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    乳腺癌組織Ezrin、VEGF表達(dá)變化及其與臨床分期的關(guān)系

    2017-07-01 19:52:12李運(yùn)華劉紹華歐陽(yáng)堅(jiān)胡兆鵬梁卉
    山東醫(yī)藥 2017年20期
    關(guān)鍵詞:萍鄉(xiāng)市乳腺癌血管

    李運(yùn)華,劉紹華,歐陽(yáng)堅(jiān),胡兆鵬,梁卉

    (1 萍鄉(xiāng)市衛(wèi)生學(xué)校,江西萍鄉(xiāng)337000;2 萍鄉(xiāng)市人民醫(yī)院)

    乳腺癌組織Ezrin、VEGF表達(dá)變化及其與臨床分期的關(guān)系

    李運(yùn)華1,劉紹華1,歐陽(yáng)堅(jiān)1,胡兆鵬2,梁卉1

    (1 萍鄉(xiāng)市衛(wèi)生學(xué)校,江西萍鄉(xiāng)337000;2 萍鄉(xiāng)市人民醫(yī)院)

    目的 探討乳腺癌組織Ezrin、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)表達(dá)變化及其與腫瘤臨床分期的關(guān)系。方法 選擇乳腺癌患者107例,手術(shù)切除乳腺癌組織標(biāo)本為乳腺癌組、距腫瘤邊緣>5 cm的癌旁正常乳腺組織標(biāo)本作為癌旁正常組。采用Maxvision TM快捷免疫組化法檢測(cè)兩組Ezrin、VEGF表達(dá)(以條帶光密度值表示),分析二者表達(dá)與乳腺癌臨床分期的關(guān)系,以及二者的相關(guān)性。結(jié)果 乳腺癌組織Ezrin、VEGF表達(dá)均較癌旁正常組織升高(P均<0.05)。隨著臨床分期增加,乳腺癌組織Ezrin、VEGF表達(dá)均逐漸升高(P均<0.05)。乳腺癌組織Ezrin、VEGF表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.024,P<0.05)。結(jié)論 乳腺癌組織Ezrin、VEGF表達(dá)均上調(diào),二者均參與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展。

    乳腺癌;Ezrin蛋白;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子

    近年來乳腺癌的發(fā)病率和病死率逐年增加[1,2]。手術(shù)切除腫瘤結(jié)合術(shù)后放化療是乳腺癌的主要治療方法,但多數(shù)患者確診時(shí)已處于臨床中晚期,治療效果及預(yù)后均不佳;腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)仍較高[3]。目前,臨床仍缺乏特異性診斷和判斷乳腺癌病情的標(biāo)志物。Ezrin蛋白是細(xì)胞骨架與細(xì)胞膜之間的連接蛋白,主要表達(dá)于富含肌動(dòng)蛋白的細(xì)胞表面,是連接膜蛋白和肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)鍵蛋白[4]。已有證據(jù)顯示,Ezrin蛋白參與了部分腫瘤細(xì)胞的增殖、分化、轉(zhuǎn)移及凋亡過程[5],但其與乳腺癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系報(bào)道較少。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)參與細(xì)胞的多種生理及病理過程,在多種腫瘤細(xì)胞中表達(dá)異常,參與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展[6]。本研究探討乳腺癌組織Ezrin、VEGF表達(dá)變化及其與乳腺癌臨床分期的關(guān)系。

    1 資料與方法

    1.1 臨床資料 選取2011年1月~2015年11月萍鄉(xiāng)市人民醫(yī)院收治的乳腺癌患者107例,年齡57~75(64.7±7.6)歲;依據(jù)WHO乳腺癌腫瘤分期標(biāo)準(zhǔn),Ⅰ期23例、Ⅱ期26例、Ⅲ期31例、Ⅳ期27例。107例患者均行手術(shù)切除腫瘤組織(乳腺癌組),并留取距腫瘤邊緣>5 cm的正常乳腺組織標(biāo)本作為對(duì)照(正常組)。

    1.2 Ezrin、VEGF表達(dá)檢測(cè) 采用Maxvision TM快捷免疫組化法。取兩組乳腺組織標(biāo)本,石蠟包埋后4 μm厚連續(xù)切片。將切片平鋪于用黏片劑處理過的載玻片上,60 ℃條件下烘干100 min;將烘干的切片放入二甲苯中脫蠟,采用57%、75%、95%及無水乙醇進(jìn)行梯度脫水處理;將載玻片放入檸檬酸緩沖液中加熱15 min;每張切片上滴一滴3%雙氧水,室溫孵育10 min;在載玻片上分別滴加一抗(兔抗Ezrin工作液濃度為1∶200,兔抗VEGF工作液濃度為1∶250),室溫孵育1 h,4 ℃孵育過夜;PBS沖洗3次,滴加二抗,室溫孵育1 h;PBS沖洗3次,DAB試劑盒進(jìn)行顯色。具體步驟參照試劑盒說明書(Ezrin試劑盒購(gòu)自Santa Cruz公司,VEGF檢測(cè)試劑盒購(gòu)自IBL公司)。選取7個(gè)典型視野,采用Pro-Plus6.0圖像分析軟件測(cè)量Ezrin、VEGF表達(dá)的光密度值(OD值)。分析Ezrin、VEGF表達(dá)與乳腺癌臨床分期的關(guān)系。

    2 結(jié)果

    乳腺癌組Ezrin、VEGF表達(dá)均明顯高于正常組(P均<0.05),見表1;隨著臨床分期增加,乳腺癌組織Ezrin、VEGFF表達(dá)灰度值均逐漸升高(P均<0.05),見表2。乳腺癌組織Ezrin、VEGF表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.024,P<0.05)。

    表1 兩組VEGF、Ezrin表達(dá)灰度值比較

    注:與正常組比較,*P<0.05。

    表2 不同臨床分期乳腺癌組織VEGF、Ezrin表達(dá)(OD值

    3 討論

    Ezrin蛋白是細(xì)胞內(nèi)維系膜蛋白及細(xì)胞骨架蛋白的關(guān)鍵分子,參與腫瘤細(xì)胞的大部分病理學(xué)過程[7,8]。研究發(fā)現(xiàn),Ezrin蛋白在前列腺癌組織中表達(dá)亦明顯增強(qiáng),其表達(dá)水平越高、患者預(yù)后越差[9];宮頸癌組織中Ezrin和E-cadherin蛋白均表達(dá)增強(qiáng),且二者均與腫瘤細(xì)胞的增殖及轉(zhuǎn)移過程相關(guān)[10];Ezrin和MMP-9在食管鱗癌組織中均表達(dá)增強(qiáng),二者是腫瘤細(xì)胞外基質(zhì)發(fā)生重構(gòu)和腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的主要參與蛋白[11];Ezrin蛋白是結(jié)腸癌和胃癌等消化道惡性腫瘤細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移及凋亡的關(guān)鍵參與分子[12,13]。本研究結(jié)果顯示,乳腺癌組織Ezrin表達(dá)水平明顯高于癌旁正常組織,且隨著臨床分期增加,乳腺癌組織Ezrin表達(dá)均逐漸升高,說明Ezrin高表達(dá)可促進(jìn)乳腺癌的發(fā)生及發(fā)展,檢測(cè)乳腺癌組織Ezrin表達(dá)有助于乳腺癌的早期診斷和病情評(píng)估。

    乳腺癌是血管依賴性腫瘤。在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展過程中,新生血管生成發(fā)揮重要作用。在氧和營(yíng)養(yǎng)充足的情況下,VEGF可以通過Wnt等信號(hào)途徑促進(jìn)正常非增殖期血管內(nèi)皮細(xì)胞增生和血管網(wǎng)絡(luò)形成[14];但腫瘤局部一般為缺氧環(huán)境,缺氧導(dǎo)致腫瘤內(nèi)皮細(xì)胞通過旁分泌或自分泌方式產(chǎn)生VEGF,以保證腫瘤組織血管生成和氧供,促進(jìn)腫瘤組織發(fā)展[15]。VEGF還可通過調(diào)控一系列癌基因和抑癌基因的表達(dá)參與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展過程[16]。本研究結(jié)果顯示,乳腺癌組織VEGF表達(dá)水平明顯高于癌旁正常組織,且隨著臨床分期增加,乳腺癌組織VEGF表達(dá)均逐漸升高,與上述文獻(xiàn)報(bào)道相符,說明VEGF高表達(dá)可促進(jìn)乳腺癌的發(fā)生及發(fā)展。

    進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),乳腺癌組織Ezrin、VEGF表達(dá)變化趨勢(shì)相同,不同臨床分期乳腺癌組織中Ezrin、VEGF表達(dá)變化趨勢(shì)亦相同,二者表達(dá)呈正相關(guān)。推測(cè)乳腺癌組織中Ezrin、VEGF表達(dá)可能存在某種關(guān)聯(lián),但二者之間的具體聯(lián)系方式及作用機(jī)制需今后研究證實(shí)。

    綜上所述,Ezrin、VEGF在乳腺癌組織中表達(dá)均上調(diào),二者均參與了乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展。

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    江西省衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)科技計(jì)劃(20177212)。

    10.3969/j.issn.1002-266X.2017.20.018

    R737.9

    B

    1002-266X(2017)20-0058-02

    2016-12-08)

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