劉超,喻貴英,劉偉霞,昌秦芬,汪楊
太極集團(tuán)重慶桐君閣藥廠有限公司,重慶南岸 401336
菊花在制劑工藝中不同滅菌方式對(duì)質(zhì)量影響的考察
劉超,喻貴英,劉偉霞,昌秦芬,汪楊
太極集團(tuán)重慶桐君閣藥廠有限公司,重慶南岸 401336
目的考察制劑中不同滅菌方式對(duì)菊花的滅菌效果及質(zhì)量的影響。方法分別采用濕熱滅菌、輻照滅菌、低溫干燥3種方法進(jìn)行考察。結(jié)果滅菌效果順序:輻照滅菌>濕熱滅菌>低溫干燥;對(duì)指標(biāo)成份的影響:不同的滅菌方式對(duì)綠原酸、木犀草苷無顯著影響,但濕熱滅菌法對(duì)3,5-O-二咖啡酰基奎寧酸影響較大,損失率約50%~60%。結(jié)論對(duì)菊花藥材采用輻照滅菌與濕熱滅菌法均可取得較好效果,但考慮到輻照滅菌的安全性需要進(jìn)一步研究,傳統(tǒng)的中藥制劑大多以濕熱滅菌方式為主,為了確保產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量,需要進(jìn)一步優(yōu)化濕熱滅菌工藝參數(shù)。
菊花藥材;加工方式;質(zhì)量影響
菊花為菊科植物(Chrysenthemum morifklium Ramat)的干燥頭狀花序,具有疏風(fēng)、清熱、明目、解毒等功效[1]。菊花含有多種化學(xué)成分,現(xiàn)代研究表明,菊花含有黃酮類、酚酸類、揮發(fā)油類、氨基酸和糖類等活性物質(zhì)[2],因品種、產(chǎn)地、采摘期、加工炮制等不同,其主要化學(xué)成分的種類和含量有一定的差異[3]。其中黃酮和酚酸等多酚類物質(zhì)是作為評(píng)價(jià)菊花品質(zhì)優(yōu)劣的重要指標(biāo),同時(shí)作為含菊花制劑內(nèi)在質(zhì)量優(yōu)劣的評(píng)價(jià)指標(biāo)。《中國藥典》(2015版)根據(jù)菊花產(chǎn)地和加工方法的不同,收載了亳菊、滁菊、貢菊和杭菊4個(gè)品種,并規(guī)定了菊花中綠原酸(3-CQA)、木犀草苷(L-7-O-Glu)和3,5-O-二咖啡?;鼘幩?3,5-DCQA)的最低含量[1]。菊花藥材為大宗農(nóng)副產(chǎn)品,容易染菌,為了確保其制劑的微生物限度,制劑時(shí)需對(duì)菊花藥材進(jìn)行滅菌處理。該文研究采用不同加工方式對(duì)制劑中菊花藥材的滅菌效果及質(zhì)量影響進(jìn)行考察,以指導(dǎo)制劑工藝設(shè)計(jì)及改進(jìn)工作。
1.1 儀器
PH030J型電熱恒溫干燥箱(江蘇常州);小型手控壓力滅菌器YXQ-WF32A(成都鍋爐輔機(jī)廠);KQ-500DBB型數(shù)控超聲波清洗儀(昆山市超聲儀器有限公司);安捷倫HP1260型高效液相色譜儀。
1.2 試藥
對(duì)照品綠原酸(批號(hào):110753-201314)、木犀草苷(批號(hào):111720-201408)和3,5-O-二咖啡?;鼘幩幔ㄅ?hào):111782-201405)均購于中國藥品生物制品檢定研究院;所用菊花藥材由太極集團(tuán)重慶桐君閣藥廠有限公司提供。
2.1 樣品的制備
2.1.1 樣品來源 分別取庫存3批藥材各2 kg,進(jìn)行凈選,混勻,均分成4份,每份各0.5 kg。
2.1.2 未滅菌藥材 分別取上述凈選的3批菊花藥材各0.5 kg即可。
2.1.3 輻照滅菌藥材 分別取上述凈選的3批菊花藥材各0.5 kg,采Co60輻照滅菌,劑量控制在3 kGy以內(nèi)。
2.1.4 濕熱滅菌藥材 分別取上述凈選的3批菊花藥材各0.5 kg,采用濕熱壓滅菌121℃,40min,70~80℃干燥2 h即可。
2.1.5 低溫干燥藥材 分別取上述凈選的3批菊花藥材各0.5 kg,置于電熱恒溫干燥箱中,60℃干燥4 h即可。
2.2 衛(wèi)生學(xué)檢驗(yàn)方法與結(jié)果
按《中國藥典》2015年版四部規(guī)定對(duì)以上樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)檢驗(yàn),結(jié)果見表1。
2.3 含量測定方法
2.3.1方法《中國藥典》2015版一部菊花含量測定方法。
2.3.2 色譜條件 色譜柱為:Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5.0 μm)色譜柱;柱溫30℃;檢測波長為348 nm;流速1.0 mL/min;進(jìn)樣量5 μL;以乙腈為流動(dòng)相A,以0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相B,按表2梯度進(jìn)行洗脫。
表2 流動(dòng)相梯度洗脫表
表3 不同滅菌方法對(duì)藥材含量影響結(jié)果比較
2.3.3 對(duì)照品溶液的制備 取綠原酸對(duì)照品、木犀草苷對(duì)照品、3,5-O-二咖啡?;鼘幩釋?duì)照品適量,精密稱定,置棕色量瓶中,加70%甲醇制成每1 mL含綠原酸35 μg,木犀草苷25 μg,3,5-O-二咖啡?;鼘幩?0 μg的混合溶液,即得(10℃以下保存)。
2.3.4 供試品溶液的制備 取樣品粉末(過四號(hào)篩)約0.25 g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入70%甲醇25 mL,密塞,稱定重量,超聲處理(功率500 W,頻率40 kHz) 40 min,放冷,再稱定重量,用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得。
2.3.5 測定溶液 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5 μL,注入液相色譜儀,測定。
2.4 檢測結(jié)果
不同滅菌方法對(duì)藥材含量影響結(jié)果見表3
2.5 不同滅菌方式的液相圖譜比較
不同滅菌方式的液相圖具體見圖1、圖2、圖3、圖4、圖5。
①實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,濕熱滅菌與輻照滅菌均能較好地殺滅微生物,起到較好的滅菌效果;而低溫干燥僅能減少藥材中的部分微生物。若制劑中以藥粉入藥,則應(yīng)采用濕熱滅菌或輻照滅菌更能保證衛(wèi)生學(xué)質(zhì)量。
圖1 對(duì)照品混合溶液圖譜
圖2 凈選藥材圖譜
圖3 低溫干燥藥材圖譜
圖4 輻照滅菌圖譜
圖5 濕熱滅菌圖譜
②通過對(duì)不同加工方式樣品的色譜圖分析,溫?zé)釡缇乃幉纳V圖中,組份色譜峰相對(duì)減少,3,5-O-二咖啡酰基奎寧酸的峰高明顯降低;其他兩種加工方式的藥材與原藥材比較,組份色譜峰與峰高基本相同。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明加工方式對(duì)菊花的組成成份有一定影響。
③濕熱滅菌對(duì)菊花藥材外觀顏色的影響比輻照滅菌、低溫干燥等方式對(duì)菊花藥材的外觀顏色的影響更明顯,且對(duì)菊花的指標(biāo)成份有較大的影響,特別是對(duì)3,5-O-二咖啡?;鼘幩岬挠绊?,通過濕熱滅菌會(huì)導(dǎo)致3,5-O-二咖啡?;鼘幩釗p失約60%;輻照滅菌雖對(duì)菊花外觀及指標(biāo)成份影響較小,但存在鈷60殘留的安全隱患,需要進(jìn)一步研究。因此在工藝設(shè)計(jì)及改進(jìn)時(shí),應(yīng)根據(jù)制劑的實(shí)際情況確定滅菌方式及滅菌參數(shù),確保產(chǎn)品質(zhì)量;在制定產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)也應(yīng)充分考慮不同的廠家采用的不同滅菌工藝對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的影響,而制定合理的限度標(biāo)準(zhǔn)。
[1]《中國藥典》[S].2015年版一部.2015:310-311.
[2]謝占芳,張倩倩,朱凌佳,等.菊花化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展[J],河南大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版,2015,34(4):290-300.
[3]覃珊,溫學(xué)森.藥用菊花質(zhì)量影響因素研究進(jìn)展[J],2010年全國中醫(yī)院院長暨道家文化與中醫(yī)藥養(yǎng)生論壇,2010:96-100.
R28
A
1672-5654(2017)04(c)-0112-04
10.16659/j.cnki.1672-5654.2017.12.112
2017-01-20)
劉超(1966-),男,重慶人,本科,工程師,研究方向:制藥工程。