血清 VEGF、 Ang-2對(duì)非小細(xì)胞肺癌診斷特異性及預(yù)后判斷準(zhǔn)確性作用分析

梁月明 張培芳 劉劍 梅湛強(qiáng) 李敏菁

血清 VEGF、 Ang-2對(duì)非小細(xì)胞肺癌診斷特異性及預(yù)后判斷準(zhǔn)確性作用分析

梁月明 張培芳 劉劍 梅湛強(qiáng) 李敏菁

目的 探討血清中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)和血管生成素-2(Ang-2)對(duì)非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)診斷特異性及預(yù)后判斷的作用。方法 選取2011年1月至2014年1月在我院治療的NSCLC患者178例(病例組)，同時(shí)選取100例健康者作為對(duì)照組，檢測(cè)血清VEGF和Ang-2含量，分析其與臨床病理、預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果 病例組VEGF和Ang-2分別為(553.21±78.43)pg/mL和(390.12±90.70)pg/mL，明顯高于對(duì)照組(P<0.05)；NSCLC患者VEGF和Ang-2與患者年齡、性別及病理類(lèi)型無(wú)關(guān)(P>0.05)；伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者VEGF和Ang-2明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)；臨床分期為Ⅲ-Ⅳ期患者VEGF和Ang-2明顯高于Ⅰ-Ⅱ期患者(P<0.05)；VEGF高水平患者生存時(shí)間為(18.97±0.95)月，明顯低于VEGF低水平患者的(23.80±0.82)月(P<0.05)；Ang-2高水平患者生存時(shí)間為(19.42±0.91)月，明顯低于Ang-2低水平患者的(23.71±0.81)月(P<0.05)；VEGF曲線下面積為0.907，截?cái)嘀禐?42.45pg/mL，靈敏度為91.60%，特異度為89.00%；Ang-2曲線下面積為0.802，截?cái)嘀禐?12.43pg/mL，靈敏度為82.60%，特異度為85.00%。結(jié)論 血清 VEGF和Ang-2可作為NSCLC診斷以及預(yù)后判斷的分子標(biāo)志物，具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。

非小細(xì)胞肺癌；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；血管生成素-2；預(yù)后；診斷

非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)是臨床上較為常見(jiàn)的呼吸系統(tǒng)惡性腫瘤，近年來(lái)環(huán)境污染、吸煙、遺傳易感因素等均促進(jìn)NSCLC的發(fā)生發(fā)展。研究顯示NSCLC的發(fā)病率可達(dá)0.05%以上，且近年來(lái)呈現(xiàn)出了一定上升的趨勢(shì)[1-2]。

對(duì)于NSCLC發(fā)病過(guò)程中生物學(xué)機(jī)制的研究，可以為患者的早期診斷及遠(yuǎn)期臨床預(yù)后轉(zhuǎn)歸提供可靠的實(shí)驗(yàn)室參考指標(biāo)。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)和血管生成素-2( angiogenin-2，Ang-2)在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了重要的調(diào)節(jié)作用，二者可以通過(guò)促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的分化進(jìn)而促進(jìn)腫瘤新生血管的形成，加劇惡性腫瘤的臨床進(jìn)展[3-5]。本研究分析了2011年1月至2014年1月在我院治療的178例NSCLC患者，探討了VEGF及Ang-2與NSCLC的臨床病理特征的關(guān)系，并初步探討了其診斷及預(yù)后價(jià)值。

資料與方法

一 、一般資料

選取2011年1月至2014年1月在我院治療的NSCLC患者178例(病例組)，納入標(biāo)準(zhǔn)：① 均經(jīng)手術(shù)或穿刺活檢病理證實(shí)為NSCLC；② 未接受過(guò)化療、放療或其他腫瘤治療；③ 入選前兩周無(wú)外傷或其他手術(shù)治療史；④ 患者及家屬知情同意并簽署同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：① 合并有視網(wǎng)膜病變、缺血性心臟病、糖尿病等疾?。虎?妊娠、哺乳期或月經(jīng)期女性。本次研究在設(shè)計(jì)之初是按照1 ∶1比例選取，但由于健康者的參與意愿、經(jīng)費(fèi)等問(wèn)題，對(duì)照組最終僅同時(shí)選取100例健康者作為正常對(duì)照組，兩組患者一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性(見(jiàn)表1)。

組別n男/女年齡(歲)病例組178102/7657．43±12．04對(duì)照組10057/4356．50±11．73t/χ20．0020．624P>0．05>0．05

二、檢測(cè)方法

清晨采集空腹靜脈血，按照10000r/min的離心速度進(jìn)行離心分離血清，-20℃保存待測(cè)，采集標(biāo)本后1周內(nèi)檢測(cè)VEGF和Ang-2，采用瑞士羅氏全自動(dòng)生化分析儀E170模塊進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)試劑盒購(gòu)自上海泰康生物科技有限公司。具體檢測(cè)方法參照試劑盒說(shuō)明書(shū)，試劑盒內(nèi)配有質(zhì)控血清或質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)品，所有操作嚴(yán)格按照操作說(shuō)明完成。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

結(jié) 果

一、兩組患者VEGF和Ang-2含量比較

病例組VEGF和Ang-2均明顯高于對(duì)照組，差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05，(見(jiàn)表2)。

組別nVEGFAng?2病例組178553．21±78．43390．12±90．70對(duì)照組100320．40±68．70242．50±87．63t27．81113．182P<0．05<0．05

二、NSCLC患者VEGF和Ang-2與臨床病理參數(shù)關(guān)系

NSCLC患者VEGF和Ang-2與患者年齡、性別及病理類(lèi)型無(wú)關(guān)(P>0.05)；伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者VEGF和Ang-2明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)；臨床分期為Ⅲ-Ⅳ期患者VEGF和Ang-2明顯高于Ⅰ-Ⅱ期患者，P<0.05。(見(jiàn)表3)。

三、NSCLC患者VEGF和Ang-2與預(yù)后的關(guān)系

本次研究隨訪截止日期為2016年2月，失訪12例，失訪率為6.74%。按照NSCLC患者VEGF和Ang-2含量的平均值，將患者分為低水平組和高水平組。VEGF高水平組患者生存時(shí)間為(18.97±0.95)月，明顯低于VEGF低水平組患者的(23.80±0.82)月，差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2=25.107，P<0.05)；Ang-2高水平組患者生存時(shí)間為(19.42±0.91)月，明顯低于Ang-2低水平組患者的(23.71±0.81)月，差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2=19.444，P<0.05)，(見(jiàn)圖1)。

四、VEGF、Ang-2診斷價(jià)值

采用ROC曲線分析,結(jié)果顯示VEGF曲線下面積為0.907，截?cái)嘀禐?42.45pg/mL，靈敏度為91.60%，特異度為89.00%；Ang-2曲線下面積為0.802，截?cái)嘀禐?12.43pg/mL，靈敏度為82.60%，特異度為85.00%。(見(jiàn)圖2)。

相關(guān)因素nVEGFtpAng?2tP年齡 <60歲110556．81±80．100．488>0．05396．21±92．321．008>0．05 ≥60歲68550．72±82．30381．42±99．40性別 男102557．16±79．230．442>0．05394．20±95．700．497>0．05 女76551．73±83．34387．19±89．40病例類(lèi)型 腺癌87570．41±87．561．475>0．05405．22±101．401．486>0．05 鱗癌98550．73±93．20382．70±104．22淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 否57422．70±79．26-11．769<0．05301．27±91．41-6．378<0．05 是121574．56±80．81397．66±95．30臨床分期 Ⅰ-Ⅱ92431．06±80．35-8．338<0．05310．41±89．40-6．32<0．05 Ⅲ-Ⅳ86567．10±89．30396．72±92．81

圖1 VEGF和Ang-2高低水平患者生存曲線

圖2 VEGF、Ang-2診斷NSCLC的ROC曲線圖

討 論

NSCLC占肺部惡性腫瘤的45%以上，早期容易發(fā)生淋巴結(jié)及臨近器官的轉(zhuǎn)移，研究顯示NSCLC的五年生存率不足35%、中位生存時(shí)間不足34個(gè)月[6]。通過(guò)對(duì)于NSCLC的早期診斷或者臨床預(yù)后轉(zhuǎn)歸的評(píng)估，可以為肺癌根治性手術(shù)爭(zhēng)取機(jī)會(huì)，同時(shí)可以為出院患者的院外隨訪提供參考。血清CA125、CEA等腫瘤指標(biāo)雖然在診斷及預(yù)后方面具有一定的價(jià)值，但其單獨(dú)或者聯(lián)合診斷的靈敏度和特異度均不足35%，漏診率及誤診率較高，同時(shí)CA125、CEA等評(píng)估患者遠(yuǎn)期生存預(yù)后的診斷學(xué)一致性指標(biāo)較差[7-8]。

在NSCLC的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，腫瘤新生血管的形成對(duì)于維持或者促進(jìn)疾病的進(jìn)展具有重要的意義，新生血管的形成可以增加腫瘤組織的血流灌注、增強(qiáng)其增殖和侵襲活力，同時(shí)新生血管的內(nèi)皮通透性較高，癌細(xì)胞容易形成癌栓并通過(guò)血管內(nèi)皮層浸潤(rùn)臨近組織[9-10]。VEGF可以促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的誘導(dǎo)分化，調(diào)節(jié)腫瘤血管的形成、提高內(nèi)皮層的通透性，促進(jìn)NSCLC病情的進(jìn)展[11]；ANG-2由血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂，在正常人體中對(duì)于血管內(nèi)皮功能的影響不大，而在胚胎組織、炎癥及惡性腫瘤等中，ANG-2作為生物活性較高的糖蛋白，具有趨化血管形成的作用，并可協(xié)同VEGF共同作用促進(jìn)NSCLC的發(fā)展[12-13]。已有的研究雖然探討了VEGF及ANG-2在NSCLC中的異常表達(dá)，但對(duì)于其評(píng)估患者遠(yuǎn)期生存預(yù)后及早期診斷的價(jià)值分析不足。

本研究發(fā)現(xiàn)，NSCLC患者血清中的ANG-2及VEGF均明顯高于正常對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，一方面表明VEGF及ANG-2可能參與到了惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，另一方面表明通過(guò)檢測(cè)ANG-2及VEGF可以為NSCLC患者的早期診斷提供潛在的臨床指標(biāo)。Giannopoulou E等[14-15]研究者通過(guò)回顧性分析了53例NSCLC患者的血清學(xué)資料，發(fā)現(xiàn)ANG-2及VEGF可平均上升25%、40%，這與本研究的結(jié)論較為一致。ANG-2及VEGF的上升可以促進(jìn)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的形成和趨化，促進(jìn)腫瘤血流高灌注，從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞容易發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移。對(duì)于相關(guān)臨床病理特征關(guān)系的研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期較晚的NSCLC患者，其VEGF及ANG-2的表達(dá)水平較高，提示二者對(duì)于NSCLC的淋巴結(jié)或者組織侵襲轉(zhuǎn)移的病理過(guò)程中可能發(fā)揮了重要的促進(jìn)作用，VEGF等可以誘導(dǎo)淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子的活化，促進(jìn)癌細(xì)胞栓對(duì)于淋巴結(jié)內(nèi)皮層的粘附和侵襲。但本研究并未發(fā)現(xiàn)NSCLC細(xì)胞來(lái)源與VEGF或者ANG-2的關(guān)系，考慮可能與樣本量不足、檢測(cè)方法的不統(tǒng)一及臨床資料的納入排除標(biāo)準(zhǔn)偏移等有關(guān)。預(yù)后隨訪觀察分析可見(jiàn)，高表達(dá)VEGF及ANG-2的患者，其遠(yuǎn)期生存預(yù)后較差，生存時(shí)間較低，臨床上對(duì)于VEGF及ANG-2表達(dá)較高的患者，出院后應(yīng)注意加強(qiáng)隨訪，從而改善預(yù)后。VEGF及ANG-2在診斷NSCLC中同樣具有重要的臨床價(jià)值，VEGF單獨(dú)檢測(cè)的靈敏度及特異度均高達(dá)90%，而ANG-2的靈敏度及特異度也可達(dá)80%以上，診斷學(xué)價(jià)值較為理想。

綜上所述，VEGF及ANG-2在NSCLC患者中異常高表達(dá)，二者與患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期具有密切的關(guān)系；臨床上通過(guò)隨訪觀察VEGF及ANG-2可以為評(píng)估患者的遠(yuǎn)期生存預(yù)后提供參考，同樣可以為NSCLC的早期診斷提供依據(jù)。但本次研究存在以下不足；① 樣本量不足，缺乏多中心的回顧性分析；② 對(duì)于遠(yuǎn)期生存預(yù)后的隨訪研究不夠深入，五年生存率等指標(biāo)的探討不足。

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Diagnostic specificity and prognostic judgment accuracy of serum VEGF and Ang-2 on non-small cell lung cancer

LIANGYue-ming,ZHANGPei-fang,LIUJian,MEIZhan-qiang,LIMin-jing
DepartmentofRespiratoryMedicine,theFirstPeople’sHospitalofFoshan,Foshan,Guangdong528000,China

Objective To investigate the diagnostic specificity and prognostic judgment accuracy of serum VEGF and Ang-2 on non-small cell lung cancer (NSCLC). Methods From January 2011 and January 2011 in our hospital, 178 patients with NSCLC were selected as the case group, and 100 healthy people were taken as the control group. It used ELISA to detect serum VEGF and Ang-2 content to analyze its relationship with clinical pathology and prognosis. Results The levels of VEGF and Ang-2 were (553.21±78.43) pg/mL and (390.12 ± 90.70) pg/mL in the case group, which were significantly higher than those in the control group (P<0.05). The level of VEGF and Ang-2 had nothing to do with their age, gender and pathological type (P>0.05), but it was obviously higher in patients with lymph node metastasis than in patients without lymph node metastasis (P<0.05). It was significantly higher in patients at clinical stage Ⅲ -Ⅳ than in patients at stage Ⅰ-Ⅱ (P<0.05). The level of VEGF was significantly higher in patients with survival time of (18.97±0.95) months than in patients with (23.80±0.82) months survival time (P<0.05), and the level of Ang-2 was higher in patients with (19.42±0.91) months survival time than in patients with (23.71±0.81) months (P<0.05). For VEGF, the area under the curve of VEGF was 0.907, the cut-off value was 442.45 pg/mL, the sensitivity was 91.60%, and the specificity was 89.00%. For Ang-2, the area under the curve was 0.802, the cut-off value was 312.43 pg/mL, the sensitivity was 82.60%, and the specificity was 85.00%. Conclusion Serum VEGF and Ang-2 can be used as molecular markers in NSCLC diagnosis and prognosis judgment, which has important clinical value.

non-small cell lung cancer; vascular endothelial growth factor; angiopoietin-2; prognosis; diagnosis

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.07.009

528000 廣東 佛山，佛山市第一人民醫(yī)院呼吸科

李敏菁，E-mail：liminglin_7588@126.com

2016-11-17]