• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    福建省53份茶樹種質(zhì)資源遺傳多樣性ISSR分析

    2017-05-30 08:58:06朱晨張舒婷常笑君王仲許長同張梓浩林玉玲賴鐘雄郭玉瓊
    熱帶作物學報 2017年7期
    關(guān)鍵詞:遺傳多樣性種質(zhì)資源茶樹

    朱晨 張舒婷 常笑君 王仲 許長同 張梓浩 林玉玲 賴鐘雄 郭玉瓊

    摘 要 利用ISSR分子標記技術(shù)對福建省7個地區(qū)的茶樹品種進行遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)的分析。篩選出的12條引物共擴增出97條條帶,其中多態(tài)性條帶有92條,多態(tài)性譜帶百分率為94.84%;53份供試材料可劃分為5大類(GS=0.71),遺傳距離介于0.66~0.99之間;Nei基因多樣性指數(shù)為0.224,Shannon's信息指數(shù)為0.368,不同地區(qū)茶樹的遺傳多樣性參數(shù)差異較大,其中寧德福安地區(qū)最高,福州鼓山地區(qū)最低;總變異系數(shù)為0.332,地區(qū)內(nèi)個體間遺傳多樣性為0.154,而地區(qū)間為0.231,福州地區(qū)與其他地區(qū)之間的相似性較弱;研究認為,福建省茶樹遺傳多樣性豐富,不同地區(qū)茶樹存在高頻率遺傳變異,而缺乏遺傳信息交流是造成福州地區(qū)遺傳多樣性較低的可能因素。

    關(guān)鍵詞 茶樹;種質(zhì)資源;ISSR;遺傳多樣性

    中圖分類號 S571.1 文獻標識碼 A

    Abstract The genetic diversity and genetic structure of tea plant in seven regions of Fujian Province were examined by ISSR.The results showed that, 97 bands were amplified with 12 ISSR primers, the polymorphic bands of which were 92, and their polymorphism percentage was 94.84%. 53 tea plant resources were divided into 5 groups(GS=0.71). The range of genetic distance was between 0.66~0.99. The Neis genetic distance was 0.224, the Shannons information index was 0.368, and the genetic diversity in different regions of tea plant had significant?difference. Fu'an in Ningde was the highest when the Gushan Mountain in Fuzhou got the lowest similarity with the others. The coefficient of gene variation was 0.332. The values of genetic diversity in and between the regions was 0.154 and 0.231, respectively.The Fuzhou area got low similarity with the others. The results indicated that, there was high genetic diversity of tea plant in Fujian Province, which had high frequency of heritable variation in different regions. The insufficiency of genetic information flow might be the main fact of the genetic diversity in Fuzhou area.

    Key words Camellia sinensis; germplasm resources; ISSR; genetic diversity

    doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2017.07.019

    茶樹(Camellia sinensis)屬于山茶科山茶屬,是多年生、木本、常綠植物,福建省是茶葉的主產(chǎn)地,栽培歷史悠久,茶樹種質(zhì)資源豐富[1]。近年來隨著新品種選育研究和示范推廣工作的不斷深入,越來越多的優(yōu)良茶樹新品種對茶區(qū)產(chǎn)量和品質(zhì)的提升起到了推動作用[2],但由于異花授粉和近交衰退的影響,造成選育的新品種遺傳基礎(chǔ)單一,新品種的優(yōu)良性狀不能較好的遺傳保持,子代的遺傳性狀良莠不齊,不利于茶產(chǎn)業(yè)的持續(xù)穩(wěn)定發(fā)展。同時傳統(tǒng)的育種方法選育周期長,親本選擇范圍有限,大多只考慮表型性狀因素[3],限制了茶樹種質(zhì)資源的研究和新品種的選育。隨著分子生物學的發(fā)展,基于基因組DNA水平的分子標記技術(shù)在植物遺傳連鎖圖譜構(gòu)建、指紋圖譜的繪制和品種鑒定、種質(zhì)資源的遺傳多樣性研究以及基因標記和定位等方面的應用越來越廣泛,這為茶樹優(yōu)良品種的選育開拓了新的思路。因此利用分子標記技術(shù)對福建省現(xiàn)有的茶樹種質(zhì)資源進行遺傳多樣性、親緣關(guān)系和遺傳性狀進行分析、鑒定和分類,可以為親本的選配提供科學依據(jù),降低選育的難度,推進良種培育的進程[4-5]。

    ISSR分子標記技術(shù)是一種利用簡單序列重復的寡核苷酸引物進行PCR擴增,通過檢測不同物種SSR位點間的序列長度來判斷其多態(tài)性[6]。與AFLP、RAPD和SSR等其他分子標記技術(shù)相比,ISSR技術(shù)多態(tài)性豐富,穩(wěn)定性強,操作簡單,相對成本較低,適用于親緣關(guān)系較近的材料[7-10]。同時ISSR分子標記技術(shù)在茶樹及其他植物基因型鑒定和親緣關(guān)系的分析利用等方面已有相關(guān)報道[11-18],而有關(guān)福建省茶樹種質(zhì)資源遺傳多樣性的綜合分析還鮮有報道。

    本研究采用ISSR分子標記技術(shù)結(jié)合生物信息學分析對福建省內(nèi)不同地區(qū)的53份茶樹種質(zhì)資源進行親緣關(guān)系的探究和遺傳多樣性的分析,以期為有效地鑒別福建省茶山林海中未收集保存的珍稀茶樹種質(zhì)資源、保護和利用已培育的優(yōu)良茶樹新品種提供新的技術(shù)手段;更為今后福建省茶樹核心種質(zhì)庫建立以及雜交育種親本選配提供可靠的科學依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    53份供試材料采自福建省7個地區(qū)(表1)。采后茶樹葉片置于密封袋中,經(jīng)液氮處理后放置-80 ℃冰箱保存。

    1.2 試驗方法

    茶樹基因組DNA提取參照唐玉海等[19]的改良CTAB法。ISSR-PCR擴增體系優(yōu)化參照林鄭和等[20]的方法。PCR擴增反應程序為:94 ℃預變性3 min;94 ℃變性45 s;退火溫度(根據(jù)不同引物而定)退火30 s;72 ℃延伸2 min,37個循環(huán)后72℃繼續(xù)延伸10 min。

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    電泳圖上同一位點無條帶和虛弱條帶統(tǒng)一標記為0,有明顯條帶的標記為1,并建立原始二元數(shù)據(jù)矩陣[21],計算每個引物的多態(tài)性比率(多態(tài)性帶數(shù)/總帶數(shù))。利用NTsys2.0、Popgene32和STRUCTURE2.3.4軟件分別進行遺傳距離聚類分析[22-23]、遺傳多樣性參數(shù)計算和遺傳結(jié)構(gòu)分析[24]。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 ISSR引物篩選與擴增結(jié)果多態(tài)性分析

    根據(jù)條帶清晰程度和多態(tài)性程度來篩選引物并確定最適退火溫度,最終篩選出12條引物及其最適退火溫度,各個引物的最佳退火溫度一般會略高于或低于引物理論退火溫度。

    用所篩選出來的12條引物對53份供試材料進行擴增,部分引物擴增結(jié)果如圖1所示,共擴增出97條清晰可見的條帶,其中92條是多態(tài)性條帶,每條引物平均擴增8.08個條帶和7.67個多態(tài)性條帶,多態(tài)性百分率達到94.84%(表2),其中引物UBC844的多態(tài)性最弱,僅為80%,而引物UBC811、UBC818、UBC827、UBC840、UBC854、UBC856、UBC857和UBC895的多態(tài)性最好,多態(tài)性百分率均到達100%。同時不同引物擴增結(jié)果也不相同,引物UBC811、UBC816、UBC856和UBC857擴增的條帶明顯多于引物UBC818和UBC895。

    2.2 福建省茶樹遺傳距離分析

    在圖2中以遺傳距離GS=0.71為標準,將供試材料劃分為5大類(表3),其中A類共有39個茶樹品種,以GS=0.74為標準又可以把A類分為4個組,其中Ⅰ組的金牡丹和金觀音之間的遺傳相似性系數(shù)高達0.99;羅源飛竹外坂和羅源西洋1號的相似性系數(shù)也高達0.90。由于金牡丹和金觀音的選育親本相同,因此兩者遺傳背景相似;羅源飛竹外坂和羅源西洋1號同處于羅源縣飛竹鎮(zhèn),生長環(huán)境和氣候相似,因此遺傳距離相近。Ⅱ組主要有武夷山地區(qū)的大紅袍、水仙、肉桂等品種。采自閩侯方山的5個品種聚類為Ⅲ組;B類只有福安菜茶1個茶樹品種,可能與福安菜茶品種的不確定性和遺傳背景的復雜性有關(guān)。C類分別是早春毫、白云特早、矮腳烏龍6號和雜交1號;D類是采自建甌的矮腳烏龍1號、2號和5號;黃旦、黃觀音和黃玫瑰等都歸入E類。南平建甌的矮腳烏龍1~6號分別聚類到A、C、D類中,是由于建甌矮腳烏龍1~6號采自建甌東峰鎮(zhèn)百年矮腳烏龍種植園,其遺傳背景存在差異。

    2.3 福建省茶樹遺傳多樣性分析

    采用Popgene32對福建省7個地區(qū)的茶樹進行遺傳多樣性分析,其等位基因數(shù)(Na)、有效等位基因數(shù)(Ne)、Nei基因多樣性參數(shù)(H)、Shannon′s信息指數(shù)(I)、多態(tài)性位點數(shù)(N.P.B)和多態(tài)位點百分率(PPB)等參數(shù)分析結(jié)果顯示(表4),不同地區(qū)茶樹的Nei基因多樣性指數(shù)(H)介于0.099~0.207,平均為0.154;Shannon′s信息指數(shù)(I)介于0.148~0.324,平均為0.242;可見,福建省茶樹的遺傳多樣性水平較高。進一步依據(jù)不同地區(qū)的基因多樣性指數(shù)從大到小排列發(fā)現(xiàn),不同地區(qū)間茶樹的遺傳多樣性水平存在明顯差異,分別為南平建甌>寧德福安>南平武夷山>閩侯方山>福州羅源>福州鼓山>福州永泰。7個地區(qū)茶樹的多態(tài)性位點數(shù)介于24~88,多態(tài)性位點百分率介于22.49%~86.80%,總多態(tài)性位點百分率達到95.58%。其中,南平建甌、寧德福安和南平武夷山地區(qū)的茶樹的多態(tài)性位點數(shù)較高,而福州鼓山和福州永泰的多態(tài)性位點數(shù)最低。

    2.4 福建省茶樹遺傳分化分析

    福建省茶樹總遺傳分化系數(shù)(Gst)為0.332,即66.80%的遺傳分化來源于不同地區(qū)茶樹內(nèi)部,而33.20%的遺傳分化來源于地區(qū)之間,可見福建省茶樹的遺傳分化或遺傳變異主要來源于地區(qū)內(nèi)部。進一步分析發(fā)現(xiàn),基因流(Nm)為1.007,略大于1.0,表明不同地區(qū)茶樹之間遺傳漂移阻礙較小,存在一定頻率的遺傳信息交流。而在地區(qū)內(nèi)部和地區(qū)間茶樹分析中,地區(qū)內(nèi)部茶樹間的遺傳多樣性(Hs)僅為0.154,地區(qū)間茶樹的遺傳多樣性(Ht)為0.231,結(jié)合各項遺傳分化參數(shù)推斷,福建省茶樹遺傳多樣性主要由于不同地區(qū)茶樹的遺傳分化或變異水平所導致的,與茶樹生長環(huán)境差異可能存在較大關(guān)系,這對鑒別珍貴茶樹種質(zhì)資源提供了新的參考依據(jù)。

    進一步分析遺傳相似系數(shù)(表5)發(fā)現(xiàn),福州羅源和寧德福安茶樹的親緣關(guān)系最近,遺傳相似度達到0.981,推測可能與這兩個地區(qū)距離較近且生態(tài)環(huán)境較一致有關(guān);福州鼓山與福州永泰茶樹的親緣關(guān)系最遠,僅為0.763,可能由二地之間的局部環(huán)境差異導致。

    2.5 福建省茶樹遺傳結(jié)構(gòu)分析

    采用STRUCTURE 2.3.4軟件對福建省茶樹53份樣品進行遺傳結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn),當K=3時,能取得最大的△K值和穩(wěn)定的lnP(K)值。因此,福建省7個地區(qū)的茶樹可分為3大類(圖3),群體Ⅰ主要由南平建甌、福州羅源和寧德福安的大部分品種組成;群體Ⅱ主要由福州鼓山、福州羅源和寧德福安的部分品種組成;群體Ⅲ包含南平武夷山、福州永泰、閩侯方山和寧德福安的部分品種。在遺傳結(jié)構(gòu)上進一步驗證不同地區(qū)茶樹之間可能存在較高頻率的遺傳信息交流。值得注意的是,霞浦元宵綠、泮野2號和矮腳烏龍3號在概率上無法和其他樣品一樣準確歸屬到具體某一個類別中,由此可見福建省茶樹遺傳背景確實相對復雜。

    進一步分析發(fā)現(xiàn),福建省茶樹模型聚類的后驗概率Q值介于0.468~0.975之間,南平武夷山、福州永泰、閩侯方山和南平建甌地區(qū)的概率值幾乎都大于0.7,且87.5%的茶樹個體分布Q值大于0.9,說明這4個地區(qū)茶樹個體之間的遺傳信息交流較為有限。而福州鼓山、福州羅源和寧德福安地區(qū)的Q值介于0.468~0.597之間,其中大于0.9的茶樹個體僅占65.51%,與其他4個地區(qū)相比,這3個地區(qū)的茶樹可能存在更復雜的遺傳背景,具有更豐富的遺傳多樣性,因此這些地區(qū)的茶樹種質(zhì)資源具有更高的開發(fā)利用價值。

    3 討論

    3.1 福建省茶樹的遺傳多樣性豐富

    利用篩選后的12條引物對福建省茶樹53份供試材料進行了ISSR分析,由于樣品既有來自同一地區(qū)的不同品種,也有來自不同地區(qū)的相同品種,還有同一地區(qū)的相同品種,樣品間的遺傳背景較為復雜。原產(chǎn)于南平武夷山地區(qū)而引種至寧德福安地區(qū)的武夷菜茶1號和2號與寧德福安地區(qū)其他茶樹品種劃分在同一組別,可能是經(jīng)過不斷的引種馴化和人工選育,以及品種間自然雜交,或是由于環(huán)境因素的影響而表現(xiàn)出較近的親緣關(guān)系[25]。綜合STRUCTURE分類結(jié)果與福建各地氣候環(huán)境進行分析,福州地區(qū)處沿海地帶,受海洋氣流影響,終年溫暖濕潤,陽光充足,霜少無雪,因此茶樹主要以提高抗蟲病能力為主;福安、建甌和羅源地區(qū)茶樹多分布于內(nèi)陸山區(qū),冬季易受南下冷空氣影響,主要以增強抗寒性變異為主;而南平武夷山和閩侯方山為山地氣候類型,具有明顯的垂直分布區(qū)域性特點,影響因素更為復雜。因此,福建茶樹品種的豐富性、福建各地氣候環(huán)境的多樣性和茶樹的引種馴化和人工選育共同造就了福建省茶樹豐富的遺傳多樣性。

    3.2 福建省不同地區(qū)茶樹存在高頻率遺傳變異

    地區(qū)內(nèi)和地區(qū)間遺傳變異信息是制定物種保護策略的重要參考依據(jù)[26]。物種的遺傳多樣性水平影響因素除了地區(qū)間的遺傳信息交流,還可能來源于環(huán)境和基因型引起的不同地區(qū)個體之間的特殊變異。Roy[27],Liu[28]和Joshi等[29]研究均發(fā)現(xiàn)茶樹不同地區(qū)的遺傳分化水平高于地區(qū)內(nèi)個體的遺傳分化水平,即茶樹的遺傳變異主要來源于地區(qū)之間。而本試驗研究發(fā)現(xiàn),不僅地區(qū)之間,同一地區(qū)內(nèi)茶樹的遺傳變異也會引起地區(qū)內(nèi)部的個體間差異,模型聚類結(jié)果也表明福建省茶樹遺傳結(jié)構(gòu)并不按照地區(qū)差異進行劃分??梢?,自然選擇或地理環(huán)境對不同地區(qū)茶樹變異的影響具有一定的平行性,而且這種生活環(huán)境的異質(zhì)化所造成的不同地區(qū)的差異是茶樹主要的變異來源,而作為亞類群,不同品種在其中的影響力較弱。此外,這種地區(qū)間高水平的遺傳變異也可能與較高的基因流有關(guān)[30-31]??偠灾芡饨鐥l件干擾,福建省不同地區(qū)茶樹存在高頻率遺傳變異,而這種干擾在品種間的差別可能較小。

    3.3 部分地區(qū)茶樹種質(zhì)資源亟需重點保護

    遺傳多樣性分析是植物新品種選育的基礎(chǔ),而不同物種瀕危類型所表現(xiàn)出的遺傳多樣性程度也不同[32-33]。福建省茶樹總Nei遺傳多樣性參數(shù)達到0.224,高于Wachira[34]報道的日本(0.169)、越南(0.194)、斯里蘭卡(0.199)和肯尼亞(0.201)等國茶樹的平均遺傳多樣性水平,福建省茶樹具有更高的遺傳多樣性。此外,Irwin[35]研究發(fā)現(xiàn),福建省茶樹遺傳漂移阻礙相對較小,存在較高頻率遺傳信息交流。然而不同地區(qū)遺傳多樣性差異較顯著,從大到小排列為南平建甌>寧德福安>南平武夷山>閩侯方山>福州羅源>福州鼓山>福州永泰,且福州羅源、鼓山和永泰地區(qū)與其他地區(qū)的遺傳相似度較低。結(jié)合福州地區(qū)茶樹分布實地調(diào)查推斷,遺傳多樣性的豐富與否可能造成不同茶樹品種之間生存、繁殖和適應能力等方面差異從而影響茶樹的空間結(jié)構(gòu)分布。隨著茶樹無性系良種的不斷推廣,地區(qū)特色茶樹品種已逐步被相對單一的無性系良種取代,從而導致地區(qū)內(nèi)部的品種多樣性逐漸喪失。因此,城市化高速發(fā)展的福州地區(qū)是福建省茶樹種質(zhì)資源保護的重點,注重地方品種資源的收集、保存和保護,防止遺傳多樣性的進一步丟失。

    今后可利用ISSR分子標記技術(shù),在全省乃至全國范圍內(nèi)收集茶樹種質(zhì)資源,建立省級和國家級優(yōu)良茶樹品種的ISSR指紋圖譜,可以對現(xiàn)有珍稀茶樹種質(zhì)資源進行有效的鑒別和保護,為優(yōu)良茶樹品種的選育以及全國性的茶樹種質(zhì)資源庫的建立提供科學依據(jù)[36]。

    參考文獻

    [1] 林志坤, 孫威江, 陳志丹, 等. ISSR分子標記技術(shù)及其在茶樹研究中的應用[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學, 2014(9): 139-142.

    [2] 李 冬, 張 俊. 茶樹新品種選育研究及推廣應用[J]. 云南農(nóng)業(yè), 2006(12): 33.

    [3] 郭春芳, 唐玉海, 孫 云, 等. 茶樹種質(zhì)資源遺傳多樣性的ISSR分析[J]. 熱帶作物學報, 2008(2): 181-186.

    [4] 林鄭和, 陳榮冰, 陳常頌, 等. ISSR分子標記在茶樹遺傳關(guān)系分析中的初步應用[J]. 茶葉科學, 2007(1): 45-50.

    [5] 趙春梅, 金榮榮, 劉 英. 甜瓜種質(zhì)資源遺傳多樣性ISSR分析[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學, 2012, 40(1): 27-28.

    [6] Zietkiewicz E, Rafalski A, Labuda D. Genome fingerprinting by simple sequence repeat (SSR)-anchored polymerase chain reaction amplification[J]. Genomics, 1994, 20(2): 176-183.

    [7] 楊春勇, 李海濤, 李學蘭, 等. 栽培沉香遺傳多樣性的ISSR和AFLP分析比較[J]. 植物遺傳資源學報, 2013(3): 553-559.

    [8] 姚明哲, 陳 亮. 分子標記在茶樹遺傳育種上的應用[J]. 生物技術(shù)通報, 2003(5): 27-30.

    [9] 潘璐璐, 丁兆堂, 段倫才, 等. 14個 ‘黃山種 茶樹單株的DNA指紋圖譜構(gòu)建[J]. 西南農(nóng)業(yè)學報, 2012, 25(5): 1 572-1 577.

    [10] 余繼忠, 楊亞軍, 黃海濤, 等. 利用ISSR標記分析福云(半)同胞系茶樹品種(系)的遺傳多樣性和親緣關(guān)系[J]. 基因組學與應用生物學, 2009, 28(2): 281-288.

    [11] 林偉東, 孫威江, 陳志丹. ISSR分子標記技術(shù)在茶樹育種中的研究進展[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學, 2015(23): 133-138.

    [12] 吳清韓, 莊東紅, 朱 慧, 等. 鳳凰單叢茶樹資源遺傳多樣性的ISSR分析[J]. 熱帶作物學報, 2015(3): 499-503.

    [13] 潘建義, 成 浩, 王麗鴛, 等. 基于ISSR分子標記的茶樹品系麗早香遺傳特性分析[J]. 浙江農(nóng)業(yè)學報, 2016(6): 999-1 002.

    [14] 劉 彤, 葛智文, 陳濤林, 等. 柳州九萬山野生茶樹種質(zhì)資源遺傳多樣性的ISSR分析[J]. 南方農(nóng)業(yè)學報, 2015(11): 1 943-1 948.

    [15] 黃福濤. 應用ISSR分子標記研究崇州枇杷茶和滎經(jīng)枇杷茶種質(zhì)資源遺傳多樣性與親緣關(guān)系[D]. 成都: 四川農(nóng)業(yè)大學, 2015.

    [16] 鄒 瑜, 何海旺, 趙 明, 等. 廣西特色蕉類種質(zhì)資源遺傳多樣性ISSR分析[J]. 西南農(nóng)業(yè)學報, 2016(10): 2 450-2 456.

    [17] 劉平平, 葉開玉, 龔弘娟, 等. 稱猴桃~(60)Co-γ射線輻射誘變植株變異的ISSR分子標記研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學報, 2016(10): 2 457-2 462.

    [18] 彭繼慶, 曹福祥, 曹基武, 等. 繡球花品種遺傳多樣性的ISSR分析及指紋圖譜構(gòu)建[J]. 中南林業(yè)科技大學學報, 2016(12): 115-120.

    [19] 唐玉海, 郭春芳, 張木清, 等. ISSR標記在茶樹品種遺傳多態(tài)性研究中的應用[J]. 福建農(nóng)林大學學報(自然科學版), 2007(1): 51-55.

    [20] 林鄭和, 陳榮冰, 陳常頌. 茶樹ISSR-PCR反應體系優(yōu)化研究[J]. 福建農(nóng)業(yè)學報, 2006, 21(3): 247-252.

    [21] 段麗君, 曹有龍, 周 軍. 枸杞ISSR反應體系的優(yōu)化與應用[J]. 西北農(nóng)林科技大學學報自然科學版, 2009(12): 133-138.

    [22] 崔 健. ISSR標記對廣西產(chǎn)雞血藤遺傳多樣性及其混偽品鑒別的研究[D]. 南寧: 廣西中醫(yī)藥大學, 2013.

    [23] 靳曉麗, 田新會, 杜文華. 基于ISSR分子標記的鷹嘴豆遺傳多樣性分析[J]. 中國草地學報, 2015, 37(3): 19-25.

    [24] Evanno G, Regnaut S, Goudet J. Detecting the number of clusters of individuals using the software STRUCTURE: a simulation study.[J]. Molecular Ecology, 2005, 14(8): 2 611-2 620.

    [25] 楊 軍, 孔祥瑞, 郭吉春, 等. 福建茶樹資源遺傳多樣性研究進展[J]. 茶葉科學技術(shù), 2012(4): 1-3.

    [26] 吳雪琴, 徐剛標, 梁 艷, 等. 南嶺地區(qū)觀光木自然和人工遷地保護種群的遺傳多樣性[J]. 生物多樣性, 2013, 21(1): 71-79.

    [27] Roy S C, Chakraborty B N. Genetic diversity and relationships among tea (Camellia sinensis) cultivars as revealed by RAPD and ISSR based fingerprinting.[J]. Indian Journal of Biotechnology, 2009, 8(4): 370-376.

    [28] Liu B Y, Wang L Y, Li Y Y, et al. Genetic diversity in tea (Camellia sinensis) germplasms as revealed by ISSR markers.[J]. Indian Journal of Agricultural Sciences, 2009, 79(9): 715-721.

    [29] Joshi S D, Sanjay R, Baby U I, et al. Molecular characterization of Pestalotiopsis spp. associated with tea (Camellia sinensis) in southern India using RAPD and ISSR markers.[J]. Indian Journal of Biotechnology, 2009, 8(4): 377-383.

    [30] 和志嬌, 和加衛(wèi), 程在全, 等. 三葉懸鉤子自然居群遺傳多樣性的ISSR分析[J]. 園藝學報, 2012, 39(11): 2 142-2 150.

    [31] Wright S. The interpretation of population structure by F-statistics with special regard to systems of mating[J]. Evolution, 1965, 19(3): 395-420.

    [32] 何友均, 李 忠, 崔國發(fā), 等. 瀕危物種保護方法研究進展[J]. 生態(tài)學報, 2004, 24(2): 338-346.

    [33] Ji L J, Wang Q, Silva J A T D, et al. The genetic diversity of Paeonia L.[J]. Scientia Horticulturae, 2012, 143(1): 62-74.

    [34] Wachira F, Tanaka J, Takeda Y. Genetic variation and differentiation in tea (Camellia sinensis) germplasm revealed by RAPD and AFLP variation[J]. Journal of Horticultural Science & Biotechnology, 2001, 76(5): 557-563.

    [35] Irwin D E, Bensch S, Irwin J H, et al. Speciation by distance in a ring species.[J]. Science, 2005, 307(8): 414-416.

    [36] 林鄭和, 陳常頌, 陳榮冰. 我國39個茶樹品種的RAPD分析[J]. 分子植物育種, 2006, 4(5): 695-701.

    猜你喜歡
    遺傳多樣性種質(zhì)資源茶樹
    山茶樹變身搖錢樹
    綠肥作物紫云英研究進展
    大白菜種質(zhì)資源抗根腫病基因CRa和CRb的分子標記鑒定與分析
    茄子種質(zhì)資源農(nóng)藝性狀遺傳多樣性分析
    玉米種質(zhì)資源抗旱性鑒定研究進展
    淺析田間水稻紋枯病抗性鑒定體系的確立與完善
    西藏野核桃的表型特征及其保育措施
    兩個推薦茶樹品種
    水稻紋枯病抗性鑒定體系的確立與遺傳多樣性研究
    茶樹灣
    tube8黄色片| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲国产欧美一区二区综合| 亚洲欧洲日产国产| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 国产亚洲一区二区精品| 免费在线观看完整版高清| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲伊人久久精品综合| 美国免费a级毛片| 黄色 视频免费看| 热99久久久久精品小说推荐| av超薄肉色丝袜交足视频| 老司机午夜福利在线观看视频 | 美女午夜性视频免费| 黄色视频不卡| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 涩涩av久久男人的天堂| 久久国产精品大桥未久av| 无人区码免费观看不卡 | 天天添夜夜摸| 国产成人av教育| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 妹子高潮喷水视频| 亚洲熟妇熟女久久| 人人妻人人澡人人看| xxxhd国产人妻xxx| 欧美 日韩 精品 国产| 高清视频免费观看一区二区| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 久久久精品94久久精品| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 精品福利观看| 欧美日韩精品网址| 久久久久久人人人人人| 91字幕亚洲| tube8黄色片| 在线观看免费视频网站a站| 久久久久精品人妻al黑| 午夜福利在线免费观看网站| 老鸭窝网址在线观看| 黄片大片在线免费观看| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 看免费av毛片| av电影中文网址| 国产精品亚洲一级av第二区| 99国产极品粉嫩在线观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 久久人妻熟女aⅴ| 亚洲天堂av无毛| 黄色怎么调成土黄色| 午夜激情av网站| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 美女高潮到喷水免费观看| 国产免费福利视频在线观看| 日韩大片免费观看网站| 国产精品一区二区在线不卡| 亚洲欧美激情在线| 成年人免费黄色播放视频| 国产av又大| 人人澡人人妻人| 国产亚洲一区二区精品| 一二三四社区在线视频社区8| 一区二区三区精品91| 久热这里只有精品99| 动漫黄色视频在线观看| 日本av免费视频播放| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 好男人电影高清在线观看| 国产三级黄色录像| 亚洲免费av在线视频| 国产成人精品久久二区二区免费| 国产日韩欧美在线精品| 男女免费视频国产| 最新美女视频免费是黄的| 在线观看免费视频日本深夜| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 一区在线观看完整版| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 久久精品国产亚洲av高清一级| 中文字幕色久视频| 曰老女人黄片| kizo精华| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 激情在线观看视频在线高清 | 日韩人妻精品一区2区三区| 男女高潮啪啪啪动态图| 美女视频免费永久观看网站| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 一进一出抽搐动态| 超碰成人久久| 人妻一区二区av| 波多野结衣一区麻豆| 啦啦啦在线免费观看视频4| 好男人电影高清在线观看| 久久国产精品大桥未久av| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲av片天天在线观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 日韩制服丝袜自拍偷拍| 亚洲av电影在线进入| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 九色亚洲精品在线播放| 宅男免费午夜| 人人妻人人澡人人看| 日韩免费高清中文字幕av| 免费少妇av软件| 黑丝袜美女国产一区| 国产单亲对白刺激| 成人特级黄色片久久久久久久 | 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 一边摸一边做爽爽视频免费| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 大片免费播放器 马上看| 91成人精品电影| 在线看a的网站| 黄色丝袜av网址大全| 热re99久久精品国产66热6| 成年人免费黄色播放视频| 极品人妻少妇av视频| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产成人影院久久av| 国产成人av激情在线播放| 成人国产一区最新在线观看| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲情色 制服丝袜| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 日韩中文字幕视频在线看片| 欧美亚洲日本最大视频资源| 精品久久久久久久毛片微露脸| 久久久久视频综合| 999久久久精品免费观看国产| av有码第一页| svipshipincom国产片| 动漫黄色视频在线观看| 免费观看av网站的网址| 两个人看的免费小视频| 精品亚洲成国产av| 久久精品成人免费网站| 高潮久久久久久久久久久不卡| 91字幕亚洲| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 精品国产一区二区三区久久久樱花| 成人三级做爰电影| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 1024视频免费在线观看| 精品少妇内射三级| 国产免费av片在线观看野外av| 后天国语完整版免费观看| 国产1区2区3区精品| 免费黄频网站在线观看国产| 成年人黄色毛片网站| 亚洲av片天天在线观看| 精品乱码久久久久久99久播| 欧美黄色淫秽网站| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 老熟妇仑乱视频hdxx| 欧美激情高清一区二区三区| av天堂久久9| 老熟妇仑乱视频hdxx| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 国产男女超爽视频在线观看| 91大片在线观看| 久久精品国产a三级三级三级| 亚洲av日韩在线播放| 黄片播放在线免费| 亚洲国产看品久久| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 欧美激情久久久久久爽电影 | 国产在视频线精品| 99国产精品免费福利视频| 国产区一区二久久| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲情色 制服丝袜| 极品少妇高潮喷水抽搐| 亚洲熟女精品中文字幕| 水蜜桃什么品种好| 大陆偷拍与自拍| 夫妻午夜视频| 免费看a级黄色片| 又大又爽又粗| 国产在视频线精品| 大香蕉久久网| 久久午夜综合久久蜜桃| 欧美精品高潮呻吟av久久| 欧美精品一区二区免费开放| 欧美激情久久久久久爽电影 | 99国产精品一区二区三区| 国产伦理片在线播放av一区| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 一级a爱视频在线免费观看| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 大码成人一级视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲精品av麻豆狂野| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| tocl精华| 国产精品98久久久久久宅男小说| 国产有黄有色有爽视频| 国产精品一区二区免费欧美| 国产又色又爽无遮挡免费看| 亚洲国产av新网站| 麻豆乱淫一区二区| 满18在线观看网站| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 精品人妻在线不人妻| 国产麻豆69| 亚洲专区国产一区二区| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 黄片播放在线免费| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 亚洲精品国产一区二区精华液| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 桃红色精品国产亚洲av| 99国产精品一区二区三区| 国产在线视频一区二区| 国产高清国产精品国产三级| 色在线成人网| 嫁个100分男人电影在线观看| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 国产精品免费一区二区三区在线 | 最新美女视频免费是黄的| 色在线成人网| 国产熟女午夜一区二区三区| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 国产免费福利视频在线观看| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 午夜福利,免费看| 91麻豆av在线| 国产男靠女视频免费网站| 久久九九热精品免费| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 女同久久另类99精品国产91| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 久久 成人 亚洲| 考比视频在线观看| 精品午夜福利视频在线观看一区 | 一级,二级,三级黄色视频| 99国产精品99久久久久| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 夫妻午夜视频| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 无人区码免费观看不卡 | 免费不卡黄色视频| 午夜精品国产一区二区电影| 欧美在线一区亚洲| 国产精品熟女久久久久浪| 欧美激情极品国产一区二区三区| 色视频在线一区二区三区| 免费少妇av软件| 无人区码免费观看不卡 | 国产区一区二久久| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 久久九九热精品免费| 亚洲色图av天堂| 99精品欧美一区二区三区四区| 久久久国产一区二区| 韩国精品一区二区三区| 波多野结衣一区麻豆| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 精品少妇内射三级| av有码第一页| 一级毛片精品| 国产伦理片在线播放av一区| av天堂久久9| 国产淫语在线视频| 亚洲国产欧美在线一区| 免费黄频网站在线观看国产| 夜夜夜夜夜久久久久| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产成人精品无人区| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 久久精品人人爽人人爽视色| 久久国产亚洲av麻豆专区| 考比视频在线观看| 欧美国产精品一级二级三级| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 性少妇av在线| 十八禁高潮呻吟视频| 男人操女人黄网站| 国产精品免费视频内射| 久久免费观看电影| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲人成77777在线视频| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 久久狼人影院| 成人国语在线视频| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 久久久久久久精品吃奶| 又黄又粗又硬又大视频| 性色av乱码一区二区三区2| 国产99久久九九免费精品| 热99久久久久精品小说推荐| 夫妻午夜视频| 午夜福利欧美成人| 成人国产av品久久久| 亚洲天堂av无毛| 美女国产高潮福利片在线看| 男女免费视频国产| 欧美激情久久久久久爽电影 | 激情视频va一区二区三区| av超薄肉色丝袜交足视频| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 好男人电影高清在线观看| 亚洲天堂av无毛| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 天堂中文最新版在线下载| 亚洲中文日韩欧美视频| 女性生殖器流出的白浆| 国产成人av激情在线播放| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 老司机在亚洲福利影院| 一级片免费观看大全| 超碰成人久久| 大型av网站在线播放| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 丝袜喷水一区| 在线av久久热| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲国产av新网站| 极品少妇高潮喷水抽搐| 一本色道久久久久久精品综合| 亚洲专区中文字幕在线| 亚洲国产av影院在线观看| 欧美日韩亚洲高清精品| 亚洲天堂av无毛| 另类精品久久| 香蕉国产在线看| 午夜两性在线视频| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 久久精品国产亚洲av高清一级| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 亚洲性夜色夜夜综合| 99久久99久久久精品蜜桃| 五月开心婷婷网| 精品国内亚洲2022精品成人 | 日韩欧美免费精品| 我要看黄色一级片免费的| 亚洲性夜色夜夜综合| 亚洲欧美一区二区三区久久| 日韩有码中文字幕| 不卡一级毛片| 免费观看a级毛片全部| 亚洲精品国产区一区二| 免费观看a级毛片全部| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 黄色片一级片一级黄色片| 日韩免费av在线播放| 免费观看a级毛片全部| 黄色 视频免费看| 久久久国产成人免费| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产精品成人在线| 麻豆乱淫一区二区| 波多野结衣一区麻豆| 黄色 视频免费看| 99香蕉大伊视频| 热re99久久精品国产66热6| 欧美精品一区二区免费开放| 中文字幕制服av| 最黄视频免费看| 悠悠久久av| 免费观看a级毛片全部| 少妇粗大呻吟视频| 人人妻人人澡人人看| 老熟女久久久| 国产97色在线日韩免费| 国产一区有黄有色的免费视频| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | av片东京热男人的天堂| 国产日韩欧美在线精品| 免费av中文字幕在线| 国产高清激情床上av| 午夜久久久在线观看| 精品一品国产午夜福利视频| 欧美精品av麻豆av| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 国产免费视频播放在线视频| 日韩视频一区二区在线观看| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 男女之事视频高清在线观看| 成年人午夜在线观看视频| 欧美激情高清一区二区三区| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 亚洲精品自拍成人| 亚洲色图av天堂| 麻豆av在线久日| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 麻豆国产av国片精品| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 首页视频小说图片口味搜索| 一区福利在线观看| 日韩大片免费观看网站| 纯流量卡能插随身wifi吗| 国产成人影院久久av| 99国产精品一区二区三区| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 国产男女内射视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 一区二区三区精品91| 欧美亚洲日本最大视频资源| 亚洲国产av影院在线观看| 免费看a级黄色片| 大码成人一级视频| 蜜桃在线观看..| 91老司机精品| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产精品熟女久久久久浪| 国产成人精品久久二区二区91| 国产精品一区二区精品视频观看| 在线观看免费日韩欧美大片| 亚洲专区中文字幕在线| 少妇的丰满在线观看| av在线播放免费不卡| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产一卡二卡三卡精品| 黄色a级毛片大全视频| 国产精品.久久久| netflix在线观看网站| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | bbb黄色大片| 91成人精品电影| 亚洲avbb在线观看| 国产欧美日韩一区二区三| 黑人欧美特级aaaaaa片| av有码第一页| 欧美精品啪啪一区二区三区| 大型av网站在线播放| 日韩一区二区三区影片| 亚洲天堂av无毛| 99国产极品粉嫩在线观看| 婷婷丁香在线五月| 18禁国产床啪视频网站| 日日爽夜夜爽网站| 18禁美女被吸乳视频| 欧美激情久久久久久爽电影 | 国产亚洲欧美在线一区二区| 最新美女视频免费是黄的| 国产欧美亚洲国产| 美国免费a级毛片| 精品福利永久在线观看| 欧美日韩黄片免| 极品人妻少妇av视频| 无遮挡黄片免费观看| svipshipincom国产片| 日韩欧美三级三区| 精品高清国产在线一区| 国产免费福利视频在线观看| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲人成伊人成综合网2020| 在线观看免费视频网站a站| 久久午夜综合久久蜜桃| 色94色欧美一区二区| 老司机深夜福利视频在线观看| 久久精品91无色码中文字幕| 日韩免费av在线播放| 日韩中文字幕视频在线看片| 日韩欧美三级三区| 午夜91福利影院| 亚洲一码二码三码区别大吗| av不卡在线播放| 欧美日韩成人在线一区二区| 亚洲伊人色综图| 午夜久久久在线观看| 91精品三级在线观看| 一区二区三区乱码不卡18| 欧美在线一区亚洲| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 首页视频小说图片口味搜索| 18禁国产床啪视频网站| 亚洲午夜理论影院| 亚洲av欧美aⅴ国产| 999精品在线视频| 十分钟在线观看高清视频www| 欧美av亚洲av综合av国产av| 搡老乐熟女国产| 国产精品.久久久| 欧美激情久久久久久爽电影 | 天天影视国产精品| 丰满迷人的少妇在线观看| 国产成人精品在线电影| 97人妻天天添夜夜摸| 国产av又大| 免费黄频网站在线观看国产| 久久热在线av| 俄罗斯特黄特色一大片| 午夜两性在线视频| 国产成人免费观看mmmm| 18禁国产床啪视频网站| 精品久久久精品久久久| 嫁个100分男人电影在线观看| 亚洲伊人色综图| 男女高潮啪啪啪动态图| 国产成人精品在线电影| 在线观看66精品国产| 人人妻人人澡人人看| 成年动漫av网址| 亚洲精品av麻豆狂野| 男女下面插进去视频免费观看| 美女视频免费永久观看网站| 欧美成人免费av一区二区三区 | 精品国产乱码久久久久久男人| 国产视频一区二区在线看| 三级毛片av免费| 一区福利在线观看| 国产免费视频播放在线视频| 亚洲国产欧美一区二区综合| 久久人人97超碰香蕉20202| 国产精品免费大片| 国产三级黄色录像| 欧美日韩av久久| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 男女无遮挡免费网站观看| 窝窝影院91人妻| 人成视频在线观看免费观看| 999久久久国产精品视频| 国产精品久久电影中文字幕 | 欧美在线一区亚洲| 亚洲专区中文字幕在线| 色尼玛亚洲综合影院| 午夜福利免费观看在线| 亚洲专区国产一区二区| 日本vs欧美在线观看视频| 两个人免费观看高清视频| 亚洲成人手机| 亚洲精华国产精华精| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产精品欧美亚洲77777| 欧美激情极品国产一区二区三区| 精品福利观看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国产不卡av网站在线观看| 午夜日韩欧美国产| 超色免费av| tube8黄色片| 怎么达到女性高潮| 交换朋友夫妻互换小说| 丝瓜视频免费看黄片| 国产高清国产精品国产三级| 免费观看人在逋| av免费在线观看网站| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 另类亚洲欧美激情| 一本综合久久免费| 欧美乱妇无乱码| 99re在线观看精品视频| 99国产精品99久久久久| 99riav亚洲国产免费| 丝袜喷水一区| 久久青草综合色| 国产成人精品久久二区二区91| 亚洲专区中文字幕在线| 国产人伦9x9x在线观看| 国产伦人伦偷精品视频| 黄色 视频免费看| 国产成人啪精品午夜网站| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 亚洲成a人片在线一区二区| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 757午夜福利合集在线观看| 女警被强在线播放| 国产精品久久久人人做人人爽| netflix在线观看网站| 国产精品成人在线| 国产又色又爽无遮挡免费看| 精品少妇内射三级| 成人手机av| 日韩精品免费视频一区二区三区| 男男h啪啪无遮挡| 亚洲五月婷婷丁香| 精品国产一区二区三区四区第35| 亚洲精品av麻豆狂野| 久久精品成人免费网站| 亚洲欧美色中文字幕在线| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 亚洲精品自拍成人| 亚洲欧美色中文字幕在线| 一级毛片精品| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 91成人精品电影| 国精品久久久久久国模美| 又大又爽又粗| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 精品高清国产在线一区| 久久性视频一级片| 在线观看免费视频网站a站| 咕卡用的链子| 桃红色精品国产亚洲av| 久久狼人影院| 咕卡用的链子| 欧美日韩一级在线毛片| 18禁国产床啪视频网站| 欧美激情久久久久久爽电影 | 1024香蕉在线观看| 色婷婷久久久亚洲欧美| 人人妻人人澡人人看| 亚洲男人天堂网一区| 美女国产高潮福利片在线看|