淋巴結(jié)病理組織免疫組化技術(shù)與標(biāo)準(zhǔn)化操作方法探討①

王雅萍

(洛陽市第三人民醫(yī)院，河南 洛陽 471000)

淋巴結(jié)病理組織免疫組化技術(shù)與標(biāo)準(zhǔn)化操作方法探討①

王雅萍

(洛陽市第三人民醫(yī)院，河南 洛陽 471000)

目的：探析淋巴結(jié)病理組織免疫組化技術(shù)與標(biāo)準(zhǔn)化操作方法。方法：對(duì)2014-10～2016-05我院收治的83例淋巴結(jié)患者的臨床資料予以回顧性分析，根據(jù)計(jì)算機(jī)數(shù)表法分為2組，即觀察組(n=42)、對(duì)照組(n=41)。觀察組患者給予免疫組化染色與標(biāo)準(zhǔn)化淋巴結(jié)組織HE片穿刺，對(duì)照組患者未給予標(biāo)準(zhǔn)化淋巴結(jié)組織HE片穿刺，觀察比較2組患者免疫組化染色切片的情況。結(jié)果：觀察組患者免疫組化染色切片的優(yōu)良率是95.2%，明顯高于對(duì)照組患者的56.1%，組間對(duì)比差異明顯(P<0.05)。結(jié)論：通過病理組織免疫組化技術(shù)的應(yīng)用，可明顯提高染色切片的優(yōu)良率，為診斷患者病情提供了可靠參考，值得臨床廣泛應(yīng)用與普及。

淋巴結(jié)；病理組織；免疫組化技術(shù)；標(biāo)準(zhǔn)化操作方法

免疫組化技術(shù)指的就是利用免疫學(xué)及組織化學(xué)原理，對(duì)組織切片或者細(xì)胞標(biāo)本中某些化學(xué)成分予以原位定位、定性或定量研究的技術(shù)[1]，其主要包括免疫細(xì)胞化學(xué)與免疫組織化學(xué)[2]。為了探討淋巴結(jié)病理組織免疫組化技術(shù)與標(biāo)準(zhǔn)化操作方法的應(yīng)用效果，本文主要對(duì)我院收治的83例淋巴結(jié)患者的臨床資料予以研究，現(xiàn)總結(jié)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

對(duì)2014-10～2016-05我院收治的83例淋巴結(jié)患者的臨床資料予以回顧性分析，根據(jù)計(jì)算機(jī)數(shù)表法分為2組，即觀察組(n=42)、對(duì)照組(n=41)。83例患者中，女39例，男44例；年齡19～79歲，平均為(47.2±6.7)歲；淋巴結(jié)部位：頸部淋巴結(jié)33例，鎖骨下淋巴結(jié)28例，腹膜后淋巴結(jié)22例。統(tǒng)計(jì)分析2組患者的一般資料可知，對(duì)比差異不明顯(P>0.05)，可進(jìn)行比較。2組患者均知曉本次研究目的，且自愿簽署知情同意書，符合倫理學(xué)要求。

1.2 方法

觀察組患者給予免疫組化染色與標(biāo)準(zhǔn)化淋巴結(jié)組織HE片穿刺，對(duì)照組患者未給予標(biāo)準(zhǔn)化淋巴結(jié)組織HE片穿刺，相關(guān)操作如下。

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)化淋巴結(jié)組織HE片

根據(jù)有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求，取材時(shí)應(yīng)嚴(yán)格控制組織厚度，最好約為0.18cm。在淋巴結(jié)組織離體之后，置于4%的中性甲醛中，并予以固定，如果在1例標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)較多的穿刺組織，應(yīng)用過濾紙包好每條組織，并置于脫水盒中，保證包埋程序時(shí)組織位于同一平面。切片厚度定為2.5μm，并將每張蠟片切成7片，對(duì)其中一張蠟片切片予以染色成HE切片，并涂在載玻片上，為免疫組化做好準(zhǔn)備。

1.2.2 免疫組化技術(shù)

對(duì)切片予以常規(guī)脫蠟，置于水中。取3%的甲醇液于室溫條件下作用一段時(shí)間，之后用清水與蒸餾水清洗切片。取pH為6.0的檸檬酸1100mL置于高壓鍋中，并蓋好，加熱2min后停止，使其自然冷卻，之后從溫室中取出。用PBS進(jìn)行沖洗，需沖洗2次，2min/次。添加二抗，在DAB顯色時(shí)可停止添加，比較抗體陰陽性。

1.3 觀察指標(biāo)

免疫組化染色切片優(yōu)良率評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)：組織結(jié)構(gòu)未被破壞，準(zhǔn)確定位陽性物質(zhì)，存在清晰、干凈的背景，無特殊著色與脫色情況，具有高度的敏感性與特異性[3]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 對(duì)2組患者的一般資料進(jìn)行比較

在性別、年齡、淋巴結(jié)部位方面，2組患者對(duì)比無明顯差異(P>0.05)，見表1。

表1 對(duì)2組患者的一般資料進(jìn)行比較

2.2 對(duì)2組患者的染色切片優(yōu)良率進(jìn)行對(duì)比

觀察組患者免疫組化染色切片的優(yōu)良率是95.2%，明顯高于對(duì)照組患者的56.1%，組間對(duì)比差異明顯(P<0.05)，見表2。

表2 對(duì)2組患者的染色切片優(yōu)良率進(jìn)行對(duì)比[n(%)]

3 討論

現(xiàn)階段，免疫組化技術(shù)取得了很大的進(jìn)步，敏感性非常高。在起步階段，免疫組化技術(shù)遇到了很多障礙，特別是技術(shù)限制特別多，致使其未能充分發(fā)揮自身作用[4]。以往抗體稀釋程度較低，最多只能稀釋幾十倍，隨著醫(yī)療技術(shù)水平的逐步提升，抗體稀釋程度越來越大，可達(dá)到上萬倍，并且抗體敏感性也得到了很大的提升[5]。目前，因?yàn)閷?shí)驗(yàn)室缺乏明確、統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，導(dǎo)致免疫組化技術(shù)結(jié)果差異較大，由此說明，設(shè)定一個(gè)明確、統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，有利于進(jìn)一步完善免疫組化技術(shù)，充分發(fā)揮其作用[6，7]。此外，免疫組化結(jié)果易受多種因素的干擾，其中抗原修復(fù)標(biāo)準(zhǔn)化最為重要。在以往操作中，均利用微波加熱法修復(fù)抗原，而現(xiàn)在，均利用高壓鍋加熱法予以修復(fù)，可更好的控制加熱時(shí)間，染色效果更佳[8，9]。本文研究結(jié)果顯示：觀察組患者免疫組化染色切片的優(yōu)良率是95.2%，明顯高于對(duì)照組患者的56.1%，組間對(duì)比差異明顯(P<0.05)。此研究結(jié)果與彭鳳英[10]的文獻(xiàn)報(bào)道非常近似，即觀察組患者免疫組化切片的優(yōu)良率是94.9%，對(duì)照組患者免疫組化切片的優(yōu)良率是53.8%，2組對(duì)比差異明顯(P<0.05)。由此可以看出，只有通過標(biāo)準(zhǔn)化操作才可以有效提高免疫組化技術(shù)的檢測(cè)結(jié)果，充分發(fā)揮其自身作用，便于進(jìn)一步了解患者病情，臨床應(yīng)用價(jià)值非常高?？偠灾?，通過病理組織免疫組化技術(shù)的應(yīng)用，可明顯提高染色切片的優(yōu)良率，為診斷患者病情提供了可靠參考，值得臨床廣泛應(yīng)用與普及。

[1]馬喆,王洪巖,袁東輝,等.病理免疫組化質(zhì)量控制過程中應(yīng)注意的幾點(diǎn)[J].診斷病理學(xué)雜志,2015,22(3):187

[2]張睿,朱正鵬,馬健波,等.淋巴結(jié)免疫組化制片技術(shù)體會(huì)[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,2015,4(2):220-221

[3]劉洪博,王文智,邱雷,等.雙重免疫組化技術(shù)檢測(cè)胃低分化腺癌誤診為淋巴瘤一例[J].天津醫(yī)藥,2013,16(8):762

[4]陳世梁,盧志承,陳春吉,等.10%中性緩沖福爾馬林固定組織HE染色的改良方法[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,2014,30(8):933-934

[5]陶成云.病理診斷中免疫組化技術(shù)的應(yīng)用研究[J].大家健康(下旬版),2016,10(8):152-153

[6]郭晉.病理組織的免疫組織化學(xué)技術(shù)分析[J].航空航天醫(yī)學(xué)雜志,2014,8(4):473-474

[7]郭海燕,郭黎黎,王志生,等.組織病理診斷中應(yīng)用免疫組化技術(shù)的價(jià)值分析[J].中國(guó)繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育,2015,10(5):177

[8]薛衛(wèi)成,樊祥山,孟剛(整理),等.胃癌相關(guān)標(biāo)志物免疫組化指標(biāo)選擇專家共識(shí)(2014)[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,2014,18(9):951-953

[9]管沛璇.免疫組化技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用思考[J].中國(guó)醫(yī)藥指南,2014,17(34):54-55

[10]彭鳳英.病理組織免疫組化技術(shù)的研究[J].吉林醫(yī)學(xué),2014,6(12):2615

王雅萍(1975～)女，河南孟津人，主管技師。

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2016-07-12)