電針聯(lián)合身痛逐瘀膠囊對CCI大鼠脊髓組織TNF-α，IL-1β，IL-6表達(dá)的影響

金弘，劉婷婷，劉樹民，陳英華，孫曉偉，樸圣愛，祝鵬宇

(1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040；3.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150001)

電針聯(lián)合身痛逐瘀膠囊對CCI大鼠脊髓組織TNF-α，IL-1β，IL-6表達(dá)的影響

金弘1，劉婷婷2*，劉樹民2，陳英華1，孫曉偉1，樸圣愛1，祝鵬宇3

(1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040；3.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150001)

目的：通過觀察電針聯(lián)合身痛逐瘀膠囊對CCI大鼠熱縮足反射潛伏期以及脊髓組織TNF-α、IL-1β、IL-6表達(dá)的影響，以期從調(diào)控脊髓組織促炎性細(xì)胞因子角度揭示其作用機(jī)制。方法：成年SD大鼠按照隨機(jī)數(shù)字表分為假手術(shù)組、模型組、電針組、中藥組和針?biāo)幗M，每組分為3天、7天和14天三個亞組，每個亞組10只大鼠。按照Bennett的方法建立CCI大鼠模型，電針組給予損傷側(cè)環(huán)跳、陽陵泉電針治療，每日1次，每次30 min。中藥組給予身痛逐瘀膠囊治療(1.64 g/kg)，灌胃給藥，給藥容積為15 ml/kg，每日1次。針?biāo)幗M給予電針和中藥聯(lián)合治療，方法及療程同上。假手術(shù)組和模型組給予等容積生理鹽水灌胃。采用熱縮足反射潛伏期進(jìn)行大鼠行為學(xué)檢測；采用ELISA法檢測CCI模型大鼠脊髓組織TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白表達(dá)。結(jié)果：模型組大鼠TWL術(shù)后3天即達(dá)到最低值，此后稍有延長，但仍顯著低于術(shù)前，術(shù)后各時間點與假手術(shù)組相比具有顯著性差異(P<0.05)；電針組、中藥組、針?biāo)幗MCCI大鼠熱縮足反射潛伏期有所延長，各時間點與模型組相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。針?biāo)幗M大鼠機(jī)械縮足反射閾值顯著上升，與電針組、中藥組相比，療效更加顯著(P<0.05)。ELISA檢測結(jié)果顯示，模型組術(shù)后各時間點脊髓組織中TNF-α、IL-1β和IL-6蛋白含量顯著升高(P<0.05)，與假手術(shù)組比較差異顯著(P<0.05)。治療后電針組、中藥組、針?biāo)幗M脊髓組織中TNF-α、IL-1β和 IL-6蛋白含量明顯降低(P<0.05)，與模型組相比差異顯著(P<0.05)。治療后針?biāo)幗MTNF-α、IL-1β和 IL-6蛋白含量明顯降低(P<0.05)，與電針組、中藥組比較差異顯著(P<0.05)。以上結(jié)果表明，電針組、中藥組、針?biāo)幗M均能抑制CCI模型大鼠脊髓組織TNF-α、IL-1β和 IL-6蛋白表達(dá)，尤以針?biāo)幗M療效更佳。結(jié)論：電針聯(lián)合身痛逐瘀膠囊能夠顯著改善CCI模型大鼠熱縮足反射潛伏期，其作用機(jī)制可能與其抑制脊髓組織中促炎性因子TNF-α、IL-1β和 IL-6表達(dá)上調(diào)有關(guān)。

神經(jīng)病理性疼痛；電針；身痛逐瘀膠囊；促炎性細(xì)胞因子

神經(jīng)病理性疼痛是指由中樞神經(jīng)系統(tǒng)、背根神經(jīng)結(jié)、背根及周圍神經(jīng)在內(nèi)的神經(jīng)系統(tǒng)受到刺激或者損傷而出現(xiàn)的非生理性疼痛[1]。神經(jīng)病理性疼痛是目前臨床慢性疼痛的主要原因之一[2]，因其對患者的生活造成較大的影響，已成為目前臨床較為棘手的疾病之一。神經(jīng)病理性疼痛尚缺乏有效的治療方法，目前可供選擇的常用的治療方法主要包括非甾體類抗炎藥、阿片類止痛藥、抗抑郁藥以及局麻藥等，但多具有止痛效果差，容易反復(fù)以及不良反應(yīng)多等缺點[3]。針灸和中藥治療坐骨神經(jīng)痛因其療效顯著且副作用小，越來越得到臨床廣泛認(rèn)可。筆者自2014年至今采用電針聯(lián)合身痛逐瘀湯治療坐骨神經(jīng)痛患者，取得滿意療效，然而其作用機(jī)制尚不明確。因此，進(jìn)一步揭示電針聯(lián)合身痛逐瘀湯治療神經(jīng)病理性疼痛的作用機(jī)制可為其更好的臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

目前，大量研究發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)生、發(fā)展過程中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)促炎性細(xì)胞因子的釋放可能起重要作用[4]。本研究擬建立神經(jīng)病理性疼痛大鼠模型，觀察電針聯(lián)合身痛逐瘀湯對CCI大鼠熱縮足反射潛伏期以及脊髓組織TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白表達(dá)的影響，探討其可能的作用機(jī)制，為其臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物與分組

選用清潔級健康成年雄性SD大鼠150只，體質(zhì)量(250±30)g，由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗中心提供(動物合格證號SCXK(黑)2008004 )。動物在實驗室適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，采用隨機(jī)數(shù)字表法將實驗大鼠分為5組，即假手術(shù)組、模型組、電針組、中藥組、針?biāo)幗M，每組30只。每組又分為3天、7天、14天三個亞組，每個亞組10只大鼠。

1.2 主要實驗儀器和試劑

熱痛刺激儀(BME-410A型，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所，中國)；恒溫箱(蘇州醫(yī)療設(shè)備廠，中國)；高速離心機(jī)(CS-15R，美國Beckman)；華佗針灸針(蘇州醫(yī)療設(shè)備廠，中國)；電針儀(KWD-801，中國英迪)；TNF-α、IL-1β、IL-6試劑盒(北京中杉公司)；身痛逐瘀膠囊(規(guī)格：0.35 g/粒，黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院，批號 20110513)。

1.3 動物模型制備

按照Bennett的方法[5]建立CCI模型，大鼠稱重后，腹腔注射水合氯醛(0.35 ml/100 g)麻醉，俯臥，用橡皮筋固定四肢于自制的鼠板上，用彎剪刀將左側(cè)后肢大腿部剃毛后用碘伏消毒，在大鼠左側(cè)股骨中上1/3處行縱形切口，鈍性分離局部肌肉，暴露并分離坐骨神經(jīng)主干，選擇4-0號鉻制羊腸線在坐骨神經(jīng)主干部位結(jié)扎4道，兩道之間間隔約1.0 mm，然后逐層縫合皮膚肌肉。假手術(shù)組大鼠暴露坐骨神經(jīng)主干后，不進(jìn)行結(jié)扎，逐層縫合皮膚肌肉。

1.4 治療方法

假手術(shù)組：術(shù)后大鼠常規(guī)飼養(yǎng)，直至相應(yīng)時間點實驗結(jié)束，其余未經(jīng)任何治療。模型組：術(shù)后大鼠常規(guī)飼養(yǎng)，直至相應(yīng)時間點實驗結(jié)束，其余未經(jīng)任何治療。電針組：選穴環(huán)跳、陽陵泉(損傷側(cè))；依據(jù)大鼠穴位圖譜確定環(huán)跳穴及陽陵泉穴定位，針具和穴位局部皮膚常規(guī)消毒后，選用華佗牌一次性針灸針(0.25 mm×25 mm)，快速進(jìn)針，同側(cè)環(huán)跳和陽陵泉穴接電針儀，上正下負(fù)，選擇疏密波[6]，頻率為2 Hz/100 Hz，電流強(qiáng)度以局部肌肉輕微顫動為度，每日1次，每次留針30 min。中藥組[7]：取身痛逐瘀膠囊囊心藥粉1.64 g加生理鹽水溶解為100 ml，制成身痛逐瘀膠囊混懸液，灌胃給藥，給藥容積為15 ml/kg，每日1次，連續(xù)治療相應(yīng)療程。針?biāo)幗M：給予電針和中藥聯(lián)合治療，方法及療程同上。

保證動物飼養(yǎng)室溫度為21～24℃，室內(nèi)濕度50%～70%， 12 h交替照明，自由進(jìn)食和飲水。各組大鼠分籠飼養(yǎng)，每籠4～5只大鼠。各組分別于術(shù)后3 d，7 d，14 d進(jìn)行行為學(xué)檢測及取材。

1.5 觀察指標(biāo)及檢測方法

1.5.1 熱縮足反射潛伏期(thermal withdrawal latency,TWL)的測定[8]

將透明有機(jī)玻璃箱放置在一個玻璃板上，檢測前30 min，將大鼠置于玻璃箱內(nèi)適應(yīng)環(huán)境和溫度。保持室溫在(25±1)℃，待大鼠適應(yīng)30 min后，用BME-410A型熱輻射刺激儀照射大鼠足底，記錄熱輻射刺激儀照射開始時間，再記錄大鼠出現(xiàn)抬腿回避的時間，該時間即為熱縮足反射潛伏期，兩次照射間隔25 s后再進(jìn)行下一次檢測，每只大鼠檢測3次，兩次照射間隔2 min，取其平均值。

1.5.2 動物取材及檢測

各組大鼠分別在術(shù)后3天、7天和14天行為學(xué)檢測后，用10%水合氯醛腹腔麻醉(3.5 mg/kg)，迅速開胸，暴露心臟，將注射器針頭快速插入左心室，固定針頭后緩慢注入生理鹽水，直至清澈透亮的液體自右心耳流出，接著用注射器緩慢注入4%多聚甲醛溶液，直至大鼠出現(xiàn)四肢抽搐，皮膚、肺臟、肝臟及眼瞼變白等表現(xiàn)，迅速斷頭，取出大鼠腰膨大部位的脊髓(相當(dāng)于L4-L6脊髓)，長度大約1.5 cm，迅速置于液氮中，-80℃保存?zhèn)溆茫拷M取材6只。

ELISA法檢測CCI大鼠脊髓組織TNF-α、IL-1β、IL-6的表達(dá)：取出保存?zhèn)溆玫募顾杞M織，放置于預(yù)先配置好的組織勻漿液中，用勻漿器在4℃下勻漿，然后用離心機(jī)離心，20 000×g離心30 min，取出上清液，按照ELISA試劑盒說明書操作，檢測TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白的含量。

1.6 統(tǒng)計學(xué)處理

2 實驗結(jié)果

2.1 熱縮足反射潛伏期檢測結(jié)果

結(jié)果表明，模型組大鼠TWL術(shù)后3天即達(dá)到最低值，此后稍有延長，但仍顯著低于術(shù)前，術(shù)后各時間點與假手術(shù)組相比具有顯著差異(P<0.05)；電針組、中藥組、針?biāo)幗MCCI大鼠熱縮足反射潛伏期有所延長，各時間點與模型組相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。針?biāo)幗M大鼠機(jī)械縮足反射閾值顯著上升，與電針組、中藥組相比，療效更加顯著(P<0.05)。詳見表1。

表1 各組CCI大鼠熱縮足反射潛伏期檢測結(jié)果

注:與假手術(shù)組比較，*P<0.05；與模型組比較，△P<0.05；與電針組比較，#P<0.05;與中藥組比較，○P<0.05。

2.2 各組大鼠脊髓組織TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白的表達(dá)

2.2.1 各組大鼠脊髓組織TNF-α的表達(dá)

結(jié)果顯示，模型組術(shù)后各時間點脊髓組織中TNF-α蛋白含量顯著升高(P<0.05)，術(shù)后7天時達(dá)到表達(dá)高峰，與假手術(shù)組比較差異顯著(P<0.05)。治療后電針組、中藥組、針?biāo)幗M脊髓組織中TNF-α蛋白含量明顯降低(P<0.05)，與模型組相比差異顯著(P<0.05)。治療后針?biāo)幗MTNF-α蛋白含量明顯降低(P<0.05)，與電針組、中藥組比較差異顯著(P<0.05)。以上結(jié)果表明，電針組、中藥組、針?biāo)幗M均能抑制脊髓組織TNF-α蛋白表達(dá)，但針?biāo)幗M的治療優(yōu)勢更加明顯，療效顯著。詳見表2。

表2 各組CCI大鼠脊髓組織TNF-α蛋白表達(dá)

注:與假手術(shù)組比較，*P<0.05；與模型組比較，△P<0.05；與電針組比較，#P<0.05;與中藥組比較,○P<0.05。

2.2.2 各組大鼠脊髓組織IL-1β的表達(dá)

結(jié)果顯示，模型組術(shù)后各時間點脊髓組織中IL-1β蛋白含量顯著升高(P<0.05)，于術(shù)后7天達(dá)到高峰，與假手術(shù)組比較差異顯著(P<0.05)。治療后電針組、中藥組、針?biāo)幗M脊髓組織中IL-1β蛋白含量明顯降低(P<0.05)，與模型組相比差異顯著(P<0.05)。治療后針?biāo)幗MIL-1β蛋白含量明顯降低(P<0.05)，與電針組、中藥組比較差異顯著(P<0.05)。以上結(jié)果表明，電針組、中藥組、針?biāo)幗M均能抑制脊髓組織IL-1β蛋白表達(dá)，尤以針?biāo)幗M療效更加顯著。詳見表3。

表3 各組CCI大鼠脊髓組織IL-1β蛋白表達(dá)

注:與假手術(shù)組比較，*P<0.05；與模型組比較，△P<0.05；與針刺組比較，#P<0.05;與中藥組比較，○P<0.05。

2.2.3 各組大鼠脊髓組織IL-6的表達(dá)

結(jié)果顯示，模型組術(shù)后各時間點脊髓組織中IL-6蛋白含量顯著升高(P<0.05)，一直持續(xù)至術(shù)后14天，與假手術(shù)組比較差異顯著(P<0.05)。治療后電針組、中藥組、針?biāo)幗M脊髓組織中IL-6蛋白含量明顯降低(P<0.05)，與模型組相比差異顯著(P<0.05)。治療后針?biāo)幗MIL-6蛋白含量明顯降低(P<0.05)，與電針組、中藥組比較差異顯著(P<0.05)。以上結(jié)果表明，電針組、中藥組、針?biāo)幗M均能抑制脊髓組織IL-6蛋白表達(dá)，尤以針?biāo)幗M療效更佳。詳見表4。

表4 各組CCI大鼠脊髓組織IL-6蛋白表達(dá)

注:與假手術(shù)組比較，*P<0.05；與模型組比較，△P<0.05；與針刺組比較，#P<0.05;與中藥組比較,○P<0.05。

3 討論

坐骨神經(jīng)痛是臨床常見的神經(jīng)病理性疼痛之一，中醫(yī)學(xué)將坐骨神經(jīng)痛歸屬于“痹癥”和“腰腿痛”的范疇[9-10]。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，該病主要累及足太陽和足少陽兩經(jīng)，因此臨床治療多遵循循經(jīng)取穴的原則，以足太陽和足少陽兩經(jīng)經(jīng)穴為主。本研究選擇上述兩經(jīng)的環(huán)跳和陽陵泉為主穴，并給予電刺激治療?，F(xiàn)代研究表明，電刺激具有較好的抗炎鎮(zhèn)痛作用，其中低頻率的電刺激能夠引起腦垂體釋放β內(nèi)啡肽和腦啡肽增多，兩者可以分別作用于μ和δ受體而起到鎮(zhèn)痛作用，但作用較為緩慢持久；而高頻率的電刺激能夠引起脊髓釋放強(qiáng)啡肽增多，從而作用于κ受體，產(chǎn)生即時的鎮(zhèn)痛作用[11]，因此本研究選擇疏密波治療，以最大程度的改善疼痛癥狀。既往研究也發(fā)現(xiàn)[6,12]，電針疏密波能夠顯著上調(diào)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型大鼠足踝關(guān)節(jié)滑膜內(nèi)HSP70蛋白表達(dá)，達(dá)到減輕局部炎癥反應(yīng)、緩解疼痛的作用，療效優(yōu)于疏波和密波。身痛逐瘀膠囊是清代名醫(yī)王清任在《醫(yī)林改錯》中所載的身痛逐瘀湯制成的成方制劑，方中川芎、桃仁、當(dāng)歸和紅花具有活血化瘀之功效；地龍、牛膝、秦艽、羌活和五靈脂具有活血化瘀并能強(qiáng)筋止痛的作用；香附具有調(diào)經(jīng)活血、理氣疏肝之效；沒藥能夠消腫生肌并活血止痛；甘草調(diào)和諸藥，并能清熱解毒、祛痰止痛。諸藥合用，共奏活血化瘀、通絡(luò)止痛之功效[13]?，F(xiàn)代研究表明，身痛逐瘀湯能夠顯著下調(diào)冰醋酸和福爾馬林誘導(dǎo)的疼痛小鼠血清中MDA、NO以及PGE2的水平，上調(diào)SOD的水平，從而發(fā)揮中樞和外周鎮(zhèn)痛作用[7]。

研究表明，疼痛與神經(jīng)免疫功能密切相關(guān)，而促炎細(xì)胞因子以及趨化因子等則會作為慢性病理性疼痛之間的橋梁作用，對神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)展發(fā)揮重要的作用[14]。以TNF-α、IL-1β和 IL-6為代表的促炎細(xì)胞因子越來越被認(rèn)為與神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)生關(guān)系密切。臨床研究表明[15-16]，骨關(guān)節(jié)炎性痛患者疼痛程度和血漿中促炎性細(xì)胞因子的水平成正比，在復(fù)合性局部疼痛綜合征患者中也得出類似研究結(jié)果。TNF-α能夠直接和其受體結(jié)合，從而觸發(fā)一系列復(fù)雜的反應(yīng)，包括激活痛覺傳入纖維相關(guān)下游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路以及受體和離子通道等，誘發(fā)以緩激肽和神經(jīng)營養(yǎng)因子為代表的其他細(xì)胞因子產(chǎn)生和釋放，增強(qiáng)突觸對刺激的敏感性[17-18]。IL-1β是由活化的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，為IL-1主要成員之一，有研究表明，IL-1β參與了疼痛的發(fā)生。IL-6是另一種主要參與細(xì)胞增殖和分化等功能的多潛能促炎性細(xì)胞因子，能夠調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)與免疫系統(tǒng)的功能，研究表明其與神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)生具有極大的相關(guān)性[19]。本實驗研究結(jié)果證實，模型組術(shù)后各時間點脊髓組織中TNF-α、IL-1β和 IL-6蛋白含量顯著升高(P<0.05)，與假手術(shù)組比較差異顯著(P<0.05)。治療后電針組、中藥組、針?biāo)幗M脊髓組織中TNF-α、IL-1β和 IL-6蛋白含量明顯降低(P<0.05)，與模型組相比差異顯著(P<0.05)。治療后針?biāo)幗MTNF-α、IL-1β和 IL-6蛋白含量明顯降低(P<0.05)，與電針組、中藥組比較差異顯著(P<0.05)。以上結(jié)果表明，電針組、中藥組、針?biāo)幗M均能抑制CCI模型大鼠脊髓組織TNF-α、IL-1β和 IL-6蛋白表達(dá)，尤以針?biāo)幗M療效更佳。

綜上所述，電針聯(lián)合身痛逐瘀膠囊能夠顯著改善CCI模型大鼠熱縮足反射潛伏期，其作用機(jī)制可能與其抑制脊髓組織中促炎性因子TNF-α、IL-1β和 IL-6表達(dá)上調(diào)有關(guān)。

[1] 熊青明,王漢兵,楊承祥,等.神經(jīng)肽與神經(jīng)病理性疼痛研究新進(jìn)展[J].中國疼痛醫(yī)學(xué)雜志,2016,22(2):137-140.

[2] 趙佳麗,陳秋紅,李紅娜,等.神經(jīng)病理性疼痛的藥物治療進(jìn)展[J].藥學(xué)實踐雜志,2016,34(4):309-312.

[3] 高崇榮,盧振和.神經(jīng)病理性疼痛治療原則與策略[J].中國疼痛醫(yī)學(xué)雜志,2014,20(3):129-132.

[4] 葉永賢,林洪,沙漠,等.神經(jīng)病理性疼痛相關(guān)分子機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國疼痛醫(yī)學(xué)雜志,2014,20(3):177-180.

[5] Bennett GJ,Xie YK.A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of painsensation like those seen in man[J].Pain,1988,33(1):87-107.

[6] 金弘,劉婷婷,陳英華,等.電針的不同波形對實驗性大鼠急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎滑膜組織中HSP70表達(dá)的影響[J].針灸臨床雜志,2012,28(7):64-66.

[7] 阮洪生,劉樹民.身痛逐瘀膠囊對醋酸致痛小鼠血清中NO、SOD、MDA、PGE2的影響[J].中藥藥理與臨床,2013,29(5):6-8.

[8] Hargreaves K.A new and sensitive method for measuring tliermal nociception in cutaneous hyperalgesia[J].Pain,1988,32(1):77-88.

[9] 吳曦,晉松,陳敏,等.電針為主治療腰椎間盤突出所致坐骨神經(jīng)痛:多中心隨機(jī)對照試驗[J].成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2015,38(2):43-47.

[10] 葉曉春,趙普,王亮,等.電針腰椎夾脊穴治療根性坐骨神經(jīng)痛的臨床療效觀察[J].中醫(yī)藥信息,2015,32(1):108-111.

[11] Han JS,Chen XH,Sun SL,et al.Effect of low- and high-frequency TENS on Met-enkephalin-Arg-Phe and dynorphin A immunoreactivity in human lumbar CSF[J].Pain,1991,47(3):295-298.

[12] 金弘，劉婷婷，劉樹民，等.電針聯(lián)合身痛逐瘀膠囊對CCI模型大鼠疼痛及脊髓組織GFAP表達(dá)的影響[J].中醫(yī)藥學(xué)報,2017,45(2):33-36.

[13] 金杰.推拿法結(jié)合身痛祛瘀湯治療氣滯血瘀型腰痛效果觀察[J].陜西中醫(yī),2017,38(1):105-106.

[14] Backonja MM,Coe CL,Muller DA,et al.Altered cytokine levels in the blood and cerebrospinal fluid of chronic pain patients[J].J Neuroimmunol,2008,195(1-2):157-163．

[15] Geiss A,Varadi E,Steinbach K,et al.Psychoneuroimmunological correlates of persisting sciatic pain in patients who underwent discectomy[J].Neurosci Lett,1997,237 (2-3):65-68.

[16] Kunz-Ebrecht SR,Mohamed-Ali V,Feldman PJ,et al.Cortisol responses to mild psychological stress are inversely associated with proinflammatory cytokines[J].Brain Behav Immun,2003,17(5):373-383.

[17] Tak PP,Smeets TJ,Daha MR,et al. Analysis of the synovial cell infiltrate in early rheumatoid synovial tissue in relation to local disease activity[J].Arthritis Rheum,1997,40(2):217-225.

[18] Lindenlaub T,Sommer C.Cytokines in sural nerve biopsies from inflammatory and non-inflammatory neuropathies [J].Acta Neuropathol,2003,105(6):593-602.

[19] Arruda JL,Sweitzer S,Rutkowski MD,et al.Intrathecal anti-IL-6 antibody and IgG attenuates peripheral nerve injury-induced mechanical allodynia in the rat: possible immune modulation in neuropathic pain[J].Brain Res,2000,879 (1-2):216-225.

Effect of Electroacupuncture Combined with Shentong Zhuyu Capsule on Expression of TNF-α, IL-1β and IL-6 in Spinal Cord Tissue of CCI Rats

JIN Hong1，LIU Ting-ting2*，LIU Shu-min2，CHEN Ying-hua1，SUN Xiao-wei1，PIAO Shen-ai1，ZHU Peng-yu3

(1.The First Affiliated Hospital of Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, China；2.Heilongjiang University of Chinese Medicine,Harbin 150040, China；3.The Second Affiliated Hospital of Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150001, China)

Objective: To observe the effect of electroacupuncture combined with Shentong Zhuyu capsule on the latent period of heat shock reflex and the expression of TNF-α, IL-1β and IL-6 in CCI rats, and to explore the mechanism. Methods: Adult SD rats were randomly divided into sham operation group, model group, electroacupuncture group, traditional Chinese medicine group and acupuncture group. Each group was divided into three subgroups: 3 days, 7 days and 14 days with 10 rats in each subgroup. According to Bennett method establish CCI rat models,and electroacupuncture group

Sunshang Cehuan Tiao, Yanglingquan electroacupuncture treatment, once a day with 30 min. Chinese medicine group received Shentong Zhuyu capsules (1.64 g/kg), administered by intragastric administration,with volume of 15ml/kg, once a day. Acupuncture and medicine group received acupuncture and traditional Chinese medicine treatment,with the same method and course above. Sham operation group and model group were given equal volume of saline. The expressions of TNF-α, IL-1β and IL-6 protein in the spinal cord of CCI model rats were detected by ELISA. The expressions of TNF-α, IL-1β and IL-6 protein in the spinal cord of CCI model rats were detected by ELISA. Results: The acupuncture and medicine group was significantly lower than the sham operation group (P<0.05). The model group was significantly lower than the sham operation group (P<0.05). The latency of heat shock reflex in CCI rats was significantly higher than that in model group (P<0.05) and the effect of acupuncture and medicine group was significantly superior to that of acupuncture group and traditional Chinese medicine group (P<0.05). The levels of TNF-α, IL-1β and IL-6 in the spinal cord tissue were significantly increased (P<0.05), and there was a significant difference between two groups (P<0.05). The levels of TNF-α, IL-1β and IL-6 in spinal cord tissue of acupuncture and medicine group, traditional Chinese medicine group and acupuncture and medicine group were significantly lower than those in model group (P<0.05). The levels of TNF-α, IL-1β and IL-6 in the acupuncture and medicine group were significantly lower than those in the acupuncture group and the traditional Chinese medicine group (P<0.05). The results showed that acupuncture group, traditional Chinese medicine group and acupuncture and medicine group could inhibit the expressions of TNF-α, IL-1β and IL-6 protein in spinal cord of CCI rats, especially in acupuncture and medicine group.Conclusion: Electroacupuncture combined with Shentong Zhuyu capsule can significantly improve the latency of heat shock reflex in CCI model rats, and its mechanism may be related to inhibiting the upregulation of proinflammatory cytokines of TNF-α, IL-1β and IL-6 in spinal cord tissue.

Neuropathic pain; Electroacupuncture; Shentong Zhuyu capsule; Proinflammatory cytokines

黑龍江省自然科學(xué)基金項目(No.H2015034);黑龍江省博士后基金項目(No.LBH-Z12264);黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)科研基金項目(No.035143)

金弘(1978-),男，副主任醫(yī)師，主要從事針刺對各種疼痛性疾病的臨床與機(jī)理研究工作。

劉婷婷*(1979-),女，副教授，主要從事針灸治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的研究工作。

2016-10-20

R246

A

1002-2406(2017)03-0078-05

修回日期：2016-11-10