鼠神經(jīng)生長因子對彌漫性軸索損傷患者M(jìn)BP和S100β蛋白的影響及療效觀察

王明強(qiáng) 劉小軍 祁紹艷 周明鍇 王生鋒

鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科 鄭州 450014

鼠神經(jīng)生長因子對彌漫性軸索損傷患者M(jìn)BP和S100β蛋白的影響及療效觀察

王明強(qiáng) 劉小軍△祁紹艷 周明鍇 王生鋒

鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科 鄭州 450014

目的 探討鼠神經(jīng)生長因子對彌漫性軸索損傷(DAI)患者血清中髓鞘堿性蛋白(MBP)和 S100β蛋白的影響及腦保護(hù)作用。方法 收錄符合診斷標(biāo)準(zhǔn)的60例DAI患者并隨機(jī)分為鼠神經(jīng)生長因子治療組和對照組各30例，用ELISA法分別檢測2組患者治療前及治療后各時間點(diǎn)血清中MBP和 S100β蛋白水平，于治療后的第7、14天對2組患者進(jìn)行格拉斯哥昏迷評分(GCS)，90 d后格拉斯哥預(yù)后評分(GOS)評判療效。結(jié)果 治療組血清中MBP和 S100β蛋白水平顯著低于對照組，且治療組格拉斯哥昏迷評分、預(yù)后評分明顯高于對照組(P<0.05)。結(jié)論 鼠神經(jīng)生長因子可顯著降低 DAI 患者血清中MBP和S100β蛋白表達(dá)水平，具有明顯神經(jīng)保護(hù)作用。

鼠神經(jīng)生長因子；彌漫性軸索損傷；髓鞘堿性蛋白；S100β蛋白

彌漫性軸索損傷(diffuse axonal injury，DAI)指頭顱在受到特殊外力作用后，深部的腦組織在剪應(yīng)力作用下出現(xiàn)以神經(jīng)元軸索腫脹、斷裂和軸索球形成為主要病理特征的損傷[1]，臨床上以原發(fā)持久的意識障礙為主要表現(xiàn)，一般病情較重，病死率高達(dá)40%～42%，傷殘率為30%～40%[2]，是外傷后長期昏迷及嚴(yán)重神經(jīng)功能障礙的最主要原因之一，尚缺乏特異治療方法，目前認(rèn)為神經(jīng)營養(yǎng)類藥物對該病患者可能獲益，但臨床多中心隨機(jī)對照研究資料缺乏。髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein，MBP)和S100β蛋白為顱腦損傷的敏感指標(biāo)，對腦組織損傷程度的判定及指導(dǎo)治療有重要意義。本研究通過測定DAI 患者血清中MBP及S100β蛋白的含量，評價應(yīng)用鼠神經(jīng)生長因子對 DAI 的神經(jīng)保護(hù)作用，以期為鼠神經(jīng)生長因子治療DAI提供理論支持。

1 資料與方法

1．1 研究對象 收集2013-01—2015-01入住我院ICU科的 DAI 患者 60 例，傷后入院時間<12 h。入選標(biāo)準(zhǔn)[3]：(1)有頭部加速和(或)減速外傷史；(2)受傷當(dāng)時便出現(xiàn)昏迷，且昏迷時間連續(xù)超過6 h；(3)CT 或 MRI 檢查顯示彌漫性雙側(cè)腦白質(zhì)水腫、白質(zhì)與灰質(zhì)界限不清、腦組織腫脹，腦室系統(tǒng)變窄，無中線移位，腦組織散在多發(fā)小出血灶(直徑<20 mm)或小梗死灶、小挫裂傷灶；(4)盡管臨床表現(xiàn)較重，但未顯現(xiàn)顱壓增高或影像學(xué)未出現(xiàn)明顯異常。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)高血壓、糖尿病和肝臟與腎臟功能不全等嚴(yán)重慢性疾病者；(2)合并嚴(yán)重的全身多發(fā)傷和(或)復(fù)合傷者；(3)開放性顱腦損傷或因病情變化開顱手術(shù)者，伴發(fā)較重顱內(nèi)感染者；(4)來院就診時發(fā)現(xiàn)兩側(cè)瞳孔散大固定、無自主呼吸等瀕死狀態(tài)者及孕產(chǎn)婦；(5)年齡<18歲或>65歲；(6)已使用類似藥物或?qū)κ笊窠?jīng)生長因子代謝造成影響的藥物者。所有患者均上報醫(yī)院倫理委員會并且經(jīng)審核通過，并遵循知情同意原則，經(jīng)患者及家屬簽字。

1．2 一般資料 符合上述 DAI 診斷標(biāo)準(zhǔn)的60例患者，依照納入次序隨機(jī)進(jìn)行分配，治療組應(yīng)用鼠神經(jīng)生長因子治療，對照組和治療組各30例。治療組男18例，女12例，年齡20～63(37.5±3.8)歲，格拉斯哥昏迷量表評分(GCS)(4.78±1.52)分；對照組男19例，女11例，年齡19～64(36.8±4.7)歲，GCS(4.23±1.79)分。2組患者在性別、年齡、腦損傷程度GCS評分等方面，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1．3 治療方法 2組均采用DAI常規(guī)處理，保持呼吸道通暢、循環(huán)支持、降顱壓、止血、抗感染、維持內(nèi)環(huán)境平衡、預(yù)防消化道出血、局部亞低溫治療等；治療組除常規(guī)治療外，在入院第1次采血后立刻予以30 μg注射用鼠神經(jīng)生長因子(商品名蘇肽生，舒泰神(北京)藥業(yè)有限公司生產(chǎn))加入 0.9% 氯化鈉注射2 mL肌內(nèi)注射，連續(xù)應(yīng)用 2周。對照組則應(yīng)用0.9%氯化鈉注射液2 mL肌內(nèi)注射，連續(xù)應(yīng)用 2周。

1．4 血清中MBP及S100β蛋白含量的測定 入院期間在藥物治療前及藥物治療后的第1、2、3、7、14天分別采集靜脈血 4 mL，冰浴，并于冰箱內(nèi)4 ℃ 保存2 h，凝血后以 4 000 r / min 分離血清，當(dāng)血清離出后，再次置于-2 ℃冰箱內(nèi)等待檢測。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清 MBP及S100β蛋白含量。

1．5 療效判定 在治療后第7、14天采用格拉斯哥昏迷評分(GCS)，分別對2組評分比較。3 個月后采用格拉斯哥預(yù)后評分量表(Glasgow outcome scale，GOS)的 5 級標(biāo)準(zhǔn)評分，5分為良好：恢復(fù)正常生活，但有輕度缺陷；4分為中殘：殘疾但可獨(dú)立生活，能在適度保護(hù)下參加社會工作；3分為重殘：殘疾但意識清楚，生活不能自行處理；2分為植物生存：僅有最小反應(yīng)(如無意識睜-閉眼)；1分為死亡。治療結(jié)果以GOS評分5分及4分表示顯效。顯效率=(中殘+恢復(fù)良好)/總例數(shù)×100%。

2 結(jié)果

2．1 2組血清MBP 含量變化比較 鼠神經(jīng)生長因子治療前及治療后第1、14天血清中 MBP 水平與對照組經(jīng)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義；治療組于第 3、7天血清中MBP 水平與對照組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1 。

2．2 2組血清S100β蛋白含量變化比較 鼠神經(jīng)生長因子治療前血清中S100β蛋白水平與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；治療組于第 1、2、3、7天S100β蛋白水平與對照組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表1 不同時間點(diǎn)2組血清中 MBP 含量 比較

注：與對照組相比，*P<0.05

表2 不同時間點(diǎn)2組血清中S100β蛋白 含量比較

注：與對照組相比，*P<0.05

2．3 2組治療第7天和第14天GCS評分及治療3個月后GOS評分比較 2組治療第7天和第14天GCS 評分均有不同程度的改善，但治療組與對照組比較改善更為顯著(P<0.05)。2組比較，3 個月后治療組 GOS 評分也明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 2組第7天和第14天后GCS 評分及治療 3個月后GOS 評分比較

注：與對照組相比，*P<0.05

2．4 2組療效比較 治療組顯效率顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 2組療效比較 [n(%)]

注：與對照組相比，*P<0.05

3 討論

DAI是臨床上致殘率和病死率均較高的重型顱腦損傷類型，因其主要病理損傷部位為腦白質(zhì)內(nèi)廣泛軸索受損，故影像學(xué)主要表現(xiàn)大腦皮髓質(zhì)交匯處、大腦中線結(jié)構(gòu)區(qū)域出現(xiàn)彌散分布的小出血灶，一般直徑<2 cm。針對該病的治療，目前尚缺乏特異治療方法，多采用顱腦損傷綜合治療方法，包括括降低顱內(nèi)壓、高壓氧療及防治并發(fā)癥等。有學(xué)者[4]認(rèn)為腦神經(jīng)保護(hù)藥物可促進(jìn)患者神經(jīng)功能障礙恢復(fù)，主張早期應(yīng)用，但尚缺乏大量臨床應(yīng)用研究支持。MBP包繞神經(jīng)纖維使神經(jīng)沖動傳導(dǎo)時減少周圍組織的干擾而加快傳導(dǎo)速度；當(dāng)神經(jīng)系統(tǒng)遭受損傷時可經(jīng)受損的血腦屏障進(jìn)入血液，其血液中的含量能夠反映神經(jīng)軸索受損的數(shù)量，間接反映了腦白質(zhì)受損的程度[5]。國內(nèi)亦有文獻(xiàn)報道血清MBP含量在腦外傷早期即可出現(xiàn)升高，且其升高程度可反映髓鞘破壞程度，即血清MBP含量和損傷病情程度呈正相關(guān)[6]。S100β蛋白是一種僅存在于腦和脊髓的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中酸性、可溶性蛋白，其生物功能具有兩面性，一方面能夠參與胞內(nèi)信號的傳導(dǎo)、調(diào)節(jié)細(xì)胞的可塑性等作用進(jìn)而起到保護(hù)神經(jīng)組織的作用[7]；另一方面若其過高超過一定水平，表現(xiàn)為神經(jīng)毒性，可以誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的凋亡、壞死[8]。目前研究發(fā)現(xiàn)，S100β蛋白是顱腦損傷的敏感指標(biāo)，其在出現(xiàn)影像學(xué)可發(fā)現(xiàn)的病理改變之前血清中就可檢測到升高，且其血清中含量的高低能反映腦部受損程度。Kanfler等[9]學(xué)者認(rèn)為S100B蛋白在目前能反映腦外傷程度指標(biāo)中特異性最高。

本研究發(fā)現(xiàn)，應(yīng)用鼠神經(jīng)生長因子的治療組于顱腦損傷第 3、7天MBP 水平均顯著低于對照組，而S100β蛋白含量在損傷后各觀察時間點(diǎn)與對照組相比顯著降低，說明損傷早期應(yīng)用該藥可減輕腦組織病變程度；治療組GCS評分、GOS評分較對照組明顯改善，表明應(yīng)用鼠神經(jīng)生長因子可改善彌漫顱腦損傷患者預(yù)后，減輕患者傷殘程度。鼠神經(jīng)生長因子有可能通過營養(yǎng)神經(jīng)元、促進(jìn)神經(jīng)纖維形成新突觸，進(jìn)而促進(jìn)神經(jīng)功能的盡快恢復(fù)，同時通過抗自由基、拮抗興奮性氨基酸神經(jīng)毒性及抑制鈣超載等作用減輕創(chuàng)傷后病理損傷過程，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。

總之，本研究表明鼠神經(jīng)生長因子治療彌漫軸索變性患者取得較好治療作用，可有效降低顱腦損傷程度，改善患者預(yù)后，減輕傷殘程度，為今后的臨床應(yīng)用及研究提供參考和借鑒。

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(收稿2016-10-31)

R651.1+5

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1673-5110(2017)05-0106-03

△通訊作者：劉小軍，E-mail：13673695138@139.com