多穗金粟蘭提取物的抑菌活性測定

李黎星

【摘 要】以研究多穗金粟蘭提取物的不同萃取相對大腸桿菌等6種細(xì)菌的抗菌作用為目的，將多穗金粟蘭提取分離，每種萃取相進(jìn)行抑菌實驗。結(jié)果表明，多穗金粟蘭提取物中抑菌活性最強(qiáng)的為乙酸乙酯相，且對大腸桿菌最為敏感。

【關(guān)鍵詞】多穗金粟蘭；提取物；抑菌活性

多穗金粟蘭（Chloranthus multistachys Pei）也稱四塊瓦（陜西）、白毛七等，屬于金粟蘭科金粟蘭屬植物。該屬植物為民間傳統(tǒng)草藥，以根、根莖或全草入藥，具有舒經(jīng)活絡(luò)，祛風(fēng)散寒，消腫止痛等功效[1]。近年來，從金粟蘭屬植物中分離到的化合物主要為萜類，其余還有香豆素類、木脂素類、甾體類等，現(xiàn)代藥理學(xué)研究還表明，其具有抑菌、抗腫瘤、抗病毒等作用[2-3]。本文為開發(fā)利用天然、高效、低毒的抑菌藥物提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

多穗金粟蘭采自陜西省寧陜縣，自然陰干；大腸桿菌，蠟狀芽孢桿菌，巨大芽孢桿菌，金黃色葡萄球菌，白色葡萄球菌，表皮葡萄球菌均購于陜西省微生物研究所。

1.2 方法

1.2.1 多穗金粟蘭的提取與分離

取干燥的多穗金粟蘭全草500g，粉碎，用甲醇回流提取3小時，抽濾，收集甲醇濾液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，除去溶劑，然后濃縮液在干燥箱40～50℃條件下烘干，得甲醇提取物浸膏。將此浸膏用過MCI柱脫去色素，進(jìn)而得到多穗金粟蘭的甲醇提取物，然后依次用乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行多次萃取，分別得到乙酸乙酯層、正丁醇層和水層，每個萃取層濃縮除去溶劑，濃縮液于干燥箱40～50℃烘干，即獲得多穗金粟蘭的乙酸乙酯相部分、正丁醇相部分及水相部分，置于冰箱4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 樣品液的制備

分別取上述多穗金粟蘭提取物的三種萃取相，配制成濃度為100 mg/ml的樣品液，過濾除菌備用。

1.2.3 培養(yǎng)基及菌懸液的配置

牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基：牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化鈉5g，瓊脂 15～20g，水1000ml，充分溶解，pH于7.0～7.2，高壓滅菌，備用。

將6種供試菌分別在斜面培養(yǎng)基上活化后，無菌條件下，挑取活化好的菌種于生理鹽水中，調(diào)節(jié)菌懸液濃度為106 CFU/ml（實驗用）。

1.2.4 抑菌活性測定

用牛津杯法測定各種提取物的抑菌活性。無菌操作臺中將培養(yǎng)基倒入平皿，每個平皿約15～20mL，待凝固。吸取0.1mL配好的菌懸液加入凝固的平板，將其涂布均勻，每個平板放3個牛津杯，每個牛津杯加入50μL的樣品溶液，另設(shè)陽性對照和空白對照。平板在4℃放置2h，然后在37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)18～24h。測定抑菌圈直徑，每組實驗重復(fù)三次。

2 實驗結(jié)果與分析

多穗金粟蘭提取物的三種萃取相分別對6種細(xì)菌的抑菌活性見表1。結(jié)果顯示，多穗金粟蘭提取物對供試菌種有不同程度的抑制作用，抑菌活性最強(qiáng)的為乙酸乙酯相，其次是正丁醇相，水相無抑菌圈。乙酸乙酯相抑菌效果最好，表明多穗金粟蘭抑菌的有效成分多存在于此相中，有實驗證明這部分富含倍半萜二聚體類成分[4]。多穗金粟蘭提取物乙酸乙酯相對表皮葡萄球菌和蠟狀芽孢桿菌的抑制效果較明顯，且以大腸桿菌最為敏感。

表1 多穗金粟蘭提取物不同萃取相的抑菌活性

抑菌圈直徑單位：mm； -代表無抑菌圈

3 結(jié)論

在社會飛速發(fā)展的今天，人類受到更多疾病的威脅，開發(fā)抗菌活性強(qiáng)且穩(wěn)定，安全無毒，無毒副作用等已成為研究熱點，所以，具有抗菌活性的天然藥物便備受關(guān)注。人們對金粟蘭科中的植物草珊瑚一直有所研究和臨床應(yīng)用，而多穗金粟蘭卻只作為民間中草藥使用，其開發(fā)和利用便受到限制。本實驗證明多穗金粟蘭具有良好的抑菌作用，雖作用不及陽性對照，但它們是天然的抑菌藥物，其的價值有待我們進(jìn)一步研究，從中開發(fā)出更多的有效成分。

【參考文獻(xiàn)】

[1]中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會.中國植物志，第20卷，第1分冊[M].北京：科學(xué)出版社，1982：79-80.

[2]曹聰梅，彭勇，肖培根.金粟蘭屬植物的化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展[J].中國中藥雜志，2008，33（13）：1509-1515.

[3]鄒雍，劉傳珍.金粟蘭屬藥用植物研究進(jìn)展[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2009，21（3）：98-100.

[4]冉新輝.多穗金粟蘭的化學(xué)成分研究[D].廣州中醫(yī)藥大學(xué)，2010：3-60.

[責(zé)任編輯：朱麗娜]