• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    響應(yīng)面優(yōu)化藍(lán)藥睡蓮總酚水提工藝的研究

    2017-06-10 03:37:54臧濤向東
    熱帶作物學(xué)報(bào) 2017年12期
    關(guān)鍵詞:響應(yīng)面法總酚

    臧濤 向東

    摘 要 以藍(lán)藥睡蓮為材料,采用響應(yīng)面分析法對睡蓮花總酚的水提工藝條件進(jìn)行研究。在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,選取提取溫度、液料比、提取時(shí)間為試驗(yàn)因素,利用中心復(fù)合試驗(yàn)設(shè)計(jì)原則進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn),確定最佳提取工藝。結(jié)果表明,藍(lán)藥睡蓮總酚水提的最佳工藝條件為:提取溫度74 ℃、液料比 43 ∶ 1 mL/g、提取時(shí)間51 min,在此條件下所得總酚提取率為11.5%,與預(yù)測值基本相符合,為睡蓮花的進(jìn)一步研究提供了理論依據(jù)。

    關(guān)鍵詞 藍(lán)藥睡蓮;水提;總酚;響應(yīng)面法

    中圖分類號(hào) O625.31;Q949.746.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

    Abstract The water extraction of total polyphenols from N. stellata Willd was studied by Response Surface Methodology(RSM). On the basis of single factor experiments, the extraction temperature, liquid to material ratio and extraction time were selected as the experimental factors. The response surface optimization experiment was carried out using the principle of a central composite design. Results showed that the optimum extraction conditions were extracting temperature 74 ℃, liquid-material ratio 43 ∶ 1 mL/g, extracting time 51 min, and the total phenol extraction rate under this condition was 11.5%. The experimental predictions are basically consistent. The study would provide a theoretical basis for further study of lotus.

    Key words Nymphaea stellata Willd; water extraction; total phenol; response surface methodology

    doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2017.12.025

    藍(lán)藥睡蓮(Nymphaea stellata Willd.)屬于睡蓮科睡蓮屬,是一種生長在湖泊和河流岸邊的多年生水生熱帶草本植物,又被稱之為星形睡蓮、藍(lán)睡蓮或延藥睡蓮[1]。其原產(chǎn)于印度和東南亞,在中國主要分布在海南、廣東及云南等地[2]。藍(lán)藥睡蓮作為尼泊爾、印度以及中國西藏的傳統(tǒng)藥物,具有廣泛的藥用價(jià)值,不僅具有抗菌、消炎、麻醉、止血、利尿等作用,還可以用于心悸、消化不良、腸炎、腹瀉、感冒等治療[3]?,F(xiàn)研究已表明,藍(lán)藥睡蓮中含有豐富的酚類成分,如槲皮素、山奈酚、沒食子酸及它們的衍生物等[4],具有抗氧化、抗炎、抑菌、降血糖、降血脂、預(yù)防心血管疾病等多種生物活性[5-8]。

    目前,藍(lán)藥睡蓮產(chǎn)品的開發(fā)利用較少,主要應(yīng)用于鮮切花的觀賞和裝飾品,鮮切花保存期短,不易貯藏,浪費(fèi)較嚴(yán)重。中國花茶飲用歷史悠久,隨著人們生活水平的提高,人們對健康和高品味生活的追求日益增加,藍(lán)藥睡蓮作為藥食兩用的資源,不僅可以作為花茶飲用,還可以制備成茶飲料等多種產(chǎn)品,減少了資源浪費(fèi),具有廣泛的開發(fā)利用價(jià)值。傳統(tǒng)的總酚提取工藝多采用有機(jī)溶劑如甲醇、乙醇、丙酮等進(jìn)行提取[9],容易導(dǎo)致有機(jī)溶劑的殘留,不利于藍(lán)藥睡蓮做為藥食兩用資源在食品、醫(yī)藥中的應(yīng)用。水提法不僅具有方便、簡單、快速、易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化等優(yōu)點(diǎn)[10],而且減少了有機(jī)溶劑的使用,具有更加實(shí)用的價(jià)值和意義?,F(xiàn)已有學(xué)者對茶葉[11]、光皮木瓜[12]、肉桂[13]等酚類物質(zhì)水提工藝進(jìn)行了研究,關(guān)于藍(lán)藥睡蓮總酚水提工藝的研究目前尚未見報(bào)道。因此,本試驗(yàn)采用響應(yīng)面法對藍(lán)藥睡蓮中酚類物質(zhì)的水提工藝條件進(jìn)行優(yōu)化,得到最佳提取工藝,為進(jìn)一步深入開發(fā)利用睡蓮花提供一定的參考價(jià)值。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    藍(lán)藥睡蓮:采自海南省??谑屑t旗鎮(zhèn)。

    試劑:Folin-酚(北京索萊寶科技有限公司);沒食子酸(標(biāo)準(zhǔn)品,純度≥98%,上海英偉生物科技公司);無水碳酸鈉(分析純,廣州化學(xué)試劑有限公司)。

    儀器:HH-ZK4電恒溫水浴鍋(鞏義予華儀器有限公司);AL204電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司);TS-RO-20L/H超純水設(shè)備(陶氏水處理設(shè)備工程有限公司);SP-722可見分光光度計(jì)(上海光譜儀器有限公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 材料預(yù)處理 選取色澤新鮮已開放的藍(lán)藥睡蓮花,去掉最外層帶有綠色的花瓣,切掉花柄,底部花托僅留3~5 mm,將其在60 ℃烘箱中烘干,將花瓣粉碎過80目篩后備用。

    1.2.2 沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作[14] 準(zhǔn)確稱取沒食子酸100 mg,用超純水溶解并定容至100 mL。分別制得濃度為0.100、0.125、0.250、0.500、1.000 mg/mL的沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液;取各濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液0.1 mL,加入20 mg/mL 的Na2CO3溶液2 mL。2 min后,加入0.9 mL Folin-酚試劑,反應(yīng)30 min,用分光光度計(jì)測定各組溶液在750 nm處的吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),沒食子酸濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    1.2.3 睡蓮干花中酚類物質(zhì)的提取及測定 準(zhǔn)確稱取粉碎后的睡蓮干花花瓣,按一定液料比加入蒸餾水,在設(shè)定的溫度下水浴浸提一定時(shí)間后,將浸提液進(jìn)行抽濾,將濾液移入100 mL容量瓶中,定容,用量程為0.2 mL的移液槍精確量取0.1 mL于10 mL刻度試管中,按1.2.2的方法進(jìn)行操作,測定其吸光度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算出提取液中總酚的提取率。以不加提取液的空白處理作參比。

    1.2.4 單因素試驗(yàn) 以睡蓮花總酚的提取率為考察指標(biāo),對液料比、提取時(shí)間、提取溫度進(jìn)行單因素試驗(yàn),考察這3個(gè)因素對睡蓮花中總酚提取效果的影響。

    提取溫度對睡蓮花總酚提取效果的影響:當(dāng)液料比為30 ∶ 1 mL/g時(shí),分別在40、50、60、70、80、90 ℃下水浴提取40 min后,按1.2.2的方法測定吸光度,計(jì)算總酚提取率。

    液料比對睡蓮干花總酚提取效果的影響:當(dāng)液料比分別為20 ∶ 1、30 ∶ 1、40 ∶ 1、50 ∶ 1、60 ∶ 1、70 ∶ 1 mL/g時(shí),分別在70 ℃下水浴提取40 min后,按1.2.2的方法測定吸光度,計(jì)算總酚提取率。

    提取時(shí)間對睡蓮花總酚提取效果的影響:當(dāng)液料比為30 ∶ 1 mL/g,溫度為70 ℃時(shí),分別水浴提取10、20、30、40、50、60、70 min后,按1.2.2的方法測定吸光度,計(jì)算總酚提取率。

    1.2.5 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)設(shè)計(jì) 在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,利用Design Expert 8.05b軟件,采用中心復(fù)合試驗(yàn)設(shè)計(jì)原則建立數(shù)學(xué)模型[15],以睡蓮花中總酚的提取率為響應(yīng)值,對液料比、提取時(shí)間、提取溫度這3個(gè)因素進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn),優(yōu)化出最佳提取工藝條件。因素與水平見表1。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

    如圖1所示,得回歸方程為y=1.317 5x+0.011 2,其相關(guān)系數(shù)為R2=0.998 4,回歸分析表明,在0~1.0 mg/mL濃度范圍內(nèi)睡蓮花中酚類物質(zhì)的質(zhì)量濃度與吸光度呈良好線性關(guān)系,可用于定量分析。因此,利用回歸方程,根據(jù)吸光度,可計(jì)算總酚的提取率。

    2.2 單因素試驗(yàn)結(jié)果

    2.2.1 提取溫度對總酚提取效果的影響 由圖2可知,隨著提取溫度的增加,總酚的提取率增大,提取液中總酚含量存在差異顯著,原因可能是隨著溫度的增加,酚類物質(zhì)的溶出率增加,提取率增加,當(dāng)溫度達(dá)70 ℃時(shí),睡蓮花總酚提取率最高,繼續(xù)升高溫度,總酚提取率稍有下降,這是因?yàn)闇囟壬?,部分酚類物質(zhì)結(jié)構(gòu)可能受高溫破壞或被氧化,導(dǎo)致提取率下降。當(dāng)溫度在80~90 ℃之間,差異不顯著。因此,在響應(yīng)面試驗(yàn)時(shí)選擇60~80 ℃為適宜的提取溫度。

    2.2.2 液料比對總酚提取效果的影響 由圖3可知,液料比對睡蓮干花花瓣總酚提取率有顯著影響,提取液的總酚含量在不同的液料比中存在顯著差異,隨著液料比的增加,睡蓮花總酚的提取率呈先上升后下降的趨勢,當(dāng)液料比為40 ∶ 1 mL/g時(shí),總酚提取率達(dá)最高,這是由于前期液料比較低,酚類物質(zhì)沒有完全溶出,隨著液料比的增加,溶出的酚類物質(zhì)達(dá)到最大,繼續(xù)增加一方面可能由于溶劑增多,其提取液濃度被稀釋了,導(dǎo)致提取率下降,另一方面可能是溶劑增大,使其他一些可溶性的雜質(zhì)溶解的量也逐漸增大,使得多酚提取含量下降[16]。因此,在響應(yīng)面試驗(yàn)時(shí)選擇液料比為30 ∶ 1~50 ∶ 1 mL/g為宜。

    2.2.3 提取時(shí)間對總酚提取效果的影響 由圖4可以看出,提取時(shí)間對睡蓮花總酚提取率具有一定的影響。隨著提取時(shí)間的增加,睡蓮花總酚提取率隨提取時(shí)間延長而增加,在20~60 min,提取液中總酚含量存在差異顯著,當(dāng)時(shí)間為50 min時(shí)達(dá)到最大;繼續(xù)延長提取時(shí)間,總酚提取率下降,這可能是因?yàn)槎喾游镔|(zhì)較不穩(wěn)定,隨著提取時(shí)間的延長導(dǎo)致酚類物質(zhì)發(fā)生氧化分解,從而導(dǎo)致酚類物質(zhì)提取率下降[17]。在提取時(shí)間為60~70 min時(shí),總酚含量差異不顯著,因此,在響應(yīng)面試時(shí)選擇40~60 min為適宜的提取時(shí)間。

    2.3 響應(yīng)面分析

    2.3.1 模型的建立與顯著性檢驗(yàn) 根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果,選取提取溫度、液料比、提取時(shí)間為影響因素,采用中心復(fù)合試驗(yàn)設(shè)計(jì)原則,進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn),試驗(yàn)方案和結(jié)果見表2。利用Design Expert 8.05b軟件對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析,得到模型對應(yīng)的二次多項(xiàng)回歸方程為:Y=11.36+0.33A+0.34B+0.088C+0.1AB-0.16AC+0.063BC-0.42A2-0.77B2-0.25C2

    為進(jìn)一步驗(yàn)證模型的可靠性,對回歸方程進(jìn)行方差分析,結(jié)果見表3。該模型p<0.000 1,為差異極顯著,說明該模型回歸方程的自變量和因變量的線性關(guān)系顯著;失擬項(xiàng)p=0.087 9>0.05,不顯著,且R=0.989 3,R2Adj=0.979 6,說明該二次回歸模型是適當(dāng)?shù)模P团c實(shí)際擬合情況好,誤差較小,實(shí)驗(yàn)方法可靠。因此,可以利用該模型較好的分析和預(yù)測在不同條件下睡蓮花中總酚的提取情況。由表3可知,影響因素A提取溫度和B液料比對響應(yīng)值有極顯著影響(p<0.01),影響因素C提取時(shí)間對響應(yīng)值有顯著影響(p<0.05),此外,AC即提取溫度與提取時(shí)間之間的交互作用差異為極顯著(p<0.01),AB即提取溫度與液料比之間的交互作用差異為顯著(p<0.05),顯著表中各因素的F值可以反映因素對響應(yīng)值的重要性,F(xiàn)值越大,表明對響應(yīng)值的影響越大,重要性越大[18],分析可知,各因素對睡蓮花總酚提取率的影響程度大小順序?yàn)椋阂毫媳龋˙)>提取溫度(A)>提取時(shí)間(C)。

    2.3.2 響應(yīng)曲面的分析與條件優(yōu)化 響應(yīng)曲面圖和等高線圖可以形象的反映響應(yīng)值隨各因素的變化趨勢[19]。因此,采用Design Expert 8.05b軟件對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行處理,繪制了提取溫度、液料比、提取時(shí)間這3個(gè)因素之間的交互作用對總酚提取率影響的響應(yīng)曲面圖和等高線圖,見圖5~7,可以看出液料比的響應(yīng)曲線陡峭,隨著液料比的增大,提取率上升較明顯,說明液料比對總酚提取率的影響較大,另外,等高線的形狀可以反映兩因素之間的交互作用,等高線形狀為橢圓形時(shí)說明兩因素之間的交互作用顯著,為圓形時(shí)說明交互作用不顯著[20]。圖6等高線圖形狀為橢圓形,說明AC之間存在顯著的交互作用,圖7等高線圖形狀近似于圓形,說明BC之間的交互作用不顯著,這與上述方差分析結(jié)果相符合。

    利用Design Expert 8.05b軟件對總酚提取率的工藝進(jìn)行優(yōu)化得到最佳工藝條件為:提取溫度74.08 ℃、液料比42.51 mL/g、提取時(shí)間50.81 min,預(yù)測總酚提取率理論值為11.47%,在此優(yōu)化條件下,根據(jù)實(shí)際可操作情況,將工藝調(diào)整為:提取溫度74 ℃、液料比43 ∶ 1 mL/g、提取時(shí)間51 min,經(jīng)3次試驗(yàn)得到的睡蓮花總酚提取率平均值為11.5%,與理論值接近,說明此模型可行。

    3 討論

    目前,關(guān)于植物多酚提取工藝的研究報(bào)道較多,但對藍(lán)藥睡蓮總酚提取工藝的研究尚未見報(bào)道。藍(lán)藥睡蓮中富含有多種酚類物質(zhì),景贊等[14]對藍(lán)藥睡蓮中多酚類物質(zhì)抗氧化活性和降糖作用進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)藍(lán)藥睡蓮中酚類物質(zhì)含量較高,具有明顯的抗氧化活性和降糖作用,可廣泛應(yīng)用于功能性食品、醫(yī)藥等行業(yè),而藍(lán)藥睡蓮在實(shí)際作為食品和藥品的應(yīng)用中多采用水進(jìn)行浸提,因此有必要對其水提工藝條件進(jìn)行研究。

    響應(yīng)面分析法是一種利用合理的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法,采用多元二次回歸方程來擬合因素和響應(yīng)值之間的函數(shù)關(guān)系,并通過回歸方程來尋找最佳響應(yīng)值的統(tǒng)計(jì)方法[16]。該法與傳統(tǒng)的正交設(shè)計(jì)相比,不僅能了解在提取過程中不同因素之間的交互作用程度,而且能更加精確的確定提取工藝的最佳點(diǎn),對于非線性影響因素的預(yù)測指導(dǎo)性更強(qiáng),具有更好的應(yīng)用價(jià)值[21]。因此,本試驗(yàn)在單因素的基礎(chǔ)上,選擇對酚類物質(zhì)含量影響較大的因素,通過響應(yīng)面分析法對睡蓮花總酚提取率的水提工藝條件進(jìn)行優(yōu)化,利用Design Expert 8.05b軟件,根據(jù)中心復(fù)合試驗(yàn)設(shè)計(jì)原則進(jìn)行試驗(yàn),建立了合理可靠的數(shù)學(xué)模型,得到了因素的主效應(yīng)關(guān)系為:液料比>提取溫度>提取時(shí)間,最后確定最佳的工藝參數(shù)為:提取溫度74 ℃、液料比43 ∶ 1 mL/g、提取時(shí)間51 min。該工藝安全、經(jīng)濟(jì)又實(shí)用,為睡蓮花茶飲料等產(chǎn)品的開發(fā),以及深入研究睡蓮花提供了一定的參考價(jià)值和理論依據(jù)。

    參考文獻(xiàn)

    [1] 關(guān)克儉, 肖培根, 土文采, 等. 中國植物志[M]. 北京: 科學(xué)出版社, 1979: 11.

    [2] 黃 謙. 藍(lán)藥睡蓮(Nymphaea stellata Willd)多酚活性研究及遺傳毒性評價(jià)[D]. 成都: 四川師范大學(xué), 2009.

    [3] Devi Bown. Encyclopedia of herbs and their uses[M]. Dorling Kindersley Limited London, New York, Stuttgart, Moscow, 1995: 317.

    [4] 季艷艷. 延藥睡蓮花中的酚類成分[J]. 國外醫(yī)學(xué)中醫(yī)中藥分冊, 2004, 26(2): 117.

    [5] 趙 軍, 徐 芳, 吉 騰, 等. 睡蓮屬植物化學(xué)成分及生物活性研究進(jìn)展[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2014(1): 142-147.

    [6] Saleem A, Ahotupa M, Pihlaja K. Total phenolics concentration and antioxidant potential of extracts of medicinal plants of Pakistan[J]. Z Naturforsch, 2001, 56: 973-978.

    [7] 尚軍華, 吳國良, 魏新娜, 等. 園藝植物多酚物質(zhì)生理功能及應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 河南農(nóng)業(yè), 2016(24): 50-52.

    [8] 唐 春, 馬 力. 植物多酚的應(yīng)用現(xiàn)狀分析[J]. 農(nóng)產(chǎn)品加工, 2014(9): 75-76.

    [9] 彭茹潔, 汪佳丹, 韓 偉. 植物多酚提取、 分離純化及其分析方法的研究進(jìn)展[J]. 機(jī)電信息, 2016(14): 21-29.

    [10] 楊 政, 蔣琳蘭. 響應(yīng)面法對水提茶多酚工藝的優(yōu)化[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué), 2013(3): 240-243.

    [11] 劉玉明, 沈先榮, 侯登勇, 等. 老葉茶葉中茶多酚水提工藝研究[J]. 時(shí)珍國醫(yī)國藥, 2015(6): 1 344-1 346.

    [12] 劉麗麗, 張建新, 鄭海燕. 響應(yīng)面分析法優(yōu)化光皮木瓜總酚水提工藝的研究[J]. 食品研究與開發(fā), 2009(4): 96-101.

    [13] 平 華, 張貴君, 李云伏, 等. 肉桂中多酚物質(zhì)水提工藝的研究[J]. 食品科技, 2008(6): 158-189.

    [14] 景 贊, 曾維才, 黃毅娜, 等. 藍(lán)睡蓮多酚類物質(zhì)抗氧化與降糖作用的研究[J]. 食品科技, 2010(7): 237-241.

    [15] 唐 斌, 馬紹英, 李 勝, 等. 響應(yīng)面優(yōu)化西蘭花中蘿卜硫素的超聲輔助提取工藝[J]. 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 2015(3): 171-177.

    [16] 代燕麗, 沈維治, 廖森泰, 等. 響應(yīng)面法優(yōu)化超聲波輔助提取桑葉多酚工藝[J]. 熱帶作物學(xué)報(bào), 2016, 37(8): 1 588-1 594.

    [17] 繆彬彬, 徐艷陽, 王一迪, 等. 響應(yīng)面法優(yōu)化香菇柄中多酚提取工藝[J]. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào), 2016(4): 1 658-1 666.

    [18] Hao W N, Li H, Hu M Y, et al. Integrated control of citrus green and blue mold and sour rot by Bacillus amyloliquefaciens in combination with tea saponin[J]. Post Harvest Biology and Technology, 2011, 59(3): 316-323.

    [19] 曹美麗, 蔣玉蓉, 闕淼琳, 等. 響應(yīng)面設(shè)計(jì)法優(yōu)化鐵皮石斛總多酚的提取工藝[J]. 食品工業(yè)科技, 2015(22): 272-276.

    [20] 王建超, 王 卿, 施文昊, 等. 響應(yīng)面分析法優(yōu)化枇杷葉多酚提取工藝[J]. 熱帶作物學(xué)報(bào), 2015, 36(2): 384-390.

    [21] 葉海潮, 余陳歡, 李 效, 等. 響應(yīng)面分析法優(yōu)化提取筋骨草抗氧化成分的工藝研究[J]. 時(shí)珍國醫(yī)國藥, 2012, 23(2): 317-319.

    猜你喜歡
    響應(yīng)面法總酚
    凌云白毫總酚提取工藝優(yōu)化及抗氧化活性
    黑蒜總酚的提取及抗氧化性研究
    山藥多糖提取工藝優(yōu)化及其抗菌活性研究
    微波輔助提取白頭翁皂苷研究
    響應(yīng)面法優(yōu)化超聲輔助提取蕎麥中蘆丁的工藝
    菊芋膳食纖維酸奶的工藝研究及營養(yǎng)分析
    船舶舷側(cè)構(gòu)件幾何尺寸優(yōu)化分析
    科技視界(2016年21期)2016-10-17 17:22:54
    響應(yīng)面法優(yōu)化孜然總酚含量測定的工藝條件
    可溶性大豆多糖超聲波提取工藝及其抗氧化性研究
    丹參彌羅松酚的提取及總酚含量測定
    中国三级夫妇交换| 男人和女人高潮做爰伦理| 51国产日韩欧美| av线在线观看网站| 亚洲经典国产精华液单| 少妇被粗大猛烈的视频| 免费大片18禁| 午夜老司机福利剧场| 黄色视频在线播放观看不卡| 51国产日韩欧美| 秋霞在线观看毛片| 亚洲最大成人手机在线| 91久久精品国产一区二区成人| 久久久精品欧美日韩精品| 91久久精品国产一区二区三区| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频 | 成人无遮挡网站| 美女cb高潮喷水在线观看| 久久久久久久国产电影| 色综合色国产| 日本wwww免费看| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 99热全是精品| 成人一区二区视频在线观看| 交换朋友夫妻互换小说| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 成人无遮挡网站| 国产爽快片一区二区三区| 欧美+日韩+精品| 午夜福利在线在线| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 人妻少妇偷人精品九色| 美女被艹到高潮喷水动态| 亚洲av日韩在线播放| 精品人妻视频免费看| 在线观看国产h片| 在线 av 中文字幕| 亚洲人成网站高清观看| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 久久久久久久国产电影| 欧美日本视频| 少妇人妻一区二区三区视频| 欧美激情在线99| 亚洲精品456在线播放app| 亚洲精品一二三| 久久精品人妻少妇| 一级毛片电影观看| 黄色视频在线播放观看不卡| 91精品一卡2卡3卡4卡| 日韩一本色道免费dvd| 大片电影免费在线观看免费| 国产美女午夜福利| 尾随美女入室| 美女主播在线视频| av国产久精品久网站免费入址| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 久久精品国产亚洲av涩爱| 神马国产精品三级电影在线观看| 欧美性感艳星| 国产精品国产三级国产专区5o| 欧美变态另类bdsm刘玥| 街头女战士在线观看网站| 欧美少妇被猛烈插入视频| 水蜜桃什么品种好| 国产伦在线观看视频一区| 2022亚洲国产成人精品| 一级二级三级毛片免费看| 少妇熟女欧美另类| 国产成人freesex在线| 亚洲欧美精品专区久久| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 婷婷色av中文字幕| 麻豆成人av视频| 亚洲欧美精品专区久久| 美女内射精品一级片tv| 免费少妇av软件| 肉色欧美久久久久久久蜜桃 | 国产伦精品一区二区三区四那| 日韩欧美 国产精品| 精品午夜福利在线看| 亚洲精品乱久久久久久| 亚洲av一区综合| 在现免费观看毛片| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 国产有黄有色有爽视频| 一级a做视频免费观看| 在线免费十八禁| 国产淫语在线视频| 久久精品人妻少妇| av在线播放精品| 久久久久久久国产电影| 国产午夜福利久久久久久| 国产一区亚洲一区在线观看| 少妇 在线观看| 新久久久久国产一级毛片| 新久久久久国产一级毛片| 最近手机中文字幕大全| 亚洲精品日本国产第一区| 午夜福利网站1000一区二区三区| av在线亚洲专区| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 亚洲精品第二区| 最近的中文字幕免费完整| 国产 一区 欧美 日韩| 欧美 日韩 精品 国产| 国产 精品1| 亚洲国产精品成人久久小说| 久久ye,这里只有精品| 六月丁香七月| 国产精品一二三区在线看| 成人二区视频| 国产日韩欧美亚洲二区| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 老司机影院毛片| 亚洲精品成人久久久久久| 天堂中文最新版在线下载 | 成人国产麻豆网| 啦啦啦在线观看免费高清www| 国产极品天堂在线| 日韩av不卡免费在线播放| 国产精品偷伦视频观看了| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 精品久久久精品久久久| 国产在线一区二区三区精| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产精品一区二区性色av| 国产一区二区在线观看日韩| xxx大片免费视频| 天美传媒精品一区二区| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 全区人妻精品视频| 日韩一本色道免费dvd| 精品国产乱码久久久久久小说| 丰满人妻一区二区三区视频av| 有码 亚洲区| 草草在线视频免费看| 国产精品三级大全| 久久6这里有精品| 99久久精品国产国产毛片| 免费看日本二区| 99久久精品一区二区三区| 伦理电影大哥的女人| 国内精品美女久久久久久| freevideosex欧美| 高清日韩中文字幕在线| 男女边吃奶边做爰视频| 欧美一区二区亚洲| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产爽快片一区二区三区| 91狼人影院| 精品国产乱码久久久久久小说| 午夜老司机福利剧场| 国产一区有黄有色的免费视频| 亚洲精品aⅴ在线观看| 亚洲最大成人av| 香蕉精品网在线| av福利片在线观看| 一级片'在线观看视频| 少妇人妻精品综合一区二区| 亚洲欧美日韩东京热| 亚洲综合色惰| 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 在线观看人妻少妇| 亚洲自拍偷在线| 卡戴珊不雅视频在线播放| 高清在线视频一区二区三区| 国产高潮美女av| 综合色av麻豆| 国产日韩欧美亚洲二区| 街头女战士在线观看网站| 大片免费播放器 马上看| 免费少妇av软件| av在线观看视频网站免费| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 在线观看av片永久免费下载| 天天躁日日操中文字幕| 国产探花在线观看一区二区| 在线观看一区二区三区| 国产亚洲精品久久久com| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲精品成人久久久久久| 日韩免费高清中文字幕av| 国产精品国产av在线观看| 婷婷色综合大香蕉| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 一本色道久久久久久精品综合| 97精品久久久久久久久久精品| 91狼人影院| 久久久成人免费电影| 亚洲精品日本国产第一区| 久久久久久久久久成人| 高清av免费在线| 欧美3d第一页| 国产午夜福利久久久久久| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 永久免费av网站大全| 日韩成人av中文字幕在线观看| 中文在线观看免费www的网站| 男人舔奶头视频| 69人妻影院| 日本一本二区三区精品| 久久99蜜桃精品久久| 一区二区三区乱码不卡18| 国产午夜精品一二区理论片| 国产一区二区在线观看日韩| 精品一区二区三区视频在线| 国产探花极品一区二区| 国产一区亚洲一区在线观看| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲精品久久午夜乱码| 赤兔流量卡办理| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 老司机影院成人| 亚洲,欧美,日韩| 丰满人妻一区二区三区视频av| 青春草国产在线视频| 九九在线视频观看精品| 精品少妇久久久久久888优播| 亚洲av成人精品一区久久| 免费看a级黄色片| 亚洲国产最新在线播放| 亚洲在久久综合| 亚洲国产av新网站| 一级黄片播放器| .国产精品久久| 精品一区在线观看国产| 日本黄色片子视频| 不卡视频在线观看欧美| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 色哟哟·www| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| av免费在线看不卡| 乱系列少妇在线播放| 国产午夜精品一二区理论片| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 国产亚洲91精品色在线| 黄色视频在线播放观看不卡| 中文字幕久久专区| 夜夜爽夜夜爽视频| 天堂中文最新版在线下载 | 视频中文字幕在线观看| 免费看av在线观看网站| 久久久久国产网址| 99久久中文字幕三级久久日本| 在现免费观看毛片| 国产免费又黄又爽又色| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 国产综合精华液| 欧美成人午夜免费资源| h日本视频在线播放| 精品国产乱码久久久久久小说| 亚洲色图综合在线观看| 香蕉精品网在线| 久久久久国产网址| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国精品久久久久久国模美| 高清毛片免费看| 国产精品久久久久久久电影| 男女边吃奶边做爰视频| 亚洲av免费高清在线观看| 成人综合一区亚洲| 日韩av不卡免费在线播放| 久久久久久国产a免费观看| 久久精品久久久久久久性| 夫妻性生交免费视频一级片| xxx大片免费视频| 国产精品国产三级国产专区5o| 欧美激情国产日韩精品一区| 少妇丰满av| xxx大片免费视频| 六月丁香七月| 亚洲久久久久久中文字幕| 国产精品一区二区在线观看99| 欧美日韩视频精品一区| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 婷婷色av中文字幕| 国产毛片a区久久久久| 七月丁香在线播放| 91在线精品国自产拍蜜月| 欧美日韩视频精品一区| 草草在线视频免费看| 国产免费视频播放在线视频| 少妇 在线观看| 亚洲精品456在线播放app| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲成色77777| 精品国产乱码久久久久久小说| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产黄色视频一区二区在线观看| 黄色欧美视频在线观看| 免费观看在线日韩| 日韩大片免费观看网站| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲欧美日韩东京热| 久久99热这里只有精品18| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 丝袜脚勾引网站| 在线播放无遮挡| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 精品久久国产蜜桃| av女优亚洲男人天堂| 日韩一区二区视频免费看| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 99久久精品热视频| 国产精品久久久久久av不卡| 免费黄网站久久成人精品| 国产黄片美女视频| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频 | 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 边亲边吃奶的免费视频| 日韩三级伦理在线观看| 狂野欧美激情性bbbbbb| 亚洲国产精品999| 亚洲欧美精品专区久久| 一区二区三区免费毛片| 国产淫语在线视频| 成人二区视频| 成人一区二区视频在线观看| 久久久午夜欧美精品| 69av精品久久久久久| 日韩视频在线欧美| 只有这里有精品99| 卡戴珊不雅视频在线播放| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 亚洲精品一二三| 国产 一区精品| 大片免费播放器 马上看| 黄色欧美视频在线观看| 一区二区三区精品91| 久久久精品欧美日韩精品| 成人二区视频| av福利片在线观看| 日韩大片免费观看网站| 免费黄色在线免费观看| 欧美人与善性xxx| 搡女人真爽免费视频火全软件| 久久久久网色| 成人一区二区视频在线观看| 日韩人妻高清精品专区| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 国产大屁股一区二区在线视频| 国产av码专区亚洲av| 麻豆国产97在线/欧美| 久久久久国产精品人妻一区二区| 国产探花在线观看一区二区| 日日啪夜夜撸| 久久韩国三级中文字幕| 别揉我奶头 嗯啊视频| 日本免费在线观看一区| 国国产精品蜜臀av免费| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 99视频精品全部免费 在线| 一区二区三区四区激情视频| 欧美激情久久久久久爽电影| 卡戴珊不雅视频在线播放| 黄色配什么色好看| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲国产日韩一区二区| av在线播放精品| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 国产精品一区二区三区四区免费观看| 免费观看无遮挡的男女| 一个人看的www免费观看视频| 国产av国产精品国产| 一个人看视频在线观看www免费| 91久久精品国产一区二区三区| 国产在线男女| a级毛片免费高清观看在线播放| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 精品久久久久久久久av| 国产在线男女| 国产精品女同一区二区软件| 高清视频免费观看一区二区| 精品少妇久久久久久888优播| 国产探花在线观看一区二区| 最新中文字幕久久久久| 日韩免费高清中文字幕av| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 99热6这里只有精品| 国产精品人妻久久久久久| 男女啪啪激烈高潮av片| 久久97久久精品| 免费少妇av软件| 亚洲欧美日韩无卡精品| 精品久久久精品久久久| 一级毛片aaaaaa免费看小| 亚洲欧洲国产日韩| 国产美女午夜福利| 在线天堂最新版资源| 在线观看美女被高潮喷水网站| 亚洲在线观看片| 亚洲欧洲国产日韩| 国产亚洲最大av| 男插女下体视频免费在线播放| 国产片特级美女逼逼视频| 国产精品.久久久| 久久久国产一区二区| 国产精品蜜桃在线观看| 22中文网久久字幕| videossex国产| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 亚洲自偷自拍三级| 又爽又黄a免费视频| 一区二区三区精品91| 亚洲四区av| 亚洲在线观看片| 制服丝袜香蕉在线| 日本一二三区视频观看| 国产精品久久久久久久电影| 午夜福利视频精品| 欧美日韩在线观看h| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 男人添女人高潮全过程视频| 亚洲精品,欧美精品| 高清欧美精品videossex| 久久亚洲国产成人精品v| 777米奇影视久久| 亚洲不卡免费看| 男女啪啪激烈高潮av片| 高清欧美精品videossex| 久久鲁丝午夜福利片| 日韩三级伦理在线观看| 成人亚洲精品av一区二区| 我的老师免费观看完整版| 午夜亚洲福利在线播放| 日本一本二区三区精品| 哪个播放器可以免费观看大片| 一本一本综合久久| 免费av不卡在线播放| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 天堂网av新在线| www.色视频.com| 中文字幕亚洲精品专区| 亚洲一区二区三区欧美精品 | 国产精品人妻久久久影院| 黄色视频在线播放观看不卡| 国产成人freesex在线| 我的女老师完整版在线观看| 国产精品嫩草影院av在线观看| 国产成人精品福利久久| 亚洲国产欧美人成| 日韩电影二区| 久久久久久国产a免费观看| 午夜福利网站1000一区二区三区| 一本色道久久久久久精品综合| 欧美极品一区二区三区四区| 只有这里有精品99| 国产老妇伦熟女老妇高清| 老司机影院毛片| 听说在线观看完整版免费高清| 国产探花在线观看一区二区| 国产精品久久久久久精品电影| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 成人毛片60女人毛片免费| 好男人视频免费观看在线| 在线精品无人区一区二区三 | 嫩草影院精品99| 国产免费又黄又爽又色| 色吧在线观看| 高清毛片免费看| 亚洲精品日韩av片在线观看| 韩国av在线不卡| 永久免费av网站大全| 插阴视频在线观看视频| 国产欧美亚洲国产| 免费大片18禁| 久久亚洲国产成人精品v| 一级a做视频免费观看| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 亚洲国产色片| 国产毛片a区久久久久| av在线天堂中文字幕| 精品一区二区三卡| 少妇人妻 视频| 色视频www国产| 久久热精品热| 久久久久网色| 久久女婷五月综合色啪小说 | 欧美成人精品欧美一级黄| 久久久午夜欧美精品| 在线 av 中文字幕| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产高清有码在线观看视频| 亚洲国产精品999| 男女国产视频网站| 成年女人在线观看亚洲视频 | 亚洲av成人精品一区久久| 久久久成人免费电影| 国产爽快片一区二区三区| 亚洲熟女精品中文字幕| 国产69精品久久久久777片| 亚洲精品亚洲一区二区| 国产人妻一区二区三区在| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 久久午夜福利片| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国精品久久久久久国模美| 国产毛片在线视频| 我要看日韩黄色一级片| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 亚洲精品乱久久久久久| 国产日韩欧美亚洲二区| 精品久久久久久电影网| 97在线人人人人妻| 亚洲av成人精品一二三区| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 3wmmmm亚洲av在线观看| 亚洲不卡免费看| 一级片'在线观看视频| 十八禁网站网址无遮挡 | 69人妻影院| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲三级黄色毛片| 亚洲色图综合在线观看| 麻豆久久精品国产亚洲av| 超碰97精品在线观看| 成人国产av品久久久| 青春草国产在线视频| 三级国产精品片| 欧美日韩综合久久久久久| 国产成人a∨麻豆精品| 黄色一级大片看看| 日日摸夜夜添夜夜爱| 18+在线观看网站| 青春草亚洲视频在线观看| 在线播放无遮挡| 一级二级三级毛片免费看| 成人综合一区亚洲| 一级片'在线观看视频| 午夜精品一区二区三区免费看| 各种免费的搞黄视频| 熟妇人妻不卡中文字幕| 精品国产三级普通话版| av线在线观看网站| 亚洲精品亚洲一区二区| 黄色怎么调成土黄色| 国产精品人妻久久久久久| 搡女人真爽免费视频火全软件| 亚洲欧美清纯卡通| 在线天堂最新版资源| 一区二区三区乱码不卡18| 国产av码专区亚洲av| 男人和女人高潮做爰伦理| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 夫妻午夜视频| 亚洲经典国产精华液单| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 麻豆成人午夜福利视频| 最新中文字幕久久久久| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 内地一区二区视频在线| 激情五月婷婷亚洲| 成人亚洲欧美一区二区av| 99热全是精品| 一本色道久久久久久精品综合| 高清视频免费观看一区二区| 男人和女人高潮做爰伦理| 日本午夜av视频| 夜夜爽夜夜爽视频| 久久影院123| 免费大片黄手机在线观看| 亚洲精品影视一区二区三区av| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 嘟嘟电影网在线观看| 亚洲天堂av无毛| 亚洲成人一二三区av| av免费观看日本| 别揉我奶头 嗯啊视频| 搡女人真爽免费视频火全软件| 亚洲不卡免费看| 爱豆传媒免费全集在线观看| 联通29元200g的流量卡| 国产视频首页在线观看| 国产成人freesex在线| 欧美成人a在线观看| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 久久久久网色| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 国产精品久久久久久精品古装| 草草在线视频免费看| 免费少妇av软件| av在线天堂中文字幕| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产精品蜜桃在线观看| 久久久精品94久久精品| 国产av码专区亚洲av| 国产精品久久久久久久久免| 欧美另类一区| 国产高清不卡午夜福利| 免费看av在线观看网站| 国产av不卡久久| 国产高清不卡午夜福利| 啦啦啦啦在线视频资源| 一边亲一边摸免费视频| .国产精品久久| 又爽又黄无遮挡网站| 国产黄a三级三级三级人| 成人亚洲精品一区在线观看 | 国产爽快片一区二区三区| 综合色av麻豆| 欧美三级亚洲精品| 午夜精品国产一区二区电影 | 午夜精品一区二区三区免费看| 丝袜美腿在线中文| 日产精品乱码卡一卡2卡三|