當(dāng)歸水煎液對(duì)刀豆蛋白A誘導(dǎo)急性肝損傷小鼠的保護(hù)作用?

陳 芯，馬雅鑾，李 蕊，朱鏐孌，王憲波，張劍平△

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，北京 100029；2.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究所，北京 100700；3.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院傳染病研究所，北京 100015；4.新發(fā)突發(fā)傳染病研究北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 北京 100015; 5.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合中心，北京 100015)

【實(shí)驗(yàn)研究】

當(dāng)歸水煎液對(duì)刀豆蛋白A誘導(dǎo)急性肝損傷小鼠的保護(hù)作用?

陳 芯1，馬雅鑾2，李 蕊3,4，朱鏐孌3,4，王憲波5，張劍平3,4△

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，北京 100029；2.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究所，北京 100700；3.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院傳染病研究所，北京 100015；4.新發(fā)突發(fā)傳染病研究北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 北京 100015; 5.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合中心，北京 100015)

目的：研究當(dāng)歸水煎液對(duì)刀豆蛋白A(concanavalin A, ConA)誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用。方法：6～8周齡C57BL/6雄性小鼠，采用目?jī)?nèi)眥靜脈注射ConA方法制備急性肝損傷小鼠致死模型，同時(shí)給予當(dāng)歸水煎液口服灌胃，觀察小鼠生存率；制備急性肝損傷非致死模型，10 h后檢測(cè)血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)水平并進(jìn)行病理染色，3 h、10 h后采用流式CBA(Cytometric Bead Array, CBA)方法，檢測(cè)血清細(xì)胞因子水平，造模3 h后采用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)肝臟誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)mRNA表達(dá)水平，造模6 h后檢測(cè)脾臟IFN-γmRNA表達(dá)水平。結(jié)果：與ConA模型組比較，給予當(dāng)歸水煎液治療后生存率顯著升高，肝組織病理損傷減輕，血清ALT、AST水平降低。當(dāng)歸水煎液治療后血清炎性細(xì)胞因子IL-12、IL-6和IFN-γ降低，肝臟iNOS mRNA表達(dá)水平降低，但對(duì)脾臟IFN-γ mRNA表達(dá)水平無明顯作用。結(jié)論：當(dāng)歸水煎液對(duì)ConA誘導(dǎo)急性肝損傷小鼠具有抗炎和保肝作用。

當(dāng)歸水煎液；刀豆蛋白A；急性肝損傷；細(xì)胞因子

急性肝損傷是人類常見疾病之一。急性肝損傷模型是現(xiàn)代研究肝臟疾病機(jī)理的重要工具，其模型種類較多，主要有四氯化碳、D-半乳糖胺、由卡介苗加脂多糖、ConA等[1]。目前應(yīng)用最廣泛的是由Tiegs等[2]在1992年應(yīng)用ConA誘導(dǎo)的小鼠特異性肝損傷模型。該模型是由多種免疫細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，它能較好地模擬人類自身免疫性肝炎、病毒性肝炎等免疫性肝損傷的特征和病理機(jī)制。該模型在一定范圍內(nèi)呈劑量依賴性，在0.15 mg/kg至30 mg/kg范圍內(nèi)，血清轉(zhuǎn)氨酶水平隨劑量的增加而升高，用量大于20 mg/kg以上時(shí)8 h有小鼠死亡。肝組織學(xué)顯示，大量淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤(rùn)，并出現(xiàn)不同程度的壞死，同時(shí)分泌大量炎性細(xì)胞因子如TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-12等[3-4]。

當(dāng)歸(Angelica sinensis)為傘形科當(dāng)歸屬植物的干燥根，具有補(bǔ)血調(diào)經(jīng)、活血止痛、潤(rùn)腸通便之功效，多用于治療血虛諸證、月經(jīng)不調(diào)、跌打損傷、風(fēng)濕痹痛、腸燥便秘等病癥[5-7]。近年來，隨著對(duì)當(dāng)歸的深入研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)歸對(duì)四氯化碳所致的動(dòng)物藥物性急性肝損傷具有保護(hù)作用[8]。孫麗霞[9]等發(fā)現(xiàn)，當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)免疫性肝損傷大鼠模型具有保護(hù)作用，其機(jī)制可能與抑制過氧化物反應(yīng)及抗自由基損傷有關(guān)。本課題組在前期工作中采用治療肝損傷的經(jīng)驗(yàn)方解毒涼血方，發(fā)現(xiàn)其能顯著提高ConA小鼠急性肝損傷模型的生存率，降低血清轉(zhuǎn)氨酶水平。由于當(dāng)歸是解毒涼血方的主要單藥，因此研采用ConA小鼠急性肝損傷模型給予當(dāng)歸水煎液灌胃治療，通過觀察小鼠生存率，檢測(cè)肝功能水平和炎性細(xì)胞因子分泌，利用現(xiàn)代免疫學(xué)理論，探討當(dāng)歸水煎液對(duì)ConA急性肝損傷小鼠的保護(hù)作用和機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 中藥的制備

中藥的標(biāo)準(zhǔn)劑量參考全國(guó)統(tǒng)編《中藥學(xué)》第2版[10]教材。小鼠用藥劑量以70 kg成人的體表面積換算，小鼠用藥量是成人每公斤體質(zhì)量的9.1倍，本實(shí)驗(yàn)小鼠用藥量按成人每公斤體質(zhì)量的10倍換算[11]。當(dāng)歸6 g，購(gòu)自北京同仁堂前門總店，按傳統(tǒng)方法將當(dāng)歸用蒸餾水浸泡，武火煮沸，文火煎2次，去渣合并濃縮至75 ml，當(dāng)歸水煎液濃度為0.08 g/ml分裝，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試劑與主要儀器

小鼠細(xì)胞因子CBA試劑盒購(gòu)于美國(guó)BD公司，ALT、AST檢測(cè)試劑盒購(gòu)于四川麥克生物科技股份有限公司，720全自動(dòng)生化分析儀購(gòu)于日本日立公司，F(xiàn)ACS Callibur流式細(xì)胞儀購(gòu)于美國(guó)BD公司。RNA提取試劑及實(shí)時(shí)熒光定量PCR探針GAPDH、IFN-γ、iNOS等均購(gòu)于Life Technology公司，逆轉(zhuǎn)錄試劑盒和PCR試劑盒購(gòu)于ABI公司，ConA購(gòu)于SIGMA公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

野生型C57BL/6雄性小鼠，6～8周齡，體質(zhì)量(20±2)g，購(gòu)自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所(許可證號(hào)SCXK(京)2014-0004)，并按照動(dòng)物保護(hù)相關(guān)法規(guī)飼養(yǎng)于該研究所SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)室。

1.4 模型制備

無菌磷酸鹽緩沖液(PBS)配制6 mg/mL ConA儲(chǔ)液。將小鼠吸入麻醉10 s，內(nèi)眥靜脈注射100 μL/只，ConA 30 mg/kg劑量制備急性肝衰竭小鼠致死模型，15 mg/kg劑量制備急性肝損傷小鼠非致死模型。主要分為3部分，一是生存率。采用致死模型，56只小鼠隨機(jī)分為2組各28只，ConA模型組和當(dāng)歸水煎液組造模的同時(shí)分別給予250 μL灌胃雙蒸水或當(dāng)歸水煎液1次；二是肝功能檢測(cè)。采用非致死模型，24只小鼠隨機(jī)分為正常組、ConA模型組、當(dāng)歸水煎液組各8只，造模10 h后取外周血；三是細(xì)胞因子檢測(cè)。造模方法同上，18只小鼠隨機(jī)分為3組各6只，造模后3 h、10 h取外周血。肝臟iNOS、脾臟IFN-γmRNA表達(dá)檢測(cè)，造模方法同上，于造模3 h后取肝臟、造模后10 h取脾臟。

1.5 生存率

從模型小鼠造模、灌胃后計(jì)時(shí)開始，至小鼠死亡計(jì)時(shí)結(jié)束，連續(xù)觀察96 h。注射造模藥物后96 h未死亡的小鼠計(jì)為生存，記錄動(dòng)物死亡時(shí)間點(diǎn)，并繪制生存曲線。

1.6 肝功能檢測(cè)

制備ConA非致死模型后10 h麻醉小鼠取外周血，2000 r/min離心15 min并分離血清，采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清ALT和AST水平。

1.7 病理染色

制備ConA非致死模型10 h后取肝臟，置于10%中性緩沖福爾馬林固定液中，經(jīng)脫水、包埋、切片、鋪片、HE染色、封片干燥后用光學(xué)顯微鏡觀察。

1.8 細(xì)胞因子檢測(cè)

制備ConA非致死模型后3 h、10 h分別麻醉小鼠取外周血，2000 r/min離心15 min分離血清，細(xì)胞因子采用小鼠細(xì)胞因子CBA試劑盒測(cè)定，按照說明書進(jìn)行流式檢測(cè)。

1.9 實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)

制備ConA非致死模型，3 h后分離肝臟，TRIzol法提取總RNA，按照試劑盒說明書將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，采用實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測(cè)肝細(xì)胞iNOS表達(dá)水平，使用ABI SDS7500軟件分析結(jié)果。造模后10 h分離脾臟，檢測(cè)IFN-γ表達(dá)水平。

1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布的計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，生存曲線采用Kaplan-Meier統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 當(dāng)歸水煎液對(duì)急性肝衰竭小鼠生存率影響

圖1顯示，造模后觀察96 h生存率并持續(xù)觀察小鼠狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)ConA模型與對(duì)正常小鼠比較出現(xiàn)活動(dòng)減少、呼吸加快、皮膚發(fā)涼、飲食減少、飲水減少等病態(tài)特征。造模4～6 h后2組小鼠均開始死亡，24 h內(nèi)死亡較集中。但當(dāng)歸水煎液組的小鼠明顯比模型組死亡緩慢，之后死亡頻率減緩，96 h后趨于穩(wěn)定，且當(dāng)歸水煎液組存活的小鼠狀態(tài)明顯好于模型組。經(jīng)Kaplan-Meier統(tǒng)計(jì)分析，當(dāng)歸水煎液組與模型組比較(P=0.020)，ConA模型組的生存率為21%，當(dāng)歸水煎液組生存率為52%，提示當(dāng)歸水煎液可提高ConA誘導(dǎo)急性肝損傷小鼠的生存率。

圖1 當(dāng)歸水煎液對(duì)ConA急性肝衰竭小鼠生存率的影響注：*P<0.05

2.2 當(dāng)歸水煎液對(duì)急性肝損傷小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶的影響

表1顯示，為進(jìn)一步評(píng)價(jià)當(dāng)歸水煎液的療效，我們檢測(cè)各組血清轉(zhuǎn)氨酶的水平。ConA模型組與正常組比較ALT顯著升高(P=0.0005)，當(dāng)歸水煎液組與ConA模型組比較ALT顯著降低(P=0.0068)；ConA模型組與正常組比較AST顯著升高(P=0.0004)，當(dāng)歸水煎液組與ConA模型組比較AST顯著降低(P=0.0204)，提示當(dāng)歸水煎液能減輕小鼠肝細(xì)胞損傷。

表1 當(dāng)歸水煎液對(duì)ConA急性肝損傷小鼠血清ALT、AST水平的影響

注：**P<0.001,*P<0.05

2.3 當(dāng)歸水煎液對(duì)肝臟組織的影響

圖2顯示，正常組小鼠在光學(xué)顯微鏡下觀察可見，肝臟肝小葉結(jié)構(gòu)完整清晰，肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)完好，大小均勻排列整齊，有明顯分界，無炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，未見腫脹及壞死，染色正常。ConA模型組小鼠肝臟大量白細(xì)胞浸潤(rùn)，肝細(xì)胞形成大片壞死灶，當(dāng)歸水煎液組小鼠肝臟白細(xì)胞浸潤(rùn)減少，壞死灶面積減小，提示當(dāng)歸水煎液可減輕小鼠肝組織損傷。

圖2 當(dāng)歸水煎液對(duì)ConA急性肝損傷小鼠肝組織的影響(標(biāo)尺50 μm, HE×200)

2.4 當(dāng)歸水煎液對(duì)炎性細(xì)胞因子分泌的影響

表2顯示，由于大量炎性細(xì)胞因子分泌ConA誘導(dǎo)急性肝損傷的重要機(jī)制，因此我們檢測(cè)當(dāng)歸水煎液對(duì)多種炎性細(xì)胞因子分泌的影響。造模后3 h、10 h取外周血，分離血清并檢測(cè)細(xì)胞因子水平。模型組與正常組比較，3 h血清中IL-12、IL-6升高，10 h 血清中IFN-γ升高。當(dāng)歸水煎液組與ConA模型組比較，3 h血清中IL-12、IL-6炎性細(xì)胞因子顯著下降(P=0.049,P=0.03)，10 h血清中IFN-γ炎性細(xì)胞因子顯著下降(P=0.0045)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3 h血清中TNF-α、MCP-1炎性細(xì)胞因子雖然下降，但差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，提示當(dāng)歸水煎液能有效降低早期血清IL-6、IL-12及晚期IFN-γ水平。

表2 當(dāng)歸水煎液對(duì)急性肝損傷小鼠炎性細(xì)胞因子分泌的影響

注：**P<0.01;*P<0.05

2.5 當(dāng)歸水煎液對(duì)脾臟IFN-γmRNA水平表達(dá)的影響

圖3顯示，由于CBA結(jié)果顯示當(dāng)歸水煎液能降低晚期血清中IFN-γ分泌水平，故造模10 h后取脾臟提取mRNA，實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)IFN-γ表達(dá)，發(fā)現(xiàn)模型組與正常組比較，脾臟IFN-γ mRNA表達(dá)升高(P=0.014)，當(dāng)歸水煎液不能降低脾臟IFN-γ mRNA的表達(dá)(P=0.45)，提示當(dāng)歸的抗炎作用不是直接作用于淋巴細(xì)胞。

圖3 當(dāng)歸水煎液對(duì)脾臟IFN-γmRNA表達(dá)的影響 注：*P<0.05

2.6 當(dāng)歸水煎液對(duì)肝臟iNOS mRNA水平表達(dá)的影響

圖4顯示，由于當(dāng)歸水煎液的作用靶點(diǎn)不是淋巴細(xì)胞，因此我們驗(yàn)證藥物的作用是否作用于天然免疫細(xì)胞。iNOS與機(jī)體炎癥損傷程度呈正相關(guān)，并且給CBA結(jié)果顯示，當(dāng)歸水煎液能降低早期血清中多種細(xì)胞因子水平，故造模3 h后取肝臟提取mRNA，實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)iNOS表達(dá)。ConA模型組與正常組比較，肝臟iNOS表達(dá)升高(P=0.0023)；與ConA模型組比較，當(dāng)歸水煎液組可降低肝臟iNOS表達(dá)(P=0.038)，提示當(dāng)歸水煎液抑制巨噬細(xì)胞活性。

圖4 當(dāng)歸水煎液對(duì)肝臟iNOS mRNA表達(dá)的影響 注：**P<0.05, *P<0.05

3 討論

急性肝損傷是由各種肝臟疾病所導(dǎo)致的病變結(jié)果[12]，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜、病因眾多，但以免疫性損傷較為多見[13-14]。免疫性肝損傷的共同機(jī)制主要有兩方面，一方面T淋巴細(xì)胞增殖活化，并被募集浸潤(rùn)肝臟，導(dǎo)致肝損傷；另一方面多種免疫細(xì)胞釋放大量炎性細(xì)胞因子，加劇肝細(xì)胞損傷[15]。

中醫(yī)認(rèn)為肝損傷屬于“脅痛”“黃疸”“積聚”“疫毒”等范疇，其病因主要有濕、熱、瘀、毒。歷代醫(yī)家對(duì)肝病治法甚多，大致可歸納出肝病治療原則為疏通氣血、清熱解毒，故活血行氣化瘀、清熱解毒類中藥是臨床治療肝損傷的主要藥物[16]。當(dāng)歸入肝經(jīng)，具有行氣活血的作用，是臨床常用活血、調(diào)經(jīng)止痛、抗炎藥。本研究結(jié)果表明，當(dāng)歸水煎液可提高ConA導(dǎo)致急性肝損傷小鼠的生存率，降低血清ALT、AST水平，改善肝組織病理損傷和白細(xì)胞浸潤(rùn)，說明其具有保肝作用。

本研究在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步探討了當(dāng)歸水煎液的保肝作用機(jī)理。當(dāng)歸水煎液能降低血清炎性細(xì)胞因子IL-12、IL-6、IFN-γ水平，IL-12等促炎性細(xì)胞因子在ConA誘導(dǎo)的肝損傷中發(fā)揮關(guān)鍵作用。因此本研究結(jié)果提示，當(dāng)歸水煎液通過抑制炎癥反應(yīng)發(fā)揮保肝作用。IL-12主要來源于單核/巨噬細(xì)胞，能進(jìn)一步啟動(dòng)Th1免疫應(yīng)答，同時(shí)促進(jìn)分泌IFN-γ，進(jìn)而炎癥損傷開始循環(huán)放大。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示，給予小鼠IL-12抗體干預(yù)后，能顯著降低ConA誘導(dǎo)小鼠肝損傷血清IFN-γ、IL-6等細(xì)胞因子水平[17]，因此IL-12是介導(dǎo)ConA模型炎癥損傷的關(guān)鍵細(xì)胞因子。IL-6主要由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生并參與免疫防御過程，同時(shí)可介導(dǎo)炎癥反應(yīng)。IL-6在ConA模型中發(fā)揮雙向作用，在肝損傷早期發(fā)揮保護(hù)作用，晚期發(fā)揮促炎作用[18]。本研究中，給予當(dāng)歸水煎液治療后3 h，血清IL-12和IL-6降低，說明當(dāng)歸水煎液在早期降低炎性細(xì)胞因子的分泌，抑制炎癥反應(yīng)的循環(huán)放大。

IFN-γ主要由活化的T細(xì)胞產(chǎn)生，IL-12可誘導(dǎo)其表達(dá)，具有活化單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞并促進(jìn)其分泌IL-1、IL-6、TNF-α等作用，還能活化中性粒細(xì)胞，刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞和白細(xì)胞產(chǎn)生黏附分子。而在ConA誘導(dǎo)的肝損傷模型中，脾中的T淋巴細(xì)胞增殖活化成為效應(yīng)T細(xì)胞，經(jīng)趨化因子和黏附分子的作用，被肝竇內(nèi)皮細(xì)胞募集至肝竇和肝小葉部位[19-20]，浸潤(rùn)的效應(yīng)T細(xì)胞持續(xù)向Th1型CD4+T細(xì)胞分化，分泌IFN-γ等細(xì)胞因子，啟動(dòng)Th1免疫應(yīng)答[19-21]。文獻(xiàn)表明，與野生型小鼠比較，IFN-γ基因敲除小鼠給予ConA注射后生存率明顯升高[22]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與模型組比較，當(dāng)歸水煎液組雖然能降低血清IFN-γ水平，但脾臟IFN-γ mRNA水平并未降低，提示當(dāng)歸水煎液并不直接作用于淋巴細(xì)胞。

巨噬細(xì)胞是天然免疫應(yīng)答中的重要成員，具有吞噬、殺傷、遞呈抗原、分泌生物活性物質(zhì)等多種免疫功能，是機(jī)體非特異性免疫的重要組成部分[23-24]。在ConA誘導(dǎo)的急性肝損傷模型中，受損的細(xì)胞釋放出各種損傷相關(guān)模式分子，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞活化。特異性清除巨噬細(xì)胞能減輕肝損傷，說明巨噬細(xì)胞能發(fā)揮關(guān)鍵作用?；罨木奘杉?xì)胞中合成的 iNOS在肝損傷時(shí)表達(dá)上調(diào)，合成一氧化氮(NO)造成肝組織損傷，繼而導(dǎo)致肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的凋亡、壞死。本研究給予當(dāng)歸水煎液治療后，肝臟iNOS mRNA表達(dá)水平降低，提示當(dāng)歸水煎液可抑制巨噬細(xì)胞活化。

綜上所述，本研究中當(dāng)歸水煎液可減輕ConA誘導(dǎo)小鼠肝損傷，其機(jī)制可能是通過降低炎性細(xì)胞因子的分泌，并抑制作用于天然免疫的巨噬細(xì)胞活化，從而阻抑炎癥損傷進(jìn)一步循環(huán)放大有關(guān)。

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Protective Effect of Angelic Decoction on Acute Liver Injury Mice Induced by Concanavalin A

CHEN Xin1, MA Ya-luan2, LI Rui3,4, ZHU Liu-luan3,4, WANG Xian-bo5, ZHANG Jian-ping3,4△
(1.SchoolofBasicMedicalSciences,BeijingUniversityofChineseMedicine,Beijing100029,China;2.InstituteofBasicTheory,ChinaAcademyofChineseMedicine,Beijing100700,China; 3.InstituteofInfectiousDiseases,BeijingDitanHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing10015,China; 4.BeijingKeyLaboratoryofEmergingInfectiousDisease,Beijing100015,China; 5.CenterofIntegrativeMedicine,BeijingDitanHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100015,China)

Objective: To investigate the protective effect of Angelic decoction on acute liver injury mice induced by Concanavalin A (ConA). Methods: Preparing acute liver injury mice model, 6-8 weeks old C57BL/6 male mice were adopted by intravenous injection of ConA. The survival rate was observed on the lethal model. For the sub-lethal model, 10hour later, the mice were sacrificed to measure the levels of serum alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST)and liver HE staining; at 3h and 10h,the serum cytokines were measured by Cytometric Bead Array；the liver inducible nitric oxide synthase was measured at 3h and the spleen interferon γ was measured at 10h by real-time PCR. Results: Compared with normal mice, after giving treatment of Angelic decoction, the survival rate of acute liver injury model was increased remarkable, the liver tissue injury were reduced and the serum levels of ALT, AST were decreased, the serum inflammatory cytokines IL-12，IL-6 and IFN-γ were decreased, the liver iNOS mRNA expression were decreased, but had no effect on the spleen IFN-γ mRNA expression. Conclusion: Angelic decoction has anti-inflammatory and liver protection effect on acute liver injury induced by ConA in mice.

Angelic decoction; Concanavalin A; Acute liver injury; Cytokine

國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81273743)-解毒涼血方阻抑IL-12家族生成治療急性肝衰竭的機(jī)制研究

陳 芯(1990-)，女，遼寧大連人，在讀碩士，從事中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)免疫研究。

△通訊作者：張劍平(1959-)，女，研究員，醫(yī)學(xué)碩士，碩士研究生導(dǎo)師，從事中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)免疫研究，Tel:010-84322622，E-mail：zhjp2358@126.com。

R285.5

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1006-3250(2017)04-0492-04

2016-09-12