu)秀青年科技人才培養(yǎng)對(duì)象專項(xiàng)項(xiàng)目（No.黔科合人字〔2011〕28號(hào)）

＊副教授，碩士。研究方向：中藥新技術(shù)與新制劑。電話：0851-8233005。E-mail：392347047@qq.com

#通信作者：教授，碩士，碩士生導(dǎo)師。研究方向：中藥新技術(shù)與新制劑。電話：0851-8233005。E-mail：642771631@qq.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.16.07