健脾止瀉寧顆粒的長(zhǎng)期毒性研究

陳 犁 呂姍珊 譙志文 陳曉雪 楊 超 周年華

(重慶希爾安藥業(yè)有限公司,重慶,401121)

中藥研究

健脾止瀉寧顆粒的長(zhǎng)期毒性研究

陳 犁 呂姍珊 譙志文 陳曉雪 楊 超 周年華

(重慶希爾安藥業(yè)有限公司,重慶,401121)

目的:考察健脾止瀉寧顆粒(簡(jiǎn)稱JPZX)對(duì)大鼠的長(zhǎng)期毒性,為其臨床安全使用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:實(shí)驗(yàn)設(shè)4組,JPZX高、中、低劑量組分別按187.1 g生藥/(kg·d)、119.3 g生藥/(kg·d)、51.07 g生藥/(kg·d)組,相當(dāng)于臨床擬用量55倍、35倍、15倍,及空白對(duì)照組。連續(xù)給藥92 d及停藥14 d,分別檢測(cè)各組大鼠的一般狀況、體質(zhì)量、血常規(guī)、血液生化指標(biāo),并對(duì)大鼠臟器進(jìn)行系統(tǒng)觀察和組織病理學(xué)檢查。結(jié)果:各劑量組大鼠給藥期及恢復(fù)期一般狀況、血液學(xué)、血生化、臟器重量及系數(shù)、大體解剖觀察與組織病理學(xué)檢查均未見明顯異常改變。結(jié)論:JPZX無(wú)明顯的長(zhǎng)期毒性,未發(fā)現(xiàn)毒性靶器官,在臨床劑量55倍以下有較好的安全性,按臨床擬用劑量服用是安全的。

健脾止瀉寧顆粒;大鼠;長(zhǎng)期毒性

健脾止瀉寧顆粒(以下簡(jiǎn)稱JPZX)處方組成為黨參、蓮子、白扁豆、黃連、黃芩、金銀花、建曲、山楂、車前子(鹽炙)和干姜,是重慶希爾安藥業(yè)股份有限公司按照中藥顆粒劑的制劑工藝生產(chǎn)而成,可清熱除濕,健脾止瀉,臨床上用于小兒脾虛濕熱所致的腹瀉。取得了較好的療效[1]。已有研究發(fā)現(xiàn),JPZX具有止瀉、調(diào)節(jié)腹瀉所致的電解質(zhì)紊亂、抗炎、抗病毒、鎮(zhèn)痛、助消化、促吸收、調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)和增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的藥理作用[2-6]。毒理學(xué)研究是保證臨床用藥安全的關(guān)鍵,其中長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)是主要的內(nèi)容。本研究根據(jù)《中華人民共和國(guó)藥品管理法》規(guī)定的長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)必須執(zhí)行“藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范”,以《中藥、天然藥物長(zhǎng)期毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》(2005)為依據(jù)[7-9],通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)SD大鼠長(zhǎng)期重復(fù)給予受試藥物JPZX干浸膏粉,觀察該藥物可能引起毒性反應(yīng)的性質(zhì)、程度、量效關(guān)系及可逆性;推測(cè)毒性靶器官或靶組織,為重復(fù)給藥毒性實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)提供參考;為其臨床安全應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 SD大鼠,SFP級(jí),120只,雌雄各半,體重50～60 g,4～5周齡,由四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(川)2008-24。大鼠飼養(yǎng)在成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物觀察室,每籠5只。室內(nèi)光照、濕度、溫度標(biāo)準(zhǔn)。大鼠購(gòu)回后飼養(yǎng)觀察1周,觀察各大鼠的一般外觀、行為活動(dòng)、進(jìn)食飲水情況、大小便性狀,并進(jìn)行稱重。給藥前進(jìn)行1次,符合實(shí)驗(yàn)要求的大鼠供實(shí)驗(yàn)用。

1.1.2 藥品 JPZX干浸膏粉(重慶希爾安藥業(yè)有限公司提供,批號(hào):120701),每克干浸膏粉含12.16 g生藥。

1.1.3 試劑與儀器 使用3%CMC-Na溶液分散本品,沉降性能得到較大改善,性質(zhì)穩(wěn)定。相應(yīng)可通過(guò)大鼠灌胃針的最大配制濃度約為0.51 g/mL。血液生化、血液學(xué)指標(biāo)檢測(cè)的試劑(上海特康科技有限公司提供)。全自動(dòng)生化分析儀(上海特康科技有限公司提供,型號(hào):TC6010L);全自動(dòng)三分群血液分析儀(上海特康科技有限公司,型號(hào):TEK-Ⅱ MINI);電子分析天平(上海越平科學(xué)儀器有限公司,型號(hào):FA1204L);電子稱(福州華志科學(xué)儀器有限公司,型號(hào):LED-5001，批號(hào):11062);離心機(jī)(湖南湘儀實(shí)驗(yàn)儀器開發(fā)有限公司,型號(hào):TD25-WS多管架自動(dòng)平衡);切片機(jī)(徠卡2015,德國(guó));TSJ-Q型全自動(dòng)封閉式組織脫水機(jī);BMJ-Ⅲ型包埋機(jī);PHY-Ⅲ型病理組織漂烘儀(常州市中威醫(yī)療儀器有限公司);顯微鏡Motic BA400;圖像分析軟件Motic Images Advanced。

1.2 方法

1.2.1 動(dòng)物分組 SD大鼠120只,隨機(jī)分為4組,空白對(duì)照組、JPZX干浸膏粉高、中、低劑量組,每組30只,雌雄各半。

1.2.2 給藥方法 JPZX高劑量組187.1 g生藥/(kg·d)[相當(dāng)于15.39 g干浸膏/(kg·d)]、中劑量組119.3 g生藥/(kg·d)、低劑量組51.07 g生藥/(kg·d),分別相當(dāng)于臨床擬用量55倍、35倍、15倍,劑量設(shè)計(jì)符合長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)[10]。各組大鼠均按15 mL/kg的體積2次經(jīng)口灌胃給予相應(yīng)濃度的供試品或等體積的溶媒(3%CMC-Na溶液)。給藥當(dāng)天定義為實(shí)驗(yàn)第1天。每天觀察各組大鼠一般狀況。每周停藥1天,停藥當(dāng)天稱量體重,每周測(cè)定攝食量;并根據(jù)新體重值調(diào)整相應(yīng)給藥量,連續(xù)92 d。給藥92 d后,每組各隨機(jī)處死大鼠20只(雌雄各10只),停藥恢復(fù)14 d,各組處死大鼠10只(雌雄各5只)。各組大鼠麻醉后腹主動(dòng)脈采血進(jìn)行血液學(xué)及血生化檢測(cè),并施以安樂(lè)死后進(jìn)行大體解剖觀察及病理組織學(xué)檢查。

1.2.3 檢測(cè)指標(biāo)與方法

1.2.3.1 一般觀察 觀察記錄給藥前7 d、給藥92 d和停藥恢復(fù)14 d期間,每日每只動(dòng)物的一般外觀和行為活動(dòng),糞便形狀、顏色,尿色,外觀體征、五官等。每周記錄一次體重和飼料消耗情況以觀察動(dòng)物生長(zhǎng)情況(飼料消耗量以稱重當(dāng)天每籠大鼠消耗的飼料量表示)。

1.2.3.2 血液生化學(xué)檢測(cè) 給藥第92天及停藥恢復(fù)第14天時(shí),取空腹大鼠腹主動(dòng)脈血,分離血清,檢測(cè)以下指標(biāo):谷丙轉(zhuǎn)氨酶,谷草轉(zhuǎn)氨酶,堿性磷酸酶,谷氨酰轉(zhuǎn)移酶,總膽紅素,直接膽紅素,總蛋白,白蛋白,球蛋白,白球比,尿素氮,肌酐,尿酸,膽固醇,三酰甘油,肌酸激酶,乳酸脫氫酶,羥丁酸脫氫酶,高密度脂蛋白,低密度脂蛋白,膽堿酯酶,葡萄糖,K+(鉀離子)、Cl-(氯離子)、Na+(鈉離子)等25項(xiàng)血液生化指標(biāo)。

1.2.3.3 血液學(xué)檢測(cè) 給藥第92天及停藥恢復(fù)第14天時(shí),取空腹大鼠腹主動(dòng)脈血,用全自動(dòng)三分群血液分析儀測(cè)定紅細(xì)胞數(shù),血紅蛋白含量,紅細(xì)胞比積,平均紅細(xì)胞體積,平均血紅蛋白含量,平均血紅蛋白濃度,紅細(xì)胞寬度變異系數(shù),紅細(xì)胞寬度標(biāo)準(zhǔn)差,血小板數(shù),平均血小板體積,白細(xì)胞數(shù),淋巴細(xì)胞絕對(duì)值,中間細(xì)胞絕對(duì)值,粒細(xì)胞絕對(duì)值,淋巴細(xì)胞百分比,中間細(xì)胞百分比,粒細(xì)胞百分比,血小板比積,血小板分布寬度,網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率及凝血酶原時(shí)間等21項(xiàng)血液學(xué)指標(biāo)。

1.2.3.4 系統(tǒng)尸解 給藥第92天及停藥恢復(fù)第14天時(shí),按“抓鬮法”確定動(dòng)物號(hào)數(shù),分批處死檢測(cè)。大鼠用戊巴比妥鈉麻醉,腹主動(dòng)脈取血后脫頸處死。按本實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尸體解剖標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行全面系統(tǒng)尸解。肉眼觀察主要臟器大小及形狀、色澤、質(zhì)地,有無(wú)肉眼可見病變或異常,并取心、肝、脾、肺、腎、腦、胸腺、腎上腺、子宮、卵巢、睪丸、附睪等組織器官稱重,計(jì)算臟器系數(shù)(臟器系數(shù)=臟器質(zhì)量/體質(zhì)量×100%)。

1.2.3.5 組織病理學(xué)檢查標(biāo)本 JPZX干浸膏粉大鼠長(zhǎng)期毒性給藥92 d及停藥14 d藥物高、中、低劑量組和空白組各30只動(dòng)物(雌雄各半),分別取心、肝、脾、肺、腎、腦(大腦、小腦、腦干)、垂體、脊髓(頸段、胸段、腰段)、子宮、卵巢、乳腺、甲狀腺、甲狀旁腺、胸腺、胰腺、腎上腺、胃、十二指腸、回腸、結(jié)腸、膀胱、淋巴結(jié)、食管、氣管、睪丸、附睪、前列腺、坐骨神經(jīng)、唾液腺(下頜下腺)、胸骨、主動(dòng)脈。10%甲醛固定。脫水、修剪、包埋、切片、HE染色、封片等,最后鏡檢并顯微照像。以上標(biāo)本均按四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所質(zhì)量監(jiān)控室病理組病理檢驗(yàn)SOP程序進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 一般觀察 給藥92 d和停藥14 d期間,空白組及JPZX高、中、低劑量組各動(dòng)物容態(tài)、步態(tài)均正常,被毛光滑;眼瞼無(wú)充血水腫,眼結(jié)膜無(wú)水腫出血點(diǎn),瞳孔大而圓;外耳無(wú)異常分泌物;口腔黏膜紅潤(rùn),無(wú)潰瘍及出血點(diǎn);各大鼠生殖系統(tǒng)無(wú)異常分泌物,大、小便形狀,氣味均正常。其中JPZX高、中劑量組大便帶藥色,形狀、氣味均無(wú)異常。

2.2 對(duì)大鼠攝食量及體重的影響 給藥前1周和給藥92 d期間,大、中、低劑量組大鼠的飼料消耗量分別與空白組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。大鼠體重結(jié)果見表1、2、3、4。表1顯示給藥92 d期間,低劑量組雌性大鼠4～12周體重有明顯增長(zhǎng)(P<0.05);中劑量組6～12周體重有明顯增長(zhǎng)(P<0.05),高劑量組有促進(jìn)體重增長(zhǎng)的趨勢(shì),但多數(shù)時(shí)間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。表2結(jié)果顯示給藥92 d期間,低劑量組雄性大鼠第3周后體重均有明顯增長(zhǎng)(P<0.05);由表3、4等表可見長(zhǎng)期給藥(3個(gè)月)停藥14 d后,JPZX中劑量組雄性大鼠的體重有明顯促進(jìn)增長(zhǎng)影響(P<0.05);其余時(shí)間點(diǎn)各組體重增長(zhǎng)正常(P>0.05)。

2.3 對(duì)血液生化學(xué)指標(biāo)的影響 結(jié)果見附表5、6、7、8。給藥92 d期結(jié)束:表5顯示,雌性大鼠與空白組比較,低劑量組白蛋白升高、鉀降低,高劑量組葡萄糖降低、鈉降低,以上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。表6顯示,雄性大鼠與空白組比較,低劑量組白蛋白升高、總蛋白降低、鉀降低,中劑量組三酰甘油降低、高密度脂蛋白降低、葡萄糖降低、鉀降低,高劑量組葡萄糖降低,以上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。停藥恢復(fù)14 d結(jié)束:表7顯示,雌性大鼠與同期空白組比較,低劑量組總蛋白降低、球蛋白降低、高密度脂蛋白升高、低密度脂蛋白升高、葡萄糖升高,高劑量組總蛋白降低、球蛋白降低、白球比升高、鉀降低,以上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。表8顯示,雄性大鼠與同期空白組比較,低劑量組總蛋白降低、球蛋白降低、膽固醇降低、高密度脂蛋白升高、鉀降低,中劑量組膽固醇降低、鉀降低、氯降低,高劑量組總蛋白降低、白蛋白升高、球蛋白降低、白球比升高、膽固醇降低、高密度脂蛋白升高、葡萄糖降低、鉀降低,以上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

除以上指標(biāo)外,給藥結(jié)束及恢復(fù)期結(jié)束,JPZX各組大鼠天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、肌酸磷酸激酶(CK)、堿性磷酸酶(ALP)、尿素(Urea)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酐(Crea)、總膽固醇(CHOL)及電解質(zhì)濃度等各項(xiàng)血生化指標(biāo)均未見明顯異常改變。

綜上所述,上述總蛋白、球蛋白、鉀、氯、葡萄糖指標(biāo)變化幅度較小,且在正常參考值范圍內(nèi);白蛋白、膽固醇、高密度脂蛋的改變具有一定防治作用。故認(rèn)為其改變?cè)诮o藥期與恢復(fù)期均無(wú)明顯毒理學(xué)意義。

2.4 對(duì)血液學(xué)的影響 結(jié)果見附表9、10、11、12。給藥92 d期結(jié)束:表9結(jié)果表明,雌性大鼠與同期空白組比較,低劑量組平均血紅蛋白含量升高,中劑量組平均血紅蛋白含量升高、平均血紅蛋白濃度升高、紅細(xì)胞寬度標(biāo)準(zhǔn)差降低,高劑量組平均血紅蛋白含量升高、平均血紅蛋白濃度升高、紅細(xì)胞寬度標(biāo)準(zhǔn)差降低,以上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。表10結(jié)果表明,雄性大鼠與空白組比較,高劑量組平均白細(xì)胞數(shù)降低、中間細(xì)胞絕對(duì)值降低,以上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。停藥恢復(fù)14 d結(jié)束:表11結(jié)果表明,雌性大鼠與同期空白組比較,低劑量組血小板分布寬度升高,中劑量組平均血紅蛋白濃度升高、血小板分布寬度升高,高劑量組平均血紅蛋白濃度升高、血小板分布寬度升高,以上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。表12結(jié)果表明,雄性大鼠與同期空白組比較,低劑量組中間細(xì)胞百分比升高、粒細(xì)胞百分比降低,中劑量組中間細(xì)胞百分比升高、粒細(xì)胞百分比降低,高劑量組血小板數(shù)升高、淋巴細(xì)胞絕對(duì)值升高、中間細(xì)胞百分比升高、粒細(xì)胞百分比降低、血小板比積升高,以上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

除以上指標(biāo)外,給藥結(jié)束及恢復(fù)期結(jié)束,JPZX各組大鼠紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、紅細(xì)胞容積(HCT)、網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比(RET%)、血小板計(jì)數(shù)(PLT)、凝血酶原時(shí)間(PT)等各項(xiàng)血液學(xué)指標(biāo)均未見明顯異常改變。

綜上所述,上述白細(xì)胞、粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞絕對(duì)值、中間細(xì)胞百分比、血小板數(shù)指標(biāo)變化幅度較小,且在正常參考值范圍內(nèi);平均血紅蛋白濃度、平均血紅蛋白含量、紅細(xì)胞寬度標(biāo)準(zhǔn)差的改變具有一定防治作用。故認(rèn)為其改變?cè)诮o藥期與恢復(fù)期均無(wú)明顯毒理學(xué)意義。

表1 雌性大鼠給藥92 d體重變化(g,♀

注:與空白組比較,*P<0.05;**P<0.01。

表2 雄性大鼠給藥92 d體重變化(g,♂

注:與空白組比較,*P<0.05;**P<0.01。

表3 雌性大鼠恢復(fù)期體重變化(g,♀

表4 雄性大鼠恢復(fù)期體重變化(g,♂

注:與空白組比較,*P<0.05;**P<0.01。

表5 雌性大鼠給藥92 d血液生化學(xué)檢測(cè)♀,n=10)

注:與空白組比較,*P<0.05。

表6 雄性大鼠給藥92天血液生化學(xué)檢測(cè)♂,n=10)

注:與空白組比較,*P<0.05;**P<0.01。

表7 雌性大鼠恢復(fù)期血液生化學(xué)檢測(cè)♀,n=5)

注:與空白組比較,*P<0.05;**P<0.01。

表8 雄性大鼠恢復(fù)期血液生化學(xué)檢測(cè)♂,n=5)

注:與空白組比較,*P<0.05;**P<0.01。

表9 雌性大鼠給藥92 d血液學(xué)指標(biāo)檢測(cè)♀,n=10)

注:與空白組比較,*P<0.05;**P<0.01。

表10 雄性大鼠給藥92 d血液學(xué)指標(biāo)檢測(cè)♂,n=10)

注:與空白組比較,*P<0.05。

表11 雌性大鼠恢復(fù)期血液學(xué)指標(biāo)檢測(cè)♀,n=10)

注:與空白組比較,*P<0.05;**P<0.01。

表12 雄性大鼠恢復(fù)期血液學(xué)指標(biāo)檢測(cè)♂,n=10)

注:與空白組比較,*P<0.05;**P<0.01。

2.5 系統(tǒng)尸解、臟器重量和臟器系數(shù) 連續(xù)灌胃給藥92 d和停藥恢復(fù)14 d后,對(duì)各組大鼠實(shí)施麻醉腹主動(dòng)脈取血脫頸處死,進(jìn)行詳細(xì)的解剖觀察。肉眼觀察心臟、肝臟、脾臟、肺、腎臟、生殖臟器、胃腸道等各臟器,其大小、形態(tài)、顏色或質(zhì)地均未見與供試品相關(guān)的異常改變。給藥結(jié)束及恢復(fù)期結(jié)束,與同期對(duì)照組比較,JPZX各組大鼠心臟、肝臟、脾臟、胸腺、肺、腎臟、卵巢、子宮、睪丸、附睪等臟器的絕對(duì)重量、臟體系數(shù)未見明顯改變,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.6 組織病理學(xué)檢查結(jié)果 肺臟:間質(zhì)性肺炎(給藥92 d對(duì)照組雌性1只、對(duì)照組雄性1只、低劑量組雌性1只)。肺膿腫:(給藥92 d對(duì)照組雄性3只、中劑量組雌性2只、高劑量組雄性1只,停藥14 d低劑量組雄性1只、中劑量組雌性1只、中劑量組雄性1只);心臟:心肌炎(低劑量組雄性1只);胸腺:胸腺萎縮,胸腺免疫細(xì)胞減少(低劑量組雄性1只)。各組隨機(jī)發(fā)生的間質(zhì)性肺炎、肺膿腫、心肌炎均屬于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自發(fā)性病變,為非特異性病變,病變散在于對(duì)照組及各藥物組,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;胸腺萎縮,胸腺免疫細(xì)胞減少,本實(shí)驗(yàn)只發(fā)生1例,是否為藥物一起還有待進(jìn)一步研究。JPZX 92 d長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)高、中、低劑量組對(duì)大鼠連續(xù)給藥92 d及停藥恢復(fù)14 d,所檢臟器未見由藥物引起的明顯組織形態(tài)、結(jié)構(gòu)異常。

3 討論

JPZX是兒科用藥。兒童患者正處于生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程,各臟器功能以及酶系統(tǒng)、免疫中樞系統(tǒng)發(fā)育不完善,藥效學(xué)和藥物代謝動(dòng)力學(xué)有其自身規(guī)律[11]。美國(guó)FDA[12]和歐洲藥品評(píng)價(jià)局(EMEA)[13]均已發(fā)布有關(guān)兒科藥物非臨床安全評(píng)價(jià)的指導(dǎo)原則,其中明確提出有些藥物對(duì)兒童特殊發(fā)育時(shí)期的影響難以在臨床試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),因此有必要開展幼齡動(dòng)物的非臨床安全評(píng)價(jià)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)幼齡大鼠長(zhǎng)期重復(fù)給予受試藥物JPZX干浸膏粉,描述大鼠重復(fù)接受受試藥物后的毒性特征,1)預(yù)測(cè)受試物可能引起的臨床不良反應(yīng),包括不良反應(yīng)的性質(zhì)、程度、劑量—反應(yīng)和時(shí)間—反應(yīng)的關(guān)系,可逆性等;2)推測(cè)受試物重復(fù)給藥的臨床毒性靶器官或靶組織;3)預(yù)測(cè)臨床實(shí)驗(yàn)的起始劑量和重復(fù)用藥的安全劑量范圍;4)提示臨床實(shí)驗(yàn)中應(yīng)重點(diǎn)檢測(cè)的指標(biāo);5)為臨床實(shí)驗(yàn)中的解毒或解救措施提供參考信息。

本實(shí)驗(yàn)?zāi)M3～4歲兒童,4～5周齡SD大鼠連續(xù)92 d經(jīng)口灌胃給予187.1 g生藥/(kg·d)[相當(dāng)于15.39 g干浸膏/(kg·d)]、119.3 g生藥/(kg·d)、51.07 g生藥/(kg·d)的JPZX,分別相當(dāng)于臨床擬用量55倍、35倍、15倍,各組大鼠一般狀況、血液學(xué)、血生化、臟器重量及系數(shù)、大體解剖觀察與組織病理學(xué)檢查均未見明顯異常改變。實(shí)驗(yàn)大鼠停藥14 d,進(jìn)行恢復(fù)期觀察及檢測(cè),結(jié)果未見延遲性不良反應(yīng)。血液生化和血液學(xué)測(cè)定有少部分指標(biāo)與正常對(duì)照組比較,顯示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但是從專業(yè)角度分析,認(rèn)為沒(méi)有毒理學(xué)意義[14]。各組少數(shù)樣本隨機(jī)發(fā)生的間質(zhì)性肺炎、肺膿腫、心肌炎均屬于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自發(fā)性病變,為非特異性病變,病變散在于對(duì)照組及各藥物組,考慮為自發(fā)性病變;胸腺萎縮,胸腺免疫細(xì)胞減少,本實(shí)驗(yàn)只發(fā)生1例,是否為藥物一起還有待進(jìn)一步研究。

綜上所述,本實(shí)驗(yàn)條件下,大鼠連續(xù)92 d經(jīng)口灌胃給予JPZX的無(wú)毒性反應(yīng)劑量(NOAEL)為187.1 g生藥/(kg·d)(臨床擬用量的55倍),提示JPZX用于臨床是安全的。

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(2016-06-14收稿 責(zé)任編輯：王明)

Study on the Long-term Toxicity of Jianpizhixiening Granule

Chen Li, Lyu Shanshan, Qiao Zhiwen, Chen Xiaoxue, Yang Chao, Zhou Nianhua

(ChongqingHealnPharmaceuticalCo.，Ltd,Chongqing401121,China)

Objective: To observe the long-term toxiciy t of Jianpizhixiening granule (JPZX) on rats to provide a scientific experimental basis for clinical treatment. Methods: The rats were randomly divided into four groups: a high, medium and low dose group of JPZX with 187.1, 119.3, 51.07 g crude drug · kg-1· day-1 respectively, equal to 55, 35 and 15 times of clinic dose, and a control group. Parameters were examined, including general condition, body weight, the indexes of hematology, blood biochemistry and the related organ histopathology after successive administration of 92 days and 14 days′ recovery. Results: In each group, there was no significant changes in the outer appearance and behavior, the indexes of hematology, blood biochemistry, organ weight and coefficient, gross anatomical observation and histopathological examination. Conclusion: In the 55 times of clinical dose, JPZX has no significant long-term toxicity, no toxicity target organ and is relatively safe under clinical proposed dose.

Jianpizhixiening granule; Long-term toxicity; Rats

重慶市科學(xué)技術(shù)委員會(huì)科技計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):cstc2011ggC10003-37)——健脾止瀉寧顆粒藥理藥效再評(píng)價(jià)研究

陳犁(1963.07—),男,大學(xué)本科,正高級(jí)工程師,重慶希爾安藥業(yè)有限公司總經(jīng)理,研究方向:藥物研究,Tel:(023)67893740,E-mail:1401228930@qq.com

周年華(1979.06—),男,大學(xué)本科,高級(jí)工程師,重慶研發(fā)副總經(jīng)理,研究方向:中成藥新藥研發(fā),Tel:(023)67893754,E-mail:244279691@qq.com

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10.3969/j.issn.1673-7202.2017.05.049