中藥組方“胃潰安”對大鼠胃潰瘍的治療作用

趙福廣　趙翠　趙文萱　李超　卞鑫　葛玥

【摘 要】目的：研究自制中藥組方“胃潰安”對冰乙酸型大鼠胃潰瘍的治療作用，評估治療效果，為胃潰瘍相關(guān)疾病的研究及中藥組方“胃潰安”的臨床應用提供理論基礎(chǔ)。方法：將30只健康的雄性SD大鼠隨機分為正常組、模型組和用藥組。在胃體與幽門交界處，將0.05ml 20%冰乙酸漿膜下注射，建立冰乙酸型大鼠胃潰瘍模型。術(shù)后第3天開始經(jīng)灌胃給藥（自制中藥組方“胃潰安”），連續(xù)14天給藥后計算各組SD大鼠的胃潰瘍面積，觀察潰瘍程度和潰瘍抑制情況的變化。結(jié)果：經(jīng)灌胃給藥后的用藥組SD大鼠潰瘍面積顯著減小，潰瘍抑制率高達100.0%。結(jié)論：自制中藥組方“胃潰安”能夠明顯抑制潰瘍發(fā)生，對胃潰瘍有很好的治療效果，連續(xù)服藥14天康復。

【關(guān)鍵詞】乙酸型胃潰瘍；胃潰瘍；治療作用

0 前言

胃潰瘍（Gastric ulcer，GU）作為一種常見的多發(fā)性消化系統(tǒng)疾病，因其發(fā)病機制復雜，難以治愈，治愈后再復發(fā)率高等特點日益受到全球性關(guān)注。迄今為止對于胃潰瘍的成因尚無統(tǒng)一定論，多數(shù)學者認為胃潰瘍的發(fā)病機制主要是由于胃黏膜中防御因子和攻擊因子失衡導致，即防御因子如胃黏膜屏障、黏膜血流、碳酸氫鹽分泌、前列腺素（PGE2）、一氧化氮（NO）等功能的衰退和攻擊因子如胃酸和胃蛋白酶等功能增強而導致胃部潰瘍的形成[1-2]。

1）中藥治療胃潰瘍的機理

具有悠久歷史的傳統(tǒng)中藥對治療胃潰瘍具有療效穩(wěn)定、毒副作用小等特點，特別是中藥復方制劑以治病為主，整體調(diào)節(jié)為輔，藥效溫，治愈后不易復發(fā)等優(yōu)勢，逐漸引起國內(nèi)學者的重視。近些年來，國內(nèi)學者對中藥的抗?jié)冃Чc作用機理進行大量的實驗探究，發(fā)現(xiàn)中藥制劑在防治胃黏膜損傷中效果尤為顯著。這也充分顯示傳統(tǒng)中藥在治療胃黏膜損傷乃至其他相關(guān)疾病中重要地位和優(yōu)勢[3]。

（1）中藥制劑對攻擊因子的影響

？譹？訛減少胃酸分泌，抑制胃蛋白酶活性。傳統(tǒng)觀點“無酸無潰瘍”，胃酸過多可造成胃部損傷，進而形成潰瘍，同時過多的胃酸不但不利于潰瘍愈合，還有加重潰瘍創(chuàng)面的趨勢。眾多研究表明，中藥治療胃潰瘍?nèi)〉玫寞熜c其抑制胃酸分泌和蛋白酶活性有關(guān)[4-6]。？譺？訛抑殺幽門螺旋桿菌（Helicobacter pylori，HP）。據(jù)臨床試驗證實，HP感染是消化性潰瘍發(fā)生的主要因素之一，HP中的尿素酶（Urase）通過水解尿素產(chǎn)生氨和二氧化碳，調(diào)節(jié)HP周圍pH，使細菌免受胃酸侵蝕，因此得以在胃內(nèi)定值。HP可在強酸環(huán)境中定植的特性可能需要我們重新審視“無酸無潰瘍”的傳統(tǒng)觀點。由HP感染引發(fā)的胃潰瘍，治愈后再復發(fā)率很高，因此，根除HP也是中藥治療潰瘍的重要機制[7-8]。？譻？訛抗氧自由基損傷，降低MDA的含量。自由基反應與潰瘍等相關(guān)疾病的發(fā)生和發(fā)展有密切聯(lián)系，自由基主要是通過脂質(zhì)的過氧化損傷胃黏膜，代謝產(chǎn)物MDA在組織中的升高可表示胃黏膜創(chuàng)面的損傷程度[9-10]，因此，清除氧自由基可促進黏膜損傷的修復。

（2）中藥制劑對防御因子的影響

？譹？訛提高胃黏膜血流循環(huán)。黏膜充足的血液供應是潰瘍愈合的重要保障，血液供應充分，離子和小分子營養(yǎng)物質(zhì)的供給才會得到保證，黏膜的完整性才能得以保全。？譺？訛提高一氧化氮（NO）的含量：NO是血管內(nèi)皮細胞釋放的血管擴張物質(zhì)，作為一種血管擴張介質(zhì)，NO可抑制血小板聚集、黏附，從而達到增加胃黏膜血流的目的。另外，NO能鞏固增強胃黏膜屏障，有黏膜修復功能。因此，NO也成為衡量抗?jié)兯幬镄Ч闹匾笜?。？譻？訛提高胃黏膜組織及血清SOD的含量：SOD是生物體內(nèi)自由基清除體系的首要防線。將SOD輸入機體，可直接清除細胞內(nèi)自由基，達到細胞修復的作用。

1 中藥治療胃潰瘍的藥理學組方

中醫(yī)歸納胃潰瘍及其相關(guān)疾病成因有二，即內(nèi)因和外因。脾胃虛弱、臟腑功能失調(diào)等為內(nèi)因，飲食不節(jié)、嗜酒過度、寒邪直中脾胃等即為外因。這或許提示我們，健康的飲食習慣及合理的中藥調(diào)治是我們遠離胃潰瘍及其相關(guān)疾病的理想方式。近些年來，不少國內(nèi)學者開展了中藥治療胃潰瘍的相關(guān)研究，發(fā)現(xiàn)一些中藥在抗胃潰瘍方面顯示出治療效果穩(wěn)定 、毒副作用小，治愈后再復發(fā)率低等優(yōu)點，使得篩選抗?jié)兯幬?，探討藥物的作用機制等相關(guān)研究得以進一步發(fā)展。目前中藥治療胃潰瘍的藥理學組方思路大致有5點：1）海螺蛸、瓦楞子、牡蠣、貝母等，中和胃酸以阻止?jié)兠胬^續(xù)受損；2）白芨、芨實、糊精等，以粘性藥物護蓋潰瘍面；3）黃芪、黨參、白術(shù)等，補氣生肌，增強局部抗損傷及修復能力；4）丹參、赤芍、莪術(shù)、元胡、三七，活血化瘀，改善局部微循環(huán)，達到創(chuàng)面修復的目的；5）公英、川連、皂刺、雙花、大黃等解毒祛邪，殺滅HP。

本實驗所采用的乙酸型大鼠慢性胃潰瘍模型，其病理特征與人慢性胃潰瘍臨床特點及其相似，經(jīng)灌胃給藥，旨在闡明中藥組方“胃潰安”對大鼠胃潰瘍的治療作用，為臨床應用乃至進一步研究提供理論基礎(chǔ)。

2 材料與方法

2.1 材料

本實驗藥物由趙福廣博士提供；實驗動物為280～320g SD大鼠，購自長春生物制品所；實驗儀器包括手術(shù)剪刀，止血鉗，鑷子，解剖板，微量注射器，灌胃器，游標卡尺，0號縫合線，脫脂棉，縫合針；實驗試劑為75%酒精，冰乙酸，10%水合氯醛，0.9%生理鹽水

2.2 方法

1）分組

取體重均勻（280～320g）健康的雄性SD大鼠30只，隨機將其分為正常組，模型組，用藥組，每組10只。

2）模型建立

在篩選治療性胃潰瘍藥物、動態(tài)觀察藥物的治療效果以及在胃潰瘍相關(guān)疾病的后續(xù)研究中，模型的建立是必要的。模型建立的成功與否，將直接影響實驗結(jié)果。迄今為止，隨著人類對胃潰瘍及相關(guān)疾病的深入探究，已經(jīng)建立多種大鼠胃潰瘍模型，如：幽門結(jié)扎型、水浸應激型、水楊酸型、乙醇型、利血平型、冰乙酸型等。其中，冰乙酸型大鼠胃潰瘍模型應用尤為廣泛。不僅因冰乙酸型大鼠慢性胃潰瘍模型成模率高，成本低，且與人慢性胃潰瘍的病理特征十分相似，亦是胃潰瘍模型中的經(jīng)典模型，現(xiàn)已廣泛應用于評估抗?jié)兯幬锏乃幮c作用機制的研究中，故本實驗采用冰乙酸型大鼠慢性胃潰瘍模型。

具體方法如下：實驗前將大鼠禁食（不禁水）24～36h，注射10%水合氯醛1ml麻醉后（視大鼠體重可作適當調(diào)整），仰臥固定在手術(shù)架上，酒精消毒腹部，劍突軟骨下腹中線切口1.5cm左右開腹，將胃拉出（脾臟易碎，注意操作），在胃的腹側(cè)面，即胃體部與幽門部交界處，將微量注射器放平刺入漿膜0.5～0.6mm處，注入20%乙酸0.05ml，形成丘疹，再用0.9%生理鹽水沖洗，將胃送回腹腔，仔細縫合腹壁及外皮，（針距應均勻，以免因傷口恢復不利造成過高的死亡率，影響實驗的準確性）手術(shù)的當天大鼠禁食（不禁水），次日開始常規(guī)飼養(yǎng)，3d成模。

3）給藥方法

A正常組：不造模，只用蒸餾水灌胃； B模型組：造模，成模后第3天開始蒸餾水灌胃；C用藥組：造模，成模后第3天開始灌胃給藥（自制中藥組方“胃潰安”），連續(xù)灌胃14天。

4）檢測方法

參照文獻方法，末次給藥后，大鼠禁食（不禁水）24h，頸椎脫臼處死大鼠，然后打開腹腔，將胃拉出，沿著胃大彎切開，用0.9%生理鹽水沖洗胃黏膜，用濾紙片吸干，將沖洗干凈的胃黏膜展平，放于冰臺上，用游標卡尺測量潰瘍的長徑（DL）和短徑（DS），計算潰瘍面積，按公式S=DL×DS×π/4計算，π取3.14。

潰瘍抑制百分率的計算：潰瘍抑制百分率=（模型組潰瘍指數(shù)-給藥組潰瘍指數(shù)）/模型組潰瘍指數(shù)×100%。

3 結(jié)果

3.1 肉眼觀察

正常組大鼠胃黏膜無損傷，表面光滑，顏色呈淡紅或粉紅色；潰瘍制作后第三天，模型組形成典型的圓形或橢圓形潰瘍損傷，顏色加深，呈深紅或暗紅色，潰瘍周圍因水腫充血而隆起，中部凹陷，且潰瘍創(chuàng)面周圍黏膜皺襞變大變粗，部分呈以潰瘍?yōu)橹行牡男菭顡p傷，較為嚴重的大鼠胃部潰瘍中心區(qū)深達肌層，其上附有一層灰白苔。

治療10天后，模型組大鼠潰瘍?nèi)匀缓車乐?，可見白苔；用藥組潰瘍深度明顯變淺，潰瘍長徑、短徑明顯減小，潰瘍面積幾乎為0。治療14天后，模型對照組全部死亡，用藥組潰瘍已看不到，胃黏膜光滑完整，呈淡紅色，與正常組無差異。

3.2 用藥后胃潰瘍恢復情況的測定

用游標卡尺測量各組潰瘍的長徑（DL）和短徑（DS），計算潰瘍的面積，按公式S=DL×DS×π/4計算，π取3.14，每組取平均數(shù)。

潰瘍抑制百分率=（模型組潰瘍指數(shù)-給藥組潰瘍指數(shù)）/模型組潰瘍指數(shù)×100%，每組取平均鼠。

4 討論

本實驗參考相關(guān)文獻，采用冰乙酸法建立胃潰瘍模型，大鼠蘇醒后精神狀態(tài)較差，拱背，嗜臥，不活動或行動遲緩，對外界刺激反應淡漠、遲鈍，約12～24h后開始少量進食進水，排糞量少，尿液呈橙黃色，有異味。模型建立第三天，解剖大鼠觀察胃部潰瘍面積，模型對照組平均潰瘍面積可達74.26mm2，用藥組平均潰瘍面積可達81.24mm2。

連續(xù)給藥10天后，模型對照組精神狀態(tài)欠佳，活動減少，嗜臥，對外界刺激反應遲鈍，排糞尿基本正常，期間有死亡情況；用藥組精神狀態(tài)良好，自由活動，對外界刺激反應敏感，排糞排尿正常，與正常組無太大差異。解剖大鼠觀察潰瘍情況，計算潰瘍面積，模型對照組潰瘍?nèi)匀环浅乐?，表面覆有白苔，平均潰瘍面積達73.96mm2；用藥組潰瘍潰瘍面積明顯減小，肉眼已經(jīng)幾乎觀察不到潰瘍，平均潰瘍面積減少到0.05mm2，治療效果非常明顯。治療14天后，模型對照組已全部死亡，用藥組精神狀態(tài)很好，活動自由，與正常組無任何差異，解剖后觀察，肉眼已完全觀察不到潰瘍，治愈率達100.0%。

自制中藥組方“胃潰安”參考了大量文獻，根據(jù)中藥治療胃潰瘍的作用機理及藥學組方，對不同成分的治療作用進行分析總結(jié)而制成，實驗證明，能有效抑制胃潰瘍的形成，促進胃粘膜損傷的愈合，對胃潰瘍有很明顯的治療作用，值得推廣使用。

5 結(jié)論

本實驗采用乙酸法復制大鼠胃潰瘍模型，三天成模，模型制作成功，模型對照組在飼養(yǎng)過程中有死亡情況。經(jīng)過10天連續(xù)給藥，用藥組平均潰瘍面積由治療前的81.24mm2減小到0.05mm2，治療14天后，用藥組潰瘍面積為零?！拔笣病睂ξ笣兊闹斡Ч己谩?/p>

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[責任編輯：田吉捷]